冠状动脉旁路移植术后影响静脉移植物内膜增生因素的实验研究

目的　研究静脉移植物内膜增生机理 ,为预防静脉移植物内膜增生寻找合理有效的途径。方法　 2 4只新西兰大白兔随机分为手术组和对照组。应用半定量方法分别于术后 2周、4周检测转化生长因子 β(TGF β)、胶原Ⅰ、胶原Ⅲ和血管紧张素Ⅱ受体 1(AT1R)mRNA表达水平。 结果　手术组各检测指标在各时点均明显高于对照组 (P <0 0 1)。术后 2周时 ,TGF β(4 0 5± 0 4 9vs 2 0 5±0 2 6 ) ;AT1R(18 2 3± 1 32vs 4 6 1± 0 5 3)、胶原Ⅰ (1 80± 0 17vs 0 90± 0 18)、胶原Ⅲ (7 0 5± 0 6 8vs2 80± 0 17)各基因表达水平最高。结论　TGF β、AT1R在内膜增生中可能发挥着重要作用。持续的动脉压力作用是导致TGF β、AT1R大量表达的主要因素 ,并由此导致胶原纤维的大量合成和沉积。     

转化生长因子βⅡ型受体-IgG Fc嵌合蛋白的基因治疗改善环孢霉素A的肾脏毒性

目的　本研究旨在探讨转化生长因子 βⅡ型受体 IgGFc(TGF βRⅡ /IgGFc)嵌合蛋白基因转染对小鼠环孢霉素A(CsA)肾毒性的作用。方法　雌性ICR小鼠予低钠饮食 1周后分为 3组 ,每组 6只 ,CsA组和TGF βRⅡ /IgGFc干预组每日皮下注射CsA 2 5mg/kg ,对照组每日皮下注射等量橄榄油。在给药的第 1天和第 7天 ,CsA组在布比卡因预处理的胫骨肌处注射 5 0 μgpCAGGS lacZ ,TGF βRⅡ /IgGFc干预组注射等量 pCAGGS TGF βRⅡ /IgGFc,均联合电穿孔 ,给药2周后处死。采用Northernblot测定肾组织中TGF β1mRNA水平 ,采用免疫组织化学和ELISA法测定肾组织和血浆中TGF β1蛋白水平。利用石蜡切片PAS和Masson’strichrom染色半定量评分评估肾小管损害和肾间质纤维化程度。结果　CsA用药 2周后 ,CsA组血浆和肾脏TGF β1表达持续增高 ,小管间质病变明显 ;TGF βRⅡ /IgGFc干预组血浆TGF β1水平与对照组相仿 ,而肾组织TGF β1表达较CsA组降低 5 0 % (P <0 .0 1) ,对小管间质病变具有保护作用 (P <0 .0 1)。结论　TGF βRⅡ /IgGFc基因转染有效抑制了CsA引起的小管间质病变。     

TGF-β1与自发性高血压大鼠肾脏功能关系的研究

探讨自发性高血压 (SHR)大鼠肾脏功能与转化生长因子 - β1的关系。方法 :研究组为SHR大鼠10只 ;同龄的WKY大鼠 7只为对照组。用ELISA法分别测定大鼠血清中TGF - β1的浓度 ;运用逆转录一聚合酶链反应 (RT -PCR)观察TGF -DmRNA在二组肾脏的表达 ;同时分别检测肾脏功能 (包括NAG酶 ,血肌酐 ,肌酐清除率 )。结果 :两组血清TGF - β1浓度的差异无显著性 (P >0 .0 5 ) ;SHR大鼠肾组织TGF - β1mR NA、尿NAG酶、血肌酐明显高于对照组 (P <0 .0 5 ) ,肌酐清除率明显低于对照组 (P <0 .0 5 ) ,肌酐清除率与肾脏局部的TGF - β1,mRNA的表达呈负相关 (P <0 .0 0 1) ;肾脏功能的改变与血清TGF - β1浓度高低无关。结论 :血压高低与血清TGF - β1浓度无关 ;肾脏局部TGF - β1mRNA的表达增高可能是引起高血压肾脏功能损害的重要因素。     

氯沙坦对糖尿病大鼠肾脏转化生长因子β1及细胞外基质表达的影响

目的 :观察氯沙坦对链脲佐菌素 (STZ)诱导的糖尿病大鼠肾脏转化生长因子 β1(TGF β1)和细胞外基质 (ECM )%DⅣ型胶原、纤维连接蛋白 (FN)表达的影响 ,以探讨糖尿病早期肾脏肥大和氯沙坦对糖尿病肾病 (diabetesnephropathy ,DN)保护作用的可能机理。方法 :实验大鼠随机分为 3组 ,每组 12只 :正常对照组 (C组 )、糖尿病组 (D组 )和氯沙坦治疗组 (DL组 )。左下腹腔注射STZ 6 0mg/kg体重制成糖尿病模型 ,DL组在糖尿病模型确立后第 2d予氯沙坦 10mg/(kg .d)灌胃 ,C组与D组仅给予等量自来水灌胃。检测各组第 4、 8wk末 (每组各取 6只 )的血糖、尿白蛋白、血浆血管紧张素Ⅱ含量及相对肾重 ;免疫组化检测肾内TGF β1、FN和Ⅳ型胶原蛋白表达水平 ,图像分析系统分析光密度值。结果 :DL组较D组尿白蛋白排泄量明显减少 ,相对肾重减轻 (P <0 0 1) ;免疫组化显示糖尿病大鼠肾内TGF β1蛋白表达增多 ,肾小球FN和Ⅳ型胶原沉积增多 ;DL组TGF β1蛋白表达均明显低于D组 ,治疗 8wk后FN和Ⅳ型胶原蛋白表达低于D组 (P <0 0 5 )。结论 :肾脏ECM积聚是糖尿病肾脏肥大的重要原因 ;氯沙坦对糖尿病肾脏病变的保护作用机制可能部分是通过下调糖尿病大鼠肾脏的TGF β1表达 ,减少ECM积聚     

大豆异黄酮对 UUO大鼠TGF-β1的抑制作用

目的　探讨大豆异黄酮对单侧输尿管梗阻 (unilateralureteralobstruction ,UUO)大鼠梗阻肾脏肾间质纤维化的防治作用及机制。方法　观察大鼠结扎侧肾脏的病理改变 ,应用HE和PAS染色观测肾间质容量 ,应用RT PCR法检测肾组织内TGF β1mRNA的表达。结果　异黄酮组梗阻肾肾间质容量明显低于对照组 ;异黄酮组TGF β1mRNA表达明显低于对照组 ,统计学分析差异显著 (P <0 0 5 ) ,异黄酮组肾间质纤维化程度轻于对照组。结论　大豆异黄酮对UUO大鼠梗阻肾肾间质纤维化有一定的抑制作用 ,其机制与大豆异黄酮可抑制TGF β1mRNA的表达有关。     

归芪方对糖尿病大鼠肾组织转化生长因子β1的影响

目的 :研究归芪方对糖尿病大鼠肾脏病变的保护作用及其机制。方法 :Wistar大鼠腹腔注射链脲佐菌素(STZ)以建立糖尿病模型 ,随机分为糖尿病模型组 (D组 )、苯那普利治疗组 (B组 )、归芪方治疗组 (G组 ) ,另设正常对照组 (C组 )。实验第 4 ,6周时 ,观察各组大鼠肾重 /体重、血糖、内生肌酐清除率 (Ccr)及肾组织结构的改变 ,放免法测定 2 4h尿微量白蛋白排泄率 (UAER)、β2 -微球蛋白 (β2 -MG)、血浆及肾组织血管紧张素Ⅱ (AngⅡ )含量 ,原位杂交法检测肾皮质转化生长因子 - β1(TGF - β1)基因表达的变化。结果 :与糖尿病模型组相比 ,归芪方可控制肾脏肥大 ,改善肾功能 ,降低AngⅡ水平 ,使肾皮质TGF - β1mRNA表达量减少 ,同时肾脏病理改变亦减轻。结论 :归芪方可降低AngⅡ水平 ,抑制TGF - β1mRNA的表达 ,减轻肾脏损伤 ,改善肾功能 ,延缓糖尿病肾病的慢性病理进展。     

肾上腺髓质素在人肾小管上皮细胞系对转化生长因子β1的拮抗作用

目的　探讨肾上腺髓质素 (AM)在人肾小管上皮细胞系 (HK 2 )对转化生长因子 β1(TGF β1)生物学效应的影响。观察系膜增生性肾小球肾炎患者血浆AM水平与肾小管间质病变的关系。方法　体外细胞培养实验分为 4组 (1)TGF β1组 ;(2 )AM组 ;(3)AM TGF β1组 ;(4 )对照组。以3H TdR掺入法测定细胞增殖 ;细胞总胶原的合成和分泌以3H 脯氨酸掺入量及培养液内3H 羟脯氨酸放射性活性来判断 ;ELISA法检测培养液中的纤连蛋白 (FN)含量 ;FN、IV型胶原和TIMP 1mRNA的表达采用RT PCR法 ;2 5例系膜增生性肾小球肾炎患者血浆AM水平测定采用放射免疫法。并设对照组。结果　 (1)AM对TGF β1的生长抑制作用无明显影响 ;(2 )AM呈浓度依赖性抑制TGF β1刺激的胶原合成和分泌 ,与TGF β1组相比 ,AM(10 -8mol/L)分别抑制了 8% (P >0 .0 5 )和 30 % (P <0 .0 5 )的胶原合成和分泌 ,AM(10 -7mol/L)则分别抑制了 5 7% (P <0 .0 5 )和 6 4% (P <0 .0 1) ;并且AM明显抑制TGF β1刺激的FN分泌 ,AM TGF β1组FN分泌 (2 0ng/ μl± 5ng/ μl)较TGF β1组 (2 8ng/ μl± 6ng/ μl)降低了 30 % (P <0 .0 5 ) ;AM显著抑制TGF β1刺激的IV型胶原、FN及TIMP 1mRNA的表达 ;(3)肾小管间质轻度病变组和重度病变组患者血浆AM水平较对照组分别增     

充血性心力衰竭肾脏致纤维机制的研究

目的　观察不同程度充血性心力衰竭时肾脏转移生长因子 β1(TGF β1)和纤维结合素 (FN)的改变以及血管紧张素转换酶抑制剂福辛普利对其的影响。方法　将SD大鼠通过腹主动脉 下腔静脉穿刺造瘘和冠状动脉结扎的方法建成不同的心力衰竭模型 ,并对冠状动脉结扎大鼠予福辛普利治疗。通过Doppler超声心动图比较心功能的各项参数 ,并采用免疫组织化学和逆转录 聚合酶链式反应 (RT PCR)方法检测肾脏TGF β1和FN的基因和蛋白表达。结果　穿刺造瘘大鼠的心功能损害较轻。而冠状动脉结扎大鼠心功能严重失代偿。福辛普利可以部分缓解冠状动脉结扎大鼠的心肌肥厚和受损的心功能。两组心力衰竭大鼠肾脏TGF β1的基因和蛋白水平以及FN的蛋白表达明显增强 (P <0 .0 0 1)。福辛普利能显著改善冠状动脉结扎大鼠肾脏TGF β1和FN表达的异常。结论　充血性心力衰竭早期即出现肾脏TGF β1和FN的表达增加 ,福辛普利通过下调其表达 ,可能会对预防和治疗肾脏病变的发生和发展有一定的帮助     

TGF-β_1在糖尿病肾病中的含量检测

目的探讨糖尿病肾病 (DN)患者体内转化生长因子 - β1(TGF - β1)含量及其与糖尿病微血管病变的关系。方法采用ELISA双抗夹心法对 4 8例 2型糖尿病肾病 (G1组 )患者尿液、血液及外周血单个核细胞PHA体外刺激培养上清液 (CPBMCs)中TGF - β1含量进行检测 ,并与 4 6例肾功能正常的 2型糖尿病 (G2组 )及 4 8例健康人(G3组 )比较。结果G1组尿液和血浆中的TGF - β1含量明显升高 ,其尿液中含量 (45 0 2 9± 99 75fg·L-1)与G2组 (74 72± 18 5 7fg·L-1)和G3组 (5 9 90± 9 5 5fg·L-1)比较 ,分别为P <0 0 1和P <0 0 0 1。血浆中含量 (387 4 5± 82 0 6fg·L-1)与G2组 (5 8 91± 11 0 3fg·L-1)和G3组 (47 2 5± 6 2 2fg·L-1)比较 ,分别为P <0 0 5和P <0 0 1。G2组与G3组之间比较 ,尿液及血浆中含量均无明显差异 (P均 >0 0 5 )。G1组患者CPBMCs中的TGF - β1含量与G2组、G3组之间无明显差异 (P均 >0 0 5 )。结论尿液和血浆中TGF - β1含量检测可能作为判断DN病情活动的一项有意义指标。     

结缔组织生长因子在肾切除大鼠肾脏中的表达和氟伐他汀的调节作用

目的　观察结缔组织生长因子 (CTGF)mRNA在 5 / 6肾切除大鼠肾皮质的表达特点和羟甲基戊二酰辅酶A(HMG CoA)还原酶抑制剂氟伐他汀的调节作用。方法　将 2 4只 5 / 6肾切除大鼠随机分为未治疗的 5 / 6肾切除组 (模型组 ,12只 )和氟伐他汀治疗的 5 / 6肾切除组 (治疗组 ,12只 ) ,另设6只假手术大鼠作为对照。氟伐他汀治疗 (7mg·kg-1·d-1) 13周后 ,检测尿蛋白排泄、血清尿素氮和肌酐含量 ,用RT PCR法检测肾皮质CTGFmRNA表达 ,免疫组织化学检测肾小球转化生长因子 β1(TGF β1)、IV型胶原和纤连蛋白的表达水平 ,并评价肾脏病变和肾小球硬化指数 (GSI)。 结果　实验终止时 ,模型组尿蛋白排泄 (30 5 4mg/ 2 4h)显著高于假手术组 (5 6mg/ 2 4h ,P <0 0 1) ,氟伐他汀治疗的大鼠尿蛋白排泄 (2 30 9mg/ 2 4h)明显低于模型组 (P <0 0 5 )。与假手术组相比 ,模型组血清尿素氮(P <0 0 1)和肌酐 (P <0 0 5 )水平均明显增高 ,氟伐他汀治疗使血清尿素氮和肌酐的含量明显降低。模型组GSI为 4 1 8± 11 5 ,明显高于假手术组 (2 2± 1 3,P <0 0 1) ,治疗组GSI(2 3 4± 6 1)明显低于模型组 (P <0 0 5 )。肾皮质CTGFmRNA表达水平约为假手术组的 3倍 (P <0 0 1) ,而在治疗组其表达水平减少 5 5 4 %。肾小球TGF     

莫比可对糖尿病肾病大鼠肾脏的保护作用

目的:探讨莫比可对糖尿病肾病(DN)大鼠肾脏的保护作用。方法:将链脲佐菌素所诱导的SD清洁级DN大鼠28只随机分为糖尿病肾病未干预组和糖尿病肾病莫比可干预组，每组各14只。另将12只鼠龄及体重相等的SD大鼠作为正常对照组，糖尿病肾病模型成功后开始给予药物干预，药物干预6周后,收集24 h尿液及血标本，处死大鼠后，取肾组织行免疫组织化学检查。结果：糖尿病肾病大鼠肾组织COX-2表达明显增加，尿蛋白增加，肌酐清除率上升,莫比可使尿蛋白减少（P＜0.01)，肌酐清除率降低（P＜0.01），COX-2表达明显下降。结论：选择性COX-2抑制剂莫比可通过部分抑制COX-2的活性而起到保护肾脏的作用,其机制可能与影响COX-2表达有关。     

糖尿病大鼠外周血单个核细胞内与肾皮质中TGF-β1mRNA水平的相关性研究

目的:观测糖尿病状态及噻唑烷二酮类药物治疗对糖尿病大鼠外周血单个核细胞(PBMC)内TGF-β1mRNA水平的影响,比较其与肾皮质TGF-β1基因表达的关系.方法:54只SD大鼠随机分为正常对照组(C组)、糖尿病组(D组)及吡格列酮治疗组(DP组).2、4、8周每组各取6只,以RT-PCR 狭缝杂交法半定量检测PBMC内和肾皮质TGF-β1mRNA水平.结果:肾皮质TGF-β1mRNA水平8周内D组均高于C组(P<0.05),而PBMC内TGF-β1mRNA水平4周时略高于C组(1.27±0.38 vs 0.88±0.36,P>0.05),8周时差别有统计学意义(1.12±0.08 vs 0.84±0.16,P<0.05).D组和DP组在8周时PBMC内TGF-β1mRNA水平与肾皮质TGF-β1mRNA水平呈正相关(r=0.83、P=0.02,r=0.82、P=0.03).结论:在糖尿病肾病早期,PBMC内TGF-β1mRNA水平增高迟于肾皮质;但PBMC内TGF-β1mRNA水平可反映肾皮质TGF-β1mRNA水平的变化.     

洛沙坦对人类正常系膜细胞及糖尿病肾病大鼠肾脏组织环氧化酶2的影响

目的:观察高糖及洛沙坦对正常人类系膜细胞(NHMCs)增殖及环氧化酶表达的影响,及洛沙坦对糖尿病肾病(DN)大鼠肾脏环氧化酶(COX2)及转化生长因子β1(TGF-β1)的影响.方法:体外实验采用高糖培养NHMCs,分二组(洛沙坦组,非干预组),用WST-1法检测NHMCs增殖,Western印迹和RT-PCR检测COX2表达.体内实验采用链脲菌素方法制备DN大鼠模型,洛沙坦干预4周后,分别检测大鼠肾脏病理改变、尿血栓素B2(TXB2)、24 h尿蛋白定量,同时采用免疫组织化学及RT-PCR方法检测大鼠肾脏COX2及TGF-β1表达.结果:洛沙坦呈剂量依赖性地抑制高糖引起的NHMCs增殖,同时还能减少高糖及低糖引起的NHMCa的COX2高表达;体内实验中,DN大鼠组肾体质量指数、尿TXB2和24 h尿蛋白均较正常对照组明显升高,洛沙坦能减少DN大鼠肾体质量指数、尿.TXB2、24小时尿蛋白,同时显著抑制肾组织COX2和TGF-β1表达.结论:洛沙坦能减少NHMCs的COX2表达,在高糖条件下更为明显.洛沙坦能抑制DN大鼠肾组织COX2和TGF-β1表达,从而改善DN肾损害.     

多(二磷酸腺苷-核糖)水解酶抑制剂单宁酸对糖尿病大鼠肾脏病变的影响及其机制

目的：研究多（二磷酸腺苷-核糖）水解酶（PARG）抑制剂单宁酸（GLTN）对糖尿病
大鼠肾脏病变的影响并探讨其可能的机制。方法：将实验动物随机分为正常对照组（NC组）、糖尿病组（DM组）、糖尿病3-氨基苯甲酰胺（3-AB）处理组（CDT组）、糖尿病GLTN低剂量（20 mg·kg-1·d^-1）处理组（LDT组）和糖尿病GLTN高剂量（30 mg·kg-1·d^-1）处理组（HDT组）,12周后检查各组动物血糖、血肌酐、尿素氮、尿蛋白排泄率水平及肾脏病变情况,免疫组织化学法检测各组大鼠肾组织PARP阳性信号表达。结果：与DM组比较,LDT和HDT组血糖水平明显降低（P<0.01）,血肌酐、尿素氮水平和尿蛋白排泄率也明显降低(P<0.01,P<0.05,P<0.01）,LDT和HDT组糖尿病大鼠的肾脏病变程度减轻,肾组织PARP蛋白表达降低(P<0.05)。但LDT和HDT组之间上述肾功能参数比较差异无显著性(P>0.05)。结论：GLTN可降低糖尿病大鼠的血糖水平,抑制肾组织PARP表达,改善肾脏功能和形态异常。     

Enalapril对实验性糖尿病大鼠肾脏的保护作用机理研究

目的 研究血管紧张素转换酶抑制剂Enalapril对糖尿病的肾病治疗作用机理，方法 以Enalapril治疗实验性糖尿病大鼠，并将正常组、糖尿病对照组及治疗组尿蛋白水平及肾组织转化生长因子β-糖基化终末产物含量进行比较，结果 Enalapril治疗组大鼠肾组织转化生长因子β及糖基化终末产物含量与糖尿病对照组相比无下降。结论 Enalapril的肾脏保护作用并非通过抑制肾组织转化生长因子β上调或糖基化终末产物积聚。     

高糖环境对体外培养糖尿病大鼠大血管内皮细胞产生转化生长因子—β的影响

OBJECTIVE: This study was designed to examine the secretion of TGF-beta by cultured rat thoracic aortic endothelial cells of the diabetic rats under high gluocose condition. METHODS: First we created diabetic rat models, then the thoracic aortic endothelial cells of the diabetic rats were isolated and cultured in 10% FBS-RPMI 1640 media with various high glucose concentrations (12.5 mmol/L, 25 mmol/L or 50 mmol/L D-glucose), high glucose and TNF-alpha or high glucose and insulin for 48 hours, and the supernatant obtained from the cultured aortic endothelial cells was collected. The level of TGF-beta 1 in the supernatant was measured using a standard bioassay, which utilizes the TGF-beta 1 sensitive Mv1Lu (CLL-64) Mink lung epithelial cell line, and the production of endothelin (ET) in the supernatant was also assessed by RIA (radio immol/Lunoassay). RESULTS: Both total TGF-beta 1 (406 +/- 29 vs 189 +/- 23 pg/ml, P < 0.05) and active TGF-beta 1 (161 +/- 24 vs 39.5 +/- 8 pg/ml) secreted by the cultured aortic endothelial cells under high glucose condition (25 mmol/L) were significantly increased as compared with control. TNF-alpha could enhance the effect of high glucose on the secretion of TGF-beta 1, whereas insulin could inhibit it. With various high glucose concentrations, the levels of ET were increased. Also TNF-alpha enhanced it and insulin inhibited it. CONCLUSION: TGF-beta 1 may be involved in the development of diabetic macrovascular complication.     

醛固酮对系膜细胞合成纤溶酶原激活剂抑制物-1的影响

目的 探讨醛固酮及阻断其受体后对系膜细胞生成纤溶酶原激活剂抑制物1（PAI-1）的影响。方法 醛固酮单独刺激大鼠系膜细胞24h以及采用螺内酯阻断后,用RT-PCR观察系膜细胞PA1-1mRNA的变化;用Western印迹方法检测细胞上清液中的PA1-1;采用ELISA方法测定细胞上清液中转化生长因子p1（TGF-β1）的含量;采用激光共聚焦检测系膜细胞内的活性氧（ROS）水平。观察不同浓度及不同作用时间的醛固酮刺激系膜细胞对PA1-1mRNA的影响。结果 醛固酮使系膜细胞PA1-1mRNA及蛋白表达明显升高,同时升高了TGF-β1的表达和细胞内的ROS水平。醛固酮使PA1-1mRNA表达呈剂量依赖性增加。100nmol／L醛固酮刺激系膜细胞4h后PA1-1mRNA表达才明显增加。加用螺内酯后使升高的PA1-1、TGF-β1表达以及细胞内ROS恢复到正常水平。结论醛固酮能独立促进大鼠系膜细胞分泌PA1-1的增加,同时醛固酮使TGF-β1表达以及细胞内ROS水平升高,而这些都是通过盐皮质激素受体介导的。     

辛伐他汀对糖尿病大鼠肾脏TGF-β系统的影响

目的：探讨辛伐他汀对糖尿病大鼠肾脏转化生长因子β1（TGF-β1）和转化生长因子βⅡ型受体（TβⅡR）表达的影响及其肾脏的保护机制。方法：SD大鼠单次腹腔注射55mg/kg链脲佐菌素(STZ )制备糖尿病大鼠模型。糖尿病大鼠随机分成糖尿病组、辛伐他汀治疗组［4mg/(kg·d)］和正常对照组。用免疫组织化学，RT-PCR和Western印迹法检测16周大鼠肾脏TGF-β1和TβⅡR表达的变化。结果：与正常对照组比较，糖尿病组和辛伐他汀治疗组TGF-β1和TβⅡR表达均增加（P<0.05）。治疗组TGF-β1和TβⅡR表达显著低于糖尿病组（P<0.05）。结论：辛伐他汀可以通过下调TGF-β1和TβⅡR的表达，抑制TGF-β系统信号通路的过度激活，减少糖尿病大鼠尿蛋白，延缓肾脏病变的进展。