转化生长因子-β对人Th17细胞增殖的影响

目的探讨转化生长因子（TGF）-β对人Th17细胞的免疫调节作用。方法应用免疫磁珠分离正常人CD4^＋T细胞并随机分为观察组和对照组,均置于含5μg/ml植物凝集素和5 ng/ml人重组IL-2的IMDM培养基中,在此基础上观察组加入100 IU/ml TGF-β,均于37℃、5%CO2孵箱中培养4 d。采用ELISA法检测两组细胞上清中IL-17蛋白水平,流式细胞术检测CD4^＋T细胞内IL-17比例（Th17细胞数量）。结果观察组和对照组CD4^＋T细胞上清中IL-17蛋白水平分别为（6.11±9.20）、（15.07±12.70）pg/ml,观察组低于对照组（P=0.07）;观察组和对照组Th17细胞数量分别为2.45%±0.62%、2.81%±0.44%,观察组明显低于对照组（P〈0.05）。结论 TGF-β在体外能通过抑制人Th17细胞增殖而调节其免疫作用。     

外源性细胞因子对柯萨奇病毒性心肌炎小鼠脾Th17细胞的影响

目的:观察转化生长因子(TGF)-β、白细胞介素(IL)-6和IL-23对柯萨奇病毒性心肌炎(VMC)小鼠脾中Th17细胞分化增殖的影响。方法:以6周龄雄性Balb/c小鼠腹腔注射柯萨奇病毒液建立VMC模型,1周后磁珠分离脾脏CD4+T淋巴细胞,分成对照组、TGF-β+IL-6组和TGF-β+IL-6+IL-23组进行体外培养。5d后应用流式细胞术测定刺激后Th17细胞的百分比;逆转录-聚合酶链式反应测定细胞中IL-17mRNA的表达;ELISA测定细胞培养上清液IL-17的水平。结果:与对照组比较,TGF-β+IL-6组Th17细胞数稍增加[(1.64±0.43)%∶(1.96±0.35)%],IL-17mRNA表达水平及细胞培养上清液IL-17浓度稍增加,但差异无统计学意义(P>0.05)。而TGF-β+IL-6+IL-23组Th17细胞数显著增加(4.08±0.77)%、IL-17mRNA表达水平及细胞培养上清液IL-17浓度均明显高于前2组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:外源性TGF-β联合IL-6对VMC小鼠脾中已分化的Th17细胞无增殖作用,而添加外源性IL-23则能显著增加Th17细胞数及其效应分子IL-17的表达。     

外源性白细胞介素-17对病毒性心肌炎小鼠脾淋巴细胞分泌的细胞因子的影响

目的:观察外源性白细胞介素(IL)-7对病毒性心肌炎小鼠脾淋巴细胞分泌的干扰素(IFN)-γ、IL-6及转化生长因子(TGF)-β的影响。方法:雄性BALB/c小鼠腹腔注射柯萨奇病毒,1周后分离提取脾脏淋巴细胞,分别用0、25、50ng/ml重组IL-17(rIL-17)培养24、48、72h,流式细胞术测定培养后T辅助细胞(Th)1比例,RT-PCR测定培养细胞IFN-γ、IL-6及TGF-β的mRNA表达,ELISA法测定培养上清液中IFN-γ、IL-6及TGF-β的水平。结果:与0ng/ml组比较,25ng/ml组rIL-17作用后Th1细胞的比例、IFN-γmRNA表达水平及IFN-γ浓度均下降(均P<0.05)。但是不同浓度组和时间组内,IL-6和TGF-β的mRNA及蛋白表达量均差异无统计学意义。结论:外源性IL-17对病毒性心肌炎小鼠脾淋巴细胞中Th1细胞分化及IFN-γ的分泌起抑制作用,但是对TGF-β及IL-6没有显著影响。     

白细胞介素-17A调节转化生长因子β1对病毒性心肌炎小鼠心肌纤维化的影响

目的 在小鼠病毒性心肌炎（viral myocarditis,VMC）心肌纤维化的发展过程中,观察白细胞介素-17A（interleukin-17A,IL-17A）是否通过调节转化生长因子-β1（transforming growth factor-β1,TGF-β1）参与心肌纤维化.方法 IL-17A基因敲除（IL-17A-deficient,IL-17A-/-）Balb/c小鼠和野生型（wild-type,WT） Balb/c小鼠分别按电脑随机数字表法分为4组,腹腔注射TCID50为10-5的柯萨奇病毒B3 （coxsackie virus B3,CVB3） 0.1 mL培养液建立小鼠VMC模型,于注射病毒后第0、14、28和42天处死小鼠,然后无菌取心脏组织,苏木素-伊红和Masson染色观察心肌组织形态学,并分别计算心肌病理积分和胶原容积积分（CVF）.实时荧光定量聚合酶链反应检测心肌组织TGF-β1mRNA的表达;酶联免疫吸附测定法检测心肌组织TGF-β1蛋白的表达水平.结果 WT小鼠的心肌纤维化随着VMC的病程发展不断加重,TGF-β1于14 d表达显著升高,28 d和42 d后逐渐下降,但仍高于正常水平,差异有统计学意义（P＜0.05）.与同时点WT小鼠相比,IL-17A-/-小鼠心肌组织的心肌纤维化程度明显减轻,TGF-β1mRNA和蛋白的表达水平明显降低,差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 IL-17A参与VMC的心肌纤维化过程,并可能通过调节TGF-β1的表达而参与这一过程.     

Th17细胞及其在心肌炎中的作用

Th17是新近发现的辅助性T淋巴细胞亚群,其特征是分泌白细胞介素17(IL-17).目前已发现Th17与诸多自身免疫性疾病密切相关.自身免疫性损伤是病毒性心肌炎发病机制中的重要因素之一,并且与扩张型心肌病的发病有关.因此,研究Th17细胞亚群在心肌炎中的作用十分必要,为进一步揭示心肌炎的发病机制,阻断心肌炎向扩张型心肌病进展提供新的思路.     

Th17细胞在病毒性心肌炎发病机制中的作用

Th17细胞是T辅助细胞家族成员,以产生白细胞介素(IL)-17等细胞因子为特征.目前研究证实Th17细胞及其相关细胞因子在炎症性、自身免疫性疾病和肿瘤等疾病的发生、发展中有重要作用.心肌炎是一种在病因、发病机制和临床预后上都具有异质性的疾病,病毒感染和自身免疫性炎症是其主要发病机制,该病被视为心血管内科亟待解决的难题...     

急性病毒性心肌炎患者Th17细胞作用初步研究

目的:初步探讨急性病毒性心肌炎患者辅助性T细胞(T help,Th)17细胞在其发病中的作用.方法:选择2008年3-11月在我院住院的急性病毒性心肌炎(AVMC)患者13例、扩张型心肌病(DCM)患者18例,采用ELISA法分别检测其外周血Th17细胞分泌的细胞因子白细胞介素(IL)-17和抗心肌抗体(AHA)的表达、三色流式细胞术检测CD4+T细胞中Th17/Th1/Th2细胞亚群的比例、实时定量PCR法检测B细胞表面IL-17R基因水平,同时选取16例健康人为对照(对照组)结果:AVMC和DCM患者Th1细胞亚群[(10.7±1.4)%、(5.2±1.1)%]、B细胞总数[(21.8±2.1)%、(16.4±1.6)%]及其IL-17R mRNA表达水平(132.4±12、37.5±6.4)较对照组[(3.1±0.8)%,(10.9±1.5)%,16.6±5.7]均有升高,但以AVMC患者更为明显(均P<0.01),且AVMC患者外周血IL-17和Th17细胞亚群也有显著增高[89.2±11.6,(5.5±2.1)%],Th2细胞无明显变化,AHA阳性率为12/13(92.3%);而DCM患者Th2细胞[(6.0±3.2)%]增多超过Th1细胞,IL-17含量和Th17细胞比例与对照组相比差异均无统计学意义,AHA阳性率为10/18(55.6%),表达水平也低于AVMC组.对照组AHA检测均为阴性.结论:Th17细胞可能在AVMC急性炎症和B细胞产生AHA方面均有重要作用.     

Th17细胞及其在心肌炎中的作用

Th17是新近发现的辅助性T淋巴细胞亚群,其特征是分泌白细胞介素17（IL-17）。目前已发现Th17与诸多自身免疫性疾病密切相关。自身免疫性损伤是病毒性心肌炎发病机制中的重要因素之一,并且与扩张型心肌病的发病有关。因此,研究Th17细胞亚群在心肌炎中的作用十分必要,为进一步揭示心肌炎的发病机制,阻断心肌炎向扩张型心肌病进展提供新的思路。     

非重型再生障碍性贫血患者Th17/Treg比例及相关细胞因子白细胞介素-6、-17和转化生长因子β1水平的临床意义

目的 探讨非重型再生障碍性贫血（NSAA）患者外周血的Th17和调节性T（Treg）细胞比例异常变化及其与白细胞介素（IL）-6、IL-17、转化生长因子（TGF）-β1水平的相关性.方法 根据诊断标准收集NSAA患者78例,应用流式细胞术（FCM）检测其外周血Th17和Treg细胞比例,用酶联免疫吸附试验（ELISA）方法检测IL-6、IL-17和TGF-β1水平,选取20例健康者为对照组,并比较其差异及其相关性.结果 NSAA患者的Th17细胞比例高于对照组（P＜0.01）,Treg细胞比例低于对照组（P＜0.01）,Th17/Treg比例明显高于对照组（P＜0.01）.NSAA组IL-6水平明显高于对照组（P＜0.01）,NSAA组IL-17水平与对照组比较差异无统计学意义（P＞0.05）,NSAA组TGF-β1水平较对照组明显降低（P＜0.05）.Treg与Th17细胞无相关,Th17与IL-17水平有相关性.结论 Th17/Treg异常与非重型再生障碍性贫血发病有关.相关细胞因子TGF-β1、IL-6与Th17与Treg细胞比例的变化有关,可能是导致NSAA发生及发展的重要因素.     

外源性转化生长因子-β3对肝星状细胞内源性转化生长因子-β3表达及其增殖的影响

目的 探讨外源性转化生长因子-β3( TGF-β3)对大鼠肝星状细胞(HSC)分泌内源性TGF-β3及细胞增殖的影响.方法 取大鼠HSC接种于12孔板,一组用不同浓度(0.08、0.4、2、10和50 ng/ml)的外源性TGF-β3干预2h后收集上清液,另一组用10 ng/ml外源性TGF-β3干预后在不同时间点(15 min、30 min、lh、2h、4h、8h,13 h)收集上清液,应用ELISA法检测TGF-β3含量.另取HSC接种于96孔板,一组用不同浓度(0.001、0.005、0.02、0.08、0.32、1.25、5、20、100、500 ng/ml)的外源性TGF-β3干预24 h,另一组用5 ng/ml外源性TGF-β3干预24和48 h,用噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖情况.倒置显微镜下观察空白对照组和外源性TGF-β3干预组HSC的大体形态.结果 当外源性TGF-β3浓度达2ng/ml时可明显促进内源性TGF-β3表达,随后内源性TGF-β3的表达量呈外源性TGF-β3浓度依赖性增长(F=210.168,P=0.00),该作用3h时达高峰[(0.845±0.028) ng/ml比(0.026±0.022) ng/ml].外源性TGF-β3浓度≥0.32 ng/ml时对HSC增殖有较弱的促进作用,但无剂量依赖关系(F=0.68,P=0.57).经TGF-β3干预的HSC镜下形态与空白对照组相比未出现明显变化.结论 外源性TGF-β3可促进HSC中内源性TGF-β3的表达,还可促进HSC增殖.外源性TGF-β3干预对HSC细胞大体形态无明显影响.     

外源性转化生长因子β3对HSC-T6细胞内源性转化生长因子β3表达的影响

目的 通过对大鼠肝星状细胞株(HSC-T6)中内源性转化生长因子β3 (TGF- β 3)mRNA和蛋白水平的检测,探讨外源性TGF- β 3对HSC-T6分泌内源性TGF-β3的影响.方法 体外培养HSC-T6,未加入外源性TGF-β 3培养的细胞为对照组,加入外源性TGF-β 3(10 ng/ml)培养的细胞为TGF-β 3组.(1)分别在l、2、4、12h和24h收集细胞,用实时荧光定量PCR法检测内源性TGF-β 3 mRNA表达;(2)分别在0、l、6h和12h收集细胞,用Western blot法检测细胞内TGF-β 3蛋白的表达;(3)分别在0、1、2、4、8、14h和24h收集细胞上清液,用酶联免疫吸附法(ELISA)检测细胞外总TGF-β 3蛋白的表达;加入外源性TGF-β 3培养HSC-T6 2 h,然后换用无血清的DMEM培养液继续培养细胞至2.25、2.5、3、4、6、10h和14h收集细胞上清液,用ELISA法检测细胞外内源性TGF-β 3蛋白的表达.对数据进行单因素方差分析.结果 (1)TGF-β 3组细胞内TGF-β 3 mRNA表达水平明显增高,于2h达峰值(2.796±0.518),为对照组(1.022±0.038)的2.74倍(P＜0.05);随后缓慢降低,维持在1.45倍水平达10h,24h时表达水平仍为对照组的1.18倍(P＜0.05).(2)不同时间点细胞内TGF-β3表达水平均无明显变化(P＞0.05).(3) TGF-β 3组细胞外总TGF-β 3含量明显增加,于4h时达高峰[(18.931±2.904)ng/ml],约为诱导量[(10.026±0.022) ng/ml]的1.89倍,随后开始下降;内源性TGF-β 3于诱导后3h达高峰[(0.835±0.027) ng/ml],为对照组[(0.026±0.022) ng/ml]的32.12倍,之后开始逐渐降低,直至维持一个弱增长的状态(P＜ 0.05).结论 外源性TGF-β 3可促进HSC-T6细胞分泌大量内源性TGF-β3.     

转化生长因子-β与肺纤维化

本文简要介绍转化生长因子 β(TGF β)在肺纤维化中的作用及其与其他细胞因子的关系 ,并综述近几年对TGF β细胞内的信号转导的新认识 ,同时展望了肺纤维化的抗TGF β策略。     

转化生长因子β1对大鼠肝星状细胞表达β-连环蛋白的影响

目的研究转化生长因子β1（TGF—β1）对大鼠肝星状细胞（HSC）表达β-连环蛋白（β-catenin）的影响。方法采用逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）比较经不同浓度的TGF-β1刺激不同时间后HSC表达β-catenin、smad3和α-SMA mRNA的变化,并比较三者之间的关系。结果1ng／ml TGF—β1刺激2h后,HSC表达β—catenin mRNA、smad3 mRNA和α—SMA mRNA量最大,β—catenin mRNA表达与两者均具有明显的相关关系（r=0．947,P〈0．01;r=0．950,P〈0．01）。结论β—catenin在TGF—β1活化HSC的过程中发挥重要作用。     

转化生长因子-β

转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)是一种多功能,具有多向调节功能的生长因子,属于TGF-β超家族,由De Larco和Todaro于1978年在研究病毒时发现[1].TGF-β的命名是因为这种细胞因子能使正常的成纤维细胞的表型发生转化,即在表皮生长因子(EGF)同时存在的条件下,可改变成纤维细胞贴壁生长的特性而获得在琼脂中生长的能力,同时失去密度依赖的生长抑制作用.由于TGF-β在动物胚胎发育、器官形成、上皮组织增生、细胞外基质合成及组织稳态等方面的作用而受到研究者的重视.     

调节性T淋巴细胞转化生长因子-β白细胞介素-17对狼疮肾炎的影响及相互关系

目的 检测活动期、静止期狼疮肾炎(LN)患者及健康人外周血白细胞介素(IL)-10、IL-6、转化生长因子(TGF)-β、IL-17、CD4~+CD25~+CD127~(lo)调节性T淋巴细胞水平,探讨TGF-β与调节性T淋巴细胞、IL-6、IL-17在LN的变化及相互关系.方法 采用三色荧光染色通过流式细胞仪(FCM)检测外周血中CD4~+CD25~+CD127~(lo)细胞水平,以双抗体夹心酶联免疫吸附(ELISA)法测定LN患者外周血中TGF-β、IL-17水平,用CBA流式蛋白分析系统检测外周血中IL-10、IL-6水平.结果 ①活动期LN患者外周血调节性T淋巴细胞低于静止期、健康组(P<0.01),静止期与健康组差异无统计学意义(P>0.05).②活动期LN患者IL-10、IL-6与静止期相比显著升高(P<0.01).③活动期LN、静止期LN、健康组TGF-β、IL-17无变化.④LN患者调节性T淋巴细胞与IL-10、IL-6、SLEDAI之间呈负相关(P<0.05);与C3、C4之间无显著相关性.⑤LN患者外周血IL-10、IL-6与SLEDAI呈正相关(P<0.01),与C3、C4均呈负相关(P<0.01).LN患者外周血SLEDAI与C3、C4均呈负相关(P<0.01).⑥LN患者调节性T淋巴细胞与TGF-β、IL-17之间无相关性.⑦TGF-β与IL-17呈正相关(P<0.01).结论 ①LN患者外周血中调节性T淋巴细胞及IL-10、IL-6、TGF-β的水平变化可作为狼疮活动性的指标.②LN患者外周血中调节性T淋巴细胞与IL-10、IL-6呈负相关.③激素有助于提高调节性T淋巴细胞,降低IL-17.④T淋巴细胞将随机体状态、局部微环境的改变以及维护机体免疫平衡的需要出现不同的极化.     

白细胞介素-17在系统性硬化病小鼠模型中的表达及与转化生长因子-β1的相关性

目的 研究白细胞介素(IL)-17在系统性硬化病(SSc)小鼠模型中的表达、意义及与转化生长因子(TGF)-β1的相关性.方法 30只雌性BALB/c小鼠按随机数字表法分为3组:对照组、博莱霉素注射4周(模型组1)和模型组1停止注射博莱霉素4周(模型组2).观察小鼠皮肤、肺部的炎症和胶原沉积的情况,荧光定量聚合酶链反应(PCR)法检测小鼠皮肤和肺部维甲酸相关孤核受体(RORγt)、IL-17A、TGF-β1mRNA的表达,酶联免疫吸附法检测血清和支气管肺泡灌洗(BALF)中IL-17、TGF-β1水平,采用方差分析进行统计分析.结果 ①模型组小鼠皮肤和肺部明显炎症细胞浸润,胶原纤维增生,皮肤炎症评分和肺部纤维化评分模型组1(2.5±0.8和3.0±1.8),模型组2(2.4±0.8和3.1±1.2)比对照组(0.9±0.7和0.9±1.0)明显增加,模型组皮肤和肺羟脯氨酸的含量较对照组明显增多(F值分别12.19,8.367,25.11,4.641;P均＜0.05).②与对照组比较,模型组1皮肤和肺部IL-17A mRNA(21±8和20±9)、RORγt mRNA(20±9和19±9)、TGF-β1mRNA(23±6和21±7)的表达量明显增高,模型组1外周血及BALF中IL-17含量明显增高,TGF-β1在BALF中含量增加,但在外周血中的含量明显减少,P均＜0.05.③IL-17A mRNA在皮肤的表达量与皮肤TGF-β1mRNA的表达量、皮肤炎症评分、皮肤羟脯氨酸的含量呈正相关(r值分别为0.514、0.555、0.632,均P＜0.01);IL-17A mRNA在肺部的表达量与肺部TGF-β1mRNA的表达量、肺部纤维化评分呈正相关(r值分别为0.620和0.437、P＜0.05);血清IL-17的含量与皮肤和肺羟脯氨酸的含量呈正相关(P＜0.05).结论 IL-17参与SSc全身免疫炎症及局部皮肤、肺部的纤维化病变,可能与TGF-β1有一定的联系,共同作用于SSc皮肤及肺部的纤维化病变.     

转化生长因子-β1对人近端肾小管上皮细胞结缔组织生长因子表达的影响

目的:探讨转化生长因子-β1(TGF-β1)对人肾小管上皮细胞结缔组织生长因子(CTGF)表达的影响,同时观察TGF-β1对肾小管上皮细胞合成细胞外基质(ECM)、组织金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)及α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的影响.方法:应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术,观察TGF-β1诱导人近端肾小管上皮细胞系(HK-2)合成CTGF、ECM、TIMP-1及α-SMA的情况.结果:在无TGF-β1刺激的情况下,HK-2细胞中有基础量的CTGF mRNA表达,TGF-β1以剂量和时间依赖的方式诱导HK-2细胞合成CTGF mRNA,其表达在24h时达高峰,同时TGF-β1可使HK-2细胞合成ECM、α-SMA增多,但在时相上均晚于CTGF.随着TGF-β1浓度的增加,HK-2细胞合成TIMP-1也随之增加,但较大剂量的TGF-β1(15ng/ml)方可使TIMP-1 mRNA的表达明显增加(P＜0.05).结论:TGF-β1可直接诱导体外培养的人近端肾小管上皮细胞表达CTGF,其表达转录水平要早于ECM、α-SMA的表达,提示CTGF可能介导了TGF-β1的促肾小管上皮细胞ECM合成和转分化的作用.     

转化生长因子-β与冠心病

转化生长因子 β具有促进胚胎生长发育,调节免疫、生长抑制、创伤修复,促进血管生成,促进细胞外基质沉积等效应,在动脉粥样硬化、血管新生和血管壁炎症、血管重塑等过程中均起重要作用,从而发挥其在冠心病中的作用。     

急性病毒性心肌炎患者CCL20对Th17细胞趋化性作用

目的:探讨CCL20与急性病毒性心肌炎(AVMC)患者Th17细胞趋化性的关系。方法:选择11例AVMC患者为研究对象,同时选取10例健康人作为对照。利用siRNA技术干预AVMC患者外周血巨噬细胞,将其分为A(不接受siRNA转染)、B(接受CCL20 siRNA转染)、C(阴性对照,接受scramble siRNA转染)亚组。应用ELISA法检测AVMC组患者血清CCL20及其巨噬细胞体外分泌CCL20的水平,趋化实验和流式细胞学结合观察体外不同水平CCL20对Th17细胞的趋化能力及表达CCL20受体CCR6的Th17细胞比例的影响,实时定量PCR法检测趋化板下室细胞表面CCR6mRNA的表达。结果:与健康对照组[(2.78±0.64)μg/L]相比,AVMC组患者体内血清CCL20水平[(11.36±2.45)μg/L]明显升高,P<0.05。体外实验中,B亚组巨噬细胞培养上清CCL20含量、趋化实验募集的Th17细胞比例、表达CCR6的Th17细胞比例和CCR6mRNA相对表达水平[(0.94±0.08)ng/L、(6.86±0.59)%、(2.56±0.78)%、(0.36±0.08)]均低于A亚...     

β-连环蛋白对转化生长因子β 1活化HSC-T6细胞的影响

目的 观察β-连环蛋白对转化生长因子β 1(TGF β1)活化肝星状细胞(HSC)的影响. 方法通过脂质体介导,将β-连环蛋白真核表达质粒[pcDNA3.1(+)-β-catenin]和绿色荧光质粒pEGFP-N1共转染体外培养的HSC-T6细胞株,用逆转录PCR和Western blot法检测经TGF β1刺激后两组细胞smad3、β-连环蛋白mRNA及蛋白质的表达.组间比较采用方差分析.结果 β-连环蛋白转染阳性的HSC-T6细胞株经TGF β 1刺激后表达smad3、β-连环蛋白及其mRNA明显强于未转染β-连环蛋白基因的HSC-T6细胞,更强于正常培养的HSC-T6细胞,smad3mRNA相对表达量分别为;0.642±0.011、0.501±0.021、0.511±0.019、0.356±0.017,F=135.304,P<0.05;β-连环蛋白mRNA相对表达量分别为:0.783±0.021、0.543±0.033、0.538±0.024、0.212±0.019,F=267.340,P值均<0.05.smad3蛋白质相对表达量分别为:0.892±0.012、0.124±0.011、0.130±0.021、0.003±0.001,F=2823.813,P<0.05;β-连环蛋白相对表达量分别为:0.921±0.020、0.210±0.010、0.208±0.008、0.002±0.001,F=3440.982,P<0.05.β-连环蛋白和smad3蛋白质的表达均与α-平滑肌肌动蛋白的表达显著相关(r=0.901,P<0.01;r=0.939,P<0.01).结论 β-连环蛋白基因转染体外培养的HSC-T6细胞株,促使HSC表达smad3、α-平滑肌肌动蛋白增强,提示β-连环蛋白能增强TGF β1的致纤维化作用.