两种抗HCV试剂检测献血者结果不符追踪观察

目的 探讨两种抗HCV试剂检测结果不符标本在抗HCV分片段试剂不同区抗原的反应性，随访和跟踪该类人员在抗HCV和抗HCV分片段试剂中的反应变化。方法 利用抗HCV分片段试剂对国家抗HCV参考品及抗HCV试剂检测不符的标本进行测试，并对可跟踪的献血者在6个月后再进行抗HCV及抗HCV分片段试剂检测。结果 国家抗HCV参考品中，29份阳性标本均出现二片段或二片段以上阳性，阴性标本全部阴性；103份抗HCV试剂结果不符标本中有6例为二片段阳性，26例为单片段阳性，以NS3、C区为主；6个月后对可以跟踪的86例献血员进行检测，37例两种抗HCV试剂转阴，16例两种试剂均转为阳性，6例抗HCV分片段阴性者己转为一个或二个片段阳性。结论 对抗HCV试剂阳性结果不符标本同时应用HCV分片段试剂检测有利于降低HCV阳性血清漏检率，跟踪和复检有助于了解阳性结果不符标本在抗HCV及抗HCV分片段试剂中的反应变化，排除假阳性。     

两种抗HCV试剂检测献血者结果不符追踪观察

目的探讨两种抗HCV试剂检测结果不符标本在抗HCV分片段试剂不同区抗原的反应性,随访和跟踪该类人员在抗HCV和抗HCV分片段试剂中的反应变化.方法利用抗HCV分片段试剂对国家抗HCV参考品及抗HCV试剂检测不符的标本进行测试,并对可跟踪的献血者在6个月后再进行抗HCV及抗HCV分片段试剂检测.结果国家抗HCV参考品中,29份阳性标本均出现二片段或二片段以上阳性,阴性标本全部阴性;103份抗HCV试剂结果不符标本中有6例为二片段阳性,26例为单片段阳性,以NS3、C区为主;6个月后对可以跟踪的86例献血员进行检测,37例两种抗HCV试剂转阴,16例两种试剂均转为阳性,6例抗HCV分片段阴性者己转为一个或二个片段阳性.结论对抗HCV试剂阳性结果不符标本同时应用HCV分片段试剂检测有利于降低HCV阳性血清漏检率,跟踪和复检有助于了解阳性结果不符标本在抗HCV及抗HCV分片段试剂中的反应变化,排除假阳性.     

第三代重组免疫印迹试验测定丙型肝炎病毒的可靠性

1993年第三代抗-HCV ELISA试剂(HCV ELISA-3)和第三代重组免疫印迹试剂(RIBA-3)在欧洲已开始使用,这两种试剂均含有NS5区抗原。RIBA-3含有再组c33与NS5蛋白,以及合成肽c100和c22;RIBA-2则均为重组抗原,即c33、c100、c22和5-1-1。为了比较RIBA-3与RIBA-2的敏感性与特异性,作者将593名HCV RNA阳性和1498名HCV RNA阴性试验对象RIBA-2测试资料同220名HCV RNA阳性和530名HCV RNA阴性试验对象RIBA-3测试资料作了对比分析。所有标本均为抗-HCV ELISA-2阳性。在对比分析时,以HCV RNA PCR结果为标准以确定     

献血者筛选中丙型肝炎病毒的确证

作者使用不同的酶联免疫测定试剂相结合的方法对第二代EIA筛选试剂检测为阳性的血清进行血清学确证。总共收集了508份志愿献血者的血清。为排除同一献血者的重复样品,收集限3个月以内。所有血清先用第二代HCV ELA 试剂筛选(Ab-bott和Ortho)复查。作者选出用这两种试剂测定都为阳性的195份血清,作进一步研究。用HCV EIA补充试剂,Monolisa抗-HCV试剂和Ag520EIA再测定。Monolisa抗-HCV含有核心蛋白(NC-450)和部分NS_3蛋白(409-1-1)。Ag520EIA只有氨基端部分(氨基酸6—77)的核心蛋白。根据初筛试验反应的强弱,将标本分为2组,第     

应用改良第3代ELISA法测定输血后肝炎中抗HCV

第2代HCV测定法采用结构和非结构区抗原对临床诊断非甲非乙肝炎及HCV高危感染具较高效果。本文作者报道,用改良第3代ELISA法测定输血后HCV感染中抗HCV血清转化,并对其敏感性作了评价。全部标本均用ELISA3和ELISA2测定抗HCV、两法均采用HCV重组抗原。ELISA3与ELISA2区另为加入HCV基因NS5重组抗原。ELISA2HCV重组抗原为C200(NS3/NS4),C100-3(NS4)和C22-3。ELISA3C200抗原除C22-3和NS5外,还含有NS3(c33c)和NS4(C100—3)两种序列。同等条件下,ELISA3标本量为10μl,ELISA2为20μl。     

用不同厂家ELISA试剂检测抗HCV结果的差异性分析

目的探讨不同厂家酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂检测丙型肝炎病毒抗体(抗HCV)结果的差异性。方法用4种不同厂家生产的第3代ELISA抗HCV试剂检测经上海科华公司生产的ELISA抗HCV试剂检测为阳性的出入境体检人员的血清标本62例,结果不一致的标本再用MP HCV BLOT3.0检测确认。结果A、B、C、D 4种试剂阳性反应数分别为59、50、43和53份,其中试剂B和C、B和D比较差异无统计学意义(P>0.05);试剂C和D比较差异有统计学意义(P<0.05)。4种试剂反应都阳性标本37份,结果不一致的标本25份,经确认有9份标本阳性。结论不同厂家抗HCV试剂检测结果的阳性率有较大差异,提示选择灵敏度较高的试剂进行初筛,并且要有另一种灵敏度和特异性高的试剂作为复检方法,当2种试剂检测都为阳性,且标本吸光度值与阳性判定值(cut off)的比值(S/CO)≥3.8时,则可判定为抗HCV阳性;当检测结果为阳性但其S/CO值≤3.8或其中1种检测方法结果为阴性,建议用免疫重组印迹(RIBA)试验确认。     

用不同厂家ELISA试剂检测抗HCV结果的差异性分析

目的探讨不同厂家酶联免疫吸附试验（ELISA）试剂检测丙型肝炎病毒抗体（抗HCV）结果的差异性。方法用4种不同厂家生产的第3代ELISA抗HCV试剂检测经上海科华公司生产的ELISA抗HCV试剂检测为阳性的出入境体检人员的血清标本62例,结果不一致的标本再用MP HCV BLOT3.0检测确认。结果A、B、C、D 4种试剂阳性反应数分别为59、50、43和53份,其中试剂B和C、B和D比较差异无统计学意义（P〉0.05）;试剂C和D比较差异有统计学意义（P〈0.05）。4种试剂反应都阳性标本37份,结果不一致的标本25份,经确认有9份标本阳性。结论不同厂家抗HCV试剂检测结果的阳性率有较大差异,提示选择灵敏度较高的试剂进行初筛,并且要有另一种灵敏度和特异性高的试剂作为复检方法,当2种试剂检测都为阳性,且标本吸光度值与阳性判定值（cut off）的比值（S/CO）≥3.8时,则可判定为抗HCV阳性;当检测结果为阳性但其S/CO值≤3.8或其中1种检测方法结果为阴性,建议用免疫重组印迹（RIBA）试验确认。     

国产丙型肝炎诊断试剂评价质控体系的建立

目的 建立丙型肝炎诊断试剂考评用质控体系.方法 收集自2009年2至6月期间4080份献血员血清标本,用酶免疫实验检测筛选出抗-HCV阳性和抗-HCV阴性的146份标本.分别使用2种进口(Murex、Ortho)和4种国产抗-HCV EIA试剂(分别为英科新创、中山生物、万泰和科华公司)对筛选出的标本进行重复检测;使用Chiron的RIBA HCV 3.0和HCV RNA PCR试剂进行确认试验;采用Roche和Abbott HCV RNA定量试剂进行HCV RNA定量检测,RNA阳性标本进行HCV基因型检测.选择不同强度的或不同含量的确认阳性和阴性的标本及系列稀释标本建立抗-HCV和HCV RNA诊断试剂评价质控体系.结果 构建了抗-HCV和HCV RNA诊断试剂评价质控体系.每种质控体系均由50份标本组成.分别包括20份抗-HCV/HCV RNA阳性标本、20份抗-HCV/HCVRNA阴性标本及10份用于灵敏度评价的系列稀释标本.阳性标本包括强、中和弱阳性,并包含国内常见HCV基因型和亚型.阴性标本包括样本吸光度值/临界值接近临界值的标本.结论 本研究所建立的质控体系背景资料丰富、检测结果稳定可靠,为新研制和改进后国产丙肝诊断试剂的性能评价提供参考数据.     

丙型肝炎病毒核心抗原检测试剂的临床评价

[目的]对研制的丙型肝炎病毒核心抗原（HCV—cAg）ELISA检测试剂进行临床特异性及敏感性评价。[方法]制备抗HCV-核心区（Core）抗原四株单克隆抗体，研制出双抗体夹心检测HCV～core抗原酶联免疫检测（ELISA）试剂。三家临床单位收集抗HCV阴性样品3040份，HBsAg阳性100份，抗HIV阳性40份，从10万份抗-HCV筛查出临界样品28人份。[结果]3040份阴性样品检测有3份HCV—cAg阳性，3份经HCVPCR检测有1份阳性，100份HBsAg阳性，40份抗HIV阳性样本检测均为阴性，在10万份抗HCV抗体筛查样品中，选择28份抗-HCV检测临界样品进行HCV—cAg检测，有4份阳性，4份HCV—cAg阳性样品中有3份HCV—RNA检测阳性。[结论]研制的双抗体夹心HCV-核心抗原ELISA试剂具有很好的特异性和灵敏度。     

丙型肝炎病毒不同编码区重组抗原在抗体检测中的应用

目的　探讨丙型肝炎病毒 (HCV)不同编码区重组蛋白片段的免疫反应性及其在抗体检测中的应用。方法　分别以 4种HCV单片段抗原 (C、NS3、NS4或NS5 )检测抗 HCV抗体阳性血清 ;以 4种单片段抗原的混合物 (MIX)检测抗 HCV抗体阳性血清、大学生体检血清和抗 HCV抗体阴性质控血清。结果　 90份抗 HCV抗体阳性血清中共有 75份可与一种或多种单片段抗原反应 ,阳性率分别为 70 .0 % (C)、6 1.1% (NS3)、5 2 .2 % (NS4 )、4 4 .4 % (NS5 ) ,其中仅与C、NS3、NS4和NS5一种抗原发生反应的分别有 8份、1份、2份和 3份血清标本 ;90份抗 HCV阳性血清经MIX抗原检测 ,阳性率为 83.3% (75 / 90 ) ;10 0份大学生血清和39份阴性质控血清经混合抗原检测均阴性。结论　HCV不同编码区重组蛋白片段有不同的免疫反应性 ,在发展抗 HCV抗体诊断试剂时 ,应采用各种不同编码区的混合抗原。     

0903种第三代抗HCV ELISAS的敏感性和特异性

[英]/VrielinkH…／／VoxSang.－1995,69.──14～17本文作者报道了3种第三代抗HCVELISA的特异性和敏感性。材料和方法：标本组别(A)血清标本来自献血员(n=403)，所有血清在各血库用第一代或第二代抗HCVELISA测定结果阳性。RIBA──2或RIBA──3反应均阳性或可疑；(B)血清标本为临床非甲非乙型肝炎病人(n=212)；(C)血清标本为多次献血病人(n=253)；(D)HCV阳性(RIBA──2和PCR确证)供血员血浆稀释参照品(n=24)，用人AB血浆2倍连续稀释，HBsAg、抗HB、抗HIV──1／2、HCV、HTLV──I／Ⅱ和密螺旋体抗原均阴性；(E)血…     

五种抗—HCV试剂比较

丙型肝炎病毒HCV主要通过血液传播,近几年来,我国献血者,尤其是献浆者中,发生HCV感染时有存在。目前,国内的采供血机构都使用ELISA试剂作献血者的抗－HCV检测,为提高抗－HCV的检出率,需尽可能地选择灵敏度高、特异性强、稳定性好的试剂。我库1999年1月～2000年9月,已使用过五种国内不同厂家生产的抗－HCV ELISA试剂,现将这五种试剂的质量信息情况报道如下： 1 材料与方法 1．1 试剂 选自国内五个厂家抗－HCV的ELISA试剂,并标号为A、B、C、D、E。 1．2 质控血清 2NCU／ml抗－HCV质控血清（9906、0005）从省…     

HCV单片段抗原EIA与常规EIA检测丙型肝炎病毒抗体的比较

目的比较国产重组HCV单片段抗原酶免疫(EIA)检测试剂与国产第三代HCV常规抗体(EIA)检测试剂的敏感性和特异性。方法利用基因工程技术重组表达的HCV单片段(HCV-C、NS、NS4、NS)EIA检测试剂和常规EIA试剂检测国家第三代抗-HCV血清考核盘(40份阳性和40份阴性血清样品)及20份不符血样，对检测结果进行统计分析。结果HCV单片段EIA检测试剂总符合率100％，常规试剂为96．2％。结论HCV抗体单片段试剂可作为对HCV常规EIA试剂检测不符血样的确认试剂。     

双抗原夹心ELISA检测抗HCV总抗体

目的建立检测抗HCV抗体的双抗原夹心ELISA法,评价其可行性。方法将与His或GST融合表达的HCV基因工程抗原,分别用作ELISA的包被和酶标记抗原,建立用于抗HCV总抗体检测的双抗原夹心ELISA。用此方法检测1 968份临床血清标本,并以间接ELISA(北京万泰试剂)与之对照;此外,用套式RT-PCR检测部分血清的HCV RNA。结果有1 761份血清2种ELISA检测均为阴性,有190份血清均为阳性,两种方法符合率为99.1%;有17份血清的检测结果不相符,间接法阳性而本法阴性的14份,其中HCV RT-PCR阳性1份;本法阳性而间接ELISA阴性的3份,其中RT-PCR阳性2份。双抗原夹心ELISA与间接ELISA的敏感性分别为99.48%、98.96%,特异性分别为99.94%、99.27%。结论新研制的检测抗HCV总抗体的双抗原夹心ELISA具有较高的敏感性和特异性,值得作进一步的深入研究。     

双抗原夹心与间接ELISA法检测抗HCV对比研究

[目的]用研制的双抗原夹心ELISA法试剂与间接ELISA法试剂对比检测抗HCV。[方法]利用基因重组技术表达的HCV多表位抗原分别包被和标记，收集献血员样本，二种国产（试剂A，B）及雅培间接抗HCV试剂同时检测，对一种试剂单独阳性和3种试剂检测均为阳性的样本，再用研制的双抗原夹心法进行检测。[结果]试剂A检测单独阳性的样本12份，试剂B单独检测阳性20份样本中，双抗原夹心检测为阴性 ；而三家试剂检测均为阳性9份样本，双抗原夹心检测均为阳性。[结论]双抗原夹心检测抗HCV特异性较间接法好，灵敏度二者相当。     

检测HCV分片段抗体对提高HCV感染临床诊断率的应用研究

目前国内使用的抗HCVELA试剂均经过中国药品生物制品检定所的审批鉴定 ,具有较好的灵敏性和特异性。但是 ,由于各试剂厂家使用选择的不同片段抗原 (HCV C、NS3、NS4 、NS5)优势表位不同 ,使用的表达载体及后期纯化工艺也有所不同 ,使得融合抗原中各片段抗原的活性存在一定的差异 ,最终造成试剂盒存在不同程度的漏检。为进一步减少漏检率 ,提高临床诊断率及输血的安全性 ,我站采用HCV分片段抗体检测来确认常规抗HCV阳性的准确性 ,得到了较好的结果。1　资料与方法1 .1　一般资料　HCV RNA阳性及抗HCV阳性标本来自唐山市传染病医…     

长春地区17，000献血员初复检抗HCV阳性标本中不同功能区抗体的状况及试剂改进的建议

[目的] 对献血员初检和复检抗HCV阳性及可疑血液标本同步进行不同功能区抗体状况的分析研究，以期发现问题和为今后的改进提供依据。[方法] 用两种国产抗HCVEIA检测试剂和一种进口试剂对长春地区17，000献血员进行筛选，检测出80份阳性样品，再用抗HCV单片段旁证试剂检测、同步分析四种抗体的反应强度和分布状况。[结果] HCV-Core、NS3、NS4、NS5均为阳性的26份，HCV-C^ NS3^ NS4^ 的11份，HCV-C^ NS3^ NS5^ 的9份，HCV-C^ NS3^ 的10份，HCV-C^ NS4^ 的3份，HCV-NS3^ NS5^ 的1份，HCV-NS4^ NS5^ 的1份，而Core^ ，NS3^ ，NS4^ 单独阳性分别为10、8、1。[结论] 根据抗HCV不同功能区抗体的分布状况，提示抗HCV检测试剂中两种国产试剂均可能存在着个别的漏检现象，主要是NS3抗体；建议国产试剂尚需提高和改进HCV非结构区抗原，尤其是NS3抗原，同时也应改进NS4抗原。     

丙型肝炎病毒抗体的ELISA检测

根据丙型肝炎病毒(HCV)分子结构特点,简述了目前检测和确诊HCV的主要方法和用于检测抗-HCV试剂的抗原来源,着重阐述了抗-HCV第一代ELISA和第二代ELISA试剂的灵敏度和特异性、HCV分子不同区域各抗原的反应特点、ELISA反应强度与HCV感染的关系以及ELISA阳性与血清ALT和抗-HBc的关系。     

用酶联免疫夹心法测定肝炎患者血清丙型肝炎抗原

目的建立血清中丙肝病毒NS3抗原（HCAg-NS3）的酶免检测方法。方法以特异性强、敏感度高、识别不同HCAg-NS3抗原表位的HCAg-NS3单克隆抗体和高效价的纯化抗-HCV分别作为包被抗体和酶标记抗体，采用夹心ELISA法测定血清中HCAg-NS3抗原。结果优化了酶免疫反应条件；该方法对HCAg-NS3的最低检测限为1—2ng／ml；批内（n=13）及批间（n=3）变异系数（CV）分别为4．51％和5．64％；对52例抗-HCV阳性血清测定HCAg-NS3抗原的检出率为21．2％，对15例HCAg-NS3阳性标本测定HCV RNA的检出率为60％，1350例抗-HCV阴性的其他类型肝炎患者血清标本中，HCAg-NS3检出率为1．7％，50例正常人血清标本的HCAg-NS3抗原测定结果均为阴性。结论该方法敏感性较高，特异性、重复性和稳定性均良好，可以作为早期诊断HCV感染的有效方法。     

献血者抗-HCV ELISA阳性结果RIBA分析

笔者将本中心对献血者丙型肝炎抗体筛选所采用两种试剂同时阳性或仅一种试剂阳性的标本 ,采用RIBA法进行抗原区带分析 ,现将 1年的分析结果报告如下。1　材料与方法1 1　材料　 2 0 0 1年 5月～ 2 0 0 2年 5月献血者标本 4 4 0 0 7份 ,每份标本均采用ORTHO及华美抗 HCV试剂同时作抗 HCV筛选 ,收集两种试剂检测同时阳性或仅一种试剂阳性的标本 12 2份 ;CHIRONRIBAHCV 3.0SIA试纸条。1.2　方法　按照CHIRONRIBAHCV 3.0SIA说明书操作 ,在CHIRONRIBA分析仪上作抗体原区代分析。2　结果试验的内控带IgG条带Ⅱ颜色明显强…