TGF-β／Smad信号通路的研究及其在肿瘤中的作用

转化生长因子β（transforming growth factor—β,TGF—β）可通过特异性结合并激活具有丝氨酸／苏氨酸激酶活性的细胞表面受体启动各种应答。Smads蛋白是TGF—β超家族细胞内重要的信号转导和调节分子,活化的受体可刺激Smads蛋白磷酸化,形成复合物入核调控靶基因的转录。TGF—β受通路中各种成分和其他信号转导通路的调节。TGF—β信号转导途径在肿瘤发生机制中有重要作用。     

转化生长因子β和糖尿病肾病

糖尿病肾脏并发症是糖尿病致死的主要原因，但其机理仍未明确。现已表明，转化生长因子β（TGF－β）是介导葡萄糖引起肾小管、肾小球系膜细胞生长和胶原合成的重要物质[1]。本文重点讨论TGF－β在糖尿病肾病发生发展中的重要作用。1．TGF－β及其受体TGF－β是一种负性生长调节因子，成熟的有活性的TGF－β分子量为25kDa，是由两个分子量为12kDa的单体分子通过链间二硫键联成的二聚体，每个分子包含112个氨基酸，性质稳定。哺乳类动物TGF－β至少有三种同型体（即β1、β2、β3）。人TGF－β基因定位于染色体19q13．1，TGF－β2…     

不同程度肝硬化患者血浆TGF-β1测定及其意义

肝硬化是肝脏慢性反复损伤后肝脏细胞外基质（ECM）合成与降解之间平衡失调、细胞外基质过度沉积的结果，其中肝星状细胞（HSC）的激活是肝纤维化发生发展的中心环节。激活的HSC可直接产生多种细胞外基质，是肝纤维化细胞外基质的最主要来源。激活的HSC也可自身分泌多种细胞因子，其中转化生长因子β1（TGF—β1）是最关键的致纤维化因子。血透明质酸（HA）、Ⅲ型前胶原（PCⅢ）可以反映肝纤维化、肝硬化程度。我们测定不同程度肝硬化患者血浆TGF—β1变化，分析TGF-β1与HA、PCⅢ的相关关系，旨在为肝硬化诊断追踪观察提供一有意义指标。     

转化生长因子β1对人脐静脉血管内皮细胞活性的影响

目的观察转化生长因子β1（TGF—β1）刺激增生性瘢痕成纤维细胞上清液对人脐静脉血管内皮细胞（HUVEC）增殖和趋化能力的影响。方法以增生性瘢痕成纤维细胞为实验组,正常皮肤为对照组,添加TGF—β1（10μg/L）为TGF—β1组,向TGF—β1组内添加丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶（Akt）阻断剂Tricirlbine（5Ixmol／L）为Akt阻断剂组,二者皆未添加的瘢痕成纤维细胞为非干扰组,利用各组细胞上清液（条件培养基）培养HUVEC,使用四甲基偶氮唑盐（MTT）法观察各条件培养基对HUVEC增殖的影响,并利用细胞划痕实验和Transwell细胞迁移实验对HUVEC的趋化情况进行评估。结果对照组吸光度值为0．91±0．34,非干扰组1．75±0．15,TGF—B,组3．26±0．58,Akt阻断剂组1．14±0．81。非干扰组吸光度值与对照组和TGF-β1组比较,差异均有统计学意义（均P〈0．01）;而Akt阻断剂组成纤维细胞增殖吸光度值明显低于TGF—β1组（P〈0．01）。细胞划痕24h后,TGF—β1组促使HUVEC划痕的闭合率较非干扰组高（P〈0．01）;而Akt阻断剂组则明显减弱HUVEC划痕闭合的速度（P〈0．01）。Transwell细胞迁移实验中,TGF—β1组迁移的细胞较非干扰组多[TGF—β1组细胞迁移数目：（1718±15）个,非干扰组：（829±2）个,P〈0．01];而Akt阻断剂组阳性细胞迁移率又明显降低[Akt阻断剂组：（935±11）个,P〈0．01]。对照组血管内皮生长因子（VEGF）（65．2±0．3）ng／L,非干扰组（87．0±0．5）ng／L,TGF—β1组（132．7±0．4）ng／L,Akt阻断剂组（70．5±0．6）ng／L。非干扰组与对照组、TGF-β1组与非干扰组、Akt阻断剂组与TGF—β1组比较,差异均有统计学意义（均P〈0．01）。结论TGF—β1可以通过刺激增生性瘢痕成纤维细胞旁分泌VEGF等细胞因子对血管内皮细胞增殖、趋化等能力产生影响。     

转化生长因子-β与肿瘤

转化生长因子-β(Transfoming growth factor—beta，TGF—β)是一类具有多种生物学效应的细胞因子，对机体许多组织细胞的生长和分化有重要的调节作用，能促进或抑制多种细胞的增殖，调节细胞外基质和结缔组织的成分，促进骨组织形成及创伤愈合，影响免疫系统的功能和肿瘤的发生、进展以及调控自身免疫疾病和肝、肾疾病等，是功能最复     

转化生子因子β1对培养心脏成纤维细胞α-SMA及Cx43表达的影响

目的：本研究拟观察转化生子因子β1（TGFβ1）诱导乳鼠CFs向MFs分化中α—SMA及Cx43表达的影响。方法：酶解-差速贴壁分离法分离培养乳鼠CFs,将10ng／mL的TGFβ1诱导培养第1天细胞;细胞免疫荧光及共聚焦纤维观察α—SMA及Cx43表达;以免疫印迹和RT—PCR分别半定量比较两者a—SMA及Cx43蛋白和mRNA表达。结果：分离培养2d的原代CFs细胞极少表达a-SMA及Cx43蛋白及其mRNA;经TGFβ1诱导24h后α—SMA及Cx43蛋白及其mRNA表达显著增高（P〈0．01）。结论：TGFβ1,可诱导乳鼠CFs向MFs分化,导致α—SMA及Cx43蛋白及其mRNA表达显著增高。     

TGF—β与EMT介导的肿瘤转移的关系

肿瘤的浸润转移是恶性肿瘤致死的主要原因,而上皮-间质转化（epithelial—mesenchymalh’ansition）EMT是肿瘤浸润和转移的重要机制。已有研究发现转化生长因子TGF—β在诱发EMT过程中起着十分关键的作用。转化生长因子β（transforminggrowthfactorbeta,TGF—β）是一种多功能的多肽类细胞因子,研究TGF—β引发的上皮问质转化在恶性肿瘤侵袭、转移中的作用,为肿瘤侵袭转移的机制和治疗提供参考。     

转移相关基因干扰对肝癌转移潜能的影响

目的：通过干扰高转移潜能肝癌细胞（ MHCC97?H）中的骨桥蛋白（ OPN）、肿瘤增殖性因子肿瘤生长因子β1（ TGFβ1）基因,使之减少OPN、TGFβ1表达,观察MHCC97?H转移能力的变化情况。方法对MHCC97?H细胞行OPN、TGFβ1基因干扰,qPCR法检测干扰效果。 MHCC97?H细胞迁移细胞学实验采用transwells法。肺转移动物模型制作方法：裸鼠尾静脉注射各组细胞,含细胞数5×106个／只,隔天连续注射3次,2周后观察肺脏组织。离体肺脏组织标本制作,DAPI 染核处理10 min,甘油PBS 封片,置于荧光显微镜下观察。免疫荧光法检测裸鼠动物模型整合素αvβ3表达。结果经基因干扰后MHCC97?H表达OPN和TGFβ1明显降低（ P＜0．05）。细胞学实验显示与对照组比较,经OPN和TGFβ?1干扰组MHCC97?H细胞迁移数量明显减少（ P＜0．01）。动物模型实验显示与对照组比较,OPN和TGFβ1干扰组肺组织中肝癌细胞较少,定量分析显示OPN和TGFβ1干扰组肺脏组织中肝癌细胞IOD值明显低于对照组（ P＜0．05）。 OPN和TGFβ1干扰组与对照组比较整合素αvβ3表达IOD值差异无统计学意义（ P＞0．05）。结论经OPN和TGFβ1基因干扰的MHCC97?H细胞肺转移能力有明显的下降,尤其是TGFβ1基因干扰组下降更加明显,但经OPN和TGFβ1基因干扰的MHCC97?H细胞表达整合素αvβ3能力无变化,整合素αvβ3介导参与了OPN和TGFβ1共同作用肝癌转移行为的变化。     

ppGalNAc-T2基因下调对肝星状细胞TGFβ1-Smad3激活途径基因表达的影响

目的 探讨糖基转移酶ppGalNAc-T2对大鼠肝星状细胞的转化生长因子(TGF)β1-Smad3激活的影响.方法 在大鼠肝星状细胞中转染ppGalNac-T2的siRNA表达质粒,用RT-PCR检测相关基因mRNA表达,Western blot以及免疫荧光方法检测Smad3基因蛋白表达.结果 相对于正常细胞,ppGalNAc-T2下调后,肝星状细胞中Smad2、Smad3、Smad4、胶原3αl(Col3α1)、转化生长因子β调节基因4(Tbrg4)、TGFβ、TGFβ2及转化生长因子β受体(TGFβr)3的mRNA及Smad3的蛋白表达几乎没有变化(P>0.05),但TGFβrl和TGFβ2都有较大程度的降低(P<0.05).结论 在大鼠肝星状细胞中,ppGalNAc-T2下调对于TGFβ1-Smad3激活途径基因表达基本没有影响,其在肝星状细胞中的具体功能有待于进一步研究.     

碱性成纤维细胞生长因子与转化生长因子β1在类风湿关节炎滑膜组织中的表达

目的 了解类风湿关节炎(RA)滑膜组织中碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)与转化生长因子β1(TGF—β1)的表达分布情况，探讨其与RA发病机制的关系。方法 应用免疫组织化学SABC法对24例RA及4例正常滑膜组织中bFGF、TGF—β1的表达分布情况进行观察分析。结果 21／24例RA滑膜组织衬里层的巨噬细胞样细胞、成纤维细胞、浸润的炎症细胞与血管内皮细胞、细胞间质可见bFGF的表达分布，并且巨噬细胞样细胞、成纤维细胞、浸润的炎症细胞的阳性程度强于血管内皮细胞、细胞间质。22／24例RA滑膜组织衬里层与衬里下层的成纤维细胞、巨噬细胞样细胞、血管内皮细胞均见TGF-β1的阳性表达分布。两者比较，阳性细胞的染色程度、染色细胞数与分布范围大致相等。4例正常滑膜组织中bFGF、TGF—β1的表达分布均为阴性。结论 RA滑膜组织中bFGF、TGF—β1的表达分布均较正常增多且表达程度大致相等，两者协同作用，参与了RA病理过程的滑膜衬里层增生、炎症细胞浸润、血管增殖与滑膜血管翳的形成及对骨与软骨的破坏。     

IFN—γ对甾类激素灵敏调节蛋白、转移生长因子β1及其Ⅱ型受体在妊娠恒河猴黄体中表达的调节作用

目的：研究妊娠恒河猴黄体中甾类激素灵敏调节蛋白(StAR)、转移生长因子(TGF—β1)及其Ⅱ型受体(TβR—Ⅱ)在妊娠早期恒河猴黄体中的表达和IFN—γ的调节作用．方法：利用原位杂交和免疫组化检测mRNA及其蛋白表达与定位．结果：StAR,TGF—βl及TβR—Ⅱ在妊娠恒河猴黄体中的表达随其功能从第15天到第35天逐渐降低;IFN—γ抑制TGF—βl、TβR—Ⅱ和StAR的表达．结论：TGF—βl及其受体对黄体的形成和功能维持可能起重要作用;IFN—γ下调StAR、TGF—βl及其受体的表达．     

Smad7和TGF—β1在结直肠癌中的表达及意义

目的检测Smad7和TGF—β1在结直肠癌中的表达,探讨其在不同临床病理特征中的表达意义,以期为研究结直肠癌的发生发展提供理论帮助。方法本实验以140例结直肠癌标本作为研究对象,70例正常结肠黏膜组织作为对照,采用免疫组织化学技术,分别检测Smad7和TGF—β1的表达及其在不同临床病理特征之间的关系。结果结直肠癌中Smad7和TGF—β1的表达明显低于对照组,Smad7和TGF-β1的表达与结直肠癌浸润深度、Dukes分期及淋巴结转移密切相关,二者在结直肠癌中的表达呈正相关。结论Smad7和TGF-β1在结直肠癌发生发展中具有重要协同作用,联合检测Smad7和TGF-β1的表达可能与判断预后有关。     

丹参对体外高糖环境中大鼠系膜细胞活性氧抑制作用的研究

目的：观察丹参对高糖环境中系膜细胞所产生的活性氧（ROS）及转化生长因子β1（TGF—β1）的抑制作用。方法：将细胞分为以下6组：对照组（C组,普通MEM培养基,含5．6mmol·L^-1葡萄糖）;高糖组（H组,30mmol·L^-1高糖MEM培养基）;小剂量丹参干预组（S1组,H组＋37．5mg·ml^-1丹参）;中剂量丹参干预组（S2组,H组＋75mg·ml^-1丹参）;大剂量丹参干预组（S3组,H组＋150mg·ml^-1丹参）;单纯丹参组（S组,C组＋150mg·ml^-1丹参）。分别采用激光共聚焦和ELISA法检测ROS及TGF—β1水平。结果：H组ROS水平较C组明显增高,分别采用不同浓度丹参干预后,ROS水平均显著降低,并呈剂量依赖性;与H组相比,不同剂量丹参干预组TGF-β1表达均降低,但仅S3组TGF—β1的下降具有统计学意义。与对照组相比,单纯丹参干预组中ROS和TGF—β1水平无明显变化。结论：丹参可减少高糖环境中系膜细胞ROS及TGF—β1的产生,而这可能是丹参发挥肾脏保护作用机制之一。     

骨组织工程的基质材料

在组织工程学中，种子细胞必须依赖于细胞外基质才能发挥功能，因此寻求理想的基质材料是骨组织工程研究的重点课题。其基本要求是：(1)良好的生物相容性和可降解性：(2)良好的骨诱导性和骨传导性；(3)高细胞渗透性；(4)表面的化学性质与微结构能支持骨细胞的生长和功能分化；(5)能与其它活性分子如骨形态发生蛋白(BMP)、转移生长因子—β(TGF—β)复合共同诱导骨的发生；(6)易消毒性。     

慢性丙型肝炎患者血清TGFβ1与肝组织纤维化的相关性

转化生长因子（TGFβ1）是一种组织生长、炎症修复的重要细胞转化生长因子。我们通过检测丙型肝炎患者血清中TGFβ1水平,以便与肝功能损害程度,肝脏病理纤维化的分级相比较,探讨TGFβ1是否可作为丙型肝炎患者肝纤维化诊断的一个重要血清学指标。     

解毒复肾逐淤方对TGF—β1诱导人肾小管上皮细胞纤维化的作用

目的探讨解毒复肾逐淤方对人肾小管上皮细胞纤维化的干预作用及可能的作用机制。方法建立转化生长因子β1（TGF—β1）诱导人肾小管上皮细胞纤维化模型,采用MTT、Western Blot和流式细胞检测方法,观察解毒复肾逐淤方对细胞增殖、细胞外基质的变化及结缔组织生长因子表达的影响。结果解毒复肾逐淤方能明显改善TGF—β1导致的人肾小管上皮细胞凋亡,减少细胞外基质的分泌,降低α平滑肌肌蛋白（α—SMA）阳性细胞数,抑制结缔组织生长因子（CT—GF）、纤连蛋白（FN）的表达。结论解毒复肾逐淤方能减轻肾间质纤维化的损伤,可能与调控TGF-β1-CTGF信号通路有关。     

转化生长因子-β和肝细胞生长因子在肺纤维中的研究进展

特发性肺纤维化（idiopathic pulmonary fibrosis,IPF）是一种原因不明的间质性肺疾病,其临床治疗效果欠佳。近年来,随着对本病发病机制和病理生理变化的深入研究和分子生物学技术的应用,了解到多种细胞及细胞因子都参与了肺纤维化的发生发展过程。特别是转化生长因子β（TGF-β）及肝细胞生长因子（HGF）在肺纤维化的发病过程中具有重要的作用,治疗上有了新的突破。本文就TGF—β和HGF细胞因子分子机构、功能及在肺纤维化中的治疗作用做一综述。     

杂色曲霉素对小鼠穹隆下器官TNFα和TGFβ_2的mRNA表达的影响

目的观察杂色曲霉素(ST)损伤脑组织时有无肿瘤坏死因子(TNF)α和转化生长因子(TGF)β2的mRNA表达的改变。方法用BALB/c小鼠,ST3mg.kg-1灌胃,分别于灌胃后0.5,1,2,4,8和16h处死动物,用原位杂交方法观察穹隆下器官(SFO)细胞TNFα mRNA和TGFβ2 mRNA的表达。结果TNFα mRNA和TGFβ2 mRNA阳性细胞广泛分布在SFO。ST处理组从0.5h开始TNFα mRNA阳性表达细胞数缓慢上升,4h达到顶点,之后缓慢下降;TGFβ2 mRNA阳性表达细胞数从0.5h缓慢持续上升,16h达到顶点。ST组各时间点TNFα mRNA和TGFβ2 mRNA阳性细胞数均明显高于对照组。结论TNFα和TGFβ2在ST对SFO细胞损伤和修复中可能起着重要的作用。     

TGFβ信号转导通路及以其为靶点的肝纤维化治疗

肝纤维化是指由多种慢性疾病引起的肝脏持续的创伤修复反应而导致的细胞外基质(ECM)过度沉积和肝脏功能的受损。激活的肝星状细胞(HSC)是促进ECM过度沉积的主要细胞。转化生长因子β(TGFβ)可激活HSC和调节ECM的合成和沉积,被认为是肝纤维化中最关键的因素。介导TGFβ信号进入细胞核内的最主要途径是Smad转导通路,而越来越多的证据表明,非Smad途径也参与了TGFβ的信号转导。TGFβ信号通路对维持内环境的稳态非常重要并涉及多种病理状态。这种具有多重生物活性的细胞因子对正常健康的维持同样非常重要,所以在TGFβ信号转导中通过阻断对纤维化的形成具有特异性作用的下游通路且不影响其他的生物活性而治疗肝纤维化具有重要的挑战性。     

转化生长因子β受体在72例膀胱癌中的表达

目的　探讨膀胱移行细胞癌中转化生长因子 β的 、 型受体 (TGFβ- R- 、TGFβ- R- )表达及其意义。方法　采用免疫组化技术 (SABC法 )对 72例膀胱癌、 1 4例正常膀胱组织的 TGFβ- R- 、 R- 进行检测 ,结合临床资料进行分析。结果　 TGFβ- R- 在膀胱癌组及正常膀胱组织中均表达 ;TGFβ- R- 在膀胱癌中阳性率较正常膀胱组织阳性率低 (P<0 .0 1 ) ,TGFβ- R- 在高分级膀胱癌中表达阳性率较低分级膀胱癌低 (P<0 .0 1 ) ;在复发癌的阳性表达率较初发性癌的阳性率低 (P<0 .0 1 )。结论　 TGFβ1对膀胱癌是一种重要负性调节因子 ,可抑制膀胱癌进展 ,TGFβ- R- 缺失使 TGFβ系统完整性受到破坏 ,TGFβ 1失去负性调节作用 ,TGFβ- R- 表达可作为判断膀胱癌预后的指标之一