褪黑素对急性肾脏缺血-再灌注损伤小鼠热休克蛋白表达的影响

目的 建立小鼠肾脏缺血-再灌注损伤模型,观察褪黑素时热休克蛋白合成的影响,了解褪黑素对小鼠急性肾脏缺血-再灌注损伤的保护作用及其机制.方法 昆明种小鼠40只,随机分成假手术组、缺血-再灌注组和褪黑素高、低剂量组.缺血-再灌注24 h后观察肾脏组织的病理学改变,并通过免疫组织化学方法观察小鼠肾脏热休克蛋白的表达.结果 与假手术组相比,缺血-再灌注组肾小管上皮细胞呈明显的缺血性改变,肾小球内中性粒细胞数目明显增多,肾脏热休克蛋白表达明显增强;褪黑素高、低剂量组与缺血-再灌注组相比,肾小管上皮细胞缺血性改变减轻,肾小球内中性粒细胞数目明显减少,肾脏热休克蛋白表达明显增强.结论 褪黑素通过诱导热休克蛋白的合成,能减轻小鼠急性肾缺血-再灌注的损伤.     

热休克预处理对大鼠缺血再灌注损伤心肌P-选择素表达的影响

目的观察热休克预处理对大鼠缺血再灌注损伤心肌P-选择素(PS)表达的影响。方法成年雌性Wistar大鼠40，只，随机分为3组。热休克组予全麻后高热处理致肛温达42士O．5℃维持15min制成热休克动物模型，24小时后热休克组及对照组结扎左冠状动脉前降支(LAD)1小时，再灌注2小时制成心肌缺血再灌注损伤动物模型，假手术组只于LAD处穿线。术毕测血清CK-MB、心梗范围、热休克蛋白70(HSP70)、PS。结果热休克组HsP70表达高于对照组及假手术组(P＜O．05)，后两组比较差异无显著意义(P＞O．05)；热休克组心梗范围、血清CK-MB、PS表达皆少于对照组(P＜O．05)；HSP70的表达与Ps的表达成负相关(r=-O．560)。结论热休克预处理对心肌缺血再灌注损伤有保护作用；Ps参与了心肌缺血再灌注损伤；HSP70可能有抑制缺血再灌注损伤心肌Ps表达的作用，这或许是热休克预处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤的另一保护机制。     

热休克蛋白HSP72在大鼠脊髓缺血耐受中的表达及其作用

目的 热休克蛋白HSP72在大鼠脊髓缺血耐受中的表达及其作用.方法 采用球囊阻断主动脉法建立大鼠脊髓缺血模型;RT-PCR测HSP72 mRNA表达水平;免疫组化法测脊髓组织HSP72含量.结果与假手术组相比,缺血3 min组HSP72 mRNA表达呈再灌注时间依赖性增加,再灌注时间30 min HSP72 mRNA表达显著增高（P＆lt;0.05）,2 h达到峰值,24 h后其表达开始下降;与缺血3 min相比,缺血6 min组再灌注30 min显著增加（P＆lt;0.05）,免疫组化显示：与假手术组相比,缺血3 min组HSP72表达呈再灌注时间依赖性增加,再灌注时间30 min HSP72表达显著增高（P＆lt;0.05）,2 h达到峰值,24 h后其表达开始下降;与缺血3 min组相比,缺血6 min组再灌注30 min,2 h,24 h HSP72均有统计学意义（P＆lt;0.05）.结论 脊髓缺血一定时间后恢复血液供应,可以发生再灌注损伤;脊髓缺血灌注后HSP72的表达增加且增加水平与缺血时间有关.     

钙蛋白酶在脊髓缺血再灌注损伤中的表达

要目的探讨脊髓缺血再灌注损伤后,钙蛋白酶在脊髓组织中的表达及缺血再灌注损伤对脊髓摘运动功能的影响。方法纯种雄性成年SD大鼠,夹闭右肾动脉分支下方腹主动脉30min,观察再灌注后3、24、72h和7d时脊髓损伤节段的钙蛋白酶Ⅰ的表达,钙蛋白酶特异性底物68-KDNFP的降解以及再灌注后72h的动物后肢功能评分。结果动物脊髓再灌注损伤后3h,开始出现的钙蛋白酶Ⅰ阳性细胞,并且随着时间的延长,阳性细胞数目逐渐增多,染色深度逐渐增加,再灌注后72h最明显,与对照组相比,具有显著性差异(P<0.01)。68-KDNFP的降解产物也在再灌注损伤后3h出现,并且随着时间的延长逐渐加重,并在72h后达到高峰。再灌注后72h后肢功能出现不同程度的运动功能障碍。结论大鼠脊髓缺血再灌注损伤后出现钙蛋白酶Ⅰ的大量表达,特异性分解细胞骨架蛋白68-KDNFP,并且会引起动物后肢一定程度的功能障碍。     

缺血后处理对大鼠心肌缺血再灌注不同时相心肌热休克蛋白70及血清超氧化物歧化酶和丙二醛的影响

目的 探讨缺血后处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤不同时相心肌热休克蛋白70（HSP70）和血清超氧化物歧化酶（SOD）及丙二醛的影响.方法 建立近交系Lewis大鼠颈部异位心脏移植左心作功模型,受体大鼠存活2d后,采用随机数字表法分为3组：①缺血再灌注组,结扎移植心脏冠状动脉左前降支30 min后再灌注3、6、12、24 h,2、4及7d,每个时相点8只受体鼠.②缺血后处理组,移植心脏缺血30 min,在再灌注前1 min给予再通10s,阻断10 s,连续3个循环.每个时相点8只受体鼠.③假手术组,穿线做套环,但不收紧结扎线.再灌注结束后检测大鼠移植心脏心肌HSP70表达和血清SOD及丙二醛值.结果 与假手术组比较,在再灌注时间3、6、12、24 h,2、4、7d等7个时相点,缺血再灌注组和缺血后处理组心肌HSP70表达水平明显增高（P＜0.01）,血清SOD值明显降低（P＜0.05）,丙二醛值明显升高[HSP70表达水平：（7.22±0.98）、（9.77±1.98）、（10.02 ±2.14）、（11.12 ±2.83）、（10.76±2.65）、（9.23±2.01）、（8.22±1.12）和（33.38±9.12）、（36.15±9.67）、（40.56±10.34）、（50.01 ±13.17）、（47.78±10.99）、（42.21 ±10.58）、（35.35 ±8.11）比（0.91 ±0.17）,SOD值：（35±6）、（34±4）、（31 ±4）、（26±3）、（29±4）、（35±7）、（37±5）和（44±7）、（41±6）、（40±5）、（32±4）、（37±5）、（44±9）、（45±8）μg/L比（57±10） μg/L,丙二醛值：（0.53±0.06）、（0.57±0.06）、（0.71±0.11）、（1.34±0.25）、（0.77±0.11）、（0.68±0.09）、（0.49±0.05）和（0.47±0.05）、（0.50±0.06）、（0.60±0.08）、（1.08±0.19）、（0.62±0.11）、（0.59±0.07）、（0.43±0.05） mmol/L比（0.36±0.04） mmol/L]（P＜0.05）;与相同灌注时间的缺血再灌注组比较,缺血后处理组在7个时相点的心肌HSP70表达水平明显增高（P＜0.01）,血清SOD值明显升高（P＜0.05）、丙二醛值明?     

热休克蛋白70对幼鼠心肌缺血再灌注损伤保护作用的实验研究

目的研究川芎嗪（TMP）诱导热休克蛋白（HSP）70对未成熟心肌缺血再灌注损伤的保护作用,探讨其干预心肌缺血再灌注损伤的作用机制及合理用药途径,为临床使用提供理论依据。方法建立幼鼠在体心肌缺血再灌注模型。将96只体重60-75g SD幼鼠（〈21d）,随机分为3组：（1）假手术（SC）组,（2）缺血再灌注（IR）组,（3）TMP预处理后缺血再灌（TMP＋IR）组;每组再随机分为4个亚组：12h亚组、24h亚组、36h亚组、48h亚组,各亚组分别于腹腔药物注射[TMP＋IR组腹腔注射TMP（100mg／kg）,SC组与IR组腹腔注射等量0．9％氯化钠溶液]后12h、24h、36h、48h制作心肌缺血再灌注模型。测定血清中肌酸激酶同工酶（CK—MB）、乳酸脱氢酶（LDH）两种酶的含量,测定幼鼠心肌内HSP70的含量．应用电镜观察幼鼠心肌细胞超微结构的病理改变。结果IR组和TMP＋IR组各时间点血清中CK-MB、LDH含量明显高于SC组（P〈0．01）;IR组心肌中HsP70表达量较SC组略增加,TMP＋IR组HSP70的表达明显增加;电镜心肌细胞超微结构观察：SC组心肌细胞结构基本正常,IR组损伤最严重,TMP＋IR组心肌细胞损伤较IR组有明显改善。结论HSP70的表达可以减轻未成熟心肌的缺血再灌注损伤,可以提高未成熟心肌对损伤性应激的耐受能力。     

热休克预处理对大鼠胰腺移植后缺血性再灌注损伤的抑制作用

摘要 目的：通过热休克预处理（HPC）,探讨减轻大鼠胰腺移植后缺血再灌注损伤的发生机制。 方法：热休克预处理后动态检测大鼠胰腺组织热休克蛋白表达。建立大鼠胰腺移植缺血再灌注模型,选择表达热休克蛋白高峰时段供体大鼠胰腺移植作为实验组,未预处理的供体大鼠胰腺移植作为对照组。胰腺移植后6h,检测静脉血及移植胰腺。Western blot法检测胰腺组织中热休克蛋白70（HSP70）的表达,免疫组化法测定肿瘤坏死因子α（TNF-α）表达。碘淀粉比色法检测血淀粉酶水平。光镜观察胰腺病理改变。 结果：HPC后供体大鼠胰腺中HSP70的表达在12h 达到高峰,与其它各时段比较具有显著差异（P<0.05）,与未预处理组比较差异也显著（P<0.01）,48h恢复到原来水平。对照组胰腺组织中TNF-α、中性粒细胞、血淀粉酶的水平明显升高,与假手术组相比差异显著（P<0.01）。实验组降低了胰腺组织中TNF-α、中性粒细胞、血淀粉酶的水平,与对照组比较差异具有统计学意义。（P<0.05）。实验组胰腺间质水肿及出血明显低于对照组。 结论：热休克预处理可以减轻大鼠胰腺移植后缺血再灌注损伤, 热休克预处理的延迟保护作用与HSP70的诱导生成有关。     

缺血后处理增加脊髓miR-125b表达减轻大鼠脊髓缺血-再灌注损伤后神经元凋亡

目的观察缺血后处理(Ischemic postconditioning,IPC)对大鼠脊髓缺血再灌注损伤(Spinal cord ischemia reperfusion injury,SCIRI)后microRNA(miRNA,miR)-125b表达及下肢运动功能的影响。方法 45只SD大鼠平均随机分为3组:假手术组(Sham组)、缺血-再灌注组(IR组)和缺血后处理组(IPC组)。Sham组仅暴露主动脉弓而不夹闭,其他各组夹闭主动脉弓14 min后再开放建立SCIRI模型。IPC组于再灌注5 min后给予5循环缺血后适应。再灌注后24 h,处死大鼠,提取脊髓组织,分别检测脊髓组织湿/干重比(Wet-dry ratio,W/D)和总含水量(Total water content,TWC),HE染色观察脊髓组织病理学变化,qRT-PCR测定脊髓组织中miR-125b表达,TUNEL法检测神经元凋亡数量(Apoptotic quantitiy,AQ)。结果术后24 h,与Sham组比较,IR组大鼠脊髓W/D、TWC、AQ升高,脊髓组织中miR-125b表达下调(P<0.05);与IR组比较,IPC组脊髓W/D、TWC、AQ降低,脊髓组织中miR-125b表达上调(P<0.05)。HE染色显示,Sham组脊髓前角结构完好,可见大量胞核完整的运动神经元,IR组脊髓前角内大量空泡形成,神经元结构缺失,胞质呈嗜酸性,而IPC组脊髓前角存在部分结构正常的神经元。结论缺血后处理可能通过上调脊髓组织中miR-125b的表达,减少脊髓组织前角运动神经元凋亡,从而改善大鼠SCIRI损伤。     

甲基强的松龙上调受损脊髓细胞内Hsp27蛋白的表达

目的 研究甲基强的松龙(MP)上调热休克蛋白27(Hsp27)对受损中枢神经元自我保护及修复机制的激发和增强作用,为进一步促进受损中枢神经元存活和纤维再生创造有利的条件.方法 采用改良Allen重物打击模型,动物随机分为2组:对照组(脊髓损伤后注入和实验组同等量生理盐水),实验组(脊髓损伤后5min使用大剂量甲基强的松龙).分别在脊髓损伤24h后行脊髓病理形态学观察,用免疫组织化学染色的方法观察脊髓细胞中Hsp27的表达.用SPSS软件对数据进行统计学处理.结果 ①在热休克蛋白27量的表达上,两组差别有统计学意义(P＜0.01).②MP治疗可明显改善损伤脊髓的病理形态.结论 MP可使具有保护作用的Hsp27表达上调,从形态学角度提示了MP可能激发并增强受损中枢神经的自我保护及修复机制.     

缺血预处理对缺血-再灌注大鼠肾脏缝隙连接蛋白43表达的影响

目的 研究缺血预处理对缺血-再灌注大鼠肾脏缝隙连接蛋白43(Cx43)表达的影响,探讨Cx43在缺血-再灌注中的作用及其意义.方法 SD大鼠30只分3组:假手术Sham组、缺血-再灌注(I-R)组、缺血预处理(IPC)组.于再灌注2 h后检测肾组织匀浆一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)水平;肾组织切片HE染色行中性粒细胞(PMN)计数及Paller评分,量化肾损害程度;Western blot定量分析Cx43蛋白在肾组织中的表达.结果 IPC组肾组织中NO、总NOS(TNOS)、诱导型NOS(INOS)水平明显高于IR组;IPC组PMN计数及Paller评分明显低于IR组;IPC组Cx43蛋白表达明显高于IR组,IR组Cx43蛋白表达明显低于Sham组.结论 缺血预处理可能通过提高Cx43在肾组织中的表达减轻肾缺血再灌注损伤.     

丙泊酚对缺血再灌注损伤脊髓的保护作用

检测血清和脊髓匀浆中Ca2＋、Mg2＋、Cu2＋、Zn2＋的变化规律,揭示丙泊酚对缺血再灌注损伤脊髓保护作用的可能机制。结果发现,随着缺血再灌注损伤时间的延长,兔血清Ca2＋、Cu2＋浓度逐渐升高,Mg2＋、Zn2＋浓度逐渐下降,至脊髓损伤后7d,以上离子变化最明显;缺血再灌注损伤7d,兔缺血脊髓匀浆中的各离子浓度变化与血清中相一致。给予丙泊酚干预后,缺血再灌注期间兔血清和脊髓匀浆中Ca2＋、Mg2＋、Cu2＋、Zn2＋浓度均无显著的波动。提示丙泊酚可通过稳定或恢复脊髓缺血再灌注损伤区金属离子的平衡发挥对脊髓缺血再灌注损伤的保护作用。     

东菱克栓酶对缺血再灌注热休克蛋白70的影响

目的：研究东菱克栓是否通过影响热休克蛋白７０（ＨＳＰ７０）起神经保护作用。方法：采用大鼠大脑中动脉线栓法缺备再灌注模型，以免疫细胞化学及病理形态学方法进行研究。结果：发现在缺血（９０ｍｉｎ）再灌注（４８ｈ）后，对照组缺血侧皮层ＨＳＰ７０免疫反应较对照组更强烈，而皮层神经元缺血性损伤则较轻。结论：东菱克栓酶对局业性缺血再灌注损伤的神经保护作用，可能与它能影响热要克蛋白有关。     

丹参酮对脊髓缺血再灌注损伤大鼠模型脊髓、血清谷氨酸含量的影响

目的观察丹参酮对脊髓缺血再灌注大鼠脊髓、血清谷氨酸水平探讨丹参酮保护脊髓的作用机制。方法选用SD大鼠88只,采用结扎腹主动脉的方法制作脊髓缺血再灌注模型。按随机数字表法将动物分为假手术组（n=8）、模型组（n=40）和丹参酮组（n=40）。A组在全麻下充分暴露脊髓,B组及C组采用Zivin法改进方法复制模型,随机在脊髓缺血再灌注30min、1h、4h、8h、12h的相应时间点切取脊髓,抽取下腔静脉血,检测缺血再灌注后脊髓谷氨酸、血清谷氨酸含量及对缺血再灌注4h、8h、12h,采用改良Tarlov评分标准进行神经功能评分。结果丹参酮组及模型组大鼠脊髓、血清谷氨酸含量均于脊髓缺血再灌注损伤后30min开始上升,缺血再灌注损伤4h后含量达到高峰,其后含量逐渐下降,12h后基本恢复正常。丹参酮组各观测点脊髓、血清谷氨酸含量均低于模型组。结论丹参酮能降低脊髓缺血再灌注大鼠脊髓谷氨酸含量,对大鼠脊髓缺血再灌注损伤具有保护作用。     

再灌注早期渐增灌注压力对缺血再灌注心肌保护作用的实验研究

目的 探讨心肌缺血后再灌注时渐增灌注压力是否具有与标准心肌缺血后处理相同的心肌保护用以及其机制.方法 观察持续缓慢升高灌注压力对缺血再灌注后心肌的冠脉流出液中cTnI含量及冠脉流量、心肌细胞超微结构变化的影响以及P-Akt的表达.结果 持续缓慢升压组能有效促进缺血再灌注心脏的冠脉流量恢复,冠脉流出液中cTnI含量减少,P-Akt高表达,同时电镜观察显示细胞超微损伤亦减轻.结论 持续缓慢升高灌注压力对离体缺血再灌注心脏具有保护作用,PI3K/Akt/GSK-3β通路可能是其心肌保护作用的信号传导通路之一.     

热休克蛋白70在心肌保护中的作用

热休克蛋白70（HSP70）是生物体在应激原刺激下细胞内迅速增加的一组蛋白质,本文探讨了其生物学特性以及在心肌保护中的作用并指出了其应用前景。其对心肌的保护作用,体现在抑制细胞凋亡,与缺血预处理相关,减弱心肌缺血再灌注损伤,及减少心肌顿抑范围等方面。     

经腹主动脉灌注瑞芬太尼聚己内酯对脊髓缺血再灌注损伤中脊髓能量代谢的影响

目的:观察腹主动脉内灌注Mu阿片受体激动剂REM-PCL对兔脊髓缺血再灌注损伤(SCIRI)中脊髓能量代谢的影响。方法:30只健康新西兰大白兔随机分为对照组(C组)、REM-PCL组(RP组,0.1 mg·kg^-1)和REM-PCL+ GSK1521498组(RG组,0.1 mg·kg^-1 REM-PCL+1 mg·kg^-1 GSK1521498),每组10只。采用肾下腹主动脉阻断法,建立SCIRI模型。分别于缺血前、缺血45 min及再灌注60 min时,取脊髓测定腺苷酸(ADP、AMP、ATP、TAN、EC)、Mu阿片受体表达、活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)含量、线粒体肿胀度(MSD)、总抗氧化能力(T-AOC) 并观察其病理学改变。分别于缺血前、缺血45 min、再灌注30 min及再灌注60 min监测血清神经特异性烯醇化酶(NSE)浓度变化。结果:与缺血前比较,缺血45 min及再灌注60 min时C组和RG组ATP、EC、TAN、T-AOC及Mu阿片受体表达均降低(P<0.01),ROS、MDA和MSD均升高(P<0.01);RP组在缺血45 min时和再灌注60 min时ATP、T-AOC、TAN、EC及Mu阿片受体表达均显著高于C组和RG组(P<0.01),ROS、MDA和MSD含量均显著低于C组和RG组(P<0.01),RP组脊髓灰质的病理损害程度明显轻于C和RG组(P<0.01)。缺血45 min、再灌注30 min及再灌注60minRP组血清NSE浓度明显低于C组和RG组(P<0.01)。结论:腹主动脉内灌注REM-PCL通过激活Mu阿片受体能够明显改善SCIRI中脊髓能量代谢,保护脊髓线粒体的结构,从而减轻SCIRI。     

一氧化氮在肝脏缺血再灌注损伤中作用的实验研究

缺血再灌注（I／R）损伤临床上常见,本实验通过观察肝脏I／R前后亚硝酸盐含量及一氧化氮合成酶（NOS）活性的变化,以探讨NO在肝脏I／R损伤中的作用。材料与方法一、动物：雌性SD大鼠27只,体重150～2009,南京军区总医院实验动物中心提供,随机分为（l）假手术组;（2）缺血再灌注组;（3）L一精氨酸（L—Arg）组,每组9只。二、模型：大鼠禁食12／J‘时,戊巴比经30mg／kg腹腔麻醉,开腹暴露肛门部,假手术组仅作肛门部血管分离而不阻断,其他均以无损伤微动脉夹夹闭肝蒂,断流40分钟后再灌注60分钟。L－Arg组在再灌注时静脉推注…     

丙泊酚与主动脉阻断引起的脊髓缺血-再灌注损伤

［摘要］丙泊酚具有减轻脊髓缺血 再灌注损伤的作用。应用丙泊酚减轻主动脉手术过程中主动脉阻断引起的脊髓损伤,已成为临床上脊髓保护的一个重要的研究方向。结合相关文献资料,对丙泊酚的药理学特点、减轻脊髓缺血 再灌注损伤的作用机制、临床常见的不良反应及相应的治疗措施进行概述.     

热休克蛋白27在食管上皮癌变过程中的表达及其意义

目的 了解热休克蛋白27(HSP27)在食管鳞癌、癌旁组织和切缘正常食管黏膜中的表达,分析其表达差异,并探讨其与食管癌发生发展的关系.方法 应用免疫组化Envision二步法,观察HSP27在食管鳞癌、癌旁组织和切缘正常食管黏膜中的表达,并比较其间是否存在差异.结果 食管鳞癌、癌旁组织和切缘正常食管黏膜中HSP27的阳性表达率分别为73.3％、53.5％和25.3％;HSP27在食管鳞癌中的阳性表达率高于在癌旁组织(P＜0.05),在癌旁组织中的阳性表达率高于在切缘正常食管黏膜(P ＜0.001).随着食管鳞癌高、中、低分化程度的不同,HSP27的阳性表达率逐渐降低,但差异无统计学意义(P＞0.05).结论 HSP27可能与食管鳞癌的发生发展有关.