水通道蛋白5过表达与宫颈癌发生及临床病理特征的相关性

目的：研究水通道蛋白5（aquaporin 5,AQP5）在宫颈癌中的表达及临床病理意义,探讨AQP5在宫颈组织恶性转化过程中的可能作用。方法：采用蛋白质免疫印迹和免疫组织化学技术检测30例正常宫颈、28例宫颈上皮内瘤样变（CIN）和56例宫颈鳞状细胞癌组织中AQP5的表达,并对其表达的临床病理参数进行统计学分析。结果：AQP5在正常宫颈、CIN和宫颈癌组织中相对蛋白表达量逐渐升高,3组间差异有统计学意义（F=38.516,P=0.000）;其表达的平均阳性细胞百分比分别为15.12%、23.18%和36.08%,3组间差异有统计学意义（χ2=22.404,P=0.000）;AQP5过表达与宫颈癌淋巴结转移相关（r=0.351,P=0.008）,与患者年龄、肿瘤大小、组织学分级和国际妇产科联盟（FIGO）分期无关。结论：增强的AQP5表达与正常宫颈组织恶性转化和宫颈癌发生有关,有望为宫颈癌提供一种新的治疗靶点和预后标记。     

FHIT基因、HPV16E6的表达与宫颈鳞癌发病的相关性研究

目的：探讨抑癌基因脆性组氨酸三联（fragile histine triad,FHIT）基因、人乳头瘤病毒16E6（HPV16E6）蛋白在宫颈鳞癌中的表达及其相互关系。方法：应用免疫组织化学链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连接（SP）法观察40例宫颈鳞癌、30例宫颈上皮内瘤样病变（CIN）和30例正常宫颈组织中FHIT基因、HPV16E6的表达。结果：FHIT基因在正常宫颈组织、CIN和宫颈鳞癌组织中的阳性表达率分别为96.7%,66.7%和30.0%,各组间阳性等级表达比较差异有统计学意义（χ2=43.595,P〈0.001）。FHIT基因阳性表达在宫颈鳞癌病理分级、临床分期中的比较,差异无统计学意义（χ2分别为3.378和3.315,均P〉0.05）。HPV16E6在正常宫颈组织、CIN和宫颈鳞癌组织中的阳性表达率分别为13.3%,53.3%和82.5%,各组间阳性等级表达比较差异有统计学意义（χ2=32.538,P〈0.001）。HPV16E6蛋白阳性表达在宫颈鳞癌病理分级、临床分期中的比较,差异无统计学意义（χ2分别为0.231和1.399,均P〉0.05）。结论：宫颈鳞癌中FHIT基因表达减少或缺失,以及HPV16E6的高检出率,提示二者在宫颈鳞癌的发生发展中起重要作用,可能是宫颈鳞癌发病机制之一。通过对FHIT基因和HPV16E6蛋白的致病机制以及相互影响的研究,有助于揭示宫颈癌发病机制,二者有可能用于临床宫颈癌诊断、预防和基因治疗。     

子宫颈癌组织中水通道蛋白8和bcl-2蛋白的表达及其相关性

目的 探讨水通道蛋白(AQP)8、bcl-2蛋白在宫颈癌组织中的表达及其相关性.方法 采用免疫组化Envision二步法检测AQP8和bcl-2蛋白在74例宫颈癌(其中鳞癌46例、腺癌28例)、34例宫颈上皮内瘤变(CIN)和15例正常宫颈组织中的表达情况,并分析两者的相关性.结果 AQP8和bcl-2蛋白主要在CIN异型细胞和宫颈癌细胞的细胞质内表达,AQP8蛋白在宫颈鳞癌、腺癌、CIN和正常宫颈组织中的阳性表达率分别为98%、61%、71%和53%,鳞癌高于腺癌、CIN和正常宫颈组织,差异有统计学意义(P＜0.01);腺癌与CIN、正常宫颈组织比较,CIN与正常宫颈组织比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).bcl-2蛋白在宫颈鳞癌、腺癌、CIN和正常宫颈组织中的阳性表达率分别为74%、71%、53%和20%,鳞癌与腺癌组织比较,差异无统计学意义(P＞0.05);鳞癌、腺癌高于CIN、正常宫颈组织,CIN也高于正常宫颈组织,差异均有统计学意义(P＜0.01).AQP8和bcl-2蛋白在宫颈癌组织中的表达呈明显正相关(rs=0.463,P=0.000).结论 AQP8和bcl-2蛋白在宫颈癌组织中的表达呈明显正相关,AQP8蛋白表达上调可能与宫颈癌的发生、发展有一定的关系.     

微小RNA-27a在子宫颈鳞癌患者血清和组织中的表达及意义

目的微小RNA-27a（microRNA-27a,miRNA-27a）在宫颈上皮内瘤变（CIN）3级和宫颈鳞癌患者血清及组织中的表达及意义。方法选择49例宫颈鳞癌（宫颈癌组）、29例CIN3（CIN3组）患者和11例正常宫颈者（对照组）,提取其血清及组织中的小分子RNA,并采用实时荧光定量PCR的方法检测miRNA-27a的表达。结果①宫颈癌组患者血清和组织miRNA-27a的相对表达量较对照组、CIN3组增高（P〈0．05）;②宫颈癌组患者血清及组织中miRNA-27a的表达呈正相关（r=0．866,P〈0．05）;③不同分期及分级宫颈鳞癌患者的血清和组织miRNA-27a表达比较,差异均无统计学意义（P〉0．05）。结论miR-27a在宫颈鳞癌和CIN3患者血清及组织中的表达均增高,提示其可能与宫颈鳞癌的发生与进展有关。     

血清鳞状细胞癌抗原检测对宫颈鳞癌的诊断价值

目的:探讨检测血清鳞状细胞癌抗原(SCCAg)在宫颈鳞癌诊断中的价值。方法:用化学发光法测定32例宫颈鳞癌(宫颈鳞癌组)、21例宫颈上皮内瘤变(CIN组)和30例慢性宫颈炎(慢性宫颈炎组)患者治疗前血清SCCAg值(以≥2.5ng/ml为阳性参考值),并根据最大约登指数计算最佳诊断界值及计算曲线下面积(AUC)。结果:宫颈鳞癌组术前血清SCCAg水平(5.516±1.523ng/ml)明显高于CIN组(0.806±0.152ng/ml)和慢性宫颈炎组(0.412±0.053ng/ml),差异均有统计学意义(t=2.492,P=0.001;t=4.715,P=0.000)。宫颈鳞癌组术前血清SC-CAg阳性率(43.75%)明显高于CIN组(4.76%)和慢性宫颈炎组(0),差异均有统计学意义(χ2=9.498,P=0.000;χ2=35.497,P=0.000);宫颈鳞癌组ⅠB期、ⅡA期、ⅡB期、Ⅳ期术前血清SCCAg阳性率分别是31.25%、40.00%、75.00%、100.00%,但4组比较,差异无统计学意义(χ2=3.2,P=0.362)。血清SCCAg对宫颈鳞癌最佳诊断界值、灵敏度、特异度和ROC曲线下面积分别为1.48ng/ml、44.00%、99.00%、0.727。结论:血清SCCAg是宫颈鳞癌特异度较高的肿瘤标志物,可作为辅助诊断指标,而降低SCCAg诊断界值可能有助于提高诊断率。     

宫颈癌中抑癌基因FHIT表达与HPV16基因状态

目的:探讨抑癌基因FHIT表达及人乳头瘤病毒16(HPV16)的基因型整合状态在宫颈癌发生发展中的作用及相关性。方法:选取柳州市人民医院2013年6月至2014年12月收治的42例宫颈癌、55例宫颈上皮内瘤样病变(CIN)和20例宫颈正常组织的患者,免疫组化法检测宫颈组织中FHIT蛋白表达;多重PCR法检测HPV16 E2/E7表达。结果:FHIT蛋白的总阳性表达率为57.26%(67/117),正常宫颈组织、CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ和宫颈癌中FHIT蛋白阳性率分别为85.00%、80.00%、75.00%、60.00%和26.19%。随着宫颈病变加重,FHIT蛋白阳性表达率下降,组间差异有统计学意义(χ~2=7.335;P=0.003)。117例单纯HPV16阳性标本HPV16总整合率为81.20%,正常宫颈组织、CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ和宫颈癌中整合率分别为60.00%、66.67%、75.00%、95.00%和92.86%;随病变加重,整合率增强,组间差异有统计学意义(χ~2=5.713,P=0.003);FHIT蛋白阳性表达在不同HPV16整合时不同,差异有统计学意义(χ~2=11.989,P=0.000)。结论:HPV16基因整合可能通过诱导FHIT基因低表达从而促使宫颈癌发生发展。     

PCNA在宫颈鳞癌组织中的表达及意义

目的探讨细胞核增值抗原（proliferating cell nuclear antigen,PCNA）在宫颈鳞癌和宫颈上皮内瘤变（cervical intraepithelial neoplasia,CIN）组织中的表达及意义。方法采用免疫组织化学S-P法检测92例宫颈鳞癌、40例CIN和92例宫颈正常组织的PCNA蛋白表达情况。结果宫颈鳞癌组织PCNA阳性表达率为82.61%（76/92）;CINⅠ、CINⅡ和CINⅢPCNA阳性表达率分别为33.33%（5/15）、71.43%（10/14）和81.82%（9/11）,正常宫颈组织无PCNA表达。宫颈鳞癌、CINⅡ和CINⅢ组织PCNA阳性表达率明显高于CINⅠ（P〈0.01）;但宫颈鳞癌PCNA表达与CINⅡ、CINⅢ比较,差异无统计学意义（P〉0.05）。PCNA阳性表达与宫颈癌分期（r=0.634,P〈0.01）、组织学分级（r=0.654,P〈0.05）有关;而与年龄无关（r=0,P〉0.05）。结论 PCNA的阳性表达可能与宫颈癌的发生、发展及细胞增殖活性增加有关。     

血清鳞状上皮细胞癌抗原对子宫颈癌及CINⅢ的诊断价值

目的：探讨血清鳞状上皮细胞癌抗原（SCCAg）在宫颈癌诊断、疗效评估等方面的应用价值。方法：本研究选择了2011年9月—2012年3月天津市中心妇产科医院妇瘤科的住院患者145例,全部为可疑宫颈癌患者,经病理组织学确诊分为宫颈上皮内瘤变（CIN）Ⅲ组55例和宫颈癌组90例。采用化学发光的方法检测患者术前血清SCCAg的浓度,结合临床资料和病理组织学诊断,分析评价SCCAg与临床分期、组织分化程度的相关性及其对宫颈癌的诊断价值,通过术前与术后SCCAg检测值的比较评价其在疗效评估方面的价值。结果：血清SCCAg浓度在CIN组和宫颈癌组中的差异有统计学意义（P=0.000）,治疗后SCCAg水平较治疗前显著下降（P=0.000）;按国际妇产科联盟（FIGO）分期分组讨论,随疾病的进展,临床分期的加重,SCCAg的数值增高,阳性率亦增高,两者具有正相关性;SCCAg在可疑宫颈癌人群的检测敏感度为71.1%,特异度72.7%,准确度71.7%,阴性预测值60.6%,阳性预测值81.0%;CINⅢ的检测阳性率为27.3%,宫颈鳞癌Ⅰ期患者的检测阳性率为66.7%。结论：SCCAg对宫颈鳞状上皮细胞癌具有诊断价值,对疗效监测及预后判断也有重要临床意义,但在早期诊断方面仍有局限性,与宫颈癌的病理类型、临床分期有关,与组织分化程度无关。     

半乳凝素-3在宫颈上皮内瘤变及宫颈鳞状细胞癌中的表达及其意义

目的:探讨半乳凝素-3(Galectin-3)在宫颈上皮内瘤变(CIN)及宫颈鳞状细胞癌(SCC)中的表达及其意义。方法:选择经病理确诊为CIN和SCC患者的石蜡标本60例,以同时期因子宫肌瘤行全子宫切除患者的正常宫颈组织(NC)石蜡标本10例作为对照,采用免疫组化方法分析CIN及SCC中Galectin-3表达情况。结果:NC、CIN、SCC及SCCⅠ、SCCⅡ、SCCⅢ组Galectin-3表达阳性率分别为40.00%、50.00%、83.33%及70.00%、90.00%、90.00%。NC、CIN、SCC3组间Galectin-3表达阳性率差异有统计学意义(χ2=9.559,P=0.049);NC组Galectin-3表达阳性率与SCCⅡ期组及Ⅲ期组比较,差异有统计学意义(χ2=5.495,P=0.029)。宫颈肿瘤>2cm组Galectin-3表达阳性率高于≤2cm组,差异有统计学意义(χ2=4.690,P=0.047)。结论:SCC中Galectin-3的阳性表达与肿瘤大小有关;Galectin-3表达阳性率随宫颈病变发展而升高。Galectin-3可能在SCC的发生、进展中发挥作用。     

CD1a和E-cadherin在宫颈上皮内瘤变中的表达

目的:探讨CD1a和E-cadherin与宫颈癌发生发展的关系及作为早期癌变生物学指标的可能性。方法:采用免疫组化SP法检测CD1a和E-cadherin在同期56例宫颈上皮内瘤变、56例宫颈鳞癌和15例正常宫颈组织中的分布及表达。结果:(1)CD1a+朗格汉斯细胞在正常宫颈、CIN和宫颈癌各组中数量逐渐减少,两两比较有显著差异(P0.01);CIN中该细胞数量随病变严重程度减少,CINⅠ和CINⅡ、CINⅠ和CINⅢ组之间两两比较有显著差异(P0.05),而CINⅡ与CINⅢ组间无显著差异(P0.05);(2)E-cadher-in在正常宫颈、CIN和宫颈癌各组中的阳性表达率及强度逐渐下降,两两比较有显著差异(P0.05);在CIN中阳性表达率及表达强度随病变严重程度呈下降趋势,CINⅠ和CINⅡ、CINⅠ和CINⅢ之间两两比较有显著差异(P0.05),而CINⅡ和CINⅢ之间无显著差异(P0.05);(3)宫颈组织中CD1a+朗格汉斯细胞的细胞数与E-cadherin的阳性表达率及强度呈正相关(r=0.912,P0.05)。结论:CD1a+朗格汉斯细胞与E-cadherin可能在宫颈癌的发生、发展过程中起重要作用。     

RRM1表达与宫颈鳞癌新辅助化疗敏感性的关系

目的:研究核糖核苷酸还原酶M1(RRM1)在宫颈鳞癌中的表达及与新辅助化疗敏感性的关系。方法:运用免疫组织化学PV-6000二步法,检测40例接受新辅助化疗的宫颈鳞癌患者中RRM1的表达,与临床病理参数及与新辅助化疗敏感性的关系。结果:(1)新辅助化疗前,RRM1基因的表达率为40.0%(16/40),低分化者RRM1表达较中高分化者高(χ2=5.625,P=0.018),RRM1的表达与患者的绝经状态、高危型HPV感染、FIGO分期、淋巴结转移无关;(2)新辅助化疗后耐药组RRM1基因的表达率为87.5%(14/16),高于新辅助化疗前(56.2%),差异有统计学意义(χ2=4.038,P=0.044);(3)新辅助化疗前RRM1阳性组的化疗有效率为37.5%(6/16),RRM1阴性组的有效率为75.0%(18/24),差异有统计学意义(χ2=5.625,P=0.018)。结论:RRM1基因的表达与组织学分级有关,新辅助化疗可能上调RRM1基因的表达水平,RRM1有望成为预测宫颈癌新辅助化疗疗效的指标。     

AQP1和AQP3在子宫颈鳞状细胞癌中表达的研究

目的:探讨AQP1和AQP3在子宫颈癌中的表达及意义。方法:通过荧光定量PCR和免疫荧光检测AQP1和AQP3在人子宫颈癌SiHa细胞系中的表达,通过免疫组化检测AQP1和AQP3在35例维吾尔族子宫颈癌、15例CINⅢ和15例慢性宫颈炎中的表达。结果:(1)SiHa细胞中AQP1和AQP3在mRNA和蛋白水平均表达;(2)AQP1表达于宫颈病变组织间质血管内皮细胞的胞质,采用微血管密度(MVD)表示AQP1表达强度。慢性宫颈炎、CINⅢ和子宫颈癌组的MVD分别是43.6±17.8、56.2±11.6、70.8±21.1,宫颈癌组MVD显著高于CINⅢ组及慢性宫颈炎组(P均<0.05),CINⅢ和慢性宫颈炎组间差异无统计学意义;AQP3在慢性宫颈炎、CINⅢ和子宫颈癌组的阳性率分别是13.33%、26.67%、48.57%,子宫颈癌组与慢性宫颈炎组间差异有统计学意义(P=0.018),子宫颈癌组与CINⅢ、CINⅢ与慢性宫颈炎组间差异均无统计学意义(P均>0.05)。结论:AQP1和AQP3的表达可能与子宫颈癌的发生、发展有关。     

p21~(WAF1/Cip1)和p27~(Kip1)在宫颈癌及癌前病变的表达及临床意义

目的:探讨细胞周期负向调控因子p21WAF1/Cip1和p27Kip1在宫颈癌及癌前病变(CIN)中的表达特点。方法:选择妇科门诊宫颈疾病专科就诊患者163例,用第二代杂交捕获试验(HCⅡ)检测高危型人乳头瘤病毒(HR-HPV)DNA负荷量,阴道镜下宫颈活检,病理确诊,并用活检组织行p21WAF1/Cip1和p27Kip1免疫组化检测,比较慢性宫颈炎、CINⅠ-Ⅲ及宫颈癌各组间HR-HPV负荷量和p21WAF1/Cip1、p27Kip1表达差异。结果:各病理类型病变(共5组)的HR-HPV阳性率分别为:慢性宫颈炎38.46%(15/39),CINⅠ80%(12/15),CINⅡ81.82%(18/22),CINⅢ93.33%(56/60),宫颈鳞癌88.89%(24/27)。慢性宫颈炎HR-HPV DNA负荷量明显低于其他4组(M=0.56pg/ml,P<0.01),CINⅠ~Ⅲ及宫颈癌4组间无显著差异(P>0.05)。p21WAF1/Cip1和p27Kip1阳性表达率在CINⅠ~Ⅲ及宫颈癌4组间无显著差异(CINⅠ40.00%、60.00%,CINⅡ54.55%、54.55%,CINⅢ56.67%、70.00%,宫颈癌51.85%、77.78%,P>0.05),但均显著高于慢性宫颈炎组(5.13%、17.95%,P<0.01);p21WAF1/Cip1和p27Kip1表达增强与HR-HPV DNA负荷量升高和宫颈病变进展呈正相关,相关系数(rs)分别为:p21WAF1/Cip1:0.27、0.34,P<0.01;p27Kip1:0.30、0.46,P<0.01。结论:p21WAF1/Cip1和p27Kip1表达增强与宫颈病变进展密切相关,对宫颈HR-HPV持续感染及高负荷量患者可行p21WAF1/Cip1和p27Kip1检测以预测细胞病变的发生和发展。     

20例早发型子宫内膜癌的临床特点分析

目的：探讨40岁以下子宫内膜癌患者的临床及病理特征。方法：对2004年12月—2012年12月收治的子宫内膜癌病例进行回顾性分析,其中≤40岁的患者（早发组）20例（占4%,20/498）,＞40岁的患者（普通组）478例,比较2组患者的多项临床指标,分析患者的临床特征、高危因素、治疗方法、病理类型、组织学分级、肌层浸润深度、淋巴结转移与附件转移的关系。结果：早发组原发不孕发病率为30.0%（6/20）,普通组为4.2%（20/478）,差异有统计学意义（χ2=25.855,P=0.000）。普通组合并高血压率高于早发组（χ2=7.954,P=0.003）。早发组患者病理类型均为子宫内膜样腺癌,普通组子宫内膜样腺癌78.5%（375/478）,2组患者病理类型差异有统计学意义（χ2=5.433,P=0.020）。早发组、普通组患者细胞分化为G1者分别占90%和49.8%。早发组、普通组临床病理Ⅰ期者分别占80%和74.1%,2组患者细胞分化程度及临床病理分期差异有统计学意义（Z分别为－8.259和－9.488,均P=0.000）。2组患者肌层浸润、宫颈累及、淋巴结转移、附件累及和腹水细胞学检查比较差异均无统计学意义（均P＞0.05）。结论：在子宫内膜癌患者中年轻妇女有着一定的比例,不孕不育是40岁以下子宫内膜癌患者的高危因素,年轻子宫内膜癌患者以子宫内膜样腺癌为主,细胞分化级别高,手术病理期别较早,深肌层浸润、淋巴结转移以及附件转移等情况与年长者相似。     

低氧环境对人上皮性卵巢癌细胞株上皮间质转化及侵袭能力的影响及机制探讨

目的:探讨低氧环境对人卵巢癌细胞上皮间质转化(EMT)和侵袭能力的影响及可能机制。方法:培养人卵巢癌细胞株SKOV-3、3AO,将每株细胞分为对照组、Co Cl2(模拟低氧环境)组、VPL(钙离子拮抗剂)组和VPL+Co Cl2组。采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测Co Cl2对SKOV-3、3AO细胞生长情况的影响;倒置相差显微镜下观察低氧后细胞形态的改变;采用Western blot法检测SKOV-3、3AO细胞中缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、转录因子Twist、上皮型钙黏蛋白(E-cad)及神经型钙黏蛋白(N-cad)表达的变化;体外侵袭实验穿膜小室(Transwell小室)检测细胞的侵袭能力。结果:Co Cl2作用后,两种细胞的存活率均较对照组明显降低(P0.05)。低氧环境下,部分细胞伸出伪足,呈多角形,细胞排列松散、紊乱。Co Cl2能体外模拟细胞低氧环境,诱导HIF-1α蛋白高表达。SKOV-3、3AO细胞中,Co C12组中HIF-1α、Twist、N-cad蛋白表达明显高于对照组、Co C12+VPL组(P0.01,P0.05);E-cad蛋白表达明显低于对照组、Co C12+VPL组(P0.01,P0.05);VPL组与对照组相比,各蛋白表达的变化无明显差异(P0.05)。Co C12组两种细胞的穿膜数均显著多于对照组、Co C12+VPL组(P0.01,P0.05)。结论:钙信号途径参与了低氧环境下HIF-1α调节卵巢癌SKOV-3、3AO细胞中Twist的表达,从而诱导这两种细胞EMT的发生并增强其侵袭能力。     

5-hmC在宫颈上皮内瘤变病理诊断中的意义及其与HPV感染的相关性#br#

目的探讨5-羟甲基胞嘧啶(5-hmC)在宫颈上皮内瘤变和宫颈鳞癌中的表达,高危型HPV在上述病变中的感染率,分析两者之间的相关性。方法应用免疫组织化学技术分别检测正常组(31例)、LSIL(42例)、HSIL(61例)和宫颈鳞癌(91例)5-hm C的表达和高危型HPV感染率。结果5-hm C阳性率在正常组、LSIL、HSIL以及宫颈鳞癌组逐渐降低,差异有统计学意义(χ²=21.146,P=0.000);高危型HPV感染率随着病变的加重逐渐增高,差异有统计学意义(χ²=69.964,P=0.000);5-hm C和高危型HPV感染率都与宫颈上皮内瘤变的组织学分级具有相关性(r=-0.512,P=0.000)、(r=0.541,P=0.000);且两者之间呈负相关(r=-0.315,P=0.000)。结论5-hm C的表达水平对宫颈上皮内瘤变分级诊断具有鉴别意义并且与高危型HPV感染密切相关,两者可能共同促进了宫颈上皮内瘤变向宫颈鳞癌的转化。