AdKDR-CDglyTK融合基因系统治疗胰腺癌的实验研究

目的 观察腺病毒介导的KDR启动子驱动的CD/TK融合双自杀基因系统(以下简称为AdKDR-CDglyTK)对胰腺癌的治疗作用.方法 采用培养细胞移植法,将人胰腺癌细胞系Capan-2接种于裸鼠背部皮下,建立裸鼠人胰腺癌移植瘤模型.将20只裸鼠随机分为4组,每组5只.分组方法:Ⅰ组:注射重组腺病毒AdKDR-CDglyTK与前药5-FC与GCV;Ⅱ组:仅注射前药5-FC与GCV;Ⅲ组:仅注射重组腺病毒AdKDR-CDglyTKⅣ组:空白对照,不施加任何处理.重组腺病毒AdKDR-CDglyTK采用瘤体内多点注射,5-FC与GCV给药方法采用腹腔内注射的方法,观察各组小鼠的生存状况及肿瘤体积、瘤重、肿瘤生长抑制率、常规病理等指标;应用透射电镜观察细胞超微结构,用TUNEL法检测细胞凋亡率,比较观察各治疗组的治疗效果;并对各组的肿瘤组织行RTPCR的检测,以了解有无双自杀基因CDglyTK的表达.结果 第Ⅰ组裸鼠移植瘤的生长显著受到抑制,第Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组肿瘤生长情况无明显差别.第Ⅰ组肿瘤细胞凋亡指数为(34.20±4.60)%,较对照组显著增加(P=0.00).结论 AdKDR-CDglyTK联合前药5-FC及GCV对人胰腺癌Capan-2细胞具明显的抑制作用,并且诱导裸鼠体内人胰腺癌Capan-2细胞的凋亡.其可能的机制是通过下调凋亡抑制基因Bcl-2的表达.     

血管内皮生长因子受体启动子双自杀基因治疗乳腺癌

目的 探讨腺病毒介导的KDRP-CD/TK融合基因对乳腺癌裸鼠体内抑瘤作用的特点.方法 以MCF-7细胞株建立裸小鼠乳腺癌动物模型,随机分为Ⅰ组[注射重组腺病毒AdKDRP-CDglyTK与前药5-氟胞嘧啶(5-FC)与丙氧鸟苷(GCV)]、Ⅱ组(仅注射前药5-FC与GCV)、Ⅲ组(仅注射重组腺病毒AdKDRP-CDglyTK)及Ⅳ组(空白对照,不施加任何处理).治疗结束后,计算抑瘤率、常规病理检查、逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测瘤体CD/TK融合基因的表达以及微血管密度(MVD)变化的检测,同时观察该治疗体系有无系统毒性.结果 各组瘤重如下:Ⅰ组(实验组)(25.04±3.09)mg、Ⅱ组(498.07±4.47)mg、Ⅲ组(501.94±4.50)mg、Ⅳ组(503.79±6.27)mg.可见Ⅰ组肿瘤逐渐缩小,余各组肿瘤逐渐增大(F=12 727.420,P＜0.01);第Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组肿瘤生长差异无统计学意义(P＞0.05);Ⅰ组有CD/TK基因表达且MVD(1.05±0.04)较对照组(4.15±0.10)变小(t=64.126,P＜0.01);常规病理检查发现Ⅰ组组织片状坏死,且该治疗体系对重要脏器无毒性作用.结论 KDR启动子驱动双自杀基因体系对裸鼠皮下移植瘤有明显的生长抑制作用,其机制涉及对肿瘤及其血管内皮细胞的双重杀伤.     

腺病毒介导双自杀基因CD/TK对人肝癌细胞株Bel7402的抑制作用

目的探讨含胞嘧啶脱氨酶(CD)／5-氟胞嘧啶(5-Fc)单纯疱疹病毒1型胸腺嘧啶激酶基因融合自杀基因(CD／TK)的重组腺病毒治疗肝癌的疗效。方法重组腺病毒Ad．CD／TK感染人肝癌细胞Bel7402,用噻唑蓝(MTT)方法观察不同浓度5-Fc和无环鸟苷(GCV)对其杀伤效应; 建立Bel7402裸鼠皮下移植瘤模型,瘤内注射Ad．CD／TK,腹腔注射GCV(50 mg／kg体重)和／或5- Fc(500 mg／kg体重)10 d,观察肿瘤生长抑制效应。结果在对感染Ad．CD／TK的Bel7402细胞的体外杀伤实验中,GCV的IC50为(12．1±2．3)μmol／L,5-Fc的IC50为(223±15)μmol／L,并且两者有协同效应。在Bel7402裸鼠移植瘤模型中,联合Ad．CD／TK和GCV、5-Fc能够显著抑制肿瘤的生长。结论腺病毒为载体的双自杀基因转染和前药的应用对人肝癌细胞的体内、体外治疗疗效明显。     

双自杀基因重组腺病毒对胰腺癌细胞特异性杀伤作用

目的 研究腺病毒介导的KDR启动子驱动CD/TK融合基因系统(Ad-KDR-CDTK)对胰腺癌细胞Capan-2特异性的杀伤作用.方法 重组腺病毒体外感染表达KDR的Capaw2细胞株,用不表达KDR的肝癌细胞HepG2做对照.观察其感染效率并以RT-PCR方法 检测转基因细胞CDTK的表达,然后给予不同浓度的前药更昔洛韦(ganciclovir,GCV)和5-氟胞嘧啶(5-fluorocy-tosine,5-FC),MTT法观察该体系对Capan-2和HepG2细胞生长增殖的影响及其旁观者效应;电镜观察细胞的病变;流式细胞仪检测细胞周期的变化和DNA含量的变化.建立Capan-2裸鼠皮下移植瘤模型,瘤内注射Ad-KDR-CD/TK,腹腔注射前药GCV(50 mg·kg-1·d-1)和5-FC(500 mg·kg-1·d-1)14 d,观察肿瘤生长抑制效应.结果 腺病毒对两种细胞株的感染率相似,其感染率随腺病毒滴度的增高而递增.RT-PCR方法 检测发现转染Ad-KDR-CDTK的Capan-2细胞有目的 基因表达.MTT法检测显示前药呈剂量依赖性抑制Capan-2生长,而不表达KDR的肝癌细胞HepG2对前药不敏感,且观察到该体系对Capan-2明显的旁观者效应.电镜下可见Capan-2有凋亡改变.用流式细胞仪测定用药组出现典型的凋亡峰;细胞周期分析显示治疗后细胞G0-G1期比率增多,G2-M及S期细胞减少.在Capan-2裸鼠移植瘤模型中,该双自杀基因系统能够显著抑制肿瘤的生长.结论 KDR启动子可调控双自杀基因体系选择性杀伤胰腺癌细胞Capan-2,诱导胰腺癌细胞凋亡,并可显著抑制人胰腺癌裸鼠移植瘤的生长.     

胞嘧啶脱氨酶基因、单纯疱疹病毒胸苷激酶基因治疗裸鼠肝门部胆管癌皮下移植瘤的研究

目的　观察胞嘧啶脱氨酶基因 (CD)、单纯疱疹病毒胸苷激酶基因 (HSV tk)共表达对裸鼠人肝门部胆管癌皮下移植瘤的治疗作用。方法　用转染有双自杀基因的包装细胞PA3 17产生的病毒上清 ,感染裸鼠肝门部胆管癌皮下移植瘤 ,给予前体药物 5 氟胞嘧啶 (5 FC) 5 0 0mg/kg体重和 /或无环鸟苷 (GCV ) 10 0mg/kg体重后 ,1次 /d ,共 10d ,观察肿瘤的生长情况。 结果　双自杀基因在裸鼠肝门部胆管癌皮下移植瘤中稳定表达 ,转基因组肿瘤的生长明显受到抑制 (P <0 .0 1) ;CD tK / 5 FC GCV组、CD/ 5 FC组、tK/GCV组抑瘤率分别为 88.3 1%、63 .5 2 %、65 .0 5 %。双自杀基因组与单自杀基因比较差异有显著性 (P <0 .0 5 )。结论　双自杀基因可明显抑制裸鼠肝门部胆管癌皮下移植瘤生长 ,较单一自杀基因有更强的抗肿瘤作用     

TK自杀基因对甲胎蛋白阳性肝癌的特异性杀伤作用

目的观察腺病毒介导的单纯疱疹病毒胸苷激酶基因(HSV-tk)/丙氧鸟苷(GCV)自杀基因系统在体内外对人肝癌细胞的杀伤效应.方法在体外按MOI值为100、10、1、0用重组腺病毒转染人肝癌细胞BEL-7402和SMMC-7721,48 h后用噻唑蓝(MTT)法测定细胞存活率.在两种肝癌裸鼠模型上,瘤体内注射重组腺病毒(1×1012 pfu/L)0.1 ml,GCV作用后观察抑瘤效果.结果体外MOI为100时,可杀死99.8%的BEL-7402细胞和17.8%的SMMC-7721细胞,两者差异有显著性(P＜0.05).体内BEL-7402组肿瘤生长明显受到抑制.结论在体内外,腺病毒介导的含AFP调控序列的HSV-tk/GCV自杀基因系统对甲胎蛋白(AFP)阳性肝癌细胞具有特异性杀伤作用,该系统可望用于肝癌的特异性基因治疗.     

靶向性双自杀基因混合碘油对兔肝癌的介入治疗研究

目的评价携带血管内皮生长因子（VEGF）启动子调控的TK及CD融合双自杀基因重组腺病毒系统（AdVEGF-CDglyTK）与超液化碘油混合栓塞兔肝癌的治疗效果.方法 36只荷VX2瘤兔随机分4组,LP组（单纯超液化碘油栓塞组）;LP＋AdVEGF-CDglyTK组（超液化碘油＋AdVEGF-CDglyTK混合栓塞,介入术后腹腔注射GCV ＋5-FC治疗组）;AdVEGF-CDglyTK组（单纯灌注AdVEGF-CDglyTK,介入术后腹腔注射GCV ＋5-FC治疗组）;NS组（生理盐水治疗组）.于术前及术后第10、15天行CT检查观察肿瘤的体积,免疫组织化学法检测肿瘤组织VEGF的表达及微血管密度（MVD）.结果 4组兔术前肿瘤体积在统计学无显著性差异（P〉0.05）;介入治疗后10天、15天的各组之间肿瘤增长率均有显著性差异（P〈0.05）,LP＋AdVEGF-CDglyTK肿瘤增长率最小,而LP组肿瘤增长率小于AdVEGF-CDglyTK组,三个治疗组疗效均优于生理盐水对照组.VEGF表达方面：LP组表达最高,与其它三组相比有显著性差异（P〈0.05）,其它三组之间未见显著性差异.MVD表达：LP组最高,LP＋AdVEGF-CDglyTK组最低,与其它各组相比有显著性差异（P〈0.05）,而AdVEGF-CDglyTK组MVD表达也低于NS组,有显著性差异（P〈0.05）.结论在对兔肝癌的治疗中,与单纯碘油栓塞以及单纯灌注AdVEGF-CDglyTK相比,AdVEGF-CDglyTK与碘油混合肝动脉栓塞可以明显降低肿瘤的生长率,减少肿瘤组织VEGF的表达及减少肿瘤新生血管生成.     

甲胎蛋白启动子驱动的yCDglyTK双自杀基因治疗裸鼠肝癌的机制研究

目的研究携带甲胎蛋白（AFP）启动子的酵母菌胞嘧啶脱氨酶胸苷激酶（yCDglyTK）双自杀基因体内靶向性治疗肝癌的效果和机制。方法构建携带AFP启动子的yCDglyTK双自杀基因表达质粒,通过阳离子脂质体将携带AFP启动子的yCDglyTK双自杀基因转染HepG2和SMMC7721肝癌细胞的裸鼠肝癌皮下种植瘤,观察自杀基因体内杀瘤效果以及细胞凋亡的情况。结果成功构建携带AFP启动子的yCDglyTK双自杀基因,其靶向性地在AFP阳性的HepG2细胞种植瘤上表达,而AFP阴性的SMMC7721细胞种植瘤上无表达,氟胞嘧啶（5-FC）、更昔洛韦（GCV）及两者联合可有效抑制HepG2细胞种植瘤的生长,抑瘤效果GCV＋5-FC〉5-FC〉GCV,而SMMC7721细胞种植瘤的生长未受影响。HepG2细胞种植瘤治疗后有明显的细胞凋亡,而SMMC7721细胞种植瘤内极少凋亡细胞。结论携带AFP启动子的yCDglyTK双自杀基因能有效地靶向性地杀伤AFP阳性的肝癌细胞,细胞凋亡可能是其杀伤的重要机制之一。     

腺病毒介导的HSV-tk/GCV自杀基因系统体内外旁观者效应的观察

目的　观察腺病毒介导的HSV tk/GCV自杀基因系统的体外、体内接触及体内远端旁观者效应。　方法　采用向体外培养的tk阴性人肝癌BEL 74 0 2细胞中加入不同比例tk阳性同种细胞 ;向荷tk阴性BEL 74 0 2瘤小鼠瘤体内注射不同数量tk阳性同种细胞 ;向双侧荷瘤小鼠一侧瘤体内注射重组腺病毒 ,GCV作用后用不同方法来观察不同情况下的旁观者效应。　结果　体外组中观察到明显旁观者效应 ,当tk阳性细胞占 10 %时 ,混合细胞存活率为 36 6 % ;体内接触组中也观察到旁观者效应 ,实验组瘤体生长明显受到抑制 (P <0 0 5 ) ;体内远端组中 ,未观察到旁观者效应 (P >0 0 5 )。结论　腺病毒介导的HSV tk/GCV自杀基因系统在体外及体内接触时均存在旁观者效应     

胸苷激酶和胞嘧啶脱氨酶融合基因抑骨肉瘤生长的研究

目的观察单纯疱疹病毒-胸苷激酶/胞嘧啶脱氨酶融合自杀基因(HSV-TK/CD)对裸鼠骨肉瘤生长的影响。方法人骨肉瘤细胞系MG-63细胞于裸鼠成瘤后将其分为6组:(1)PBS对照组;(2)重组腺病毒(adenovirus,Ad)-Lac-Z/GCV 5-FC组;(3)Ad-TK/GCV组;(4)Ad-CD/5- FC组;(5)Ad-TK/GCV Ad-CD15-FC组;(6)Ad-TK-CD/GCV 5-FC组。各组经治疗后观察肿瘤的生长状况及组织病理学改变。结果(2)组与(1)组比较,肿瘤体积与肿瘤坏死程度差异无统计学意义(P>0.05);与(1)、(2)组比较,(3)～(6)组肿瘤的生长均受到明显抑制(P<0.05),且(5)、(6)组与(3)、(4)比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论融合自杀基因HSV-TK/CD对裸鼠骨肉瘤生长有明显的抑制作用。     

结直肠癌TNM分期与循环DNA水平关系的临床研究

目的探讨结直肠癌TNM分期与循环DNA水平的关系。方法选择2010年3月～2011年9月42例结直肠癌患者,术前检测循环DNA和癌胚抗原（CEA）水平,术后病理确定TNM分期;同期检测14例健康人循环DNA水平作为对照组。结果健康人循环DNA水平（22.14±16.16）μg/L,结直肠癌循环DNA水平：Ⅰ期（79.85±53.08）μg/L,Ⅱ期（77.21±40.46）μg/L,Ⅲ期（85.66±39.87）μg/L,Ⅳ期（145.52±51.72）μg/L。结直肠癌Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期、Ⅳ期循环DNA水平明显高于健康人（P〈0.05）;结直肠癌Ⅳ期明显高于其他各期,差异有显著性（P〈0.05）;Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期之间循环DNA水平差异无显著性（P〉0.05）;循环DNA水平在不同年龄段、性别、肿瘤部位间差异无显著性（P〉0.05）。CEA与循环DNA水平之间无直线相关关系（r=0.153,P=0.333）。结论循环DNA水平检测具有微创、标本获取容易、可重复检测的优点,它有可能在结直肠癌早期诊断方面成为有价值的肿瘤标志物。     

全阴囊Ⅲ度烧伤不同方式重建阴囊对生精功能的晚期影响的实验研究

目的:探讨全阴囊Ⅲ度烧伤不同方式重建阴囊对睾丸生精细胞凋亡及bcl-2蛋白表达的影响。方法:以2月龄贵州小型猪为实验动物,雄性40只,雌性24只。雄性随机分正常对照组(Ⅰ),自然愈合组(Ⅱ),植皮组(Ⅲ),皮瓣组(Ⅳ),每组10只。建模10月末雄性对照组及实验组每组6只与同期饲养的雌猪一一配对饲养,配对3周后雌猪继续喂养4个月观察生育情况,雄猪1年末取各组双侧睾丸标本,原位末端标记法(TUNEL)检测睾丸生精细胞凋亡指数(AI),免疫组化(SABC法)检测bcl-2蛋白表达。对数据行单因素方差分析。结果:细胞凋亡结果:Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ的AI值(x±s)%分别为:7.07±3.50、40.34±4.85、15.14±1.36、39.29±5.73,Ⅰ与Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ相比差异均有显著性(P<0.05),Ⅱ与Ⅳ相比差异无显著性(P>0.05),Ⅲ与Ⅱ、Ⅳ相比差异均有显著性(P<0.05)。bcl-2蛋白表达结果:Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ的bcl-2蛋白表达(x±s)%分别为:75.07±3.74、54.93±4.03、66.85±3.06、53.33±5.22,Ⅰ与Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ相比差异均有显著性(P<0.05),Ⅱ与Ⅳ相比差异无显著性(P>0.05),Ⅲ与Ⅱ、Ⅳ相比差异均有显著性(P<0.05)。配对喂养结果:Ⅱ、Ⅳ组配种没有成功,Ⅰ组全部配对成功,生育幼猪(10.0±1.18)头,Ⅲ组4头配种成功,生育(9.92±1.31)头,Ⅰ组与Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组相比差异均有显著性(P<0.05),Ⅲ组与Ⅱ、Ⅳ组相比差异均有显著性(P<0.05),Ⅱ与Ⅳ组相比差异无显著性(P>0.05)。结论:全阴囊Ⅲ度烧伤不同方式重建阴囊1年后对生精功能均有抑制作用,导致生精细胞凋亡增加,bcl-2蛋白表达降低,其中植皮重建阴囊对睾丸生精功能影响最小,建议阴囊Ⅲ度烧伤创面采用植皮修复。     

结直肠癌病检淋巴结数目与TNM分期及预后的关系

目的 探讨病检淋巴结数目与结直肠癌分期及预后的关系.方法 将567例结直肠癌患者根据术后病检的淋巴结数目分为3个组:≤6枚、7～11枚、≥12枚组,比较各组5年生存率的差别.TNM分期(Ⅰ～Ⅳ期)分别以病检淋巴结数目分为<12枚和≥12枚两组,比较各分期中两组的5年生存率的差别,分析预后相关因素.5年生存率的比较采用Kaplan-Meier法并经Log-rank检验,预后多因素分析采用Cox比例风险模型.结果 567例平均病检淋巴结数目为(16.75±9.88)枚,病检淋巴结数目分别为≤6枚,7～11枚,≥12枚时,结直肠癌5年生存率各为32.3%(21/65),43.8%(53/121),57.7%(220/381),单因素分析表明,病检淋巴结数目≥12枚的结直肠癌5年生存率明显高于其他两组(≤6枚,7～11枚)(P<0.05).<12枚、≥12枚淋巴结两组在Ⅰ期或Ⅳ期的结直肠癌5年生存率无明显差别(89.5%vs.89.1%,8.0%vs.18.2%,P>0.05),而≥12枚淋巴结的Ⅱ期和Ⅲ期5年生存率明显高于<12枚(71.1%vs.32.6%,48.8%vs.30.0%,P<0.05),多因素COX回归模型分析表明,病检淋巴结数目是Ⅱ、Ⅲ期结直肠癌独立的预后因素.结论 病检的淋巴结数目主要通过影响Ⅱ、Ⅲ期的预后与结直肠癌总5年生存率明显相关,是Ⅱ、Ⅲ期结直肠癌独立的预后因素.

Abstract：

Objective To study the relationship between the number of examined lymph nodes and the prognosis of colorectal cancer by TNM stage. Methods According to the number of examined lymph nodes, 567 patients of colorectal carcinoma who underwent resection were divided into three groups: ≤ 6,7-11 and ≥ 12, the 5-year overall survival rates of three groups were compared. For each TNM stage ( stage Ⅰ -Ⅳ ) , patients were substratified into two groups basing on the number of examined lymph nodes:<12 group and ≥12 group, the 5-year survival rates of two groups in each TNM stage were assessed, and prognostic factors of stage Ⅱ and Ⅲ stage were analyzed. 5-year survival curves were estimated with the Kaplan-Meier method and compared by the log-rank test. Cox proportional models were used to conduct multivariate analyses of prognostic factors. Results The average number of examined lymph nodes was 16. 75 ±9. 88. With the patients grouped by the number of lymph nodes ( ≤6,7 -11 and ≥12 nodes) , the 5-year survival rate was 32. 3% , 43. 8% , and 57. 7% , the univariable analysis indicated that the 5-year survival rate of ≥ 12 examined nodes were significantly higher than the other groups (P<0. 05). There was no difference between two groups in the 5-year survival rates of stage Ⅰ or Ⅳ colorectal cancer (89. 5% vs.89. 1% ,8. 0% vs. 18. 2% , P>0. 05 ) , however, the 5-year survival rates of stage Ⅱ and Ⅲ colorectal cancer in ≥12 group were significantly higher than<12 group(71. 1% vs. 32. 6% ,48. 8% vs. 30. 0% ,P<0. 05) , multivariable analysis revealed that the number of lymph nodes examined was an independent factor of prognosis of stage Ⅱ and Ⅲ colorectal cancer. Conclusions The number of examined lymph nodes significantly influenced the 5-year overall survival rate of TNM stage Ⅱ and Ⅲ colorectal cancer.     

腺病毒载体介导的胞嘧啶脱氨酶和胸苷激酶融合基因体外抑瘤效果的观察

目的：构建重组腺病毒载体，观察自杀基因对不同大肠癌细胞系的细胞毒作用。方法：利用重组腺病毒载体介导的胞嘧啶脱氨酶（CD）、单纯疱疹病毒胸苷激酶（HSV-tk)融合基因感染人结肠腺癌细胞系LoVo、HCT－8和直肠腺癌细胞系HR－8348，通过细胞集落形成实验、细胞存活率测定（MTT法），检测和分析HSV－tk／丙氧鸟苷（GCV）、CD／5－氟胞嘧啶（5－FC）双自杀基因系统对肿瘤细胞的杀伤作用和旁观者效应的大小。结果：Western Blot检测分析融合基因的表达，显示重组腺病毒介导的双自然基因可以在3种肿瘤细胞中表达。不加5－FC和GCV时，各转染组和对照组肿瘤细胞集落形成分别为：94、93、95；96、94，比较差异无显著性（P＞0．05）。在5－FC（80．0mg/L）和GCV（0．8mg/L)浓度下3种肿瘤细胞存活率降至2．1％、4．3％和3．2％，与不同前药相比差异有显著性（P＜0．01）。感染细胞在混合细胞中比例仅仅占5％时，就能获得明显的旁观者效应，细胞杀伤率分别升至22．2％、34．8％和40．4％。结论：CD、TK融合基因联合联合双前药治疗能取得显著的抗肿瘤作用。     

WTp53基因联合TK/GCV、CD/5-FC系统抑制结肠癌肝转移的实验研究

目的研究WTp53基因联合TK／GCV、CD／5-FC系统对结肠癌肝转移的抑制作用。方法32只裸鼠随机分为4组，每组8只。脾内注射法建立结肠癌肝转移动物模型。第1组：脾内注射SW480细胞（对照组）；第2组：脾内注射SW480／p53细胞；第3组：脾内注射SW480／TK-CD细胞，腹腔注射GCV、5-FC；第4组：脾内注射SW480／p53与SW480／TK-CD等比例混合细胞，腹腔注射GCV、5-FC。观察各组裸小鼠的肝转移率、肝转移瘤数目、肿瘤细胞凋亡指数（AI）、生存期等指标。结果各治疗组裸鼠肝转移的发生率下降，平均肝转移瘤数减少，其动物的生存期延长，肝转移瘤内的癌细胞凋亡率增高。联合基因治疗组效果最好，且WTp53与TK／GCV、CD／5-FC有交互协同作用。结论WTp53基因与TK／GCV、CD／5-FC系统联合应用具有协同效应，可有效地抑制结肠癌肝转移的形成。