子宫颈癌组织中水通道蛋白8和bcl-2蛋白的表达及其相关性

目的 探讨水通道蛋白(AQP)8、bcl-2蛋白在宫颈癌组织中的表达及其相关性.方法 采用免疫组化Envision二步法检测AQP8和bcl-2蛋白在74例宫颈癌(其中鳞癌46例、腺癌28例)、34例宫颈上皮内瘤变(CIN)和15例正常宫颈组织中的表达情况,并分析两者的相关性.结果 AQP8和bcl-2蛋白主要在CIN异型细胞和宫颈癌细胞的细胞质内表达,AQP8蛋白在宫颈鳞癌、腺癌、CIN和正常宫颈组织中的阳性表达率分别为98%、61%、71%和53%,鳞癌高于腺癌、CIN和正常宫颈组织,差异有统计学意义(P＜0.01);腺癌与CIN、正常宫颈组织比较,CIN与正常宫颈组织比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).bcl-2蛋白在宫颈鳞癌、腺癌、CIN和正常宫颈组织中的阳性表达率分别为74%、71%、53%和20%,鳞癌与腺癌组织比较,差异无统计学意义(P＞0.05);鳞癌、腺癌高于CIN、正常宫颈组织,CIN也高于正常宫颈组织,差异均有统计学意义(P＜0.01).AQP8和bcl-2蛋白在宫颈癌组织中的表达呈明显正相关(rs=0.463,P=0.000).结论 AQP8和bcl-2蛋白在宫颈癌组织中的表达呈明显正相关,AQP8蛋白表达上调可能与宫颈癌的发生、发展有一定的关系.     

Twist2和E-cadherin在宫颈鳞癌中的表达及意义

目的：研究Twist2与E-cadherin在宫颈上皮内瘤样变（CIN）及宫颈鳞状细胞癌中的表达情况,探讨其在宫颈癌变过程中的作用及意义。方法：应用蛋白质免疫印迹（Western blot）和免疫组织化学法检测Twist2、E-cadherin在正常宫颈组织（对照组）、CINⅠ组、CINⅡ～Ⅲ组、宫颈鳞癌组中的表达情况。结果：Twist2和E-cadherin在4组中阳性表达率比较差异有统计学意义（χ2=48.163,P=0.000;χ2=43.169,P=0.000）。宫颈鳞癌Twist2、E-cadherin的阳性表达率在不同分化程度、临床分期、有无淋巴结转移组间差异有统计学意义（P＜0.05）,在不同年龄间差异无统计学意义（P＞0.05）。Twist2与E-cadherin在宫颈鳞癌组织中的表达呈负相关（r=-0.401,P=0.003）。对照组、CIN组、宫颈鳞癌组间Twist2、E-cadherin的相对表达量差异有统计学意义（F=652.225,P=0.000;F=299.112,P=0.000）。结论：Twist2、E-cadherin可能共同参与了宫颈鳞状细胞癌的恶性转化过程,联合检测Twist2与E-cadherin有助于判断宫颈癌的恶性程度及其预后。     

PCNA在宫颈鳞癌组织中的表达及意义

目的探讨细胞核增值抗原（proliferating cell nuclear antigen,PCNA）在宫颈鳞癌和宫颈上皮内瘤变（cervical intraepithelial neoplasia,CIN）组织中的表达及意义。方法采用免疫组织化学S-P法检测92例宫颈鳞癌、40例CIN和92例宫颈正常组织的PCNA蛋白表达情况。结果宫颈鳞癌组织PCNA阳性表达率为82.61%（76/92）;CINⅠ、CINⅡ和CINⅢPCNA阳性表达率分别为33.33%（5/15）、71.43%（10/14）和81.82%（9/11）,正常宫颈组织无PCNA表达。宫颈鳞癌、CINⅡ和CINⅢ组织PCNA阳性表达率明显高于CINⅠ（P〈0.01）;但宫颈鳞癌PCNA表达与CINⅡ、CINⅢ比较,差异无统计学意义（P〉0.05）。PCNA阳性表达与宫颈癌分期（r=0.634,P〈0.01）、组织学分级（r=0.654,P〈0.05）有关;而与年龄无关（r=0,P〉0.05）。结论 PCNA的阳性表达可能与宫颈癌的发生、发展及细胞增殖活性增加有关。     

FHIT基因、HPV16E6的表达与宫颈鳞癌发病的相关性研究

目的：探讨抑癌基因脆性组氨酸三联（fragile histine triad,FHIT）基因、人乳头瘤病毒16E6（HPV16E6）蛋白在宫颈鳞癌中的表达及其相互关系。方法：应用免疫组织化学链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连接（SP）法观察40例宫颈鳞癌、30例宫颈上皮内瘤样病变（CIN）和30例正常宫颈组织中FHIT基因、HPV16E6的表达。结果：FHIT基因在正常宫颈组织、CIN和宫颈鳞癌组织中的阳性表达率分别为96.7%,66.7%和30.0%,各组间阳性等级表达比较差异有统计学意义（χ2=43.595,P〈0.001）。FHIT基因阳性表达在宫颈鳞癌病理分级、临床分期中的比较,差异无统计学意义（χ2分别为3.378和3.315,均P〉0.05）。HPV16E6在正常宫颈组织、CIN和宫颈鳞癌组织中的阳性表达率分别为13.3%,53.3%和82.5%,各组间阳性等级表达比较差异有统计学意义（χ2=32.538,P〈0.001）。HPV16E6蛋白阳性表达在宫颈鳞癌病理分级、临床分期中的比较,差异无统计学意义（χ2分别为0.231和1.399,均P〉0.05）。结论：宫颈鳞癌中FHIT基因表达减少或缺失,以及HPV16E6的高检出率,提示二者在宫颈鳞癌的发生发展中起重要作用,可能是宫颈鳞癌发病机制之一。通过对FHIT基因和HPV16E6蛋白的致病机制以及相互影响的研究,有助于揭示宫颈癌发病机制,二者有可能用于临床宫颈癌诊断、预防和基因治疗。     

细胞信号转导通路MEK在宫颈癌前病变和宫颈癌的表达及意义

目的：探讨宫颈癌前病变及宫颈癌组织中丝裂原激活细胞外信号调节激酶（mitogen-activated extracellular signal-regulated kinase,MEK）细胞信号转导通路表达的意义。方法：选择并收集2013年1月—2014年4月在天津市第一中心医院妇科诊治、临床病理资料完整的宫颈病变患者共92例,根据宫颈病变程度将患者分为正常组（30例）、高级别宫颈上皮内瘤样变（CIN）组（30例）和宫颈癌组（32例）。用免疫组织化学SP法检测MEK在不同组织中的表达。结果：MEK在正常组、高级别CIN组和宫颈癌组中阳性表达率分别为20.0%、56.7%和68.8%,其中宫颈癌组MEK阳性表达率最高,分别高于高级别CIN组及正常组,差异有统计学意义（P＜0.05）。高级别CIN组MEK的阳性表达率高于正常组（P=0.003）。MEK阳性表达率与患者年龄、宫颈癌病理类型、肿瘤组织分化程度、肿瘤大小及宫颈癌临床分期等因素无关（P＞0.05）。结论：MEK转导通路可能在宫颈癌及癌前病变的发生发展中有一定的作用。     

宫颈病变中双链RNA依赖的蛋白激酶与HPV感染的相关性

目的：通过检测双链RNA依赖的蛋白激酶（PKR）、人乳头瘤病毒（HPV）在宫颈病变组织中的表达,探讨PKR在宫颈病变发生发展中的意义及可能机制。方法：选择临床病历资料和病理资料完整的宫颈癌患者共37例、同期宫颈上皮内瘤样病变（CIN）Ⅰ～Ⅲ患者56例为研究对象,因子宫肌瘤等良性病变切除子宫的正常宫颈组织30例为对照。采用免疫组织化学SABC法检测PKR及HPV16/18 E6的表达,分析二者与宫颈病变发生发展的关系。结果：宫颈癌组织中PKR表达阳性率为54.1%,高于CINⅢ,CINⅠ～Ⅱ组和正常宫颈组,差异有统计学意义（P <0.05）;在宫颈癌组中PKR表达与HPV16/18 E6表达存在负相关 （r =-0.554,P <0.05）;在CINⅢ组中PKR表达与HPV16/18 E6表达存在正相关（r =0.480,P =0.032）。结论：PKR的异常表达在CINⅢ向宫颈癌发展过程中可能发挥主要作用,此外SABC法测定PKR和E6的表达有可能成为筛选子宫颈癌的早期指标。     

ABCG2与CD133在宫颈癌的表达及意义

目的:探讨ABCG2及CD133蛋白在宫颈癌的表达及临床意义。方法:用免疫组化SP法检测92例宫颈癌、40例宫颈上皮内瘤变(CIN)和30例正常宫颈组织中AB-CG2及CD133蛋白的表达。结果:ABCG2在宫颈癌、CIN和正常宫颈组织的阳性表达率分别为69.6%、42.5%、23.3%,CD133为57.6%、37.5%、23.3%,两者在宫颈癌的表达均高于CIN及正常组织,差异均有统计学意义(P0.05);两者表达与宫颈癌患者年龄、肿瘤大小、临床分期无相关性(P0.05),而在不同分化组间表达的差异有统计学意义(P0.05)。结论:ABCG2和CD133蛋白异常表达与宫颈癌的发生、发展有关,二者联合检测可作为评估宫颈癌恶性程度、指导治疗的重要参考指标。     

宫颈癌中抑癌基因FHIT表达与HPV16基因状态

目的:探讨抑癌基因FHIT表达及人乳头瘤病毒16(HPV16)的基因型整合状态在宫颈癌发生发展中的作用及相关性。方法:选取柳州市人民医院2013年6月至2014年12月收治的42例宫颈癌、55例宫颈上皮内瘤样病变(CIN)和20例宫颈正常组织的患者,免疫组化法检测宫颈组织中FHIT蛋白表达;多重PCR法检测HPV16 E2/E7表达。结果:FHIT蛋白的总阳性表达率为57.26%(67/117),正常宫颈组织、CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ和宫颈癌中FHIT蛋白阳性率分别为85.00%、80.00%、75.00%、60.00%和26.19%。随着宫颈病变加重,FHIT蛋白阳性表达率下降,组间差异有统计学意义(χ~2=7.335;P=0.003)。117例单纯HPV16阳性标本HPV16总整合率为81.20%,正常宫颈组织、CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ和宫颈癌中整合率分别为60.00%、66.67%、75.00%、95.00%和92.86%;随病变加重,整合率增强,组间差异有统计学意义(χ~2=5.713,P=0.003);FHIT蛋白阳性表达在不同HPV16整合时不同,差异有统计学意义(χ~2=11.989,P=0.000)。结论:HPV16基因整合可能通过诱导FHIT基因低表达从而促使宫颈癌发生发展。     

宫颈癌中环氧合酶2与血管内皮生长因子C的表达及相关研究

目的：探讨环氧合酶2（COX-2）和血管内皮生长因子C（VEGF—C）在宫颈癌中的表达及意义。方法：应用免疫组织化学S—P法检测42例宫颈癌、20例宫颈上皮内瘤样变（CINⅠ～Ⅲ）、10例正常宫颈组织中COX-2和VEGF—C的表达。结果：宫颈癌组COX-2和VEGF—C阳性表达率分别高于CIN组及正常宫颈组（P〈0．05）。不同年龄、预后COX-2表达无差异（P〉0．05）,但不同病理类型和临床分期间表达差异有统计学意义（P〈0．05）。不同年龄、病理类型、预后VEGF-C表达无差异（P〉0．05）,但不同临床分期间表达差异有统计学意义（P〈0．05）。COX-2和VEGF-C在宫颈癌组织中的表达呈正相关（r=0．41,P〈0．05）。结论：COX-2和VEGF—C在宫颈癌的发生发展中起重要作用。可能作为宫颈癌早期诊断和判断预后的重要指标。     

宫颈病变中双链RNA依赖的蛋白激酶与HPV感染的相关性

目的：通过检测双链RNA依赖的蛋白激酶（PKR）、人乳头瘤病毒（HPV）在宫颈病变组织中的表达,探讨PICR在宫颈病变发生发展中的意义及可能机制。方法：选择临床病历资料和病理资料完整的宫颈癌患者共37例、同期宫颈上皮内瘤样病变（CIN）Ⅰ-Ⅲ患者56例为研究对象,因子宫肌瘤等良性病变切除子宫的正常宫颈组织30例为对照。采用免疫组织化学SABC法检测PICR及HPV16/18E6的表达。分析二者与宫颈病变发生发展的关系。结果：宫颈癌组织中PKR表达阳性率为54．1％,高于CINⅢ。CINⅠ-Ⅱ组和正常宫颈组,差异有统计学意义（P〈O．05）;在宫颈癌组中PICR表达与HPV16／18E6表达存在负相关（r=-0．554,P〈0．05）;在CINⅢ组中PKR表达与HPV16／18E6表达存在正相关（r=0．480,P=0．032）。结论：PKR的异常表达在CINⅢ向宫颈癌发展过程中可能发挥主要作用．此外SABC法测定PKR和E6的表达有可能成为筛选子宫颈癌的早期指标。     

AQP1和AQP3在子宫颈鳞状细胞癌中表达的研究

目的:探讨AQP1和AQP3在子宫颈癌中的表达及意义。方法:通过荧光定量PCR和免疫荧光检测AQP1和AQP3在人子宫颈癌SiHa细胞系中的表达,通过免疫组化检测AQP1和AQP3在35例维吾尔族子宫颈癌、15例CINⅢ和15例慢性宫颈炎中的表达。结果:(1)SiHa细胞中AQP1和AQP3在mRNA和蛋白水平均表达;(2)AQP1表达于宫颈病变组织间质血管内皮细胞的胞质,采用微血管密度(MVD)表示AQP1表达强度。慢性宫颈炎、CINⅢ和子宫颈癌组的MVD分别是43.6±17.8、56.2±11.6、70.8±21.1,宫颈癌组MVD显著高于CINⅢ组及慢性宫颈炎组(P均<0.05),CINⅢ和慢性宫颈炎组间差异无统计学意义;AQP3在慢性宫颈炎、CINⅢ和子宫颈癌组的阳性率分别是13.33%、26.67%、48.57%,子宫颈癌组与慢性宫颈炎组间差异有统计学意义(P=0.018),子宫颈癌组与CINⅢ、CINⅢ与慢性宫颈炎组间差异均无统计学意义(P均>0.05)。结论:AQP1和AQP3的表达可能与子宫颈癌的发生、发展有关。     

磷酸化蛋白激酶B和p27在宫颈癌组织的表达及意义

目的:探讨宫颈癌组织中磷酸化蛋白激酶B(P-PKB)和p27蛋白的表达及其在子宫颈癌发生、发展中的意义。方法:采用免疫组化SP法检测51例宫颈癌组织,36例宫颈上皮内瘤变(CIN)组织和20例正常宫颈组织中P-PKB蛋白和P27蛋白的表达,并分析它们与宫颈癌临床病理因素的关系。结果:宫颈癌组织中P-PKB的阳性表达率(74.5%)明显高于CIN组(52.8%)和正常宫颈组(15%)(P<0.05),P-PKB蛋白的表达随宫颈癌分化程度下降、临床分期升高而升高(P<0.05),在无淋巴结转移的宫颈癌中的表达明显低于有淋巴结转移癌(P<0.05)。p27蛋白在宫颈癌组织中的阳性表达率(49.0%)明显低于CIN组(80.1%)和正常宫颈组(90.0%)(P<0.05),p27蛋白的表达随宫颈癌分化程度下降、临床分期升高而降低(P<0.05),在无淋巴结转移的宫颈癌中的表达明显高于有淋巴结者(P<0.05)。宫颈癌中P-PKB蛋白表达与p27蛋白表达呈负相关(r=-0.326,P<0.05)。结论:P-PKB蛋白在宫颈癌中过表达,p27蛋白在宫颈癌中表达明显降低,与P-PKB蛋白表达呈负相关,P-PKB蛋白可能通过抑制p27蛋白的表达,促进肿瘤的发生发展。     

宫颈鳞癌组织中AQP1和AQP4的表达及意义

目的:探讨水通道蛋白1、4(AQP1、AQP4)在宫颈鳞癌组织的表达及意义。方法:免疫组化染色检测AQP1和AQP4在20例正常宫颈组织、10例CINⅠ级、10例CINⅡ级、8例CINⅢ级组织及45例浸润性宫颈鳞癌组织的分布和表达特点。结果:AQP1主要于血管内皮细胞表达,它在正常宫颈组织、宫颈CINⅠ、Ⅱ、Ⅲ级组织及宫颈浸润性鳞癌组织的阳性表达指数分别为10.14±1.48、10.61±1.23、10.46±0.92、10.64±0.52和11.85±2.74,宫颈鳞癌组织AQP1表达明显高于正常组织(P<0.05),FIGOⅡ期宫颈鳞癌组织中AQP1的表达指数(13.15±2.38)明显高于I期(11.06±2.68)(P<0.05),肿瘤伴淋巴结转移者AQP1表达指数(13.37±2.91)明显高于淋巴结未转移者(11.30±2.50)(P<0.05);AQP4主要于鳞状上皮细胞以及肿瘤细胞表达,它在正常宫颈组织、宫颈CINⅠ、Ⅱ、Ⅲ级组织及宫颈鳞癌组织的阳性表达指数分别为3.26±0.99、3.79±1.22、3.68±1.47、3.92±1.48和4.23±2.03,宫颈鳞癌组织AQP4表达高于正常组织(P<0.05),淋巴结转移肿瘤组织AQP4表达指数(5.32±1.69)高于淋巴结未转移者(3.84±1.02)(P<0.05);AQP1和AQP4于肿瘤组织中表达无相关性(P>0.05)。结论:AQP1、AQP4过表达可能在宫颈癌变及进展过程中起重要作用,并分别通过增加血管内皮细胞和肿瘤细胞对水的通透性,促进肿瘤侵袭和转移。     

Annexin A2、NF-κBp65在宫颈癌中的表达及意义

目的:检测宫颈浸润癌(ICC)和宫颈上皮内瘤变(CIN)中Annexin A2、细胞核因子(NF-κBp65)蛋白的表达,探讨两者在ICC和CIN组织中表达的意义。方法:用免疫组化SP法检测74例ICC、24例CIN及15例正常宫颈上皮中Annexin A2、NF-κBp65蛋白的表达,并分析它与临床病理特征的关系。结果:(1)Annexin A2、NF-κBp65在ICC阳性表达率(71.6%,74.3%)均显著高于CIN(37.5%,33.3%)(P<0.05)和正常宫颈上皮(13.3%,20%)组(P<0.05);(2)低分化癌组织中Annexin A2的阳性表达显著高于中、高分化癌组织(P<0.05),且其表达与年龄、组织类型、病理分级和淋巴结转移呈正相关(P<0.05)。NF-κBp65表达与淋巴结转移呈正相关(P<0.05);(3)ICC中Annexin A2、NF-κBp65的表达呈正相关(r=0.339,P<0.05)。结论:Annexin A2在宫颈癌中可能充当癌基因的角色;Annexin A2表达可作为诊断宫颈癌的辅助指标;Annexin A2、NF-κBp65可能在宫颈癌的发生发展中起重要作用。     

p21~(WAF1/Cip1)和p27~(Kip1)在宫颈癌及癌前病变的表达及临床意义

目的:探讨细胞周期负向调控因子p21WAF1/Cip1和p27Kip1在宫颈癌及癌前病变(CIN)中的表达特点。方法:选择妇科门诊宫颈疾病专科就诊患者163例,用第二代杂交捕获试验(HCⅡ)检测高危型人乳头瘤病毒(HR-HPV)DNA负荷量,阴道镜下宫颈活检,病理确诊,并用活检组织行p21WAF1/Cip1和p27Kip1免疫组化检测,比较慢性宫颈炎、CINⅠ-Ⅲ及宫颈癌各组间HR-HPV负荷量和p21WAF1/Cip1、p27Kip1表达差异。结果:各病理类型病变(共5组)的HR-HPV阳性率分别为:慢性宫颈炎38.46%(15/39),CINⅠ80%(12/15),CINⅡ81.82%(18/22),CINⅢ93.33%(56/60),宫颈鳞癌88.89%(24/27)。慢性宫颈炎HR-HPV DNA负荷量明显低于其他4组(M=0.56pg/ml,P<0.01),CINⅠ~Ⅲ及宫颈癌4组间无显著差异(P>0.05)。p21WAF1/Cip1和p27Kip1阳性表达率在CINⅠ~Ⅲ及宫颈癌4组间无显著差异(CINⅠ40.00%、60.00%,CINⅡ54.55%、54.55%,CINⅢ56.67%、70.00%,宫颈癌51.85%、77.78%,P>0.05),但均显著高于慢性宫颈炎组(5.13%、17.95%,P<0.01);p21WAF1/Cip1和p27Kip1表达增强与HR-HPV DNA负荷量升高和宫颈病变进展呈正相关,相关系数(rs)分别为:p21WAF1/Cip1:0.27、0.34,P<0.01;p27Kip1:0.30、0.46,P<0.01。结论:p21WAF1/Cip1和p27Kip1表达增强与宫颈病变进展密切相关,对宫颈HR-HPV持续感染及高负荷量患者可行p21WAF1/Cip1和p27Kip1检测以预测细胞病变的发生和发展。     

NF-κBp65,c-IAP2,Caspase-3在宫颈癌中的表达及意义

目的:探讨核因子-κB(NF-κB)p65、细胞凋亡抑制蛋白-2(c-IAP2)和半胱氨酸蛋白水解酶-3(Caspase-3)在宫颈癌组织中表达的意义。方法:应用免疫组织化学方法检测NF-κBp65、c-IAP2和Caspase-3在44例宫颈癌、50例宫颈上皮内瘤变(CIN)及30例正常宫颈组织中的表达情况。结果:宫颈癌和CIN中NF-κBp65,c-IAP2的阳性表达率高于正常宫颈组织(P<0.05),而Caspase-3的表达率低于正常宫颈组织(P<0.05),3个指标在CINⅠ和正常宫颈组织中的表达无差异(P>0.05),在CINⅡ～Ⅲ中NF-κBp65,c-IAP2的表达高于正常宫颈组织(P<0.05),而Caspase-3的表达低于正常宫颈组织(P<0.05);NF-κBp65,c-IAP2,Caspase-3在宫颈癌的不同临床分期中的表达无差异(P>0.05),NF-κBp65,c-IAP2在低分化和有淋巴结转移组宫颈癌组织中的表达高于高分化组织和无淋巴结转移组(P<0.05),而Caspase-3的表达低于高分化组织和无淋巴结转移组(P<0.05);NF-κBp65与c-IAP2在宫颈癌中的表达呈正相关,NF-κBp65,c-IAP2在宫颈癌中的表达与Caspase-3的表达呈负相关。结论:宫颈癌中NF-κBp65、c-IAP2高表达而Caspase-3低表达可能和宫颈癌的发生发展有关。