人参皂苷Rg1对帕金森病模型小鼠室管膜下区神经干细胞的作用

目的：探讨人参皂苷Rg1促进帕金森病模型小鼠原住神经干细胞增殖分化的作用。方法：C57BL／6小鼠随机分成正常组、模型组和人参皂苷Rg1治疗组。采用MPTP腹腔注射建立帕金森病小鼠模型,利用免疫组化单标和双标技术观察人参皂苷Rg1对小鼠侧脑室室管膜下区神经干细胞增殖分化的影响。结果：人参皂苷Rg1治疗5d,侧脑室室管膜下区的5-溴脱氧尿苷（BrdU）、神经上皮干细胞蛋白（Nestin）阳性细胞较模型组明显增多,并可见大量从背外侧角沿胼胝体排列的BrdU、Nestin阳性细胞;人参皂苷Rg1治疗20d,BrdU／Nestin双标细胞的数量较模型组明显增多。结论：人参皂苷Rg1可促进帕金森病模型小鼠脑内神经干细胞的增殖和迁移。     

人参皂苷Rg1干预小鼠巨大肩袖损伤后的肌肉退变

背景:肩袖肌退变(肌肉萎缩、纤维化和脂肪浸润)是肩袖撕裂后出现的常见问题,严重影响肩关节功能和手术预后。人参皂苷Rg1具有抗氧化、抗细胞凋亡、降血脂等生物效应,然而人参皂苷Rg1对肩袖损伤后肌肉退变的影响未见报道。目的:探讨人参皂苷Rg1对巨大肩袖损伤小鼠肌肉退变的影响。方法:将60只C57BL/6J小鼠随机分为假手术组、模型组、人参皂苷Rg1低剂量组、人参皂苷Rg1高剂量组,每组15只。假手术组小鼠切开右肩皮肤后缝合,其余3组小鼠均行右侧肩关节肩袖损伤造模,模拟巨大肩袖撕裂手术切断冈上肌肌腱和肩胛上神经压迫。术后假手术组和模型组腹腔注射生理盐水0.5 mL;人参皂苷Rg1低、高剂量组予以腹腔注射人参皂苷Rg130,60 mg/kg,1次/d,共注射6周。末次注射后次日予以步态分析评估小鼠肢体功能,安乐死后取术侧冈上肌测量肌肉萎缩率、肌肉收缩力,肌肉组织进行油红O染色、Masson染色,RT-PCR检测萎缩、纤维化、脂肪浸润相关基因的表达。结果与结论:①与模型组相比,人参皂苷Rg1低、高剂量组爪印面积、步长显著增加(P<0.05);②与模型组相比,人参皂苷Rg1低、高剂量组肌纤维横截面积、冈上肌收缩力显著增加(P<0.05),湿肌质量减少比率、脂肪浸润面积比率、胶原纤维面积比率显著下降(P<0.05);③与模型组相比,人参皂苷Rg1低、高剂量组肌肉组织中萎缩、纤维化和脂肪浸润相关基因的表达显著下降(P<0.05);④人参皂苷Rg1低、高剂量组爪印面积、冈上肌收缩力、肌纤维横截面积无统计学差异(P>0.05),人参皂苷Rg1高剂量组其他指标均优于低剂量组(P<0.05);⑤结果说明,人参皂苷Rg1能显著减轻小鼠巨大肩袖撕裂后肩袖肌萎缩、纤维化和脂肪浸润,并有利于肌肉力量及肢体功能的改善。     

人参皂苷Re对重症急性胰腺炎小鼠小肠黏膜的影响及调控机制

目的 探讨人参皂苷Re通过调控Janus激酶2/信号转导子与转录激活子3(JAK2/STAT3)通路对重症急性胰腺炎(SAP)小鼠小肠黏膜的影响及作用机制.方法 48只小鼠分为对照组、SAP组、SAP+人参皂苷Re组和SAP+人参皂苷Re+LY2784544组(n= 12).通过腹腔注射雨蛙肽溶液(禁食12 h后,10...     

人参皂苷Rg1对创伤后应激障碍大鼠行为学变化和海马神经元自噬的影响

目的:研究人参皂苷Rg1对创伤后应激障碍(PTSD)大鼠行为学变化和海马神经元自噬的影响。方法:将SD大鼠随机分为5组:对照组;模型组;人参皂苷Rg1低、高剂量(20和40 mg/kg)组;阳性药(氟西汀)组。采用连续单一应激和足底电击相结合方法制备PTSD模型,人参皂苷Rg1低、高剂量组和阳性药组分别连续灌胃给药21 d,对照组及模型组每日等体积生理盐水灌胃。造模前后各组大鼠分别作旷场试验和僵立行为测定,Nissl染色法观察海马神经元形态结构变化,免疫荧光双标记法观察海马beclin 1和LC3阳性神经元,Western blot法检测海马beclin 1、LC3-Ⅰ、LC3-Ⅱ蛋白水平以及LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比率。结果:与对照组相比,模型组大鼠在旷场箱内活动次数减少,木僵率提高,海马神经元排列疏松,出现空泡样结构,伴有不同程度的细胞固缩,beclin 1和LC3阳性神经元明显增多,beclin 1蛋白水平增高,LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比率增大。人参皂苷Rg1低、高剂量组大鼠在旷场箱内活动次数增加,木僵率下降,海马神经元空泡样结构减少,细胞数量增多,beclin 1和LC3阳性神经元减少,beclin1蛋白水平下降,LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比率减少。其中,人参皂苷Rg1高剂量组较Rg1低剂量组上述改变更为明显。结论:PTSD模型大鼠存在明显的海马神经元自噬增强和行为学异常表现。人参皂苷Rg1对PTSD症状有明显改善作用,其机制可能与抑制海马神经元异常自噬活动有关。     

人参皂苷Rh1对哮喘模型小鼠炎症因子表达的抑制作用

目的:观察和探讨人参皂苷Rh1对哮喘模型小鼠的血清和支气管肺泡冲洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)中炎症因子的表达和肺组织形态学变化的影响。方法:雄性BALB/c小鼠40只,分为正常对照组、哮喘模型组、人参皂苷Rh1小剂量(40 mg·kg~(-1)·d~(-1))治疗组和人参皂苷Rh1大剂量(80 mg·kg~(-1)·d~(-1))治疗组,并利用卵清蛋白致敏和雾化吸入激发方法制作哮喘模型;人参皂苷Rh1小剂量治疗组和大剂量治疗组分别在每次激发攻击前30 min灌胃,每天一次,共2周。在末次激发24 h后收集BALF,计数嗜酸性粒细胞(eosinophil,EOS)数目;利用ELISA测定BALF中白细胞介素(IL)-4、IL-5和干扰素γ(IFN-γ)的水平;收集血液并测定血清中Ig G和Ig E的水平;用Western blot检测肺组织中转化生长因子(TGF)-β1蛋白表达的变化;用HE染色观察肺组织的病理学变化。结果:人参皂苷Rh1可抑制小鼠哮喘模型BLAF中EOS数目(P0.01);降低BLAF中IL-4、IL-5和IFN-γ的表达(P0.01);减少血清中Ig E的含量(P0.01);减少肺组织中TGF-β1蛋白表达(P0.01),并改善哮喘小鼠肺组织病理学变化。结论:人参皂苷Rh1对哮喘小鼠具有抑制炎症因子表达、调节免疫反应和改善肺组织病理变化的作用。     

三七总皂苷改善宫内缺氧新生鼠脑损伤及学习记忆功能

目的:制作胎鼠宫内缺氧模型,探讨三七总皂苷对宫内缺氧新生大鼠突触重建及学习记忆功能的影响。方法:孕14 d开始将孕鼠置于动物缺氧培养箱中,制作胎鼠宫内缺氧模型。新生鼠经腹腔分别注入三七总皂苷和生理盐水;正常对照组不治疗。免疫荧光法检测脑微管相关蛋白-2(MAP-2)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、突触素(SYN)和突触分化诱导基因1(SynDIG1)的表达。Morris水迷宫实验检测各组大鼠的学习记忆功能。结果:Morris水迷宫结果表明,与对照组相比,模型组大鼠学习记忆能力明显下降,经三七总皂苷治疗后学习记忆能力明显改善。缺氧后新生鼠脑MAP-2、SYN和SynDIG1表达明显减少,GFAP表达明显增多;治疗组MAP-2、SYN、SynDIG1表达明显高于模型组,GFAP表达明显低于模型组。结论:三七总皂苷可减轻缺氧缺血后神经元的损伤,减弱GFAP的表达,促进突触的重建,改善宫内缺氧大鼠学习记忆功能。     

人参皂苷Re对人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞缺氧复氧损伤的保护作用

目的：探讨人参皂苷Re 对人神经母细胞瘤SH-SY5Y 细胞缺氧复氧损伤的保护作用。 方法：采用缺氧复 氧法制备SH-SY5Y 细胞损伤模型,分为对照组、模型组、Re 6.25 μg/mL 组和Re 12.50 μg/mL 组。采用MTT 法测定细胞存活率,四甲基罗丹明甲酯（TMRM）染色评估细胞线粒体膜电位变化,DAPI 染色观察细胞凋亡 率,并进一步采用免疫印迹检测各组细胞核因子NF-E2 相关因子2（Nrf-2）、Bax 和p53 的蛋白表达。 结果：人 参皂苷Re 对SH-SY5Y 细胞活力无显著影响;缺氧复氧条件下,细胞存活率显著降低,而人参皂苷Re 在6.25、 12.50 μg/mL 浓度下预保护可显著提高细胞存活率。缺氧复氧损伤后,人参皂苷Re 6.25、12.50 μg/mL 能显著提 高SH-SY5Y 细胞的线粒体膜电位水平和抑制SH-SY5Y 细胞的凋亡率。人参皂苷Re 能够提高Nrf-2 的蛋白表达, 抑制Bax 和p53 蛋白的表达。结论：人参皂苷Re 可以抑制缺氧复氧损伤细胞的凋亡和氧化损伤,对缺氧复氧诱导 的神经细胞具有显著的保护作用。     

人参皂苷Rg1对缺氧复氧BMSCs增殖和凋亡的影响

目的　探讨人参皂苷Rg1(ginsenoside Rg1)对缺氧复氧BMSCs增殖和凋亡的影响,并探讨其可能机制。 方法　实验分为BMSCs正常对照组、BMSCs缺氧复氧组(Model组)、人参皂苷Rg1 1×10-7、1×10-6 、1×10-5 mol/L处理组、尼莫地平2.5×10-7 mol/L处理组（阳性对照组）。各组分别于缺氧复氧12h前加入完全培养基（正常对照组、Model组）、人参皂苷Rg1（人参皂苷Rg1各处理组）、尼莫地平（阳性对照组）。建立缺氧复氧BMSCs模型。采用TUNEL法检测各组的细胞凋亡率,免疫荧光和免疫印迹技术定性定量检测各组增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)、Bcl-2、Bax的表达情况。 结果 TUNEL结果显示,BMSCs正常对照组未见明显凋亡细胞,Model组可见明显的凋亡细胞,与Model组比较,其余各处理组凋亡细胞数量均减少,以人参皂苷Rg1（1×10-5mol/L）组最为明显。免疫荧光和免疫印迹结果显示,BMSCs正常对照组可见少量的PCNA 、bcl-2、bax表达;Model组的PCNA 、bcl-2的表达减少,但bax的表达显著增高,bcl-2/bax比值降低;与Model组比较,人参皂苷Rg1各组PCNA 、bcl-2表达均呈不同程度的增高,而bax表达呈现相反的趋势,bcl-2/bax比值增高,以Rg1 (1×10-5 mol/L)组最为明显。 结论 人参皂苷Rg1预处理对缺氧复氧BMSCs具有保护作用,其机制可能与下调bax的表达,上调PCNA 、bcl-2的表达,抑制BMSCs凋亡和促进BMSCs增殖有关。     

人参皂苷Rgl联合美满霉素对脑缺血大鼠海马内NMDA受体表达及学习记忆功能的影响

目的:观察人参皂苷Rgl联合美满霉素对脑缺血大鼠学习与记忆的影响和海马NMDA受体亚单位(NR2A/B)表达的变化。方法:本研究将48只成年雄性SD大鼠分为正常组、假手术组、慢性脑缺血组、人参皂苷Rgl+美满霉素处理组,每组12只。利用双侧颈总动脉结扎方法制备慢性脑缺血再灌注大鼠模型,造模后药物处理21 d,采用Morris水迷宫和及穿梭箱实验测试其学习与记忆成绩,再采用Western Blot方法分析海马的NR2A,NR2B的表达。结果:Morris水迷宫测试结果显示模型组大鼠寻找平台的潜伏期较假手术组明显延长,药物处理组大鼠寻找平台的潜伏期较模型组明显缩短;穿梭箱测试结果显示:与假手术组相比,模型组大鼠电击时间明显延长;与模型组相比,治疗组大鼠电击时间明显缩短;Western Blot结果显示:模型组NR2A表达水平较假手术组明显降低,而NR2B明显升高;药物处理组大鼠海马内NR2A表达水平较模型组明显上调,而NR2B明显下调。结论:人参皂苷Rgl联合美满霉素明显改善脑缺血大鼠的学习记忆能力,其作用机制可能与调节NMDA受体表达有关。     

人参皂苷Rg_2对体外培养的海马缺氧神经元的预防保护作用

为观察人参皂苷Rg_2对缺氧大鼠海马神经元的保护作用,选取Wistar大鼠海马神经元体外培养14d,随机分为对照组、5μmol/L尼莫地平组(尼莫地平组)、Rg_20.025mmol/L组(Rg_21组)、Rg_20.050mmol/L组(Rg_22组)。将相应药物加入到培养液中孵育4h后,建立急性缺氧细胞模型。采用流式细胞仪检测各组神经元缺氧后的细胞凋亡情况,用酶法测定超氧化物歧化酶(SOD)的活性以及丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)的含量,并对所得结果加以比较。结果发现,离体条件下人参皂苷Rg_2可显著增强海马神经元的活性,降低其凋亡率及死亡率;提高细胞上清液中超氧化物歧化酶的活性,降低MDA及NO的含量,且呈量效比例关系。以上结果提示,人参皂苷Rg_2在体外有抗缺氧损伤的作用。其作用机制可能是通过抑制细胞凋亡、提高抗氧化酶的活力、清除自由基而发挥作用。     

低氧训练大鼠骨骼肌组织低氧诱导因子1对血管新生的影响*

背景：低氧诱导因子1是一种在氧平衡调节中起关键作用的转录因子,与机体的耐缺氧能力密切相关。 目的：观察低氧训练大鼠骨骼肌组织中低氧诱导因子1和血管内皮CD34的蛋白表达,探讨低氧诱导因子1在促进骨骼肌组织血管形成中的作用。 方法：将健康雄性SD大鼠60只,随机分为6组：常氧对照组、低氧不运动组、常氧训练组、低住高练组、高住低练组和高住高练低练组。运动组采用10 周递增负荷跑台运动训练,每周训练6 d,运动量由第1 周的速度为15 m/min、持续时间为25 min 递增至第10 周速度为28 m/min、持续时间为50 min,低练组每周二、四、六在相当于海拔1 500 m的低氧环境中训练,并且在低氧环境中居住,低氧程度由第1 周相当于海拔1 800 m 递增至第10 周相当于海拔3 600 m。 结果与结论：低氧状态下,低氧诱导因子1有大量的蛋白表达,低氧复合运动表达更多,而CD34 蛋白表达只发生在常氧运动组和低氧训练组。提示低氧诱导因子1是促进骨骼肌组织血管新生的一种重要因子,但须结合运动才能产生积极的作用。      

COPD合并慢性缺氧患者肺血管对急性缺氧反应变化中肺动脉平滑肌细胞钾通道的作用

目的：以人离体肺动脉环缺氧张力变化为对象研究钾通道在缺氧性肺血管收缩（HPV）发生中的作用。 方法： 从手术室切取人肺动脉环，进行人肺动脉环张力试验，分正常对照组，单纯慢性阻塞性肺病（chronic obstructive pulmonary disease ，COPD）组和COPD合并慢性缺氧组，分别利用相应的特异性阻断剂观察电压门控性钾通道（KV），钙离子激活的钾通道（KCa）， ATP敏感的钾通道（KATP），在缺氧性肺血管收缩（HPV）的作用。 结果： （1）3组肺动脉环在急性缺氧时血管收缩张力均增加，同时COPD＋慢性缺氧组增加百分比显著低于对照组；COPD组与对照组无显著差异。（2）4-AP阻断Kv后较阻断前，3组肺血管环缺氧张力增加幅度均显著降低（P<0.05），同时正常对照组和COPD组降低幅度明显大于慢性缺氧组。TEA阻断KCa后以及格列苯脲（glybenclamide）阻断KATP后二者较阻断前，3组肺血管环缺氧张力均显著增加（P<0.05），同时COPD＋慢性缺氧组增加的幅度明显大于正常组（分别是P<0.01和P<0.05）。 结论： （1）慢性缺氧可降低肺血管的收缩性及肺血管对急性缺氧的收缩反应；（2）Kv在3组人离体肺动脉环HPV反应中均起介导作用，慢性缺氧可使此介导作用加强；KCa和KATP在3组人离体肺动脉环HPV反应中均起调节作用，慢性缺氧可使此调节作用加强。     

雾化吸入亚硝酸钠对低氧性肺动脉高压大鼠肺动脉压力及NO、H_2S水平的影响

目的:探讨雾化吸入一氧化氮供体亚硝酸钠(NaNO2)后对低氧性肺动脉高压(HPH)大鼠肺动脉压力及体内一氧化氮(NO)、硫化氢(H2S)水平的影响。方法:雄性Wistar大鼠50只,随机分为常氧空白组、常氧亚硝酸钠组、低氧空白组、低氧生理盐水组、低氧亚硝酸钠组,采用常压低氧法建立大鼠HPH动物模型。测定肺动脉平均压(mPAP)、右室重量、左室+室间隔重量并计算右心室肥厚指数(RVHI=RV/LV+S);血清及肺匀浆NO含量、血浆H2S水平测定;光镜观察肺小动脉结构改变,弹力纤维+VG染色观察弹力纤维、肌纤维及胶原纤维增生情况。结果:低氧前各组大鼠体重无差别,而低氧后大鼠体重差别显著(P0.05);低氧各组大鼠的mPAP、RVHI值与常氧各组相比均升高,低氧亚硝酸钠与低氧空白组和低氧生理盐水组比较,mPAP和RV/(LV+S)值降低(P0.05);血清中NO水平低氧各组较常氧各组均降低(P0.05);肺组织匀浆中NO水平:低氧空白组和低氧生理盐水组较常氧各组降低(P0.05);而低氧亚硝酸钠组与常氧空白组比较无显著差异(P0.05);血中H2S水平:低氧各组均较常氧各组降低(P0.05);低氧亚硝酸钠组与低氧空白组、低氧生理盐水组比较升高(P0.05)。光镜下,常氧空白组管腔结构正常;常氧亚硝酸钠组未见明显变化;低氧空白组肺小动脉平滑肌增生,胶原纤维增多,管壁增厚,管腔狭窄;低氧生理盐水组变化同低氧空白组;低氧亚硝酸钠组管壁狭窄较低氧空白组有所减少。结论:雾化吸入亚硝酸钠能有效降低肺动脉压力,减轻右室重构,可调节大鼠体内NO、H2S水平,可能通过直接作用或在体内影响气体信号分子的分泌及合成来实现对HPH的防治。     

应力负荷下兔肩袖急性断裂重建后腱-骨修复动物模型建立及其修复过程中影像学评价

背景：目前尚无公认的动物模型可以作为应力负荷下肩袖损伤的相关研究标准的实验动物模型。 目的：建立应力负荷下兔肩袖腱-骨急性断裂重建术后修复动物模型,并对其修复过程中进行影像学评价。 方法：将新西兰白兔进行双侧肩关节行冈上肌腱离断术,并行冈上肌腱止点重建,术后随机分为应力负荷组与非应力负荷组。非应力负荷组正常笼养;应力负荷组于冈上肌腱重建术后第2周开始进行肩关节被动屈伸训练。分别于术后第2,4,8周训练结束后行肩关节MRI和超声检查。 结果与结论：MRI检查结果显示：术后4和8周,T2WI相应力负荷组连接肌腱与骨组织低信号显示面积较非应力负荷组大。超声检查结果显示：术后4和8周,兔冈上肌腱止点重建处连续性回声,应力负荷组较非应力负荷组稍明显。结果提示,应力负荷下兔肩袖急性断裂术后腱-骨修复动物模型建立相对成功,一定的应力刺激能够促进肩袖腱-骨修复。     

不同β-肾上腺素能受体对低氧应激大鼠心脏舒缩功能的影响

目的:探讨不同β-肾上腺素能受体(β-adrenergic receptor,β-AR)在急性低氧应激中对大鼠左、右心室舒缩功能的影响。方法:健康雄性SD大鼠随机分为4组(n=7):对照组(control group)、非选择性β-肾上腺素能受体阻断剂普萘洛尔组(propranolol group)、选择性β_1-肾上腺素能受体阻断剂阿替洛尔组(atenolol group)和选择性β2-肾上腺素能受体阻断剂ICI 118,551组(ICI 118,551 group),各组大鼠分别在常氧(西宁,海拔2 260 m,20.9% O_2,79.1% N_2)和急性低氧(15.0% O_2,85.0% N_2)通气的状态下进行实验,监测各组大鼠心率(heart rate,HR)、左心室收缩压(left ventricular systolic pressure,LVSP)、右心室收缩压(right ventricular systolic pressure,RVSP)及左、右心室内压最大上升和下降速率(±dp/dt_(max))等心功能指标变化;同时,比较低氧通气前后动脉血气的变化。结果:常氧下,propranolol组、atenolol组与ICI 118,551组LVSP和左心室±dp/dt_(max)较给药前降低,同时propranolol组与atenolol组RVSP和右心室±dp/dt_(max)较给药前明显降低(P0.05)。低氧通气5 min后,各组大鼠与常氧组相比动脉血氧分压(PaO_2)、LVSP和左心室±dp/dt_(max)均降低(P0.05);但右心室±dp/dt_(max)明显升高(P0.05);且低氧条件下control组心功能指标的变化程度均比propranolol组和atenolol组明显。结论:低氧应激时心脏β_1-AR的激活可能是心脏发挥代偿调节的重要方式,但右心室通过紧张源性扩张代偿表现出的右心舒缩功能增强对低氧下机体循环血流量的维持更为重要。     

低氧训练时心肌组织细胞低氧诱导因子1α与凋亡相关蛋白的表达

背景：运动对心肌细胞凋亡的影响有了比较多的研究,但低氧训练对心肌细胞凋亡的研究不多见。低氧诱导因子1α是否控制了Bcl-2家族的表达而影响凋亡发生,尚未明确。 目的：分析低氧训练时心肌组织低氧诱导因子1α蛋白表达情况与凋亡蛋白的相互关系。 方法：将健康雄性SD大鼠60只,随机分为6组：①对照组常温常氧下喂养,不运动。②低氧组在低氧环境下喂养,不运动。③运动组常温常氧下运动。④低住高练组常氧下居住,低氧、常氧训练交替进行。⑤高住低练组低氧下居住,常氧下训练。⑥高住高练低练组低氧下居住,低氧、常氧训练交替进行。运动组大鼠负荷跑台训练8周,训练每周6 d,运动速度和运动时间连续递增,运动速度从开始的10 m/min、持续时间为15 min递增至第8周的25 m/min、持续时间为50 min。低氧程度由开始从海拔1 500 m增加到第8周达到海拔3 600 m。训练结束后,运用苏木精-伊红染色、TUNEL法和蛋白免疫组织化学方法检测大鼠心肌组织细胞低氧诱导因子1α、Bcl-2、Bax的表达变化。 结果与结论：①常氧时低氧诱导因子1α几乎不表达,低氧可增加低氧诱导因子1α的蛋白表达,低氧复合运动,表达更多。②低氧组和低氧运动组大鼠心肌组织Bax表达变化不是很明显,但Bcl-2表达就远远低于常氧不运动组。③低氧组、运动组与低氧运动组心肌组织细胞凋亡较明显,但三者相互之间比较差别较小,说明低氧结合运动不会使细胞凋亡更加严重。结果表明各实验组Bcl-2表达显著低于对照组,Bax表达变化不明显。但低氧可增加低氧诱导因子1α的蛋白表达,低氧复合运动,表达更多。说明低氧诱导因子1α有可能调节Bcl-2、Bax的表达,从而控制细胞凋亡的发生与否。 中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建;骨细胞;软骨细胞;细胞培养;成纤维细胞;血管内皮细胞;骨质疏松;组织工程      

附子理中汤及拆方干预脾阳虚模型大鼠

背景：中药复方多具有“双向调节”、“纠正偏性”从而恢复机体平衡的药效特点,实验拟采用附子理中汤及其拆方为干预药物,验证附子理中汤对脾阳虚证具有最佳的“温阳健脾”效果,为进一步了解附子理中汤多节点起效的机制提供基础资料。 目的：以转化医学思维为指导观察附子理中汤及拆方对脾阳虚模型大鼠的药效。 方法：采用肩胛间棕色脂肪切除术+高脂饲料喂养+隔日寒冷环境刺激的复合因素造模法制备脾阳虚Wistar大鼠模型,造模后第70天分别灌胃附子理中汤、理中汤和附子干姜汤;对照组不造模,喂饲普通饲料,测量各组大鼠体质量、肛温和肛温温度曲线下面积。 结果与结论：模型组大鼠体质量增长最慢,其余给药3组体质量增长较快,又以附子组增长最明显,与模型组比较,差异有显著性意义(P < 0.05)。模型组大鼠肛温均低于其余4组,与对照组比较,差异有显著性意义(P < 0.05)。附子组大鼠肛温升高明显,与模型组比较差异有显著性意义(P < 0.05)。模型组大鼠的肛温温度曲线下面积低于对照组,差异有显著性意义(P < 0.05)。附子组、理中组、附姜组大鼠的肛温温度曲线下面积高于模型组,差异有显著性意义(P < 0.05或P < 0.01)。结果可见附子理中汤以及拆方理中汤和附子干姜汤均能纠正脾阳虚大鼠脾失健运导致体质量减少或增长缓慢和脾失温煦导致体温低的病理状态,以附子理中汤的效果较好。     

环加氧酶-2在大鼠原代皮质神经细胞缺氧损伤中的作用

目的:观察环加氧酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)在原代培养的大鼠皮质神经细胞缺氧-再给氧损伤中的作用以及COX-2特异性抑制剂NS398的保护作用。方法: 原代培养大鼠皮质神经细胞,随机分为对照组(未处理组)、缺氧再给氧组、COX-2特异性抑制剂NS398+缺氧再给氧组。用噻唑蓝(MTT)比色法测定细胞生存率,用Western印迹法检测COX-2蛋白质的表达,用DNA凝胶电泳法检测细胞凋亡情况。结果: 培养的大鼠原代皮质神经细胞经缺氧再给氧处理后,COX-2蛋白质表达水平明显高于对照组及缺氧再给氧+NS398组(P＜0.05);缺氧再给氧+NS398予处理组神经细胞生存率明显高于单独缺氧再给氧组(P＜0.05和P＜0.01),DNA凝胶电泳显示DNA断裂显著减轻。结论:COX-2参与缺氧再给氧后神经细胞凋亡的病理过程,COX-2特异性抑制剂明显减轻缺氧再给氧后神经细胞的损伤,保护神经细胞免遭缺氧诱导的细胞凋亡。     

沉默caspase-3基因影响骨髓间充质干细胞的增殖和凋亡

背景：缺血缺氧的心肌微环境导致植入的细胞存活率低。 目的：观察沉默caspase-3基因对大鼠骨髓间充质干细胞增殖和体外缺血缺氧环境下凋亡的影响。 方法：构建靶向caspase-3的shRNA重组慢病毒并转染骨髓间充质干细胞为转基因组,以正常细胞组和空载体组做对照,采用MTS法检测各组细胞增殖情况。建立缺血缺氧模型,real-time PCR和免疫组织化学分别检测缺血缺氧环境各组细胞的caspase-3 mRNA和蛋白表达水平,应用流式细胞术检测不同缺血缺氧时间点(0,6,12,24,48 h)各组细胞的凋亡率。 结果与结论：重组慢病毒成功转染骨髓间充质干细胞,且细胞增殖活性升高(P < 0.05)。缺血缺氧环境下,转基因组细胞caspase-3在mRNA和蛋白表达水平相比对照组下降(P < 0.05)。沉默caspase-3能显著降低骨髓间充质干细胞的凋亡率(P < 0.05),且随着缺血缺氧时间的延长凋亡率缓慢升高。结果提示,沉默caspase-3能加快骨髓间充质干细胞的生长速度和提高在体外缺血缺氧环境下的抗凋亡能力。     

甘氨酸对缺氧/复氧心肌细胞[[Ca2+]i和TNF-α浓度的影响

目的: 观察甘氨酸对缺氧/复氧心肌细胞内游离钙、心肌细胞存活率和TNF-α浓度的影响。方法: 利用原代培养的SD大鼠乳鼠心肌细胞建立心肌缺氧/复氧(H/R)模型,实验分7组:① 对照组;② 缺氧/复氧 (H/R)组;③ 0.5 mmol/L甘氨酸(GLY)+H/R组;④ 1.0 mmol/L GLY+H/R组;⑤ 2.0 mmol/L GLY+H/R组;⑥ 4.0 mmol/L GLY+H/R组;⑦ 4.0 mmol/L GLY对照组。结果: 在一定浓度范围内(0.5-2.0 mmol/L),甘氨酸能抑制缺氧/复氧损伤引起的细胞内钙超载,并呈现剂量依赖性关系,在2.0 mmol/L浓度水平,达到最佳抑制效应。甘氨酸能抑制心肌细胞产生TNF-α,避免心肌H/R损伤的加重,增加心肌细胞的存活率。 结论:甘氨酸对缺氧/复氧心肌具有保护作用,其机制与抑制钙超载,减少TNF-α的生成有关。