实验性单纯疱疹性角膜炎中基质金属蛋白酶-2的表达研究

目的:探讨I型单纯疱疹病毒（HSV-1）感染对角膜基质金属蛋白酶-2（MMP-2）分布表达的影响。方法:分别收集正常眼球及HSV-1（KOS株）感染后第2,7,14,28d的感染眼球行石蜡包埋,并应用抗MMP-2的多克隆抗体免疫染色角膜切片。结果:感染后第2d,MMP-2的表达比未感染眼增加且表达主要位于浅表基质层及上皮下的炎性细胞中。感染后第7d,MMP-2的表达较第2d减弱。而感染后第14及28d可见角膜基质中及浸润的炎性细胞中尤其是溃疡处可见MMP-2的表达再次显著增加。结论:由角膜细胞及浸润的炎性细胞分泌产生的MMP-2对HSV-1感染所致上皮性角膜炎及角膜溃疡形成可能起重要作用。     

单纯疱疹病毒基质型角膜炎的治疗进展

单纯疱疹病毒(herpes simplex virus,HSV)感染眼部引起的单纯疱疹病毒性角膜炎(herpes simplex keratitis,HSK),尤其是基质型HSK,是导致角膜混浊的首要原因,也是行穿透性角膜移植术的重要指征。现行的临床和实验研究主要采用皮质类固醇和抗病毒药物治疗,然而激素有明显的副作用,抗病毒药仅在病毒复制时才有效。目前尚缺乏高质量的皮质类固醇和抗病毒药之外的药物临床实验。免疫调节药物环孢素对治疗基质型HSK很有吸引力,而抑制潜伏在三叉神经节的病毒重新激活的疫苗是减少HSV眼病复发的最有效途径。文中对当前基质型HSK的治疗进展进行综述。     

单纯疱疹病毒性角膜基质炎的鼠模型建立

目的 建立单纯疱疹病毒性角膜基质炎（HSK）的鼠模型，为研究HSK的发病机制及临床治疗奠定基础。方法 用HSV－1 RE株感染Balb/c鼠角膜，建立HSK的鼠模型，并在感染后1天、3天、7天观察病变。结果 实验组鼠角膜有HSK病变发生，而空白对照组鼠角膜上皮愈合、完整光滑。结论 HSV－1 RE株感染Balb/c鼠有效，可致HSK发生。     

羊膜移植对单纯疱疹病毒性角膜基质炎中明胶酶活性表达的影响

目的:探讨羊膜移植对小鼠角膜1型单纯疱疹病毒(HSV-1)感染后发生角膜基质炎(HSK)的角膜中明胶酶(Gelatinases)的活性表达变化的影响,探讨羊膜移植对HSK的治疗作用及其机制。方法:将50只BALB/c小鼠随机分为实验组和对照组,每组各25只,105pfu/L HSV-1病毒(SM44株)感染小鼠角膜,制作HSK小鼠模型。对实验组小鼠右眼角膜行羊膜移植术,对照组角膜不行羊膜移植术。在羊膜移植术后第0,2,7,14,21天处死动物取角膜。应用明胶酶谱(Gelatin Zymography)方法和计算机图像分析系统检测小鼠角膜明胶酶的酶活性表达的变化。结果:角膜感染HSV-1后,明胶酶谱显示:实验组小鼠角膜中酶原形式的pro-MMP-9(92 kU)在AMT后第2,14,21天表达增强。活性形式的MMP-9(82 kU)在AMT后各时间点均有表达,但在第2,14及21天表达增强。pro-MMP-2(72 kU)条带在AMT后各时间点均有表达。而MMP-2活性条带(62 kU)则出现在AMT后第14天和21天。对照组小鼠角膜中明胶酶的表达变化情况跟实验组类似,但是,MMP-2活性各时间点均较实验组为强(P<0.05)。而MMP-9的活性在羊膜移植后第2天(P<0.01),第14及21天(均为P<0.05)均较实验组为强。结论:羊膜移植对HSV-1感染小鼠角膜后引起的坏死性角膜基质炎形成的角膜上皮缺损和角膜基质溃疡有明显的修复作用,这种作用的机制可能是通过抑制明胶酶的活性表达而实现的。     

阿昔洛韦治疗单纯疱疹病毒性角膜基质炎

单纯疱疹病毒Ⅰ(HSV-Ⅰ)引起角膜基质层感染称为单纯疱疹病毒性角膜基质炎(Herpes stromal keratitis,HSK).不仅难治,且易复发,是严重致盲眼病之一.     

基质金属蛋白酶MMP-2 mRNA在糖尿病苍鼠视网膜中的表达

目的:探讨基质金属蛋白酶(MMP-2)在糖尿病视网膜病变(DR)发生发展中的作用及其机制. 方法:用链脲佐菌素(STZ)诱导苍鼠糖尿病模型,提取视网膜中总RNA,半定量RT-PCR观察视网膜中MMP-2 mRNA表达情况,HE染色观察光镜下视网膜的形态特征及变化,血清学检测苍鼠血清甘油三酯(TG),总胆固醇(TC)和电化学发光法检测胰岛素水平等变化. 结果:糖尿病苍鼠不仅表现为高血糖,还表现为高TG血症. 视网膜中MMP-2 mRNA表达呈升高趋势, 与正常对照组相比于造模后16 wk末时即差异具有统计学意义(P＜0.05). 结论:此为研究基质金属蛋白酶参与DR的发病机制提供了依据.     

卵巢肿瘤中基质金属蛋白酶-7及其组织抑制剂-3基因的表达

目的研究卵巢肿瘤组织中基质金属蛋白酶MMP-7及组织抑制剂TIMP-3基因的表达及与卵巢恶性肿瘤临床病理特征和预后的关系.方法应用RT-PCR方法检测48例恶性卵巢肿瘤、21例良性肿瘤及22例正常卵巢组织中MMP-7及TIMP-3mRNA的表达情况,进行阳性率及半定量的比较,并将其结果与临床及病理学资料进行统计学分析.结果 MMP-7及TIMP-3在正常卵巢组织中阳性率仅为9.09%与4.50%,在卵巢恶性及良性肿瘤中阳性表达率分别为83.3%、66.7%、68.7%、81.0%,明显高于正常卵巢(P＜0.000),其半定量表达亦明显高于正常卵巢(P＜0.000).它们在卵巢恶性肿瘤中的表达水平与患者的临床病理特征及预后无相关性.结论 MMP-7及TIMP-3可能与卵巢肿瘤的发生、发展有关.     

人胰腺癌基质金属蛋白酶及其抑制因子基因mRNA表达

目的：观察胰腺组织及其癌变标本中基质金属蛋白酶及金属蛋白酶组织抑制因子（ＴＩＭＰｓ）基因的表达，以探讨ＭＭＰｓ及ＴＩＭＰｓ在肿瘤侵袭和转移过程中的作用。方法：采用ｃＤＮＡ探针（ＭＭＰ２，ＭＭＰ９，ＴＩＭＰ）对两株胰腺癌细胞，１５例胰腺癌手术切除标本和８例正常胰腺组织标本进行Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交。结果：胰腺癌组织和ＰａＴｕ胰腺癌细胞ＭＭＰ２、ＭＭＰ９和ＴＩＭＰ１的基因表达水平明显高于正常胰腺组织，其     

食管癌组织中基质金属蛋白酶—2mRNA的表达

目的：探讨食管癌组织中基质蛋白酶－2（MMP-2)mRNA的表达。方法：用反转录PCR（RT－PCR）法检测41例食管癌患者的癌组织、癌旁组织MMP－2mRNA的表达。结果：食管癌患者的癌组织MMP-2 mRNA的表达率（25／41）与癌旁组织的表达率（15／41）比较差异有显著性（P＜0．05）。有淋巴结转移的食管癌患者癌组织MMP－2mRNA的表达率（15／19）与无淋巴结转移者的表达率（10／22）比较差异有显著性（P＜0．05）。侵及浆膜层者的表达率（13／18）高于未侵及浆膜层者（12／23），但差异无显著性。结论：MMP－2在食管癌的侵袭和转移中起到十分重要的作用。     

基质金属蛋白酶MMP-9及其组织抑制剂TIMP-1mRNA在卵巢上皮性肿瘤中的表达及其临床意义

目的 探讨基质金属蛋白酶(MMP-9)及其组织抑制物(TIMP-1)mRNA与卵巢上皮性癌的发生、发展的关系.方法 采用RT-PCR技术检测69例卵巢上皮性肿瘤(38例恶性、15例交界性、16例良性)及11例正常卵巢组织中MMP-9及TIMP-1 mRNA的表达,并分析其与各临床病理特征的关系.结果 MMP-9 mRNA在卵巢上皮性癌及交界性肿瘤组织中的阳性表达率(分别为76%、44%)及表选水平[分别为(154.14±4.42)、(96.87±3.04)]均显著高于良性肿瘤及正常卵巢组织[分别为13%、9%和(8.26±2.67)、(2.34±1.02);P<0.05];且MMP-9mRNA在晚期卵巢上皮性癌组织中的阳性袁达,率和表达水平明显高于早期癌组织(p<0.05).TIMP-1 mRNA在卵巢上皮性癌及交界性肿瘤组织中的阳性表达率(分别为68%、38%)及表达水平[分别为(126.35±3.81)、(90.62±5.54)]均显著高于良性肿瘤及正常卵巢组织[分别为13%、9%和(8.32±2.02)、(2.63±1.35);P<0.05];TIMP-1 mRNA在卵巢上皮性癌组织中的阳性表达率和表达水平与各临床病理特征均无相关性(P0.05).结论 MMP-9mRNA的高表达及MMP-9/TIMP-1平衡的调节失衡导致卵巢上皮性肿瘤的发生、侵袭和转移;MMP-9 mRNA的高表达对卵巢上皮性癌有预后意义.     

单纯疱疹病毒性角膜炎泪液中EGF检测分析

为了解单纯疱疹病毒性角膜炎(Herpes Simplex Virus Keratitis,HSVK)病程中泪液表皮生长因子(Epidermic Growth Factor,EGF)的分泌状况,应用放射免疫沉淀法定量测定对照组40例(A组),HSVK发作期组49例(B组)及HSVK恢复期组31例(C组)共120例人反射性泪液中的EGF值.结果发现B组泪液中EGF含量增高,与A、C组的比较有非常显著差异性(P<0.001);C组泪液中EGF含量较高,与A组的比较亦有显著性差异(P<0.05).提示HSVK病程中反射性泪液EGF含量较正常人高.     

玉屏风散治疗实验性小鼠单纯疱疹病毒性角膜炎的观察

目的观察玉屏风散对实验性小鼠单纯疱疹病毒角膜炎（HSK）的治疗效果,探讨其对机体免疫功能的调节作用。方法将90只小鼠随机分为实验组、模型对照组及空白组各30只。通过单纯疱疹病毒1型（HSV-1）感染60只小鼠60眼（实验组、模型对照组各30只）的角膜建立HSK小鼠,实验组小鼠灌服玉屏风散水煎剂,模型对照组和空白组灌服等量的生理盐水,每日一次在裂隙灯下角膜荧光素染色检查小鼠角膜上皮炎的愈合情况及角膜的混浊度;并分别在给药后第7天、第14天及第28天随机取3组小鼠眼眶静脉血,离心取血清,ELISA法测定小鼠血清白细胞介素-2（IL-2）的水平,同时行眼球组织病理学检查。结果实验组小鼠角膜混浊度明显低于模型对照组;实验组小鼠单纯疱疹病毒角膜炎治愈率75%,对照组治愈率30%,两组比较差异有显著性（P〈0.05）;实验组小鼠第14天、第28天血清IL-2含量高于模型对照组及空白组,差异有显著性（P〈0.05）;小鼠角膜组织病理检查示实验组第7天、第14天、第28天角膜炎症反应程度较模型对照组轻。结论玉屏风散能调节小鼠免疫功能,对单纯疱疹病毒角膜炎有明显疗效。     

中西医结合治疗单纯疱疹病毒性角膜炎58例

目的 观察增损银翘散联合无环鸟苷治疗单纯疱疹病毒性角膜炎（上皮型）的临床疗效。方法 115例患者分组，治疗组58例62只眼，对照组57例61只眼。对照纽予以0．1％无环鸟苷滴眼液点眼，口服阿昔洛韦片；治疗组在对照组疗法的基础上虽用增损银翘散煎服，同时给予清开灵静脉滴注。结果 治疗组治愈率和总有效率分别为87．10％和96．77％，对照纽的治愈率和总有效率为67，21％和91．80％，两组相比总有效率有显著性差异（P〈0．05），治愈率有非常显著差异（P〈0．01）；治愈天数两组相比差异显著（P〈0．05）。结论 对于单纯疱疹病毒性角膜炎采用中西医结合疗法效果更好，临床治愈率高，见效快，复发率低。     

中西医结合治疗单纯性疱疹病毒角膜炎206例

单纯疱疹病毒性角膜炎,是一种常见的致盲眼病,其发病率和致盲率均占角膜病的首位.且病程迁延,易反复发作,给患者躯体及精神造成严重伤害.2001年12月～2005年11月,笔者采用中西医结合的方法治疗该病206例,取得满意疗效,现总结如下.     

Toll样受体在角膜上的表达及在单疱病毒角膜炎中的作用

Toll样受体(TLR)是新近发现的一类具有高度保守性的蛋白家族受体,它能识别各种病原体及内生配体,并对其作出应答,从而引起一系列炎性反应并开始固有免疫及适应性免疫反应。至今在人类角膜细胞中已发现10种功能性TLR,分别识别细菌、病毒、真菌等致病微生物的病原相关分子结构,并经过下游信号转导通路启动先天免疫。单纯疱疹病毒Ⅰ型感染中Toll样受体的发现为深入研究其发病机制及临床治疗开辟了更为广阔的前景。     

喷昔洛韦体内抗单纯疱疹病毒的作用

目的 :研究喷昔洛韦 (PCV)对单纯疱疹病毒 (HSV)感染小鼠的疗效。方法 :每只分别用病毒滴度为 10 0LD50 ·(0 .1ml) - 1 HSV 1、HSV 2腹腔注射 0 .0 3ml,2 4h后皮下注射给药 ,PCV剂量分别为 2 0 ,5 0 ,10 0 ,2 5 0mg·kg- 1 ·d- 1 ,疗程 5d。观察动物的反应 ,出现死亡时间和死亡数 ,所有动物用药后观察 15d。同时收集各组动物治疗后的标本 ,进行病毒分离 ,按常规测定病毒滴度。另设病毒对照组、0 .9%NaCI对照组、阳性药阿昔洛韦对照组 (ACV)。结果 :PCV对HSV感染鼠有保护作用 ,5 0mg·kg- 1 ·d- 1 时 ,HSV 1和HSV 2感染鼠的存活率分别为 6 0 %和 75 % ,平均存活时间 (d)分别为 11.3± 3.6和 12 .9± 2 .8,随着药物剂量增加 ,疗效增强 ,该药还能降低组织内病毒滴度 ,阻止体内病毒复制 ,抗HSV作用类似于相同剂量的ACV。结论 :PCV有抗HSV作用。     

单纯疱疹病毒I型糖蛋白D核酸疫苗的构建及初步研究

目的构建、制备Ⅰ型单纯疱疹病毒糖蛋白Ｄ重组质粒ＤＮＡ疫苗，初步检测其诱导机体产生体液免疫应答的效果，为研制ＨＳＶ－１新型疫苗奠定基础。方法用ＰＣＲ的方法从ＨＳＶ－１病毒基因组中扩增糖蛋白Ｄ（ｇｌｙｃｏｐｒｏｔｅｉｎ　Ｄ，ｇＤ）基因，利用基因重组技术构建重组质粒；将重组质粒体外转染真核细胞ＣＯＳ－７，Ｗｅｓｔｅｒｎ　ｂｌｏｔｔｉｎｇ检测表达产物；于ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠后腿胫前肌注射免疫，０、２周各免疫１次，１００μｇ／次。初次免疫后０、２、４、６周眼眶采血，ＥＬＩＳＡ间接法检测抗体。结果重组质粒酶切出相应大小片段，经测序证实为ＨＳＶ－１ｇＤ序列。Ｗｅｓｔｅｒｎ　ｂｌｏｔｔｉｎｇ证实能够在体外真核细胞中表达。免疫小鼠后，产生特异性抗体，抗体滴度１∶２０００。结论ＨＳＶ－１ｇＤ重组质粒ＤＮＡ有可能作为ＨＳＶ－１的ＤＮＡ疫苗，用于防治ＨＳＶ－１感染及其相关疾病。关键词单纯疱疹病毒角膜炎ＤＮＡ疫苗糖蛋白Ｄ     

PCR检测生殖器疱疹患者HSV-2

目的：用聚合酶链反应（ｐｏｌｙｍ ｅｒａｓｅｃｈａｉｎ ｒｅａｃｔｉｏｎ, Ｐ Ｃ Ｒ）检测生殖器疱疹患者单纯疱疹病毒（ｈｅｒｐｅｓｓｉｍ ｐｌｅｘ ｖｉｒｕｓ ２, Ｈ Ｓ Ｖ２）。方法：对１０１ 例生殖器疱疹和糜烂患者及２０ 例对照组用 Ｐ Ｃ Ｒ法检测 Ｈ Ｓ Ｖ１、 Ｈ Ｓ Ｖ２。结果： Ｈ Ｓ Ｖ２ 检出阳性率占 ６０４％ （６１／１０１）, Ｈ Ｓ Ｖ２ 和 Ｈ Ｓ Ｖ１ 双重感染占４％ （４／１０１）。对照组均为阴性,并且年龄轻者感染阳性率高于年龄长者。结论： Ｐ Ｃ Ｒ 具有操作较易、快速、敏感的特点,为临床对生殖疱疹的诊断和鉴别诊断提供了理想的新方法。     

中药治疗单纯疱疹性角膜炎的疗效观察

目的:探讨中药治疗单纯疱疹性角膜炎(HSK)的临床疗效。方法:78例HSK患者随机分为治疗组(39例)和对照组(39例);治疗组接受中药治疗,对照组接受传统西医药治疗。结果:总有效率治疗组(94.87%)明显高于对照组(79.49%),两组比较差异具有统计学意义(P<0.05);治疗组平均治愈天数和显效天数均明显短于对照组,差异具有统计学意义(P<0.01);两组均无明显治疗副反应。结论:中药治疗HSK疗程短,疗效肯定,值得推广应用。