迷走神经刺激对戊四氮致痫大鼠行为及脑电图的影响

为探讨迷走神经刺激（ＶＮＳ）的抗癫痫作用,观察了ＶＮＳ对正常大鼠和戊四氮（ＰＴＺ）致痫大鼠行为和脑电图的影响,结果发现,ＶＮＳ可明显延长致痫大鼠癫痫发作和痫波释放的潜伏期（Ｐ＜０．０５）,减轻癫痫发作的严重程度（Ｐ＜０．０１）,并能抑制皮层及海马癫痫波的释放（Ｐ＜０．０１）,而对正常大鼠脑电图无影响。结果提示ＶＮＳ可明显抑制ＰＴＺ诱导的大鼠癫痫。     

迷走神经刺激对戊四氮致痫大鼠行为及脑电图的影响

为探讨迷走神经刺激（ＶＮＳ）的抗癫痫作用,观察了ＶＮＳ对正常大鼠和戊四氮（ＰＴＺ）致痫大鼠行为和脑电图的影响。结果发现,ＶＮＳ可明显延长致痫大鼠癫痫发作和痫波释放的潜伏期（Ｐ〈０．０５）,减轻癫痫发作的严重程度（Ｐ〈０．０１）,并能抑制皮层及海马癫痫波的释放（Ｐ〈０．０１）,而对正常大鼠脑电图无影响。结果提示ＶＮＳ可明显抑制ＰＴＺ诱导的大鼠癫痫。     

大鼠癫癎持续状态后海马神经元凋亡的研究

目的：通过美解眠诱导鼠癫癎持续状态后观察海马神经元的细胞凋亡现象。　材料和方法：给ＳＤ大鼠腹腔注射美解眠（２０ ｍ ｇ／ｋｇ）,２４ ｈ 后在光镜和电镜下观察大鼠海马神经元的形态学改变,并以ＤＮＡ 末端标记法（ＴＵＮＥＬ）检测海马神经元的凋亡。　结果：ＳＤ大鼠注射美解眠后出现典型的癫癎发作,光镜和电镜下可观察到海马神经元有典型的细胞凋亡现象,包括细胞体皱缩、胞质浓缩、染色质凝聚成块状、有边集现象, 同时有少量凋亡小体形成。ＴＵＮＥＬ检测发现海马结构内可见ＴＵＮＥＬ染色阳性细胞,其分布不均匀,有区域性差异,以ＣＡ３ 区最为多见。致癎组海马ＣＡ３ 区ＴＵＮＥＬ阳性细胞数的平均百分率（７５．１４％ ）与对照组（９．４％ ）相比有极显著性差异（Ｐ＜ ０．０１）。　结论：癫癎发作可诱导大鼠海马神经元发生凋亡。     

蓝斑核内微量注射去甲肾上腺素对颏舌肌功能的影响

实验取健康家兔２２只，用２０％乌拉坦静脉麻醉，断双侧迷走神经，观察蓝斑核（ＬＣ）内微量注射去甲肾上腺素（ＮＡ）对动物窒息引起的颏舌肌肌电积分活动增强效应（ＰＩＭＡ）的影响，结果表明：增强颏舌肌的ＮＭＡ，表现为增幅峰值加大，潜伏期缩短，恢复时间延长，且此效应可被妥拉苏林所阻断。结果提示蓝斑核内有肾上腺素受体存在，对颏舌肌有兴奋作用。     

迷走神经刺激对致大鼠脑内NOS 免疫反应阳性细胞的影响

目的：探讨迷走神经刺激抗癫作用与脑内一氧化氮(NO)的关系。　 方法：大鼠用戊四氮(PTZ)腹腔注射致,行迷走神经刺激抗癫,应用免疫组化方法观察大鼠脑皮质及海马一氧化氮合酶(NOS)免疫反应阳性神经细胞的变化。　结果：PTZ致后,大鼠皮层、海马NOS阳性细胞数及阳性细胞光密度较对照组明显增加（P<0.01）;而行迷走神经刺激(VNS)抗癫组动物上述脑区NOS阳性细胞及光密度明显减少（P<0.01）。　 结论：VNS的抗癫作用与脑内NO的减少相关,VNS可能通过抑制脑内谷氨酸的释放而发挥抗癫作用。     

肾上腺素能α及β受体介导海马对细胞免疫功能的调节

本实验通过用ＭＴＴ法测定ＣｏｎＡ刺激脾淋巴细胞的增殖活性，研究了大鼠海马中微量注射去甲肾上腺素对细胞免疫功能的影响，并进一步探讨了α及β受体在此影响中的作用。结果发现（１）海马内微量注射ＮＥ对ＣｏｎＡ刺激的林巴细胞增殖反应产生抑制效应，此效应能被α及β受体阻断剂酚妥拉明，心理安所阻断。（２）β，β１、及β２受体激动剂异丙基肾上腺素（ＩＳＯ）、ＯＢＵＴＡＭＩＮＥ、ｍＥＴＡＰＲＯＴＥＲＥＮＯＬ均能抑制     

去甲肾上腺素对B细胞功能的作用机制研究

目的：观察不同浓度去甲肾上腺素（ＮＡ,１０＾－１０－１０＾－６ｍｏｌ／Ｌ）对大鼠Ｂ细胞功能的影响。α和β肾上腺素能受体及钙离子通道在ＮＡ影响Ｂ细胞功能中的作用,从细胞水平了解ＮＡ对Ｂ细胞功能的调节作用及其作用机制。方法：利用体外抗体生成的检测方法,即用绵羊红细胞（ＳＲＢＣ）刺激大鼠肠系膜淋巴结Ｂ细胞转化成抗体形成细胞（ＡＦＣ）,然后检测其抗体生成量。结果：（１）１０＾－１０,１０＾－９,１０＾－８     

中缝隐核至导水管腹侧部途径的儿茶酚胺中间神经元定位分析

研究脑内交感抑制系统中中缝隐核（ＮＲＯ）至中脑导水管周围灰质腹侧部（ｖＰＡＧ）多突触通路的儿茶酚胺中间神经元定位。方法在戊巴比妥钠麻醉的大鼠，应用原位杂交组织化学法检测电刺激激活ＮＲＯ对酪氨酸羟化酶（ＴＨ）ｍＲＮＡ表达的影响，同时采用辣根过氧化物酶（ＨＲＰ）逆行标记与免疫组化双标法以观察投射至ｖＰＡＧ的脑干儿茶酚胺能神经元分布。结果激活ＮＲＯ１８～２０ｈ后引起脑干延髓头端腹外侧区（ｒＶＬＭ）、孤束核（ＮＴＳ）、蓝斑（ＬＣ）、中缝背核的ＴＨｍＲＮＡ的表达增加；ＨＲＰ／ＴＨ双标细胞分布于ｒＶＬＭ（Ｃ１）、ＮＴＳ、ＬＣ、黑质网带、室周灰质等区。结论ＮＲＯ至ｖＰＡＧ途径的肾上腺素、去甲肾上腺素神经元主要位于ｒＶＬＭ的Ｃ１区、ＮＴＳ、ＬＣ。     

中央灰质注射升压素和催产素受体拮抗剂对刺激视上核镇痛和加强电针镇痛效应的影响

观察中央灰质（ＰＡＧ）在化学刺激视上核（ＳＯＮ）镇痛和加强电针（ＥＡ）镇痛中的作用。方法：ＰＡＧ内微量注射精氨酸升压素（ＡＶＰ）受体拮抗剂和催产素（ＯＴ）受体拮抗剂后，观察对ＳＯＮ内注射Ｌ－谷氨酸（Ｌ－Ｇｌｕ）引起的镇痛和加强电针镇痛的影响。结果：ＰＡＧ内注射Ｖ１拮抗剂ｄ（ＣＨ２）５Ｔｙｒ（Ｍｅ）ＡＶＰ对化学刺激ＳＯＮ引起的镇痛和加强电针镇痛无影响；Ｖ１Ｖ２受体拮抗剂ｄ（ＣＨ２）５Ｔｙｒ（Ｅｔ）ＤＡＶＰ可部分抑制这种效应；ＰＡＧ内注射２００ｐｇＯＴ受体拮抗剂ｄ（ＣＨ２）５Ｔｙｒ（Ｍｅ）２，Ｏｒｎ８－ｖａｓｏｔｏｃｉｎ（ＯＶＴ）则可完全阻断这种效应。结论：ＰＡＧ参与刺激ＳＯＮ镇痛和加强电针镇痛的过程，ＳＯＮ释放的ＯＴ通过作用于ＰＡＧ内的ＯＴ和Ｖ２受体而发挥镇痛和加强电针镇痛作用。     

迷走神经刺激对致(癎)大鼠脑内NOS免疫反应阳性细胞的影响

目的 :探讨迷走神经刺激抗癫作用与脑内一氧化氮 ( NO)的关系。　方法 :大鼠用戊四氮 ( PTZ)腹腔注射致 ,行迷走神经刺激抗癫 ,应用免疫组化方法观察大鼠脑皮质及海马一氧化氮合酶 ( NOS)免疫反应阳性神经细胞的变化。　结果 :PTZ致后 ,大鼠皮层、海马 NOS阳性细胞数及阳性细胞光密度较对照组明显增加 ( P<0 .0 1) ;而行迷走神经刺激 ( VNS)抗癫组动物上述脑区 NOS阳性细胞及光密度明显减少 ( P<0 .0 1)。　结论 :VNS的抗癫作用与脑内 NO的减少相关 ,VNS可能通过抑制脑内谷氨酸的释放而发挥抗癫作用     

慢性VNS对点燃大鼠大脑皮质及海马神经元兴奋性的影响

目的：探讨迷神经刺激（VNS）抗癫痫作用的细胞机制。方法：用戊四氮（PTZ）行大鼠腹空注射点燃制作癫痫模型,行迷走神经刺激抗癫痫,应用荧光分光光度法测定不同浓度谷氨酸（Glu）对正常、PTZ点燃及VNS治疗动物大脑皮质及海马神经元胞内游离钙升高的影响,同时观察VNS对动物癫痫行为的影响。结果：VNS组动物胞内游离钙浓度较PTZ点燃组明显降低,并对外源性Glu的升谪胞内游离钙有明显抑制作用,行为观察显示VNS能明显抑制癫痫发作的严重程度,延长癫痫的发作的潜伏期。结论：VNS能明显抑制大鼠PTZ的点燃效应,降低Glu对神经元胞内游离钙的升高作用。VNS可能通过调节神经元兴奋性／抑制性受体的活性来发挥抗癫痫作用。     

慢性应激在慢性胃炎发病中的作用研究

目的 探讨慢性应激在慢性胃炎发病中的作用.方法 75只雄性SD大鼠随机分为应激组(50只)和对照组(25只).应激组大鼠以束缚浸水法制备慢性应激模型,对照组不进行任何应激.观察指标:(1)大鼠应激前后的体重及进食量;(2)实验后大鼠脑脊液中5-羟色胺(5-HT)、5-羟吲哚乙酸(5-HIAA)、去甲肾上腺素(NA)和3-甲氧基-4-羟基苯乙二醇(MHPG)、多巴胺(DA)和高香草酸(HVA)水平;(3)用酚红排泄试验测定实验后大鼠的胃排空速率;(4)实验后大鼠胃黏膜的病理变化.结果 (1)应激前两组大鼠体重、体重增长百分率及进食量间差别无统计学意义(P>0.05);而应激后两组大鼠体重、体重增长百分率及进食量间差别有统计学意义(P<0.001).(2)应激后两组大鼠脑脊液中MHPG、5-HT及5-HIAA水平间差别有统计学意义(P<0.001),而NA、DA、HVA水平间差别无统计学意义(P>0.05).(3)两组大鼠胃组织大体标本显示炎症发生率间差别有统计学意义(P<0.001);光镜检查显示两组大鼠慢性炎症发生率间差别有统计学意义(P<0.001).(4)两组大鼠胃内酚红残留率间差别有统计学意义(P<0.05).结论 慢性应激可以引起胃黏膜的慢性炎症性变化,可能是通过改变脑脊液神经递质水平来影响胃运动.     

慢性铅暴露大鼠海马脑区自噬相关蛋白表达的研究

目的:观察慢性铅暴露后子代大鼠海马脑区铅含量变化,采用自噬/溶酶体途径关联蛋白标记物探讨慢性铅暴露对海马脑区自噬/溶酶体途径关联信号蛋白表达的影响。方法:以慢性铅暴露子代大鼠为研究对象,随机编号分组为对照组、低剂量铅暴露组(0.5 g/L)和高剂量铅暴露组(2.0 g/L)。断乳期仔鼠分笼饲养,仔鼠饮用低、高含量的醋酸铅饮用水直至60天成熟期。分别取血样与海马脑组织样本使用石墨炉原子吸收分光光度法进行铅含量测定,免疫印迹及免疫荧光组化方法分别检测慢性铅暴露后海马脑区自噬相关蛋白Beclin 1、LC3、LAMP2及cathepsin B的表达变化情况。结果:与对照组比较,模型组大鼠血铅含量显著升高(P<0.01)。同时,低剂量与高剂量铅暴露模型组大鼠海马脑铅含量显著升高,分别为(1.26±0.31)μg/g(低剂量组)与(1.83±0.18)μg/g(高剂量组)vs对照组(0.52±0.13)μg/g。此外,免疫印迹结果显示,高剂量铅暴露组大鼠海马脑区的早期自噬标志物Beclin 1及LC3-Ⅱ/LC3-I比值较对照组显著增加(P<0.05或P<0.001)。激光共聚焦显微镜结果显示,慢性铅暴露高剂量组较正常对照组的自噬相关蛋白cathepsin B在海马锥体神经元的阳性表达明显增加。结论:慢性铅暴露诱导大鼠海马脑区发生自噬/溶酶体途径关联信号蛋白表达变化,可能与海马脑区铅含量的增加存在内在关联性。     

番茄红素对慢性铁负荷大鼠肝细胞自噬的保护作用

目的 :探讨番茄红素对慢性铁负荷大鼠肝细胞自噬的影响。方法:通过饲喂高铁饲料和灌胃番茄红素的方法构建SD慢性铁负荷模型,采用铁染色和透射电镜方法观察肝组织细胞的形态结构及其超微结构的变化,采用免疫组化方法观察肝组织切片中LC3-B蛋白的表达。结果:慢性铁负荷组与对照组及番茄红素组动物比较,肝细胞中有大量铁蛋白颗粒累积,线粒体和内质网膜膨胀,胞质中形成自噬前体,LC3-B微管相关蛋白有较强表达。结论:番茄红素能降低肝细胞中铁诱导线粒体膜的改变和细胞的自噬,具有一定的保护作用。     

慢性应激肝郁模型大鼠蓝斑CRF、c-fos的表达及逍遥散的干预作用

目的观察慢性应激状态下大鼠一般状况,血清促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)浓度,蓝斑(LC)中促肾上腺皮质激素释放因子(CRF)、即刻早期基因c-fos的表达,以及逍遥散对其的干预效应。方法将18只SD健康雄性大鼠随机分为正常对照、模型、逍遥散治疗组,每组6只。采用束缚的方法造模,观察大鼠行为、饮食、排便的变化;造模21d后取出蓝斑,用ELISA法检测血清中CRH浓度,Real-timePCR检测蓝斑中CRFmRNA和c-fosmRNA的表达。结果模型组大鼠行为、排便、饮食出现明显异常;与正常对照组比较,模型组大鼠血清CRH浓度升高,蓝斑中CRFmRNA和c-fosmRNA表达均上调(P<0.01);与模型组比较,逍遥散组大鼠血清CRH浓度下降,蓝斑中CRFmRNA和c-fosmRNA表达下调(P<0.01);逍遥散组较对照组CRH浓度升高、CRFmRNA和c-fosmRNA表达上调,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论神经递质CRF介导了慢性束缚应激中LC的激活,转录因子c-fos亦参与了其调控,而逍遥散则可以有效地进行干预,下调其过表达。     

毁损伏隔核对吗啡给药大鼠条件性位置偏爱与脑功能的影响

目的：探讨双侧毁损伏隔核对吗啡给药大鼠条件性位置及大鼠脑功能的影响。方法：6-羟多巴胺注射毁损大鼠双侧伏隔棱，以条件性位置偏爱实验评价伏隔核对大鼠的影响；以Morris水迷宫实验评价对空间学习记忆功能的影响。结果：在条件性位置偏爱实验中，单纯给药组与毁损给药蛆、单纯毁损组、对照组相比较存在显著差异（P〈0．05）。在自然戒断状态下。单纯给药组条件性位置偏爱先增加后减少。水迷宫实验毁损组与对照组相比，毁损前后自身对照均无明显差异（P〉0．05）。结论：伏隔核中的多巴胺系统在精神依赖（大鼠表现为条件性住置偏爱）形成过程中起关键性作用。     

氯膦酸二钠脂质体对重症急性胰腺炎大鼠心肌损伤的保护作用

［摘要］目的: 探讨氯膦酸二钠脂质体（clodronate liposome, LC）对重症急性胰腺炎（SAP）大鼠心肌损伤的保护作用。方法: 将48只SD大鼠随机分为假手术组、SAP组及SAP+LC组,各组再分为术后2 h和6 h组（n=8）。测定大鼠血清IL-6、淀粉酶及肿瘤坏死因子α（TNF-α）的含量,HE染色观察LC对SAP大鼠心肌组织病理损伤的影响,普鲁士蓝染色法观察LC对SAP大鼠心肌细胞间巨噬细胞的影响,免疫组化法观察LC作用后SAP大鼠丝裂原活化蛋白激酶（mitogen activated protein kinase,MAPK）的表达。结果： 假手术组术后2、6 h血清IL-6、淀粉酶、TNF-α含量均分别明显低于SAP组和SAP+LC治疗组（P<0.05）,SAP+LC组明显低于SAP组（P<0.05）。假手术组术后2、6 h心肌组织病理学评分明显低于SAP组和SAP+LC组（P<0.05）,SAP+LC组明显低于SAP组（P<0.05）。假手术组术后2、6 h心肌细胞间巨噬细胞数量明显低于SAP组和SAP+LC组,SAP+LC组明显低于SAP组。假手术组术后2、6 h心肌组织MAPK评分明显低于SAP组和SAP+LC组（P<0.05）,SAP+LC组明显低于SAP组（P<0.05）。 结论： LC可选择性清除单核/巨噬细胞,对SAP大鼠心肌损伤起到保护作用。     

迷走神经刺激对戊四氮癫痫大鼠海马区γ-GABA、Glu和脑电变化

目的 观察VNS对正常大鼠和戊四氮(PTZ)致癫痫大鼠的脑电图的影响,以及测定海马区GABA,GLU的变化.进一步探讨迷走神经刺激(VNS)的抗癫痫机制.方法 随机分为对照组、刺激A组、刺激B1组、刺激B2组、刺激B3组、刺激C组,各10只.分别观察脑电图和测定海马GABA、GLU的变化.结果 VNS可明显延长致病大鼠癫痫发作和痫波释放的潜伏期(P<0.05),减轻癫痫发作的严重程度,并能抑制皮层及海马癫痫波的释放,VNS对正常人鼠脑电图无影响.刺激各组海马GABA升高,GLU下降,组与组之间有明显差异P<0.05.结论 VNS可明显抑制PTZ诱导的大鼠癫痫.     

迷走神经刺激对海人酸致痫大鼠海马胶质细胞胶原纤维酸性蛋白的影响

目的观察迷走神经刺激（VNS）对海人酸（KA）致痫大鼠海马星形胶质细胞（AS）的胶原纤维酸性蛋白（GFAP）的影响,探讨AS与癫痫的关系及在VNS治疗癫痫中的作用。方法 36只SD大鼠随机分为对照组、KA组和VNS＋KA组,每组12只。侧脑室注射0.05%KA溶液3μL制作大鼠癫痫模型;采用免疫组织化学和western blot方法检测VNS后KA致痫大鼠海马星形胶质细胞GFAP的变化。结果大鼠侧脑室注入KA后3～5min内癫痫发作,发作级别按国际公认Racine标准均达到Ⅳ～Ⅴ级;KA组大鼠海马GFAP阳性细胞数,western blot值显著高于对照组（P〈0.01）,VNS＋KA组大鼠海马GFAP阳性细胞数和western blot值显著低于KA组（P〈0.01）。结论 VNS可抑制KA致痫大鼠海马星形胶质细胞GFAP的表达,提示抑制星形胶质细胞激活可能是VNS抑制癫痫的作用机制之一。     

儿茶酚雌激素介导慢性间歇低氧诱导OSAHS雌性大鼠遗尿模型的建立

目的：利用慢性间歇低氧（CIH）诱导建立阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征（OSAHS）遗尿雌性大鼠模型,并探讨儿茶酚雌激素（CE）在CIH诱导的OSAHS遗尿中的作用。方法：选取6周龄SD雌性大鼠16只,随机分成CIH组和对照组,每组8只。实验组置于常压间歇低氧舱,对照组置于同等条件下的空气模拟对照舱,均放置4周。监测24 h进水及排尿量;测定血清中CE,儿茶酚胺类化合物如肾上腺素（Adr）、去甲肾上腺素（NA）和多巴胺（DA）含量及其儿茶酚氧位甲基转移酶（COMT）活性;测定排尿阈;留取膀胱行HE及Weigert染色,光镜下观察组织学变化。结果：CIH组大鼠氧舱外进水量及排尿量与对照组比,差异无统计学意义（P＞0.05）。但CIH组大鼠氧舱内排尿量明显增加,血清中CE、Adr、NA和DA含量明显增高,而COMT的活性明显降低,排尿阈明显降低,膀胱组织光镜下显示膀胱逼尿肌肌束排列紊乱、疏松,部分肌束断裂。结论：CIH可诱导雌性大鼠发生遗尿,伴有排尿量增多,排尿阈降低,血清中儿茶酚胺类化合物含量增高,而COMT的活性降低,与儿童OSAHS诱发遗尿的临床症状相似,提示通过CIH诱导建立OSAHS遗尿雌鼠模型基本可行。