酶联免疫印渍法检测脑囊虫病人循环抗原的研究

用ＭｃＡｂ－ＥＬＩＢ检测脑囊虫病人血清中ＣＡｇ，并与ＤＡＢＳ－ＥＬＩＳＡ进行了比较，其阳性率分别为８９．２％和８１．１％。４０例正常人，３０例单纯绦虫病患者及２９例包虫病人血清，用ＭｃＡｂ－ＥＬＩＢ检测囊虫ＣＡｇ，除１例包虫病患者呈轻度交叉反应外均为阴性。结果表明本法具有高特异性与敏感性。对５７例接受阿苯达唑治疗的脑囊虫病人，用ＭｃＡｂ－ＥＬＩＢ法及ＤＡＢＳ－ＥＬＩＳＡ于治疗后１年内检测血清中ＣＡｇ，累计检出率分别为４３．９％及２２．８％。表明ＭｃＡｂ－ＥＬＩＢ法测ＣＡｇ具有更好的疗效考核价值。     

金标特异抗原单克隆抗体斑点免疫金染色用于检测脑囊虫…

应用金标记猪囊尾蚴囊液抗原为探针，以抗猪囊尾蚴抗原的ＭｃＡｂ为联桥，建立了非常规Ｄｏｔ－ＩＧＳ用于检测脑囊虫病患者ＣＡｇ的方法，用４Ｇ２ＭｃＡｂ检测８４例脑囊虫病人，１３例检出ＣＡｇ，阳性率为９２．８６％。检测其他疾病患者３６例，均为阴性。用４Ｇ２与１Ｆ１１株ＭｃＡｂ可分别检出最小抗原量为１ｎｇ／ｍｌ和０．２５ｎｇ／ｍｌ。本法敏感、特异、操作简单，可用于脑囊虫病的诊断。     

单克隆抗体Dot-ABC-ELISA检测包虫病人循环抗原

作者用活化生物素标记抗细粒棘球蚴抗原单克隆抗体（ＭｃＡｂ）１Ｄ８，以聚氯乙烯（ＰＶＣ）白色薄膜凹孔板为载体，建立了ＭｃＡｂ－Ｄｏｔ－ＡＢＣ－ＥＬＩＳＡ检测包虫病人循环抗原的方法。测定人源包虫囊液抗原的灵敏度为６ｎｇ／３μｌ样品．９２例确诊包虫病人血清循环抗原检出率为７６．１％（７０／９２），在抗体阳性者中循环抗原检出率为８１．６％（６２／７６），抗体阴性者中检出率为５０％（８／１６）。１００份正常人和１２２份羹虫病等其它寄生虫病人血清，仅１份囊虫病人血清出现交叉反应．测定循环抗原对包虫病人，尤其是血清抗体阴性者的免疫诊断有重要价值．本法简便、快速，适于推广．     

用Sepharose 4B提纯猪囊尾蚴尿素溶性抗原和水溶性抗原的应用

本实验用Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ ４Ｂ分别提纯猪囊尾蚴尿素溶性抗原和水溶性抗原，各自分别分离出两组蛋白质：Ｓ１Ａｇ－ｕ，Ｓ２Ａｇ－ｕ和Ｓ１Ａｇ－Ｗ，Ｓ２Ａｇ－ｗ，用ＥＬＩＳＡ方法检测囊尾蚴病人，包虫病人和肝吸虫病人血清。显示：血清１：４００稀释时，囊尾蚴病人血清（６０例），Ｓ１Ａｇ－ｕ，Ｓ２Ａｇ－ｕ和Ｓ１Ａｇ－ｗ，Ｓ２Ａｇ－ｗ的阳性率分别为９８．３％，８８．３％和８１．６％，７６．７％，包虫病人血清（３     

单克隆抗体Dot－ELISA检测包虫病人循环抗原的研究

用单克隆抗体－斑点酶联免疫吸附试验（ＭｃＡｂ－Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ）检测４６例确诊包虫病患者血清循环抗原,３５例呈阳性反应,阳性率为７６．０９％。１４例猪囊虫病人,５０例健康人血清均为阴性,上述结果表明本方法具有较好的敏感性和特异性,而且操作简便,试剂用量少,肉眼判断结果,可用于包虫病的诊断和疗效考核。     

应用特异性单克隆抗体测定脑囊虫病患者血清及脑脊液中循…

应用特异单克隆抗体作ＤＯＴ－ＥＬＩＳ和竞争ＥＬＩＳＡ检测６５例脑囊虫病患者血清和脑脊液中前淳离循环Ａｇ（ＦＣＡｇ）和循环免疫复合物抗原（ＣＩＣＡｇ）。血清ＦＣＡｇ阳性率分别为８１．３％和８１．５％，ＣＩＣＡｇ阳性率为９５．４％和９２．３％（０．１９－１２０．０ｇ／ｍｌ）脑脊液测定ＦＣＡｇ阳性率为７８．５％和８６．２％，ＣＩＣＡｇ阳率率为９０．８％和９３．８％。结果表明检测总循环抗的有利于提高脑囊虫     

检测血清和脑脊液中囊尾蚴循环抗原诊断脑囊虫 …

目的：用抗血清检测脑囊虫病患者血清和脑脊液（ＣＳＦ）中囊尾蚴循环抗原（ＣＡｇ）诊断脑囊虫病。方法：用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ提纯的蛋白质分子量为６４ｋＤａ、５３ｋＤａ、３２ｋＤａ～３０ｋＤａ的囊尾蚴抗原分别免疫家兔,制备相应的抗血清,以双夹心ＥＬＩＳＡ 检测患者血清和ＣＳＦ中ＣＡｇ。结果：抗原体５３ｋＤａ抗原抗血清对３２例脑囊虫病活动型患者血清和ＣＳＦ中ＣＡｇ的检出率分别为９３．８％和９１．７％,１６例脑     

应用McAb法检测包虫病人尿液抗原

用ＭｃＡｂ－Ｓａｎｄｗｉｃｈ－ＥＬＩＳＥ（夹心法）及ＭｃＡｂ－Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ（点免疫法）同步检测了４６例包虫病人及４２例正常人的不同抗原样品,结果表明：ＭｃＡｂ夹心法对患血清,尿液抗原阳性检出率分别为：８０．４３％、７８．２６％,明显高于对照组（Ｐ〈０．０５）,且血清与尿液抗原检测结果无差别（Ｐ〉０．０５）,具有相关性（Ｐ〈０．０５）;点免疫法抗原检出率分别为７３．９１％、５８．７９％。两法     

识别血吸虫成虫多肽表位单克隆抗体细胞株的建立及用…

作者获得１株特异的抗血吸虫成虫２０－２４ｋＤａ蛋白多肽表位的杂交瘤细胞株，分泌ＭｃＡｂ为ＩｇＧ１，腹水效价１．２×１０＾６。将ＳｊＡ１１１ ＭｃＡｂ－ＨＲＰ结合物用Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ检测４９９例慢性血吸虫病患者的循环抗原，阳性者３９０例（７８．１６％）；２５例肺吸虫病人，３６例华支睾吸虫病人及１３２例正常人血清中，仅１例肺吸虫病人出现交叉反应。ＣＡｇ的检出率和阳性血清滴度倒数的几何均值（ＧＭＲＴ）     

18kDa抗原诊断泡型包虫病的评价

目的：评价１８ｋＤａ抗原在泡型包虫病（ＡＥ）诊断中的价值。方法：用免疫印渍法检测３３例泡型包虫病、６９例囊型包虫病（ＣＥ）、３０例囊虫病和８２例健康人血清对泡型棘球蚴（Ｅｍ）和囊型棘球蚴（Ｅｇ）原头节１８ｋＤａ抗原的抗体反应。同时用羊包囊液抗原常规ＥＬＩＳＡ法检测上述血清。结果：ＥＬＩＳＡ试验,ＡＥ血清阳性率为９３．９％、ＣＥ为８５．５％、囊虫病为５０％、健康人为６．１％。显示３种患者血清存在较强的交叉反应。免疫印渍试验,两种原头节的１８ｋＤａ抗原对ＡＥ血清阳性反应均为９０．９％、ＣＥ分别为１０．１％和１３％、囊虫病患者为１３．３％和１６．７％。与健康人血清不发生反应。结论：１８ｋＤａ抗原可以有效的鉴别两型包虫病。     

同步检测血清和唾液中的棘球蚴抗原及其特异性抗体

应用ＭｃＡｂ－Ｓａｎｄｗｉｃｈ－ＥＬＩＳＡ（夹心法）及Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ（点免疫法）同步检测了包虫病病人的不同抗原、抗体样品,结果表明ＭｃＡｂ夹心法对患血清、唾液抗原阳性检出率分别为８０．４３％和６０．８７％;点免疫法对血清、唾液抗体检出率为８６．９６％和７８．２６％,均明显高于对照组（Ｐ〈０．０５）,对抗原,抗体的同步检测结果进行显性及相关性分析,得出血清抗原检测可取代以往的血清抗体检测,唾     

识别血吸虫成虫多肽表位单克隆抗体细胞株的建立及用于检测循环抗原的研究

作者获得１株特异的抗血吸虫成虫２０－２４ｋＤａ蛋白多肽表位的杂交瘤细胞株（ＳｊＡ１１１）。分泌ＭｃＡｂ为ＩｇＧ１,腹水效价１．２×１０６。将ＳｊＡ１１１ＭｃＡｂ－ＨＲＰ结合物用Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ检测４９９例慢性血吸虫病患者的循环抗原（ＣＡｇ）,阳性者３９０例（７８．１６％）;２５例肺吸虫病人,３６例华支睾吸虫病人及１３２例正常人血清中,仅１例肺吸虫病人出现交叉反应。ＣＡｇ的检出率和阳性血清滴度倒数的几何均值（ＧＭＲＴ）随着每ｇ粪便虫卵数（ＥＰＧ）的增加而递增。吡喹酮治疗后各期病人粪孵阴性者ＣＡｇ的转阴率：半年为７５．５０％（１１４／５１）,１年为７３．６８％（８４／１１４）,１年半为８８．０４％（１０３／１１７）。     

Dot-ELISA的囊虫病免疫诊断价值

本文用纯化糖蛋白抗原对１１６ 例囊虫病人血清进行Ｄｏｔ－ ＥＬＩＳＡ检测,阳性率为９６．８％ （１１２／１１６）,３６ 例健康人血清皆为阴性,２７ 例肝吸虫病与包虫病人血清除２例外均为阴性,并以ＩＨＡ和ＥＬＩＳＡ作对照,结果表明Ｄｏｔ－ ＥＬＩＳＡ 在３种方法中敏感性和特异性较高     

western blot 法诊断囊虫病的应用研究

目的：探讨四种猪囊尾蚴（Ｃｙｓｔｉｃｅｒｃｕｓｃｅｌｕｌｏｓａｅ）特异性抗原ｃＣ１、ｃＣ２、ｃＰ１、ｃＨ１（分子量分别为２８ｋＤａ、１８ｋＤａ、１４ｋＤａ、３４ｋＤａ）混合应用诊断人囊虫病的价值。方法：以猪囊尾蚴ｃＤＮＡ表达文库中筛选出的β－半乳糖苷酶－猪囊虫特异性抗原ｃＤＮＡ编码的融合蛋白（ｆｕｓｉｏｎｐｒｏｔｅｉｎｓ，ＦＰ）为抗原，作简化的Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ（ｉｍｐｒｏｖｅｄＷｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ，ＩＷＢ）分析，检测１０７例囊虫病、４０例华支睾吸虫病、２４例包虫病和３４例健康人血清对融合蛋白的反应。同时应用粗制抗原（ｃｒｕｄｅａｎｔｉ－ｇｅｎ，ＣＡ）进行ＥＬＩＳＡ、ＩＨＡ对比检测。结果：在简化Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ检测中，ＦＰ被１０７例囊虫病患者血清中９４例（８７．９％）血清所识别，与华支睾吸虫病、包虫病患者及健康人血清无交叉反应，特异性为１００％。以粗制抗原作ＥＬＩＳＡ、ＩＨＡ检测囊虫病人血清中的ＩｇＧ抗体阳性率分别为８４．１％和７４．８％，与华支睾吸虫病患者血清存在交叉反应，假阳性率分别为２．５％、１２．５％；与包虫病患者血清存在交叉反应，假阳性率分别为８．３％、１６．７％；与健康人血清也存在交叉反应, 假阳性率分别为8. 8%、11. 8% 。结论: β－半乳糖苷酶2猪囊尾蚴FP 诊断囊虫病具有较高敏感性和高度的特异性。     

McAb4F8、McAb1F11与囊尾蚴抗原作用免疫印渍分析

将猪囊尾蚴囊液抗原（ＣＣＦＡ）和脑囊虫病病人脑脊液（ＰＣＳＦ）进行ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳分析，发现在ＣＣＦＡ中有１４条蛋白带，范围在２８～７６ｋＤａ。脑囊虫病病人ＣＳＦ中有６条蛋白带，范围在３３～８３ｋＤａ。用ＣＣＦＡ和ＰＣＳＦ与ＭｃＡｂ４Ｆ８和ＭｃＡｂ１ＦＩ１１免疫印迹试验，证明ＣＣＦＡ中５０、５３、６３和７０ｋＤａ蛋白带与两株ＭｃＡｂ均有反应，另一条蛋白带３３ｋＤａ仅能被ＭｃＡｂ１Ｆ１１识别。ＰＣＳＦ中的６条蛋白带中有３条（５３，６３和７０ｋＤａ）与２株ＭｃＡｂ均有反应，另一条蛋白带３３ｋＤａ仅与ＭｃＡｂ１Ｆ１１反应。２例对照脑脊液中未出现反应带。结果显示ＭｃＡｂ４Ｆ８和ＭｃＡｂ１Ｆ１１均抗ＣＣＦＡ和ＰＣＳＦ中的主要蛋白带。     

检测血清和脑脊液中囊尾蚴循环抗原诊断脑囊虫病的研究

目的：用抗血清检测脑囊虫病患者血清和脑脊液（ Ｃ Ｓ Ｆ）中囊尾蚴循环抗原（ Ｃ Ａｇ）诊断脑囊虫病。方法：用 Ｓ Ｄ Ｓ Ｐ Ａ Ｇ Ｅ提纯的蛋白质分子量为 ６４ ｋ Ｄａ、５３ ｋ Ｄａ、３２ ｋ Ｄａ～３０ ｋ Ｄａ 的囊尾蚴抗原分别免疫家兔,制备相应的抗血清,以双夹心 Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ 检测患者血清和 Ｃ Ｓ Ｆ中 Ｃ Ａｇ。结果：抗５３ ｋ Ｄａ 抗原抗血清对 ３２ 例脑囊虫病活动型患者血清和 Ｃ Ｓ Ｆ中 Ｃ Ａｇ 的检出率分别为９３．８％ 和９１．７％ ,１６ 例脑囊虫病非活动型患者仅１ 例 Ｃ Ｓ Ｆ Ｃ Ａｇ 阳性。 Ｃ Ａｇ 检出率明显高于用抗６４ ｋ Ｄａ、３２ ｋ Ｄａ～３０ ｋ Ｄａ 囊尾蚴抗原抗血清检测的结果（ Ｐ＜ ０．０５）。结论：抗５３ ｋ Ｄａ 囊尾蚴抗原抗血清检测活动型脑囊虫病患者血清和 Ｃ Ｓ Ｆ中的 Ｃ Ａｇ 敏感性较高,特异性较强,可用于活动型脑囊虫病的诊断和疗效考核。     

Dot-IGSS,Dot-IGS和Dot-ELISA检测脑脊液中循环抗原诊断脑囊虫病的比较研究

应用自制的直径２０ｎｍ的胶体金标记ＧＡＲ－ＩｇＧ，以斑点免疫金银染色法（Ｄｏｔ－ＩＧＳＳ）、斑点免疫金染色法（Ｄｏｔ－ＩＧＳ）和Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ三种方法，同时检测９９例脑囊虫病人脑脊液（ＣＳＦ）中循环抗原（ＣＡｇ），阳性率分别为９４．９５％、９３．９４％和９２．９３％。检测５１份非囊虫病患者和６２例其他脑部疾病患者的ＣＳＦ，三种方法均为阴性。诊断指数分别为１９４．９５％、１９３．９４％和１９２．９３％。检出ＣＡＳ的最小量Ｄｏｔ－ＩＧＳＳ为２４４ｎｇ／ｍｌ．Ｄｏｔ－ＩＧＳ和Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ为４８８ｎｇ／ｍｌ。试验表明三种方法诊断脑囊虫病具有敏感性高、特异性强、重复性好和方法简便易行．有希望用于脑囊虫病的临床诊断。     

联合检测循环抗原和抗体在血吸虫病基本控制地区应用价值…

血吸虫病基本控制地区７岁以上的人群共８４７名为检测对象，应用抗日本血吸虫ＣＣＡ单克隆抗体Ⅲ Ｄ１０建立的Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ检测血虫循环抗原（ＣＡｇ），以ＥＬＩＳＡ和ＩＨＡ检测循环抗体（ＣＡｂ）。结果ＣＡｇ的阳性检出率为３．１９％，ＥＬＩＳＡ和ＩＨＡ检测ＣＡｂ的阳性检出率分别为６．２６％和９．４５％，两者的检出率间差异有显著性（Ｐ〈０．０１），ＣＡｇ与ＣＡｂ（ＥＬＩＳＡ和ＩＨＡ检测）的联合检出率分别     

混合或单一单抗检测肺吸虫病人血清中循环抗原的研究

本文报道应用由７种抗卫氏并殖吸虫囊蚴和成虫单克隆抗体（ＰｗＭ和ＰｗＡ一ＭｃＡｂ）组成的混合ＭｃＡｂ一ＥＬＩＳＡ法检测辽宁省凤城县肺吸虫病流行区２０８份滤纸血循环抗原（ＣＡｇ），阳性率为３８％（７９／２０８）。对１００份同时有滤纸血和血清样本者同步检测进行比较，滤纸血ＣＡｇ阳性率为６２％（６２／１００），血清ＣＡｇ阳性率５７％（５７／１００），符合率为９１％，经确切概率法处理两者无显著性差异，说明滤纸血可代替血清作ＣＡｇ检测。分别用７种ＭｃＡｂ检测５５份混合ＭｃＡｂ检测为阳性的样本，４种抗囊蚴ＭｃＡｂ中Ｇ＿２Ｂ＿３检出率最高，Ａ＿３Ａ＿７次之，３种抗成虫ＭｃＡｂ中Ａ＿３Ｄ＿３检出率最高，表明用Ｇ＿２Ｂ＿３或Ａ＿３Ａ＿７与Ａ＿３Ｏ＿３混合检测Ｐｗ病人ＣＡｇ更省更好。但在斯氏肺吸虫流行区应首选Ａ＿２Ｅ＿７，因其与斯氏Ａｇ有强烈的交叉反应，对斯氏肺吸虫患者血清ＣＡｇ检出率高达９４．７％（１８／１９）。本研究结果提示上述７种ＭｃＡｂ单独应用或不同组合后应用有助于提高ＣＡｇ的检出率并有助于肺吸虫感染虫种和虫期的判别。     

McAb4F8,McAb1F11与囊尾蚴抗原作用免疫印渍分析

将猪囊尾蚴囊液抗原（ＣＣＦＡ）和脑囊虫病病人脑脊液（ＰＣＳＦ）进行ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳分析，发现在ＣＣＦＡ中有１４条蛋白带，范围在２８～７６ｋＤａ。脑囊虫病病人ＣＳＦ中有６条蛋白整，范围在３３～８３ｋＤａ。用ＣＣＦＡ和ＰＣＳＦ与ＭｃＡｂ４Ｆ