颊癌中肿瘤转移抑制基因nm23mRNA的表达

通过Ｎｏｒｔｈｅｒｎ斑点杂交技术研究５２例颊癌及相关组织中肿瘤转移抑制基因ｎｍ３２－Ｈ１和ｎｍ２３－Ｈ２ｍＲＮＡ的表达。结果发现：颊癌组织中ｎｍ２３－Ｈ１和ｎｍ２３Ｈ２ｍＲＮＡ表达比正常颊粘膜、白斑、癌旁粘膜均有不同程度增高，颊癌有转移组中ｎｍ２３－Ｈ１ｍＲＮＡ表达比无转移组明显降低，转移灶中ｎｍ２３－Ｈ１ｍＲＮＡ的表达更低（Ｐ〈０．０５），ｎｍ２３－Ｈ１ｍＲＮＡ经无转移组明显降低，转移灶中ｎｍ２     

颊癌中肿瘤转移抑制基因nm23mRNA的表达 Ⅱ.定量逆转录多聚酶链反应检测

采用定量逆转录多聚酶链反应（Ｑ－ＲＴ－ＰＣＲ）技术检测ｎｍ２３－Ｈ１和ｎｍ２３－Ｈ２ｍＲＮＡ在４７例组织标本中的表达情况，发现ｎｍ２３－Ｈ１和ｎｍ２３－Ｈ２ｍＲＮＡ在颊癌原发灶、癌旁粘膜、正常颊粘膜、颌下腺、白斑、正常淋巴结和有转移的淋巴结中均有不同程度的表达。ｎｍ２３－Ｈ１在肿瘤转移组颊癌原发灶中的表达低于无转移组（Ｐ＜０．０５），ｎｍ２３－Ｈ２在颊癌有、无转移中的表达无差异（Ｐ＞０．０５）；ｎｍ２３－Ｈ１和ｎｍ２３－Ｈ２表达与临床病理参数间均无关（Ｐ＞０．０５）。结果提示：ｎｍ２３－Ｈ１ｍＲＮＡ表达下降与颊癌转移关系密切，而ｎｍ２３－Ｈ２ｍＲＮＡ表达与颊癌转移无关；通过Ｑ－ＲＴ－ＰＣＲ检测ｎｍ２３－Ｈ１ｍＲＮＡ的表达水平可为临床预测颊癌的转移提供有价值的指标。Ｑ－ＲＴ－ＰＣＲ技术的主要优点在于通过少量组织提取的总ＲＮＡ即可检测ｎｍ２３ｍＲＮＡ的表达。     

颊癌中肿瘤转移抑制基因nm23mRNA的表达 Ⅰ.Northern斑点杂交研究

通过Ｎｏｒｔｈｅｒｎ斑点杂交技术研究５２例颊癌及相关组织中肿瘤转移抑制基因ｎｍ２３－Ｈ１和ｎｍ２３－Ｈ２ｍＲＮＡ的表达。结果发现：颊癌组织中ｎｍ２３－Ｈ１和ｎｍ２３－Ｈ２ｍＲＮＡ表达比正常颊粘膜、白斑、癌旁粘膜均有不同程度增高。颊癌有转移组中ｎｍ２３－Ｈ１ｍＲＮＡ表达比无转移组明显降低，转移灶中ｎｍ２３－Ｈ１ｍＲＮＡ的表达更低（Ｐ＜０．０５）。１１例有转移颊癌患者中有９例（８１．８％）为ｎｍ２３－Ｈ１低表达；而１９例无转移颊癌，有１５例（７８．９％）为高表达（Ｐ＜０．０５）。ｎｍ２３－Ｈ２ｍＲＮＡ表达在有无转移组患者中无明显差异（Ｐ＞０．０５）。结果提示，在颊癌的转移过程中，ｎｍ２３－Ｈ１比ｎｍ２３－Ｈ２起着更重要的作用。ｎｍ２３－Ｈ１ｍＲＮＡ表达可作为预测有无颊癌淋巴结转移的一个有价值的指标。     

口腔鳞癌nm23—H1基因存在状态和颈淋巴结转移的关系

目的：探讨口腔鳞癌中nm23-H1基因结构变化和表达水平及其和颈淋巴结转移的关系。方法：用PCR法扩增了30例入口腔鳞癌,7例正常口腔粘膜标本及人舌鳞癌细胞系TSCCa和人口腔转移癌细胞系GNM nm23-H1基因,并对PCR产物进行SSCP分析;用原位杂交法检测鳞癌组织及两组细胞株nm23-H1mRNA水平,对其和颈淋巴结转移的关系进行统计学分析,结果：除1例口腔鳞癌外,所有标本均无nm23-H1结构变化。9例有转移的口腔鳞癌组织中有7例nm23-H1mRNA表达阴性,而1例无转移患者只有5例表达阴性,且GNM nm23-H1阳性率低于TSCCa(41.2%对63．1％）,nm23-H1表达与癌转移呈显著负相关（P＜0．01）,nm23-H1表达和组织学分级无关。结论：nm23-H1 mRNA水平的变化不是由基因结构变化导致;nm23-H1基因产物对口腔鳞癌颈淋巴结转称有抑制作用。     

口腔鳞癌组织中nm23—H1基因的mRNA表达及临床意义

目的 研究口腔鳞癌中ｎｍ２３－Ｈ１基因的ｍＲＮＡ表达情况及其与口腔鳞癌颈淋巴结转移的关系。方法 采用斑点杂交的方法检测８例口腔鳞癌，２例正常口腔粘膜中ｎｍ２３－Ｈ１基因的ｍＲＮＡ表达情况。结果 ２例正常口腔粘膜中ｎｍ２３－Ｈ１基因的ｍＲＮＡ表达水平均较高；４例手术时无颈淋巴结转移的口腔鳞癌组织中３例ｎｍ２３－Ｈ１ｍＲＮＡ呈相对高表达，１例表达水平较低；而伴有颈淋巴结转移的４例口腔鳞癌组织中ｎｍ２３     

肿瘤转移抑制基因nm_(23)-H_1在口腔粘膜鳞癌和癌前病变中的表达及意义

目的 :通过观察肿瘤转移抑制基因nm2 3 -H1在正常口腔粘膜 (NM)、口腔粘膜白斑 (LK)及口腔粘膜鳞癌 (OSCC)中的不同表达 ,分析其在OSCC及其癌变过程中的表达规律 ,探讨其与肿瘤的分化、浸润和转移的关系。方法 :采用免疫组织化学SP法检测nm2 3 -H1在 8例NM、12例LK及 5 8例OSCC中的不同表达 ,用x2 检验Fisher精确概率法对检测结果进行统计学分析。结果 :nm2 3 -H1在NM及LK中多数为高染 ,分别占 87 2 5 %和 83 3% ,而在OSCC中低染率为 5 6 90 % ,与前两者相比存在着显著差异 (p<0 0 5 ) ;nm2 3 H1的异常表达与肿瘤的分化程度及有无颈淋巴结转移 ,都存在显著相关性 (p <0 0 5 )。结论 :nm2 3 -H1蛋白表达水平是判断肿瘤有无颈淋巴结转移及其分化程度的参考指标。     

头颈部鳞癌抑癌基因nm23-H1的表达、DNA倍体与淋巴结转移的关系

目的 :研究头颈部鳞状细胞癌 (HNSCC)nm2 3 H1基因的表达、DNA含量与淋巴结转移的关系。方法 :选择 3 0例未经治疗的HNSCC患者术后新鲜肿瘤标本 ,应用免疫组化ABC技术和流式细胞术 (FCM )检测瘤细胞nm 2 3 -H1基因表达、异倍体 (aneuploid)和S期细胞比例 (S phasefraction ,SPF) ,探索这 3个参数与淋巴结转移之间的关系。结果 :nm 2 3 H1的阳性率为 60 % ,异倍体检出率为 66.7%。nm 2 3 H1表达、DNA倍体和SPF与淋巴结转移有关 (均为P <0 .0 1)。nm 2 3 H1表达与DNA倍体无关 (P >0 .0 5 ) ,nm 2 3 H1表达与SPF有关 (P <0 .0 5 )。结论 :对nm2 3 H1表达、DNA倍体和SPF的检测可预测HNSCC淋巴结转移趋势和预后 ,是指导临床治疗有意义的一项生物学指标     

nm23-H1基因在口腔鳞癌颈淋巴结转移不同阶段的调控作用

目的　探讨nm23-H1基因在口腔鳞癌区域淋巴结转移不同阶段的调控作用及影响。方法　利用免疫组化和Western Blot技术,结合淋巴结转移和原发灶浸润分型的资料,分组对照研究nm23-H1基因在200例口腔鳞癌颈淋巴结转移不同阶段的表达情况。结果　淋巴结转移组nm23-H1基因阴性表达率明显高于无淋巴结转移组(P<0·01)。N1期、转移仅累及1个淋巴结、Ⅳc型浸润,以及低分化肿瘤的患者,均有比其它患者明显增高的 nm23-H1基因的阴性表达率(P<0·01);转移至颌下或颌下-颈深上淋巴结平面者的阴性表达率,也高于转移到其它平面者(P<0·05)。结论　nm23-H1基因主要是通过干扰肿瘤实体内高转移细胞亚群的形成和初始转移的发生来调控口腔鳞癌患者的颈淋巴结转移。     

肿瘤抑制基因nm23-H1在口腔鳞癌组织中的蛋白表达及其与预后的关系

目的　研究nm2 3 H1 蛋白在口腔鳞癌中的表达情况 ,并探讨它与口腔鳞癌患者预后的关系。方法　采用免疫组化SABC法检测 75例口腔鳞癌、19例癌旁粘膜、8例正常口腔粘膜及 9例颈淋巴结转移灶中的nm2 3 H1 蛋白染色 ,利用 χ2 检验及单因素、多因素Cox比例风险模型进行统计分析。结果　χ2 检验发现 ,nm2 3 H1 蛋白表达水平在生存期小于 3年组和大于 7年组间差异有显著性(P <0 0 5 )。单因素Cox模型分析发现nm2 3 H1 蛋白表达水平等因素与预后有关 ;多因素Cox分析未发现nm2 3 H1 蛋白表达水平等因素与预后有关。结论　nm2 3 H1 蛋白表达水平的高低可能不是影响口腔鳞癌患者预后的主要因素 ,nm2 3 H1 蛋白可能通过对转移的作用间接影响预后。     

Cervical lymph node metastasis in squamous cell carcinoma of the buccal mucosa: a retrospective study on pattern of involvement and clinical analysis

Background The study was performed with an aim to map the pattern of metastasis of squamous cell carcinomas of buccal mucosa to various cervical lymph node levels and analyze its correlation with primary tumor size and histo-pathological grading. Material and Methods 254 patients with squamous cell carcinoma of the buccal mucosa treated with surgery first approach were analyzed retrospectively. The tumor size was noted from pre-operative CT Scans and were divided into early and advanced tumors. The resected specimen was studied to note the histo-pathological grading of the squamous cell carcinoma and the metastatic deposits at various lymph node levels. Results Out of 254 patients (149 females, 105 males), 145 patients showed histo-pathologically proven metastatic deposits in one or more lymph nodes out of which there were 56 patients showing occult metastasis. 78/145 patients showed metastatic involvement of level IB and/or IA lymph nodes, 31 showed involvement of level II and/or I lymph nodes, 27 showed involvement of level III with or without involvement of level I and II and 9 showed metastasis to level IV and V lymph nodes with or without level I, II or III lymph nodes. Cervical lymph node metastasis had statistically significant association with tumor size with advanced tumors showing worse pattern of metastatic spread beyond level I and II lymph nodes. As the degree of differentiation of squamous cell carcinoma reduced, they were more prone for cervical metastasis with moderately and poorly differentiated squamous cell carcinoma showing higher involvement of level III, IV and V lymph nodes. Conclusions The majority of buccal mucosa cases showed metastasis to level I, II and III lymph nodes out of which level IB and/or IA was most frequently involved. Metastasis to level IV and V lymph nodes was rare and was seen especially in patients with advanced primary tumor and poor histo-pathologic differentiation. Key words:Oral squamous cell carcinoma (OSCC), cervical lymph node metastasis, histologic differentiation, locally advanced disease.     

颊黏膜鳞癌颈淋巴结隐匿性转移的临床研究

目的:探讨颊黏膜鳞癌隐匿性转移规律。方法:1992-01～2004-12月在南京大学口腔医院口腔颌面外科行颈淋巴清扫术的颊黏膜鳞癌cN0患者69例,男性31例,女性38例,年龄31～79岁,平均58.2岁。颈部的处理采用根治性颈淋巴清扫术、功能性颈淋巴清扫术或肩胛舌骨上颈淋巴清扫术。结果:颊黏膜鳞癌颈淋巴结隐匿性转移率为14.49%(10/69),转移到Ⅰ区为10.14%(7/69)、Ⅱ区为5.80%(4/69)、Ⅲ区为2.90%(2/69);T1颈部隐匿性转移率为9.52%(2/21)、T2为15.38%(6/39),T3、T4例数较少,其中4例T3中有1例转移,5例T4中有1例转移;高、中分化鳞癌颈部隐匿性转移率分别为14.89%(7/47)、10.00%(2/20),低分化鳞癌例数较少,2例中有1例转移。结论:认识颊黏膜鳞癌颈部淋巴结隐匿性转移特征,对制定颈部治疗方案具有重要意义。     

口腔鳞癌p16基因的表达及其病理意义

目的　探讨 p16基因在口腔鳞癌中的表达情况及其病理意义。方法　利用原位杂交和 Western blot-ting技术检测了 48例口腔鳞癌标本和 6例正常口腔粘膜标本 p16基因 m RNA的分布和强度及 p16蛋白的表达 ,并分析了 p16蛋白表达和患者临床病理参数的关系。结果　 6例正常口腔粘膜 p16 m RNA表达均阳性 ;48例口腔癌标本中有 2 1例 p16 m RNA表达阴性 (4 3.7% ) ,2 6例无 p16蛋白表达 (5 4.2 % ) ,其中 2 1例 m RNA表达阴性的病例均无 p16蛋白表达 ,另外 5例无 p16蛋白表达的鳞癌组织有 p16 m RNA杂交信号 ;p16蛋白表达与肿瘤的部位、癌细胞的分化程度及临床分期均无关 ,但与颈淋巴结是否转移密切相关 (P<0 .0 1)。结论　 p16基因产物丧失常发生于口腔鳞癌 ;p16基因可能通过某种机制抑制癌细胞的转移特性。     

口腔鳞癌中血管内皮生长因子C、受体3和抑癌基因nm23-H1的表达及意义

目的探讨血管内皮生长因子C（vascular endothelial growth factor C，VEGF-C）、受体3（vascular endothelial growth factor receptor-3，VEGFR-3）和抑癌基因nm23-H1的表达在口腔鳞状细胞癌（oral squamous cell carcinoma，OSCC）淋巴转移中的作用。方法对经病理证实的OSCC60例切片采用免疫组化SP法检测VEGF-C、VEGFR-3和nm23-H1的表达，计数肿瘤淋巴管密度（lymphatic vessels density，LVD），结合临床病理因素进行分析。结果OSCC中VEGF-C蛋白阳性率为58．3％，LVD为（8．43±2．64）个／高倍镜下和nm23-H。阳性表达，三者均明显差异于癌前病变和良性病变（P〈0．05），VEGF-C表达和LVD、淋巴结转移相关（P〈0．01）；nm23-H1表达与淋巴结转移、临床分期和组织学分级相关（P〈0．05）。结论在OSCC淋巴转移中VEGF-C、VEGFR-3高表达和nm23-H1蛋白缺失起重要作用，三者的检测结果对深入探讨肿瘤淋巴转移机制有参考价值。     

ERK及nm23-H1蛋白表达与舌癌侵袭、转移的关系

目的:探讨ERK及nm23-H1在舌癌中的表达及与侵袭、转移的关系。方法:采用免疫组织化学方法检测ERK及nm23-H1在74例舌癌中的表达。采用SPSS10.0软件包对数据进行统计学处理。结果:ERK的表达与临床分期及颈淋巴结转移呈正相关。nm23-H1的表达与临床分期及颈淋巴结转移呈负相关。ERK表达与nm23-H1表达呈负相关。ERK阳性同时nm23-H1阴性表达者,颈淋巴结转移率显著高于ERK阴性同时nm23-H1阳性表达者,舌癌中ERK及nm23-H1的表达率呈负相关。结论:ERK及nm23-H1的表达与舌癌的侵袭及颈淋巴结转移密切相关,联合检测具有一定的临床意义,有望成为判断侵袭、转移的指标之一。     

颊黏膜鳞癌cN_0患者的颈部处理

目的　探讨颊黏膜鳞癌cN0 患者的颈部处理原则。方法　对四川大学华西口腔医院颌面外科1 980～ 2 0 0 0年收治的 1 0 1例颊黏膜鳞癌cN0 患者进行回顾性研究。所有患者均行原发灶切除加同期或二期颈清扫术 ,有的患者还兼行化疗、放疗。术后淋巴结作病理学检查 ,随访 3年以上。结果　 101例颊黏膜鳞癌cN0 患者中有17例发生颈淋巴结转移 ,淋巴结隐匿性转移 (OM)率为16.83% ,且随临床T分期的增高而增高 ,T3和T4期的隐匿性转移率分别为18.18%和 52.00% ;转移淋巴结主要分布于颌下淋巴结组 (41.18% )和颈深上淋巴结组(29.41%)。结论　颊黏膜鳞癌颈部隐匿性转移率较高 ,对T3,4 期的cN0 颊黏膜鳞癌患者应考虑行选择性同期全颈清扫术。     

口腔鳞状细胞癌中趋化因子受体CCR7的表达及其与颈部淋巴结转移的关系

目的 探讨趋化因子受体CCR7在口腔鳞状细胞癌中的表达及在口腔鳞癌颈淋巴结定向转移中的作用.方法 应用免疫组化、反转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blotting等方法检测85例口腔鳞状细胞癌组织以及口腔鳞癌细胞系Tca8113和腺样囊性癌细胞系(adenoid cysticcareinoma,ACC-M)中CCR7的表达,分析CCR7表达与口腔鳞癌临床病理参数之间的关系.比较Tca8113和ACC-M对淋巴结的黏附能力,以及CCR7抗体对其黏附能力的影响.结果 66%(56/85)的口腔鳞癌组织存在CCR7的阳性表达,其中淋巴结转移组的CCR7阳性表达率明显高于无淋巴结转移组(P=0.015).RT-PCR和Western blotting检测结果也证实,CCR7在口腔鳞癌中有阳性表达.Tca8113细胞系对淋巴结的黏附能力明显高于ACC-M细胞系,并且能够被CCR7抗体有效阻断.结论 趋化因子受体CCR7在口腔鳞癌的发生发展及淋巴结转移中起着重要的作用.     

表皮生长因子受体在颊粘膜鳞状细胞癌中的表达及其临床病理学意义

表皮生长因于受体（EGFR）是一单跨膜糖蛋白，与细胞的增殖、转化有关。本文采用免疫组化ABC法检测8例正常颊粘膜上皮及40例颊粘膜鳞癌中EGFR的表达状况，结果显示：EGFR在颊癌组织中呈异质性表达，其阳性率明显高于正常颊粘膜组织（P＜0．05）；EGFR表达状况与颈淋巴结转移及预后间存在相关关系（P＜0．05）。EGFR（＋）表达者多数伴有颈淋巴结转移，预后差。以上结果说明，EGFR在颊癌组织中的表达水平，可作为评估颊癌细胞增殖状态，颈淋巴结转移情况及患者预后的一项参考指标。     

颊癌及转移淋巴结角蛋白谱的分析研究

目的探讨口腔颊黏膜鳞状细胞癌及转移淋巴结角蛋白谱的特点。方法颊部鳞状细胞癌活检标本及转移淋巴结活检标本,提取角蛋白,进行SDS-PAGE电泳和利用免疫印迹(Western Blot)杂交方法研究转移角蛋白谱的表达。结果颊黏膜化鳞状细胞癌中出现了单层角蛋白上皮如CK18、19,而CK10表达缺失;淋巴结转移鳞状细胞癌中出现了单层角蛋白上皮如19等,并且出现了大量角蛋白片段。结论颊黏膜鳞状细胞癌变异性表达CK18、19,不表达CK 10。转移淋巴结和原发鳞状细胞癌的角蛋白谱是不同的,在口腔鳞状细胞癌淋巴结转移过程中,角蛋白谱发生了变化。     

A model for the study of lymph node metastasis from oral carcinoma by serial transplantation of metastatic tumor in hamsters

A new model of lymph node metastasis was successfully established by serial transplantation of a metastatic tumor to the submandibular lymph node from a chemically induced squamous cell carcinoma of the tongue into the buccal pouch in hamsters. Tongue carcinomas were induced by application of a 0.5% solution of 9,10-dimethyl-1,2-benzanthracene (DMBA) in acetone. The tongue tumors and metastatic tumors to the submandibular lymph nodes were transplanted to the buccal pouch of recipient hamsters. In the first generation, lymph node metastases were found only in hamsters that received a metastatic tumor. The metastatic tumors to the lymph nodes were maintained by serial transplantation into the buccal pouch from metastatic sites until the eleventh generation. The incidence of lymph node metastasis exceeded 90% in animals after the ninth generation.     

Histological distribution of cervical lymph node metastases from intraoral/oropharyngeal squamous cell carcinomas.

The histological frequency and distribution of cervical lymph node metastases was studied in 326 neck dissections from 253 patients with an intraoral/oropharyngeal squamous cell carcinoma. Metastasis was evident in 118 patients (47%) and 18 had bilateral metastasis. For primary sites other than the tongue, metastasis developed initially in a node(s) in the first drainage group (level I or II) with progressive involvement of neighbouring nodes ('overflow'). Simultaneous bilateral metastases were seen in some tumours of the floor of mouth, tongue and oropharynx which involved the midline. An erratic distribution of metastases suggestive of 'fast-tracking' (skip lesions and peppering) was only seen in tongue tumours. The pattern of metastatic spread indicates that level IV nodes must be included in staging and therapeutic neck dissections in tongue cancer. Metastasis to 'accessory' lymph nodes (lingual, buccal) occurs infrequently but may explain some 'local' recurrences.