可吸收表皮生长因子复合膜防止肌腱粘连的研究★

背景：采用液态分子生物材料作为屏障预防肌腱粘连发生，存在药物降解快、流失量大、屏障作用不理想等问题，因此研究者们越来越多的倾向于膜态屏障材料的研制开发。同时发现肌腱损伤后，腱细胞在多种内源性的生长因子作用下增殖分化，促进了肌腱的内源性愈合，但究竟哪一种因子是肌腱愈合的特异性因子，也是学者们研究的焦点之一。 目的：观察表皮生长因子复合胶原膜在预防鞘管区肌腱粘连、促进肌腱内源性愈合中的作用。 方法：将30只10月龄雄性leghorn公鸡随机分为3组，每组10只。将每只鸡的左足第三趾造成挤压撕脱伤模型，用改良Kessler缝合法缝接。断端分别包裹复合有表皮生长因子的胶原膜、单纯的胶原膜以及断端不加任何处理。术后4周，对标本进行大体观察、生物力学测试、光镜、电镜等观察。 结果与结论：表皮生长因子胶原膜组肌腱粘连程度较轻，腱缝合段内的胶原纤维数量多，以粗大的Ⅰ型胶原为主；成纤维细胞数量少，腱细胞成熟。单纯胶原膜组肌腱粘连较轻，但腱缝合段内的胶原纤维数量少，排列稀疏，以纤细的Ⅲ型胶原为主；空白对照组肌腱与周围组织粘连重，腱缝合段内的胶原纤维数量较多，排列紊乱，Ⅰ、Ⅲ型胶原交错排列。结果表明表皮生长因子来促进肌腱的内源性愈合，可降解胶原膜修复腱鞘可阻止肌腱的外源性愈合，从而达到防止肌腱粘连的目的。     

人胎羊膜移植预防肌腱粘连的实验研究

目的 探讨红花注射液保存的人胎羊膜植入防治肌腱粘连的作用机制。方法 将30只成年鸡随机分成两组,每组15只,各30根屈肌腱予以切断,左足为实验组行断端吻合后植入红花注射液保存的胎羊膜、右足为对照组、空白组分别植入未经药液保存的胎羊膜及单纯吻合。通过肉眼、光镜观察肌腱愈合假鞘形成及粘连情况,并测定生物力学、病理组织学评分及腱组织中羟脯氨酸含量。结果 1、肉眼观察：实验组左足爪肌腱完全恢复正常,腱周无粘连,对照组无明显粘连,空白组有粘连,且粘连程度较重。2、光镜观察：实验组腱周有纤维组织形成,见腱周裂隙,断端愈合,肌腱外周无明显组织粘连。对照组大致同左足爪,断端基本愈合,腱周无明显粘连。空白组无腱周裂隙形成,有较多成纤维细胞及少量单核细胞浸润。3、生物力学测定：趾关节总屈曲角度、屈趾深肌腱滑移距离比较,实验组明显大于空白组,有极显著性差异（P＜0.01）;实验组大于对照组,有显著性差异（P＜0.05）。4、病理组织学观察：实验组纤维增生量、粘连程度及范围显著小于空白组（P＜0.01）。实验组腱内纤维增生量、肌腱粘连程度及范围少于对照组（P＜0.05）; 5、腱组织中羟脯氨酸含量测定：实验组与空白组比较,有显著性差异（P＜0.05）;实验组与对照组比较,有显著性差异（P＜0.05）。结论 红花注射液保存的胎羊膜可有效防治肌腱吻合术粘连。     

脱细胞羊膜预防生物衍生肌腱修复鸡屈趾肌腱Ⅱ区缺损修复后的粘连

背景：羊膜有预防肌腱修复后粘连的作用,但存在一定的免疫排斥反应。 目的：探讨脱细胞羊膜对生物衍生肌腱修复鸡屈趾深肌腱Ⅱ区缺损修复后肌腱粘连的预防作用。 方法：分别以罗曼鸡右爪的第2,3,4趾将实验分成生物衍生肌腱组,生物衍生肌腱+脱细胞羊膜组以及自体肌腱组,建立屈趾深肌腱Ⅱ区1 cm缺损模型。以生物衍生肌腱桥接第2,3趾缺损,以自体肌腱桥接第4趾的肌腱缺损,在第3趾的生物衍生肌腱和上下吻合口周围包裹完整的脱细胞羊膜。 结果与结论：生物衍生肌腱组与自体肌腱组移植物为外源性愈合,生物衍生肌腱+脱细胞羊膜组羊膜有效地防止了成纤维细胞向修复区域内浸润,形成内源性愈合。肌腱粘连程度生物衍生肌腱+脱细胞羊膜组优于生物衍生肌腱组和自体肌腱组,生物衍生肌腱组和自体肌腱组相似,移植物周围的炎症反应生物衍生肌腱+脱细胞羊膜组>生物衍生肌腱组>自体肌腱组。证实脱细胞羊膜能通过机械性阻挡周围肉芽组织向修复区域内生长而防止外源性愈合造成的肌腱粘连。     

局部注射当归注射液对肌腱断裂愈合及粘连的影响★

目的：肌腱断裂缝合术后粘连是常见的难题之一。观察当归注射液对吻合后的家兔肌腱愈合及其周围组织粘连的影响，探索一种防止肌腱粘连同时促进肌腱愈合的方法。 方法：实验于2005-10/2006-05在湖北中医学院中心实验室完成。①实验分组及方法：选用大耳白兔30只，制备肌腱吻合模型，造模后按随机数字表法分为3组（n =10）：当归注射液组每隔5 d于腱周注射当归注射液2.0~2.5 mL/只，连续4次；生理盐水组于腱周给予等量生理盐水；空白对照组不作特殊处理。②实验评估：术后2，4，6周，分别观察肌腱色泽、吻合处的愈合形态、腱内外膜增殖情况及胶原纤维生成和排列情况，并测定羟脯氨酸含量、吻合口抗张力强度、粘连范围及肌腱滑动度。 结果：30只白兔均进入结果分析。①肌腱愈合情况：当归注射液组术后肌腱色泽正常，术后2周腱外膜增厚并桥接吻合口两端，腱内膜亦开始增殖；4周后腱内膜明显增厚，胶原纤维增多并与腱长轴基本一致排列；6周后吻合口腱纤维排列整齐，与腱轴方向一致。术后2周各组羟脯氨酸含量、吻合口抗张力强度差异均无显著性意义（P > 0.05）；当归注射液组的吻合口抗张力强度、羟脯氨酸含量高于空白对照组、生理盐水组（P < 0.05~0.01），后两组差异无显著性意义（P > 0.05）。②肌腱粘连情况：当归注射液组术后2周肌腱开始膨大并渐增大，出现薄膜样粘连；4周膨大最为明显，吻合口间隙消失，6周吻合口膨大消失，粘连膜样消失，肌腱滑动度较大，腱外形恢复正常。术后2周各组肌腱滑动度、粘连范围差异均无显著性意义（P > 0.05）；术后4，6周当归注射液组的肌腱滑动度大于空白对照组、生理盐水组（P < 0.05~0.01），粘连瘢痕范围小于空白对照组、生理盐水组（P < 0.05~0.01），后两组差异无显著性意义（P > 0.05）。 结论：当归注射液局部应用可促进肌腱的内源性愈合，加快肌腱的愈合速度，提高愈合质量；同时可通过抑制外源性愈合，减少或防止肌腱的粘连。     

生物材料修复运动性肌肉肌腱损伤：2007/2009 CNKI数据库相关文献的评价

摘要 目的：文献分析当前生物材料在修复运动性肌肉肌腱损伤方面研究现状。 方法：以“生物材料、运动损伤、修复、肌腱”为中文关键词,采用计算机检索中国期刊论文数据库2007-01/2009-12相关文章。纳入关于生物材料在修复肌肉、肌腱方面研究的文章,排除重复研究或Meta分析类文章。以19篇文献为主,重点对生物材料在修复肌肉肌腱方面研究文献进行了整理分析。 结果：组织工程研究的不断深入为运动性肌肉肌腱损伤的修复提供了可靠的生物材料和技术保障,生物材料修复运动性肌腱损伤具有与人体组织相容性好、易被组织吸收、不易感染、无粘连及断裂、无排斥等现象,表现了其优势。同时人工生物材料的妥善运用,为肌腱损伤后的快速良好康复提供了可能及保障。 结论：肌腱愈合由内、外源愈合共同作用,以内源性愈合方式为主,同时又与腱鞘、腱纽及滑液等条件有密切联系;肌腱粘连多是由于外源性愈合参与过多及腱周损坏所致。 关键词：生物材料;肌腱;损伤;修复;数据库 doi:10.3969/j.issn.1673-8225.2011.12.034     

转化生长因子β1中和抗体对转化生长因子β诱导肌腱胶原和术后粘连的影响

背景: 研究表明,转化生长因子β1在肌腱损伤愈合过程中增加了肌腱细胞胶原的合成和术后粘连的形成。 目的：观察转化生长因子β1抗体对转化生长因子β诱导的肌腱细胞胶原产生及术后粘连形成的影响。 设计、时间及地点：随机分组观察实验,于2005-09/2006-06在同济医学院实验动物中心完成。 材料：选择2~5月龄新西兰大白兔,体质量3.5~4.5 kg。转化生长因子由美国Santa Cruz B iotechnology公司提供。 方法：取兔屈指肌腱分离肌腱成纤维细胞、腱外膜细胞和腱内膜细胞,将细胞随机分成2组,实验组加入1 µg/L 转化生长因子β后,再加入0.1,0.5,1.0 mg/L转化生长因子β1中和抗体,对照组不添加任何试剂,酶联免疫吸附实验测定Ⅰ型胶原。取84只兔行中趾屈指肌腱切断吻合术,将其中36只兔随机分成3组,腱鞘内分别注入生理盐水、1.0,2.0 mg/L转化生长因子β1中和抗体,4,8周后取出肌腱行肌腱粘连检测、生物力学测定、组织学观察和扫描电镜观察;余48只兔随机分成2组,腱鞘内分别注入生理盐水和1.0 mg/L转化生长因子β1中和抗体,1,2,4,8周后取出肌腱,原位杂交方法测定肌腱转化生长因子β1和Ⅰ型胶原mRNA的表达。 主要观察指标：各组兔肌腱细胞胶原产生及术后粘连情况。 结果：酶联免疫吸附实验显示,转化生长因子β1能明显提高肌腱细胞Ⅰ型胶原的产生;转化生长因子β1抗体能降低3种细胞Ⅰ型胶原的产生,随抗体质量浓度增加,Ⅰ型胶原水平逐渐降低,且呈剂量依赖性;术后4,8周,与1.0,2.0 mg/L 转化生长因子β1组比较,生理盐水组屈趾肌腱滑动距离较短,模拟主动屈曲度明显受限(P < 0.05),最大抗断裂载荷各组间比较差异无显著性意义(P > 0.05)。扫描电镜和组织学观察结果显示,术后4,8 周生理盐水组胶原纤维排列紊乱,1.0,2.0 mg/L 转化生长因子β1组胶原纤维排列整齐。原位杂交结果显示,术后各时间点1.0 mg/L 转化生长因子β1组转化生长因子β1 和Ⅰ型胶原mRNA表达均低于生理盐水组(P < 0.05)。 结论：转化生长因子β1抗体能有效抑制转化生长因子β1在肌腱损伤修复中的作用,减少粘连形成。     

几种高分子生物材料屏障作用预防肌腱粘连的系统评价

目的：评价不同高分子生物材料预防肌腱粘连的安全性，分析不同高分子生物材料在预防肌腱粘连中对组织的损伤程度、毒副作用、对肌腱滑移功能的改善，是否影响肌腱愈合等方面的优缺点。 方法：以计算机检索方法在检索中国期刊全文数据库中(CNKI：1990/2005)检索关于不同高分子材料预防肌腱粘连的临床研究与实验研究的随机对照实验，检索词为“肌腱粘连、生物材料、屏障”。检索后对每项研究的资料结果进行提取、分析。 结果：共有11项实验571例肌腱损伤患者、7项建立肌腱损伤的动物模型的实验研究符合纳入标准，肌腱损伤术后采用高分子材料预防粘连减少外源性粘连生成率，随访结果显示应用高分子生物材料预防肌腱粘连，通过影响肌腱的内源性愈合及外源性愈合，难以在肌腱周围形成粘连带，可形成良好的周围环境，为早期控制被动活动建立基础，后期减少外源性粘连生成,改善肌腱滑移功能有良好结果，并且不影响肌腱愈合。 结论：高分子生物材料屏障作用预防肌腱粘连具有很好的临床效果，特别透明质酸钠进行鞘内注射或局部置入，不仅对肌腱有营养作用，也具有润滑作用，其防止肌腱粘连的作用是肯定的。但由于纳入试验少，证据的强度不足，其他有效性指标和安全性,有待更多证据加以评价。     

肌腱细胞转化生长因子β及其受体表达：6-磷酸果糖的抑制效应

背景：转化生长因子β在肌腱愈合与粘连形成中具有重要的作用，抑制转化生长因子β及其受体表达可起到一定的防止肌腱术后粘连作用。 目的：探讨转化生长因子β天然抑制剂6-磷酸果糖对兔屈趾肌腱腱鞘、腱外膜和腱内膜细胞转化生长因子β及其受体的影响。 方法：取兔屈趾肌腱分离培养腱鞘、腱外膜和腱内膜细胞。3种细胞分别加入6-磷酸果糖(实验组)或不加6-磷酸果糖(对照组)培养。采用酶联免疫吸附实验定量检测转化生长因子β及其受体的表达，原位杂交和免疫组织化学观察观测转化生长因子β1的表达。 结果与结论：实验组细胞转化生长因子β及其受体的表达均较对照组下降(P < 0.05)。实验组3种细胞阳性转化生长因子β1 mRNA表达率及细胞内转化生长因子β1 mRNA表达强度均较对照组明显降低(P < 0.05)。免疫组化显示加入6-磷酸果糖培养后，3种细胞转化生长因子β1表达均明显降低。     

链霉素缓释复合降解膜植入损伤肌腱局部腱周结缔组织的变化

背景：国内外学者曾用生物、非生物及药物等方法,诸如生物膜、透明质酸钠、纤维素密封胶等材料进行大量肌腱修复防粘连研究,但到目前为止尚未取得突破性进展。 目的：观察肌腱损伤局部植入链霉素复合降解膜后腱周结缔组织的增生。 方法：切断SD大鼠跟腱后,随机数字表法分为3组,分别在肌腱断端缝合处植入链霉素复合缓释降解膜、维生素C复合缓释降解膜、空白缓释降解膜。术后90 d行肌腱损伤局部组织学观察、羟脯氨酸含量和生物力学指标检测。 结果与结论：链霉素复合缓释降解膜组肌腱缝合处内部的成纤维细胞、胶原纤维均较其腱周围、维生素C复合缓释降解膜组、空白缓释降解膜组多;腱缝合处肌腱周围多为正常结构的疏松结缔组织,很少有增生的结缔组织长入肌腱内部;肌腱与周围组织分界清晰,最大抗拉强度、羟脯氨酸含量明显优于其他两组。表明链霉素复合缓释降解膜通过抑制腱周结缔组织增生,防止腱周结缔组织增生长入腱内,从而减轻或防止粘连形成。     

血管内皮生长因子对兔跟腱内源性愈合作用的量效关系

背景: 多种生长因子在肌腱愈合过程中参与调控细胞的增生和基质合成,血管内皮生长因子在组织愈合和再生中发挥重要作用。目前对于血管内皮生长因子在肌腱内源性愈合方面的研究尚不多。 目的：观察兔跟腱局部硅胶管阻隔后,应用血管内皮生长因子对跟腱内源性愈合作用的量效关系。 设计、时间及地点：随机对照动物实验,于2007-11/2008-04在中南大学湘雅二医院中心实验室完成。 材料：健康家兔48只,体质量2.5~3.0 kg,随机均分成空白组、血管内皮生长因子100,50,10 ng组,每组12只,用于建立跟腱损伤模型。 方法:切开家兔右侧跟腱表面皮肤、皮下组织,钝性分离跟腱的腓肠肌束支和比目鱼肌束支,于跟骨止点上方约2 cm处横行切断跟腱腓肠肌束支,将2 cm长硅胶管套入一侧断端,5-0缝合线改良Kessler法缝合跟腱,缝合后将硅胶管覆盖跟腱缝合处,空白组硅胶管内不加药,其他3组于手术当日及术后第7,14,21天往硅胶管内加入血管内皮生长因子100,50,10 ng。 主要观察指标：术后2,4,6周,每组各取4只家兔行大体标本肉眼观察及组织学观测。 结果：术后6周,各组硅胶管外与周围组织粘连较2,4周时减轻,需钝性或用手术刀分离一面,各组肌腱粘连程度分级差异均无显著性意义(P > 0.05),管内跟腱断端完全被牢固的新生跟腱纤维组织所连接,各组均愈合良好,血管内皮生长因子100,50,10 ng组较空白组愈合质量好(P < 0.05)。术后2,4,6周,血管内皮生长因子100,50 ng组成纤维细胞数较血管内皮生长因10 ng组多(P < 0.05),血管内皮生长因子100,50 ng组成纤维细胞计数差异无显著性意义(P > 0.05),3组胶原水平无差异,血管内皮生长因子100,50,10 ng组成纤维细胞计数及胶原水平均高于空白组(P < 0.05)。 结论：不同剂量外源性血管内皮生长因子均能促进成纤维细胞的增殖和成熟,增加胶原的分泌,促进胶原纤维的成熟,从而促进跟腱的内源性愈合。100,50 ng血管内皮生长因子对促进跟腱愈合效果要优于应用10 ng,100 ng与50 ng之间无明显差异。