巨噬细胞集落刺激因子对DEL细胞增殖作用的研究

目的 :在动脉粥样硬化等血管性疾病中 ,作为一种突出的特征 ,动脉管壁血管平滑肌细胞 (ｖａｓｃｕｌａｒｓｍｏｏｔｈｍｕｓｃｌｅｃｅｌｌ,ＶＳＭＣ)的异常积聚常伴随巨噬细胞的存在。ＶＳＭＣ增殖是动脉粥样硬化、高血压和血管再狭窄等常见血管病变的共同病理表现 ,对于ＶＳＭＣ过度增殖的机制研究已引起广泛重视。有实验证明 ,ＶＳＭＣ和巨噬细胞均合成且表达、分泌巨噬细胞集落刺激因子 (ｍａｃｒｏｐｈａｇｅｃｏｌｏｎｙ -ｓｔｉｍｕｌａｔｉｎｇｆａｃｔｏｒ,ＭＣＳＦ) ,并表达ＭＣＳＦ的受体 ,现已肯定 ,在血管动脉粥样硬化损害的进…     

双重标记法定性检测AS斑块中的凋亡细胞

长期以来 ,人们一直认为动脉粥样硬化(ａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ ,ＡＳ)是一种以平滑肌细胞 (ｓｍｏｏｔｈｍｕｓｃｌｅｃｅｌｌ ,ＳＭＣ)增殖和变性为主要病变的疾病 ,但近年的研究表明 ,细胞凋亡作为一种生理性死亡形式不仅在正常的血管内存在 ,而且以高于正常情况下的凋亡率参与了ＡＳ的发病过程 ,并调节着动脉管壁中ＳＭＣ的数量[1] 。目前 ,细胞凋亡与ＡＳ关系的研究已成为探索ＡＳ发病机制的一条新途径。尽管已有大量的形态学证据支持细胞凋亡参与ＡＳ发生发展的观点 ,但由于ＡＳ斑块组成的相对复杂性 ,要阐明ＡＳ血管壁中凋亡…     

大鼠局部脑缺血区VCAM-1表达和单核/巨噬细胞浸润的研究

正常生理情况下血管内皮细胞不表达或者弱表达ＶＣＡＭ 1,但在炎症病灶区和免疫反应时产生的细胞因子可诱导血管内皮细胞ＶＣＡＭ 1的表达 ,从而导致单核 /巨噬细胞的浸润。研究证实 ,ＶＬＡ 4(ｖｅｒｙｌａｔｅａｐｐｅａｒｉｎｇａｎｔｉｇｅｎ 4)抗体能完全阻滞ＶＣＡＭ 1依赖性的细胞 细胞间的粘附。正常脑内存在少量ＥＤ2阳性单核/巨噬细胞。而在自发性高血压鼠和老龄鼠其数量增加。细胞因子ＩＬ 1(ｉｎｔｅｒ ｌｅｕｋｉｎ 1)和ＴＮＦ α(ｔｕｍｏｒｎｅｃｒｏｓｉｓｆａｃｔｏｒ α)对单核 /巨噬细胞的浸润起调节作用。本次实验 ,旨…     

肿瘤抗原诱导的骨髓基质细胞活化后凋亡

目的　活化后凋亡（ａｃｔｉｖａｔｉｏｎｉｎｄｕｃｅｄ ａｐｏｐｔｏｓｉｓ） 被认为是免疫应答负向调控（ｄｏｗｎｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ） 的一种重要方式,抗原提呈细胞在完成了抗原提呈功能后是否也经历一个自身活化后凋亡的过程,目前尚无定论。方法　以巨噬细胞型骨髓基质细胞（ｍａｃｒｏｐｈａｇｅ ｌｉｋｅ ｓｔｒｏｍａｌ ｃｅｌｌｓ） 为模型,探讨抗原提呈细胞是否具有自身活化后凋亡的现象。结果　经 Ｇ Ｍ Ｃ Ｓ Ｆ 诱导的 Ｂ Ｍ Ｓ Ｃ 高表达多种膜表面分子,包括 Ｍ Ｈ ＣⅠ、 Ｍ Ｈ ＣⅡ、 Ｂ７２ 、 Ｖ Ｃ Ａ Ｍ１ 、 Ｃ Ｄ１４ 等,显著表达巨噬细胞的标志 Ｆ４／８０ 和树突状细胞的标志 Ｎ Ｌ Ｄ Ｃ１４５ ;对同种异体淋巴细胞的促增殖能力显著增强,表明 Ｂ Ｍ Ｓ Ｃ 具有抗原提呈细胞的分子和细胞基础与功能活化特征。进一步研究发现, Ｂ Ｍ Ｓ Ｃ 经 Ｆ Ｂ Ｌ３ 肿瘤抗原刺激后１８ 小时,上述多种免疫分子表达明显下调,而 Ｆａｓ Ｌ 分子明显升高,透射电镜显示其具有明显的凋亡特征。结论　骨髓基质细胞经肿瘤抗原诱导后存在凋亡现象,其具体机制和免疫调节意义有待进一步探讨。     

血管平滑肌细胞增殖与迁移的机制研究

目的 :研究血管平滑肌细胞 (ＶＳＭＣｓ)增殖与迁移在动脉粥样硬化 (ＡＳ)的早期、中期或ＡＳ进展期或血管事件的发病机制中的作用。方法 :采用改良的Ｂｏｙｄｅｎ小室法检测ＶＳＭＣｓ的迁移效应 ;以ＭＴＴ法、3 Ｈ ＴｄＲ掺入法、3 Ｈ 脯氨酸标记法和ＶＳＭＣｓ计数评价ＶＳＭＣｓ的增殖效应 ;将培养的ＶＳＭＣｓ分为 5组 :2 %胎牛血清 (2 %ＦＣＳ)组、ＡｎｇⅡ组(其浓度为 10 -10 ～ 10 -6Ｍｏｌ/Ｌ)、Ｌｏｓａｒｔａｎ组 (其浓度为10 -7～ 10 -5Ｍｏｌ/Ｌ)、ＭＣＰ 1ｍｃＡｂ组 (终浓度为 10 μｇ/ｍｌ)和阳性对照组 (含 5 %的酵母多糖…     

糖基化终产物增加人外周血单核细胞对单核 细胞趋化蛋白-1的表达

动脉粥样硬化 (Ａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ ,ＡＳ)是严重危害人类健康的疾病 ,糖尿病患者并发ＡＳ的可能性是正常人的 3～ 4倍。高血糖状态下蛋白质发生的非酶糖基化可使其最终形成不可逆的糖基化终产物 (Ａｄｖａｎｃｅｄｇｌｙｃｏｓｙｌａｔｉｏｎｅｎｄｐｒｏｄｕｃｔｓ,ＡＧＥｓ)。ＡＧＥｓ可与单核细胞等多种细胞上受体结合 ,加速动脉粥样斑块的形成。单核细胞粘附于内皮并透入内皮下形成泡沫细胞是ＡＳ的早期事件。这一过程与单核细胞趋化蛋白- 1 (Ｍｏｎｏｃｙｔｅｃｈｅｍｏａｔｔｒａｃｔａｎｔｐｒｏｔｅｉｎ - 1 ,ＭＣＰ -…     

血管平滑肌细胞增殖与迁移的机制研究

目的 :血管平滑肌细胞 (ＶＳＭＣｓ)增殖与迁移在动脉粥样硬化 (ＡＳ)的早期、中期或ＡＳ进展期或血管事件的发病机制中起着关键性作用。方法 :采用改良的Ｂｏｙｄｅｎ小室法检测ＶＳＭＣｓ的迁移效应 ;以ＭＴＴ法、[3Ｈ]-Ｔｄｒ掺入法、[3Ｈ]-脯氨酸标记法和ＶＳＭＣｓ计数评价ＶＳＭＣｓ的增殖效应 ;将培养的ＶＳＭＣｓ分为 5组 ;2 %胎牛血清 ( 2 %ＦＣＳ)组、ＡｎｇⅡ组 (其浓度为 1 0 - 1 0 ～ 1 0 - 6ｍｏｌ/Ｌ)、Ｌｏｓａｒｔａｎ组 (其浓度为 1 0 - 7～ 1 0 - 5ｍｏｌ/Ｌ)、ＭＣＰ - 1ｍｃＡｂ组 (终浓度为 1 0 μｇ/ｍＬ)和阳性对照…     

血管平滑肌细胞凋亡中c-Fos蛋白的持续性表达

血管平滑肌细胞凋亡中ｃ－Ｆｏｓ蛋白的持续性表达戴云张兵（第一军医大学组胚教研室）血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）的调亡可能参与血管的发生、重塑及某些心血管疾病的病理过程。本文以低血清条件诱导体外培养ＶＳＭＣ的调亡，初步探讨了其与ｃ－Ｆｏｓ蛋白表达的关系。酶...     

MCP-1 mcAb和Losartan拮抗Ang Ⅱ介导的VSMCs的增殖与迁移效应的实验研究

目的探讨单核细胞趋化蛋白－１单克隆抗体（ＭＣＰ－１－ｍｅＡｂ）或Ｌｏｓａｒｔａｎ 拮抗血管紧张素Ⅱ（ＡｕｇⅡ）介导的血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣｓ）增殖与迁移效应的可能性，为防治动脉硬化提供一定的理论依据。方法采用改良的Ｂｏｙｄｅｎ小室法检测 ＶＳＭＣｓ的迁移效应；以 ＭＴＴ法、~３Ｈ－ＴａＲ掺入法、~３Ｈ－脯氨酸标记法和ＶＳＭＣｓ计数评价ＶＳＭＣｓ的增殖效应。将培养ＶＳＭＣｓ分为 ５组； ２％胎牛血清（ ２％ＦＣＳ）组、 ＡｕｇⅡ组（其浓度为 １０－１０～１０－６ｍｏｌ／Ｌ）、Ｌｏｓａｒｔａｎ组（其浓度为 １０－７～１０－５ｍｏｌ／Ｌ）、ＭＣＰ－ｌｍｃＡｂ组（终浓度为 １０μｇ／ｍｌ）和阳性对照组（含５％的酵母多糖活化血清）。结果（１） ＡｕｇⅡ具有剂量依赖性的促进 ＶＳＭＣｓ的增殖与迁移效应；（２） ＭＣＰ－１ｍｃＡｂ或 Ｌｏｓａｒ－ｔａｎ能有效地拮抗ＡｕｇⅡ介导的ＶＳＭＣｓ增殖与迁移效应。结论 ＭＣＰ－１ｍｃＡｂ或Ｌｏｓａｒｔａｎ对动脉硬化性疾病可能具有较大的应用前景。     

M-CSF对RAW264.7细胞抗氧化系统的影响

目的：探讨巨噬细胞集落刺激因子（Ｍａｃｒｏｐｈａｇｅ ｃｏｌｏｎｙ－ｓｔｉｍｕｌａｔｉｎｇ ｆａｃｔｏｒ,Ｍ－ＣＳＦ）抗单核／巨噬细胞氧化损伤的作用机理,揭示Ｍ－ＣＳＦ对小鼠巨噬细胞系ＲＡＷ２６４．７细胞抗氧化系统影响。方法：以Ｌ９２９细胞条件培养液为Ｍ－ＣＳＦ来源,采用酶活笥测定等生化测定方法,考察Ｍ－ＣＳＦ细胞内还原型谷胱甘肽含量、脂质过氧化物含量、过氧化氢酶活性、谷胱甘肽还原酶活性等检测指标     

柯萨奇B3病毒引起心肌细胞凋亡的初步探索

目的 以病毒性心肌炎（ｖｉｒａｌ ｍｙｏｃａｒｄｉｔｉｓ,ＶＭＣ）细胞感染模型为基础,研究柯萨奇Ｂ３病毒（ＣｏｘｓａｃｋｉｅＢ３ ｖｉｒｕｓ,ＣＶＢ３）感染与心肌细胞凋亡的关系。方法 在嗜鼠心肌柯萨奇Ｂ３病毒（ＣＶＢ３ｍ）感染心肌细胞后２４ｈ电镜观察细胞超微结构的改变,同时取细胞悬液以流式细胞仪检测“凋亡峰”,了解细胞亡率,并采用酶联免疫分析法（ＥＬＩＳＡ）定量测定ＣＶＢ３ｍ病毒感染后１、２、４、     

通过受体介导法将核酶特异导入肝细胞以阻断HBV蛋白表达的初步研究

应用半乳糖末端糖蛋白受体（ＡＳＧＰ－Ｒ）介导的内吞作用，将外源基因导入真核细胞，与脂质体介导的转染和细胞表面转铁蛋白受体（Ｔｆ－Ｒ）介导的内吞作用相比，虽然三种方式均能有效介导外源基因的转移，但ＡＳＧＰ－Ｒ法具有肝细胞特异性，而脂质体法和Ｔｆ－Ｒ法不具此特性。将克隆于真核表达载体的针对乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）ｍＲＮＡＰｒｅＣ／Ｃ区的核酶质粒ｐＣＭＶ－Ｒｉｐｃ特异性导入肝细胞并发挥作用，通过酶联免疫吸附法（ＥＬＩＳＡ）检测细胞培养液中的乙型肝炎表面抗原（ＨＢｓＡｇ）和ｅ抗原（ＨＢｅＡｇ），评价核酶在细胞水平对ＨＢＶ抗原表达的阻断作用。结果表明当核酶质粒ｐＣＭＶ－Ｒｉｐｃ与ＨＢＶ抗原表达质粒ｐＵＣ－２ＨＢＶ共转染ＨｅｐＧ２细胞时，核酶对ＨＢｓＡｇ和ＨＢｅＡｇ表达的抑制率分别为５５．２９％和６８．７３％。     

线粒体与细胞凋亡

线粒体是所有真核细胞内重要的细胞器 ,是ＡＴＰ生成的主要部位 ,对维持细胞能量代谢和正常功能活动起重要作用。新近研究发现 ,线粒体内包含一些与细胞凋亡有密切关系的物质 :如ｐｒｏ ｃａｓｐａｓｅ ,细胞色素Ｃ (ＣｙｔＣ) ,Ｓｍａｃ Ｄｉａｂｌｏ ,ＡＩＦ等。在一定因素的刺激下 ,线粒体膜的通透性增加 ,这些物质可由线粒体释出 ,诱导细胞凋亡。因此线粒体在细胞凋亡的发生中起重要作用 ,被形象地称为细胞凋亡的“燃烧室”。大多数细胞发生凋亡时均伴有 :(1)胞浆酸化 ;(2 )线粒体结构与功能障碍 ;(3)Ｃａｓｐａｓｅ活化。细胞发生凋亡…     

多发性硬化患者血清和脑脊液中可溶性VCAM—1的变化

多发性硬化 (ｍｕｌｔｉｐｌｅｓｃｌｅｒｏｓｉｓＭＳ)是中枢神经系统的炎性脱髓鞘疾病 ,已有研究显示可溶性血管细胞粘附分子 1(ｓＶＣＡＭ 1)在ＭＳ患者中会发生变化 ,本研究目的是观察ｓＶＣＡＭ 1在ＭＳ患者血清和脑脊液 (ＣＳＦ)中的变化及与临床的关系。1　对象与方法1 1　研究对象　ＭＳ组 :共 19例 ,其中男 7例 ,女 12例 ;年龄 18～ 53岁 ,平均 32 9± 9 6岁 ,缓解期 3例 ,复发期 16例 ;均符合Ｐｏｓｅｒ关于ＭＳ的诊断标准[1] 。病人处于复发期的标准 :在平稳期至少 30ｄ后 ,出现新的症状或旧的症状加重持续 2 4ｈ至 6个月 ,不…     

LIGHT 一个新的非CD28依赖的T细胞共刺激分子

ＬＩＧＨＴ(ｆｏｒｈｏｍｏｌｏｇｏｕｓｔｏｌｙｍｐｈｏｔｏｘｉｎｓ ,ｅｘｈｉｂｉｔｓｉｎ ｄｕｃｉｂｌｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ,ａｎｄｃｏｍｐｅｔｅｓｗｉｔｈＨＳＶｇｌｙｃｏｐｒｏｔｅｉｎＤｆｏｒＨＶＥＭ ,ａｒｅｃｅｐｔｏｒｅｘｐｒｅｓｓｅｄｂｙＴｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓ) 〔1〕是1998年发现的ＴＮＦ超家族成员 ,又称为ＨＶＥＭ Ｌ(ｈｅｒｐｅｓｖｉｒｕｓｅｎｔｒｙｍｅｄｉａｔｏｒ ｌｉｇａｎｄ) 〔2〕 是肿瘤坏死因子超家族的第 14个成员 (ＴＮＦＳＦ14)。由于ＬＩＧＨＴ同时具有诱导肿瘤细胞凋亡和共刺激Ｔ细胞活化的…     

丙型肝炎病毒核心区蛋白对HepG2细胞凋亡的影响

已有越来越多的证据表明肝细胞和外周血淋巴细胞凋亡在丙型肝炎的发生和慢性化过程中起着重要作用。ＨＣＶ核心区 (ＨＣＶ Ｃ)具有较强的免疫调节功能 ,但ＨＣＶ Ｃ蛋白究竟是促进细胞凋亡还是抑制细胞凋亡目前还有争论。目前尚未见有关ＴＲＡＩＬ(ＴＮＦｒｅｌａｔｅｄａｐｏｐｔｏｓｉｓｉｎｄｕｃｉｎｇｌｉｇａｎｄ)所介导细胞凋亡在丙型肝炎致病过程中所起作用的研究报道。本实验主要研究ＨＣＶ Ｃ蛋白对ＨｅｐＧ2细胞凋亡的影响。通过基因重组技术构建包括ＨＣＶ Ｃ的重组真核表达质粒 ,将重组真核表达质粒经脂质体介导稳定转染肝癌细…     

线粒体在B细胞受体介导的凋亡过程中的关键性作用

细胞凋亡对组织发育和自身稳定具有重要调节作用。为了阐明Ｂ细胞受体 (ＢＣＲ)介导的凋亡机制 ,研究者用人Ｂｕｒｋｉｔｔ淋巴瘤细胞株ＢＬ6 0做为研究生发中心Ｂ细胞耐受的实验模型。实验结果指出 :①ＴＮＦ相关凋亡诱导配体 (ＴＲＡＩＬ)的两种受体 ,即ＴＲＡＩＬ Ｒ1 、 Ｒ2 ,以及ＣＤ95、ＴＮＦ Ｒ1 、 Ｒ2 和ＴＮＦ Ｒ相关凋亡介导蛋白 (ＴＲＡＭＰ)等死亡受体或ＴＮＦ受体 ,均不参与ＢＣＲ介导的ＢＬ6 0细胞凋亡 ;②上述死亡受体或ＴＮＦ受体介导的凋亡依赖于Ｃａｓｐａｓｅ 8的早期活化 ,随后发生Ｃａｓｐａｓｅ 3等的活化。而该研…     

ROS对小鼠腹腔巨噬细胞凋亡的影响

目的 探讨ＲＯＳ影响巨噬细胞凋亡的机制。方法 激光扫描共聚集显微术,流式细胞术和荧光标记技术等,结果（１）凋亡巨噬细胞内ＤＡＤＰＨ氧化酶活性急剧降低使得胞内ＲＯＳ水平快速上降;（２）ＲＯＳ清除剂促进地塞米松诱导的巨噬细胞凋亡;（３）ＰＫＣ促进巨细胞凋亡和ＲＯＳ急剧减少;ｃＡＭＰ抑制巨噬细胞凋亡和ＲＯＳ急剧减少。结论 （１）ＲＯＳ抑制地塞米松诱导的巨噬细胞凋亡;（２）ＰＫＣ,ｃＡＭＰ等因素通过影响地     

细胞间粘附分子-1和血管细胞间粘附分子-1的结构与功能

细胞粘附分子（ｃｅｌｌ　ａｄｈｅｓｉｏｎ　ｍｏｌｅｃｕｌｅ，　ＣＡＭ）是一类调节细胞与细胞、细胞与细胞外基质（ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ　ｍａｔｒｉｘ，　ＥＣＭ）间相互结合、起粘附作用的膜表面糖蛋白。细胞间粘附分子－１（ｉｎｔｅｒｃｅｌｌｕｌａｒ　ａｄｈｅｓｉｏｎ　ｍｏｌｅｃｕｌａｒ－１，　ＩＣＡＭ－１）和血管细胞间粘附分子－１（ｖａｓｃｕｌａｒ　ｃｅｌｌ　ａｄｈｅｓｉｏｎ　ｍｏｌｅｃｕｌａｒ－１，　ＶＣＡＭ－１）均属于ＣＡＭ中免疫球蛋白超家族（ｉｍｍｕｎｏｇｌｏｂｕｌｉｎ　ｓｕｐｅｒｆａｍｉｌ…     

UV-C诱导的体外凋亡SMC内Bcl-2蛋白表达的研究

目的 观察经ＵＶ－Ｃ照射后的凋亡ＳＭＣ内Ｂｃｌ－２蛋白表达的情况。方法 应用组织贴块法进行体外ＳＭＣ培养，ＳＰ免疫组织化学技术和图像分析技术检测经ＵＶ－Ｃ照射后的ＳＭＣ内Ｂｃｌ－２蛋白的表达。结果 ＵＶ－Ｃ照射体外ＳＭＣ后，细胞出现典型的凋亡形态学和生化指标的改变；凋亡ＳＭＣ胞浆内Ｂｃｌ－２表达下降和出现胞浆内Ｂｃｌ－２的迁移和再分布入核。结论 ＵＶ－Ｃ照射可引起体外ＳＭＣ凋亡，且Ｂｃｌ－２可能参