尿中酞酸酯类代谢物、双酚A和壬基酚的固相萃取-高效液相色谱测定法

目的 建立同时测定人尿中3种酞酸酯代谢物[邻苯二甲酸单丁酯(MBP)、邻苯二甲酸单(2-乙基己基)酯(MEHP)、邻苯二甲酸单辛酯(MOP)]、双酚A(BPA)和壬基酚(4-NP)3类化合物的高效液相色谱分析方法.方法 尿样经β-葡萄糖醛酸酶水解、固相萃取柱浓缩与净化,以乙腈-水为流动相进行浓度梯度与流速梯度2种梯度方式进行洗脱,咔唑为内标定量测定.结果 MBP、MEHP、MOP、BPA和4-NP在尿中的线性范围分别为0.621～497.100、0.397～317.900、0.236～188.800、0.487～778.700和0.371～296.500 ng/ml,相关系数均大于0.9967,平均相对标准偏差值均小于10.0%,尿样中MBP、ME:HP、MOP、BPA和4-NP榆出限分别为0.155、0,099、0.059、0.121和0.092 ng/ml;平均加标回收率在85.0%以上.结论 方法准确度高,重现性好,简便实用,可用于人尿中的酞酸酯代谢物和BPA、4-NP的含量测定.     

正己烷在静态染毒柜中浓度变化与时间的关系

目的:用静态染毒柜进行正己烷染毒,研究染毒柜内正己烷浓度变化与时间关系。方法:分别在染毒后0、60、120、180和240 min吸取静态染毒柜中的气体,用气相色谱仪测定正己烷浓度。结果:低剂量正己烷(2.0g/m3)在染毒0~180 min内浓度相对较稳定,不同时间段正己烷浓度没有显著性差别(P>0.05),直到240 min时浓度才有明显下降(P<0.05)。中剂量正己烷(10.0 g/m3)在染毒0~60 min时间浓度变化较小(P>0.05),120 min时浓度明显下降(P<0.05),但120~180 min浓度又趋于稳定。高剂量正己烷(50.0 g/m3)染毒,其浓度随染毒时间延长明显下降,各检查点浓度都有显著性差别(P<0.05)。结论:使用静态染毒柜染毒低剂量正己烷浓度能维持较长时间的恒定,中剂量维持浓度恒定时间较短,高剂量正己烷染毒不适合用静态染毒柜。     

高效液相色谱法测定血清中的双酚A

双酚A(bisphonelA)是重要的化工原料 ,主要用于生产聚碳酸酯 (PC)、环氧树脂 (EP)和其他高分子材料 ,在这些材料中仍残留不少双酚A。PC用于制造耐热的茶具、咖啡杯等 ,EP用于食品包装材料 ,如罐装饮料与肉类罐头的内层涂料。由于这些物品都是人们经常接触的生活用品 ,造成双酚A也随之进入体内。双酚A是环境内分泌干扰物 ,在人体内能起到干扰体内正常激素分泌的作用 ,从而影响生殖功能 ,导致恶性肿瘤的产生。测定人血浆中的双酚A含量可对人类机体的影响提供评价依据。测定双酚A的方法有气相 质谱联用法[1,2 ] 、液相 质谱联用法[3 ] ,…     

普通人群血清双酚A水平的测定

[目的]建立高效液相色谱方法检测血清中双酚A(bisphenol，BPA)的浓度，并测定普通人群血清中双酚A的水平。[方法]按照高效液相色谱法的程序建立检测血清双酚A的方法。选择无任何职业性接触双酚A记录的普通人群作为研究对象，检测其血清双酚A水平，建立普通人群中的正常基准值。[结果]建立的高效液相色谱法能够满足检测血清中双酚A的要求，检测限为0．39ng／ml。245例血样中，120例可检出双酚A，全部样品的双酚A的浓度范围为未检出～15．9ng／ml，中位数水平低于检测限，P75为2．05ng／ml，95％上限为6．8ng／ml。男女检出率无差别，检出率在不同年龄组间存在差别。随着年龄的增长，检出率上升。[结论]本研究显示，建立的高效液相色谱法能够满足检测出普通人群血清中双酚A的要求。普通人群中血清双酚A的浓度都比较低，正常基准值低于6．8ng／ml。个别水平较高，其来源需要关注。     

免疫亲和柱净化-高效液相色谱荧光检测法测定儿童血清中双酚A

摘要:目的　建立免疫亲和柱净化-高效液相色谱荧光检测法（IAC-HPLC-FL）检测儿童血清中的双酚A。方法　采用乙腈沉淀血清中蛋白,IAC纯化与浓缩血清中的双酚A,C18色谱柱分离,乙腈-水（40∶60,V/V）溶液为流动相,荧光检测。结果　1 ng/ml～50 ng/ml的浓度范围内,双酚A的浓度与峰面积成良好的线性关系（r＞0.999）,检测限为0.85 ng/ml。加标回收率为77.8%～83.7%,相对标准差为 1.12%～3.27%。56份儿童血清样品中均检出双酚A,双酚A含量为2.06 ng/ml～19. 69 ng/m,均值7.39 ng/ml,标准差为4.09 ng/ml。结论　该法灵敏度高、重复性好,能够有效地分离和检测人血清中的双酚A,适用于人血清中双酚A的测定。     

双酚A致体外培养大鼠胚胎发育毒性的时间-效应关系研究

目的探讨双酚A（BisphenolA）对大鼠胚胎毒性的时间-效应关系。方法采用全胚胎培养模型,对9.5d龄大鼠胚胎分别染毒BisphenolA（100mg/L）6、16、26、48h,观察体外培养胚胎生长发育的影响。结果早期暴露6h对体外培养的大鼠胚胎的生长发育无不良影响,染毒16h即可影响大鼠胚胎的生长发育,染毒26h和48h对胚胎生长发育和形态分化均有明显的抑制作用。光镜下发现只有染毒26h以上才出现卵黄囊及大鼠胚胎脑组织结构的改变。结论体外实验条件下,BPA对器官形成期的早期大鼠胚胎的毒性作用具有明显的时间-效应关系,其毒性表现为慢性毒性作用。     

HPLC法测定人血清中苯妥英钠的浓度

目的：建立测定人血清中苯妥英钠浓度的方法。方法：采用大连依利特HypersilODS2色谱柱（4.6mm×150mm,5μm ）,流动相为甲醇-乙腈-水（20∶15∶65）,流速为1mL·min-1,检测波长为210nm,柱温为30℃,内标为苯巴比妥。结果：苯妥英钠血药浓度在6.25～100 mg·L-1范围内线性关系良好（r=0.9995,n=6）,最低检测浓度为1.56mg·L-1;平均回收率为99.64%～100.2%,日内与日间RSD均〈5%（n=5）。结论：本方法快速、简便、准确,适用于临床苯妥英钠的血药浓度监测。     

性早熟女童血清中双酚A、辛基酚、4-壬基酚测定和分析

目的探讨双酚A(BPA)、辛基酚(OP)、4-壬基酚(4-NP)与性早熟女童发病的关系。方法收集2005年3～10月在复旦大学附属儿科医院性早熟专科门诊就诊的初诊性早熟女童110例,正常女童100例,运用高效液相色谱法测定患儿和正常女童血清BPA、OP、4-NP的含量,同时测定子宫、卵巢体积及血清中雌二醇含量,将血清中BPA、OP、4-NP含量与靶器官的临床指标作相关性分析。结果40.9%和33.6%的性早熟女童血清中分别检测出BPA和OP,而正常女童仅2%和5%分别检测出BPA和OP,24.5%性早熟女童血清检测出4-NP,3%正常女童血清检测出4-NP;性早熟女童血清中BPA、OP、4-NP构成比均高于正常女童(P0.01);性早熟女童血清中BPA含量与子宫体积呈正相关(r=0.557,P0.05),与卵巢体积呈正相关(r=0.469,P0.01),血清中OP含量与子宫体积呈正相关(r=0.576,P0.05),与卵巢体积呈正相关(r=0.676,P0.01)。结论性早熟女童受BPA、OP、4-NP污染的程度均比正常女童严重得多,而且BPA、OP对子宫、卵巢体积有影响,可能与性早熟女童的发病有一定关系。     

孕期染毒双酚A对雄性子代生殖发育影响

目的 探讨母鼠孕期接触双酚A对子代雄鼠生殖发育的影响及作用机制.方法 将受孕SD雌鼠40只,随机分为双酚A0、10、50、250 mg/kg染毒组,以2 mL/kg容积自受孕第5d灌胃染毒至第20d;孕第21 d每组处理5只孕鼠,检测母鼠血中性激素水平,胎鼠数、死胎数、胎鼠重和胎盘重,高效液相色谱法检测母鼠血及胎盘中双酚A含量,另5只孕鼠自然分娩,待雄性子鼠性成熟后检测血中性激素水平,生殖器官脏器系数、病理、精子质量.结果 10、50 mg/kg剂量组母鼠血清中雌二醇(E2)含量分别为1 780.78、1 680.10 pmol/L,明显高于对照组的1361.74pmol/L(P＜0.01),低、中、高3个染毒组睾酮(T)含量分别为5.55、4.76、6.79 nmol/L,明显高于对照组的3.20 nmol/L(P＜0.01);50、250mg/kg剂量组雄性子鼠附睾及前列腺脏器系数分别为0.297、0.325和0.153、0.173,均高于对照组(P＜0.01),镜下可见附睾间质及前列腺上皮有增生改变;250 mg/kg剂量组精子活动率为52.9%,明显低于对照组的67.4% (P ＜0.05).结论 孕期染毒双酚A对胎鼠发育无明显影响,但影响子鼠生殖器官发育和精子生成质量.     

酶水解-高效液相色谱法测定人血清中双酚A

目的建立高效液相色谱-荧光(HPLC-FL)法检测人血清中的双酚A。方法采用β-葡萄糖酸酐酶水解人血清中的结合型双酚A,乙醚-正己烷(1∶1)混合溶液提取人血清中的双酚A,C18色谱柱分离,以己腈-四氢呋喃-水(40∶3∶60)的混合溶液为流动相,激发光波长227 nm,发射光波长310 nm检测人血清中的双酚A。结果双酚A在20 min内完全洗脱出来,分离效果良好。在0~2 500μg/L的浓度范围内,双酚A的质量浓度与峰面积成良好的线性关系,其在血清中的检测限为0.139μg/L。加标回收率大于83.5%,精密度为1.13%~5.26%。结论该法灵敏度高、重复性好,能够有效地分离和检测人血清中的双酚A,适用于人血清中双酚A的测定。     

大、小鼠吸收和代谢双酚A的差异

目的 探讨相同剂量双酚A(bisphenol A,BPA)经口染毒后,引起大、小鼠血清BPA浓度差异的机制.方法 无特定病原体(specic pathogen free,SPF)级雄性SD大鼠和ICR小鼠各18只,一次性经口给予300 mg/kg的BPA后,在第0.5、1.0、12.0小时时间点各采集6只大、小鼠血液,用荧光-高效液相色谱法(fluorescence-high performance liquid chromatography,FL-HPLC)检测血清中BPA浓度;大、小鼠各6只采用原位小肠吸收模型循环灌流100 ml 0.1 mmol/L BPA灌流液,用FL-HPLC法分别检测第0.5、1.0、2.0小时时间点灌注液中BPA浓度和灌流后2.0 h血清中的浓度;采用逆转录PCR(RT-PCR)方法检测大、小鼠肝脏尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶2B1(UDP-glucuronosyltransferase 2B1,UGT2B1)mRNA的表达水平,并采用FL-HPLC法检测UGT2B1的酶活性;大、小鼠各6只禁食24 h后,一次性经口给予300 ms/kg BPA,收集24 h粪便,用FL-HPLC法检测粪便中BPA含量.结果 300 ms/kg BPA经口染毒后第0.5、1.0、12.0小时时间点小鼠血清中BPA浓度分别为(66.57±14.95)、(51.16±16.06)、(22.73±5.00)μg/ml,大鼠血清中BPA浓度分别为(15.63±5.65)、(18.34±5.02)、(7.65±2.58)μg/ml,各时间点小鼠均高于大鼠,差异有统计学意义(F值分别为50.660,17.957,8.420,P值均＜0.05);0～、0.5～、1.0～2.0 h小鼠小肠各时间段吸收速率分别为(10.20±4.20)、(1.49±0.67)、(1.31±0.55)μg·cm-2·min-1均高于大鼠相应时间段吸收率[(1.87 ± 0.69)、(0.47±0.13)、(0.36 ± 0.08)μg·cm-2·min-1],差异均有统计学意义(F值分别为14.954、8.877、11.536,P值均＜0.05).0.1 mmol/L BPA灌肠2 h后小鼠血清中的BPA浓度为(22.64±4.35)μg/ml,高于大鼠的(4.13±0.83)μg/ml,差异有统计学意义(F=74.643,P=0.000);大鼠肝脏中BPA代谢酶UGT2B1 mRNA的表达水平和酶活性明显高于小鼠;300 mg/kg BPA经口染毒24 h后,大鼠经粪便排出的BPA量为(1.50±0.32)mg/g,高于小鼠的(0.57±0.35)ms/g,差异有统计学意义(F=21.215,P=0.001).结论 大、小鼠经口给予300 mg/kg BPA染毒后,由于小鼠肠吸收BPA的能力高于大鼠,而大鼠代谢及排出BPA能力高于小鼠,引起小鼠血清中BPA的浓度明显高于大鼠.     

用高压液相色谱法检测罐装食品中类雌激素双酚A和烷基酚

目的 建立不同基质食品中双酚A（BPA）、壬基酚（NP）和辛基酚（OP）等类雌激素的高压液相色谱法（HPLC）,检测市售罐装食品中类雌激素。方法 固体样品经甲醇超声提取、二氯甲烷萃取、浓缩。液体样品的分析采用NH。柱浓缩、富集和净化。HPLC采用WatersXTerra^TM MSC18液相色谱柱分离,甲醇．水作为流动相梯度洗脱。采用荧光检测,激发波长：225nm;发射波长：310nm。结果 建立的方法具有良好的线性关系,蔬菜类罐装食品和方便面中BPA、NP和OP的检出限分别为0．5、0．1和0．1μg/kg,鱼、肉类罐装食品BPA、NP和OP的检出限分别为1、0．5和0．5μg/kg。BPA、NP和OP加标回收率分别为74．9％～95．1％、76．3％～103．6％和72．1％～109．2％;相对标准偏差（RSD）分别为4．98％～11．2％、2．35％～8．88％和5．61％～12．3％。结论 该方法测定罐装食品及方便面中类雌激素（BPA、OP和NP）,具有较高的灵敏度和选择性,结果准确可靠、重现性好。     

双酚A对雄性大鼠生殖系统的影响

目的探讨双酚A(BPA)对青春期雄性大鼠生殖系统的影响。方法30只雄性Wistar大鼠,随机分为3组,每组10只。每隔1d腹腔注射低剂量〔1mg/kg·bw〕和高剂量〔25mg/(kg·bw)〕BPA染毒8周,对照组给予等体积溶剂丙二醇。测大鼠体重、睾丸和附睾湿重并计算睾丸/体重比值、附睾/体重比值;观察睾丸、附睾组织学结构的变化;计数附睾尾精子数;应用放射免疫法测定血清性激素水平。结果与对照组比较,低剂量和高剂量BPA组大鼠的体重均下降:高剂量组大鼠死亡2只,睾丸、附睾湿重降低,睾丸/体重比值升高,精子计数减少;光镜下可见睾丸间质水肿,附睾间质血管扩张。结论双酚A可能对青春期雄性大鼠体重、生殖系统的发育及精子发生有不良影响。     

The prevalence of cardiovascular risk factors among male bedouins: A population in transition

Accumulating evidence suggests that cardiovascular disease which was very rare among Negev Bedouins until the 1970's is now on the increase. The Bedouin nomads are being settled in townships and are changing habits and lifestyles as a result. The aim of this study was to determine the prevalence of known cardiovascular risk factors in Bedouins at different levels of lifestyle changes. To do so, the prevalence of the risk factors was examined in a traditional tribal group and in a settled Bedouin group. Among settled Bedouins, 15% were obese (BMI > 30) and a further 35% were overweight (BMI 25–29.9), as compared with no obesity and only 23% of overweight in the tribal group. The differences were most marked in the younger age group. Mean LDL-cholesterol levels also differed between the two study groups, being significantly higher in settled than in tribal Bedouins (113.9 mg% ± SD 28.6 vs 96.9 mg% ± SD 27.1 respectively, p<0.05). High BMI and LDL-cholesterol were both significantly and independently associated with being settled. No differences between the groups were found in relation to blood pressure, smoking and fasting blood glucose. It appears therefore that settlement of nomadic Bedouins and the changes associated with it, alter the pattern of cardiovascular risk factors in this population.     

双酚A对接触男工精液质量的影响

目的 探讨双酚A(BPA)对接触男工精液质量的影响.方法 选择20名接触BPA的工人作为职业接触组,另选择与接触组年龄、职业和体力活动相匹配,但不接触BPA和其他可能损伤生殖功能的物理或化学因素的16名造型工人作为对照组.采集被调查对象的血液,检测其血液中BPA水平,按WHO推荐方法分析精液质量. 结果94.4%的接触组工人血液中检出BPA,中位数为101.94 μg/L,而对照组仅有18.8%的工人血液中检出BPA,中位数为0 μg/L.接触组精子密度[(68.65±44.00)×106个/ml]明显低于对照组[(118.56±98.36)×10~6个/ml],差异有统计学意义(P<0.05),而其他精液和精子质量指标则未见明显差异.相关分析结果表明,精子快速前向运动与血液中BPA水平呈正相关(r=0.44,P<0.01),精子正常率与血液中BPA水平呈负相关(r=-0.62,P=0.01 ). 结论接触BPA可引起男工精子密度降低,BPA可能在一定程度上影响精液质量.     

双酚A职业暴露及血清双酚A对男性性激素的影响

目的研究职业接触双酚A（bisphenol A,BPA）对男性性激素水平的影响。方法于2005-2008年选取在工作中职业接触BPA的男工280名作为暴露组,选取不接触BPA的男工379名为对照组,并将暴露组按血清BPA水平分为3组,分析职业接触BPA对激素水平的影响。采集研究对象空腹静脉血10 ml,采用高效液相色谱法检测血清BPA水平,放射免疫分析法检测抑制素B（inhibin B,INB）的水平,酶联免疫吸附测定法检测游离睾酮（free testosterone,FT）、雄烯二酮（androstenedione,AD）和性激素结合球蛋白（sex hormone-binding globulin,SH-BG）水平。结果暴露组与对照组血清FT、AD、INB、SHBG水平比较,差异均无统计学意义（均有P>0.05）;与接触工龄≤5年相比,>5年组血清BPA浓度降低,AD水平升高,SHBG水平降低;进一步将暴露组分为BPA未检出、BPA≤19.07μg/L、BPA>19.07μg/L 3组,3组间比较SHBG、AD水平差异均有统计学意义（均有P<0.05）;两两比...     

Imbalance of testosterone level in male offspring of rats perinatally exposed to bisphenol A

The purpose of this study was to investigate whether exposure to bisphenol A (BPA) through the placenta and milk has any effect on the reproductive system in male offspring. Pregnant rats were treated with BPA at 0, 4, 40 and 400 mg/kg body weight, from gestation day 6 through lactation day 20 by gavage. Plasma testosterone concentrations in offspring at 9 weeks old were significantly high in BPA groups as compared with those of the control. At the age of 36 weeks the hormone concentrations showed an increase in a dose-dependent manner, although without statistical significance. Testosterone content in testes showed a similar tendency to that in plasma, though statistically insignificant. Little alteration in testes weight was seen in BPA-exposed offspring. There was no remarkable change in plasma concentrations of luteinizing hormone and follicle-stimulating hormone at 9 weeks old. The pathway of E2 (17beta-estradiol) formation from testosterone seemed not to be affected by BPA. The results indicate that exposure to BPA during the perinatal period has a significant effect on testosterone homeostasis in male offspring of rats.     

壬基酚对仔鼠雄性生殖系统的影响

目的探讨宫内及哺乳期暴露壬基酚对雄性仔鼠生殖系统的影响.方法对28只受孕母鼠从受孕第1天开始灌胃染毒壬基酚(分别为0、50、100和200mg/kg体重),直至仔鼠娩出21d断奶后停止染毒,仔鼠于70日龄剖杀,测定与仔鼠生殖功能相关的各项指标.结果随着壬基酚染毒剂量的增加,70日龄雄性仔鼠的睾丸和前列腺的重量降低,睾丸重分别为2.86、2.98、2.59和2.44g;前列腺重分别为0.26、0.23、0.20和0.19g.每克睾丸日产精子数和每克附睾精子计数也随壬基酚剂量的增加而降低,每克睾丸日产精子数分别为22.46×106、18.46×106、17.43×106和17.26×106;附睾尾精子计数分别为46.85×106、39.74×106、35.57×106和31.36×106.雄性仔鼠包皮分离时间在高剂量组(47.83d)大于对照组(46.31d).结论宫内及哺乳期暴露于壬基酚可使雄性仔鼠睾丸生精功能降低,但睾丸无形态学变化.     

Therapeutic effects of quercetin against bisphenol A induced testicular damage in male Sprague Dawley rats

The present study was designed to investigate protective effects of quercetin against bisphenol A (BPA) induced testicular toxicity in male Sprague Dawley rats. Twenty adult male rats were divided into four groups. The first group served as the control and was provided with normal saline. The second group of rats was treated with 50 mg/kg of BPA dissolved in alcoholic saline. The third group received oral gavage of 50 mg/kg quercetin while the fourth group was treated with quercetin (50 mg/kg) along with BPA (50 mg/kg). All of the treatments were carried out for 52 days. Testicular tissues and epididymis were used for histology while blood plasma was used for hormonal and biochemical analysis. BPA administration resulted in a significant reduction in seminiferous tubule diameter and epithelial height with impaired spermatogenesis. Quercetin treatment resulted in restoration of spermatogenesis and reversal of histological damage. In addition, BPA treatment significantly reduced (p < 0.05) plasma testosterone level (ng/ml) while estrogen was not affected. Similarly, BPA caused a significant alteration in the lipid profile. Interestingly, quercetin treatment led to a marked increase in plasma testosterone, decrease in estrogen concentration, as well as a normalized lipid profile. In conclusion, results indicated that BPA administration induces toxic effects on testis and epididymis, impairs spermatogenesis, with an imbalance in hormonal levels and lipid profile while quercetin amended these toxic effects by restoring normal spermatogenesis, testicular tissue damage, and hormonal levels. This suggests that quercetin may be a potential therapeutic against BPA induced testicular toxicity.