经脾注射日本血吸虫虫卵诱发C57BL／6鼠肝脏细胞反应的初步探讨

为探讨日本血吸虫虫卵肉芽肿形成机理和病理作用，本实验改进Ｂｏｔｒｏｓ方法，设虫卵可溶性抗原（ＳＥＡ）致敏组和未致敏组，选用Ｃ５７ＢＬ／６鼠经脾注射虫卵诱发小鼠日本血吸虫肝肉芽肿，并对虫卵诱发的细胞反应进行了观察。结果显示：（１）经脾注射虫卵诱发小鼠肝肉芽肿方法简单、安全、有效；所建模型，特别是致敏组模型在肉芽肿形成机理研究中较有价值。（２）ＳＥＡ致敏可加强日本血吸虫肝肉芽肿形成．（３）抗体或抗原－抗体复合物作用参与日本血吸虫肝肉芽肿形成。（４）虫卵及虫卵肉芽肿均对肝细胞具有一定损伤作用。     

日本血吸虫单克隆抗独特型抗体NP30对虫卵肉芽…

应用日本血吸虫单克隆抗独特型抗体ＮＰ３０腹腔注射致敏Ｃ５７ＢＬ／６小鼠，继之经脾脏注射虫卵形成的肝虫卵肉芽肿模型。用ＳＥＡ致敏组作阳性对照，ＳＰ２／０腹水组作阴性对照。实验结果表明，在虫卵攻击后第４ｄ，ＮＰ３０致敏组肝虫卵肉芽肿面积、体积即开始明显增加，出现多量嗜酸性粒细胞浸润。     

日本血吸虫单克隆抗独特型抗体NP30对虫卵肉芽肿形成的致敏作用

应用日本血吸虫单克隆抗独特型抗体ＮＰ３０腹腔注射致敏Ｃ５７ＢＬ／６小鼠，继之经脾脏注射虫卵形成的肝虫卵肉芽肿模型。用ＳＥＡ致敏组作阳性对照，ＳＰ２／０腹水组作阴性对照。实验结果表明，在虫卵攻击后第４ｄ，ＮＰ３０致敏组肝虫卵肉芽肿面积、体积即开始明显增加，出现多量嗜酸性粒细胞浸润。肉芽肿面积在第８ｄ、体积在第１５ｄ达高峰值，与ＳＥＡ致敏组的高峰值相近（Ｐ＞０．０５）。而ＳＰ２／０腹水组肉芽肿的面积、体积至第３２ｄ才达高峰值，其高峰值低于ＮＰ３０致敏组（面积Ｐ＜０．０５，体积Ｐ＜０．０１）。本文提示ＮＰ３０对肝虫卵肉芽肿的形成具有致敏作用。     

不同感染度日本血吸虫小鼠的免疫组织化学研究

目的：探讨不同感染度日本血吸虫小鼠肝组织内可溶性虫卵抗原（ＳＥＡ）及其抗体水平和虫卵肉芽肿病变的动态变化与相互关系。方法：免疫组化酶标法和图像分析法。结果：感染后４ｗｋ，３组小鼠肝内均检出ＳＥＡ，此后ＳＥＡ水平逐渐升高，６－９ｗｋ时达高峰，以后逐渐下降。感染后６ｗｋ起，在虫卵周围检出抗ＳＥＡ抗体，８ｗｋ时抗体水平升高，１０ｗｋ后达高峰。３组小鼠在感染后相应时间，肝内ＳＥＡ及抗体水平基本相同。３组小鼠肝内虫卵肉芽肿至感染后５ｗｋ时尚未形成，６－７ｗｋ时虫卵肉芽肿反应最强，其平均直径和面积达最大值，８ｗｋ后逐渐减小。３组小鼠间无显著性差异。结论：肝组织内ＳＥＡ及其抗体水平与虫卵肉芽肿病变密切相关，与感染度无显著关系。     

小鼠脾脏注射日本血吸虫卵所诱发肝脾内细胞应答的比较研究

本实验选用Ｃ５７Ｂｌ／６小鼠经脾注入日本血吸虫虫卵，对虫卵所诱发的肝脏和脾脏细胞反应进行了比较研究。观察结果显示在致敏组与非致敏组小鼠脾脏中均未出现以嗜酸性粒细胞为主的虫卵肉芽肿，与肝脏中细胞反应明显不同，且虫卵在脾内诱发的细胞反应也弱。分析认为可能与脾脏内存在针对血吸虫虫卵肉芽肿形成的免疫调节有关，值得进一步探讨，并认为本实验模型将可能有助于进行脾脏免疫应答与肝虫卵肉芽肿形成关系的研究。     

日本血吸虫感染动物经免疫抑制后组织内虫卵肉芽肿病变与抗原及抗体水平变化的研究

应用醋酸可的松（ACT）腹腔注射日本血吸虫感染小鼠后观察其对肝、肠组织内虫卵抗原、特异性抗体的影响及对虫卵肉芽肿形成的抑制作用。实验结果表明:注射ACT后,组Ⅰ（1mng/d）感染小鼠肝、肠组织内不同时期的虫卵抗原及抗体GMRT均显著地低于对照组;肝、肠组织内肉芽肿的平均直径（μm）也明显地小于对照组。认为ACT对日本血吸虫感染小鼠组织内虫卵肉芽肿病变、特异性抗原和抗体反应均显示抑制作用。本项研究进一步阐明了感染宿主虫卵肉芽肿病变机理,可为今后寻找控制虫卵肉芽肿病变的有效方法,提供依据。     

小鼠脾脏注射日本血吸虫卵所诱发肝脾内细胞应答的比较研究

本实验选用Ｃ５７ＢＬ／６小鼠经脾注入日本血吸虫虫卵，对虫卵所诱发的肝脏和脾脏细胞反应进行了比较研究。观察结果显示在致敏组与非致敏组小鼠脾脏中均未出现以嗜酸性粒细胞为主的虫卵肉芽肿，与肝脏中细胞反应明显不同，且虫卵在牌内诱发的细胞反应也弱。分析认为可能与脾脏内存在针对血吸虫虫卵肉芽肿形成的免疫调节有关，值得进一步探讨，并认为本实验模型将可能有助于进行脾脏免疫应答与肝虫卵肉芽肿形成关系的研究。     

日本血吸虫虫卵肉芽肿内抗原和抗体的动态

用日本血吸虫虫卵注入肺内同步产生肉芽肿的小鼠肺模型进行研究。发现新鲜虫卵注入未致敏小鼠肺内,3.5d即出现细胞反应,28d达高峰,淋巴细胞和巨噬细胞是早期的主要成分。虫卵内抗原(SEA)于注射后第1d最高,随即逐渐下降,卵周抗原3.5d开始逐渐增高,28d达到高峰,其后逐渐减少,未测到抗-SEA抗体。以抗原消耗的虫卵注入致敏小鼠,至第35d实验结束时未见明显肉芽肿形成。结果表明新鲜虫卵能对未致敏小鼠诱发肉芽肿形成;日本血吸虫虫卵肉芽肿形成的机制与曼氏血吸虫者相似,也是虫卵抗原(SEA)诱发的细胞免疫为主的超敏反应。     

诱导保护性免疫的日本血吸虫未成熟卵可溶性抗原分析

目的：为寻找抗日本血吸虫虫卵成熟疫苗候选分子提供实验依据。方法：用日本血吸虫未成熟卵可溶性抗原（ＳＩＥＡ）和成虫冷浸抗原经皮肤多次重复注射小鼠，再感染后４９天收集小鼠肝内虫卵。聚乙二醇沉淀虫卵内抗原抗体复合物，应用ＥＩＴＢ分析该抗原抗体复合物。结果：发现各组抗原抗体复合物的组份为６７ＫＤ、５４ＫＤ或４０ＫＤ，其中５４ＫＤ为诱导保护性免疫的各组样品共有组分。结论：推测５４ＫＤ抗原分子在诱导宿主产生抗卵成熟的保护力可能起着重要作用     

小鼠日本血吸虫肝虫卵肉芽肿模型的建立

本文报告应用腹腔注射SEA致敏C57BL/6小鼠,继之经脾脏攻击注射虫卵的方法,建立了小鼠日本血吸虫肝虫卵肉芽肿模型,并与自然感染模型作比较.结果证明,SEA致敏组小鼠肝虫卵肉芽肿发生率为100%.其肉芽肿的形态、细胞组成、转化发展过程及单虫卵肉芽肿的直径和面积均与自然感染模型相似.本实验表明经脾脏注射虫卵及SEA致敏建立小鼠日本血吸虫肝虫卵肉芽肿模型是一种良好的肉芽肿实验动物模型.     

SIEA抗血清抑制日本血吸虫卵肺肉芽肿的研究

目的探讨日本血吸虫未成熟卵可溶性抗原（ＳＩＥＡ）诱导保护性免疫的效果及机制。方法将日本血吸虫未成熟卵在ＲＰＭＩ—１６４０培养液加ＳＩＥＡ免疫血清中培养４天,小鼠尾静脉注射该虫卵,３２天后观察并统计小鼠肺内肉芽肿面积。结果对照组和实验组肺内虫卵肉芽肿面积之间存在显著性差异（Ｐ＜０．０１）。结论ＳＩＥＡ诱导产生的抗体具有一定的免疫力;抗体可能通过阻塞卵孔或者结合特定抗原,阻止卵内毛蚴发育,达到抗卵胚发育的效果。     

日本血吸虫感染动物肝组织内虫卵肉芽肿病变控制方法的进一步研究

应用免疫增强剂“４２５”及其主要成分阿魏酸经腹腔分别注射感染日本血吸虫小鼠后１４～２９ｄ，两者均使小鼠肝组织内抗原水平显著地低于对照组（Ｐ均＜０．０５），前者还可使肝组织内特异性抗体（ＩｇＧ）水平显著地高于对照组（Ｐ＜０．０１）；注射α－干扰素对肝组织内抗原及抗体水平均无明显影响；但注射三种不同药物后小鼠肝组织内虫卵肉芽肿反应增长比均显著地小于对照组（Ｐ均＜０．０１）。结果进一步证实了以往的报道，通过体液免疫和细胞免疫不同途径的抑制或调节作用，可使虫卵肉芽肿病变减弱，并提示免疫增强剂“４２５”可能含有同时刺激宿主体液免疫和细胞免疫的成分，阿魏酸还可能有直接影响毛蚴分泌ＳＥＡ的作用。     

日本血吸虫可溶性虫卵抗原等电点组分的特性分析

应用等电聚焦技术将日本血吸虫可溶性虫卵抗原（ＳＥＡ）分为２０个不同等电点（ｐＩ）的组分（等电点范围为１．８６—１１．４０），测定其各组分的体液与细胞免疫反应及体外诱发肉芽肿形成反应。结果表明等电点酸性区的组分（ｐＩ３．７８－５．５４）在日本血吸虫肉芽肿形成中可能起重要的作用；抗体，在感染的早期（５ｗｋ）也与肉芽肿的调节有关。     

单克隆抗体NP28—5B对日本血吸虫卵肉芽肿形成的调节作用

本研究首先应用针对中国大陆株日本血吸虫可溶性虫卵抗原(SEA)中140kD靶抗原的单克隆抗体NP28-5B(lgG_1),经体内被动转移试验表明对虫卵致敏/虫卵攻击的小鼠肺肉芽肿模型中日本血吸虫虫卵肉芽肿形成具显著的抑制或调节作用(抑制率为53％,P<0.002),进一步提供证据表明抗体参与虫卵肉芽肿形成的调节网络,也将为日本血吸虫病抗病免疫和抗病疫苗研究提供重要的分子基础。作者对上述作用机理作了有限探讨。     

小鼠脾内注射日本血吸虫病患者尿液循环抗原制备单克隆抗体

目的： 探讨用一种快速免疫方法制备抗人尿液日本血吸虫循环抗原的单克隆抗体。方法： 将日本血吸虫病患者尿液用１５％ 三氯醋酸提取循环抗原后采用脾内直接注射法免疫 Ｂ Ａ Ｌ Ｂ／ｃ小鼠制备单克隆抗体。结果： 建立了 ２ 株分泌抗人尿日本血吸虫循环抗原的单克隆细胞株２ Ｅ６ 及２ Ｂ１１,两者免疫球蛋白鉴定均属 Ｉｇ Ｍ 类, Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ测得单抗对尿液循环抗原（ Ｉ Ｈ Ｕ Ｃ Ａｇ）,效价分别为２．５６×１０５ 和６．４×１０４ 。琼脂双扩散试验显示２ 株单抗与正常人尿三氯醋酸提取物均不能形成沉淀线,而２ Ｅ６ 与日本血吸虫病患者尿液循环抗原能产生沉淀线。分别用２ Ｂ１１ 和２ Ｅ６ 腹水为捕捉抗体, Ｈ Ｒ Ｐ Ｈ１１ 为酶标抗体检测 １２ 例急性血吸虫病患者尿液,依次为６ 例和３ 例阳性,８ 例正常人尿液均为阴性。结论： 用血吸虫病患者尿液提取的循环抗原经脾脏注射免疫 Ｂ Ａ Ｌ Ｂ／ｃ 小鼠制备单克隆抗体用于检测日本血吸虫病患者尿液中循环抗原是可行的。     

日本血吸虫单克隆抗独特型抗体NP30对虫卵肉芽肿免疫调节作用的研究

目的研究日本血吸虫单克隆抗独特型抗体ＮＰ３０对虫卵肉芽肿的影响。方法 ＮＰ３０腹腔注射主动免疫ＩＣＲ小鼠,对照组腹腔注射ＳＰ２／０腹水,分别在尾蚴攻击感染后第４、８、１２、１６、２０、２４周处死,观察和比较肝内虫卵肉芽肿的形成和演变。应用计算机图像分析技术,测量虫卵肉芽肿大小。结果尾蚴攻击感染第 １２周以后, ＮＰ３０免疫组虫卵肉芽肿的直径明显低于 ＳＰ２／０对照组,虫卵肉芽肿的演变时相提前,并出现２种特殊类型的肉芽肿。结论ＮＰ３０能减轻日本血吸虫对宿主造成的免疫病理损害。     

小鼠注射日本血吸虫卵肺肉芽肿形成的动力学和机理

血吸虫病的主要病理损害是虫卵肉芽肿,关于日本血吸虫卵肉芽肿的知识了解甚少。本文使用小鼠肺肉芽肿模型,观察肺内日本血吸虫卵肉芽肿形成的动力学与机理。方法实验鼠分8组(每组7～8只),分别皮下注射10～50,000个日本血吸虫卵致敏鼠,以不注射的鼠作对照。2周后再静注虫卵3,000个,其后在不同天数(1～64天)取肺作病理检查,每鼠至少检测30个肉芽肿面积,求其平均值作t检验。用2,000个虫卵致敏鼠后2周,将5,000个虫卵分别由门静脉注入肝或由尾静脉注入肺,8天后分别取肝及肺,测肉芽肿面积。分离肺内肉芽肿,并从肉     

日本血吸虫未成熟虫卵26／28kDa抗原诱导抗雌虫生…

目的：探讨日本血吸虫未成熟虫的２６／２８ｋＤａ抗原（ＳＩＥＡ２６－２８ｋＤａ）诱导小鼠产生抗雌虫生殖免疫的效果。方法：采用纯化的ＳＩＥＡ２６／２８ｋＤａ抗原以及ＳＩＥＡ－Ｉ抗原，分别免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，于攻击感染后４６ｄ进行粪卵，组织内虫卵定量。结果：证明ＳＩＥＡ２６／２８ｋＤａ抗原能诱导小鼠产生抑制雌虫生殖的免疫力。与对照组比较，ＳＩＥ２６／２８ｋＤａ抗原免疫鼠减虫虽不明显，但肝组织内总卵数、     

洞庭湖区东方田鼠天然抗日本血吸虫抗体水平的初步研究

目的：探讨洞庭湖区东方田鼠天然抗日本血吸虫尾蚴（ Ｃ Ａ）、童虫（ Ｊ Ａ）、成虫（ Ａ Ｗ Ａ）及虫卵抗原（ Ｓ Ｅ Ａ）的抗体检出率及其水平。方法：应用间接 Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ 对未感染野生东方田鼠（ Ｗ Ｍ Ｆ）、室内繁殖东方田鼠（ Ｂ Ｍ Ｆ）和感染日本血吸虫尾蚴１５ ｄ 的室内繁殖东方田鼠（ Ｂ Ｍ Ｆｉ１５ ）的抗日本血吸虫 ４ 种不同阶段抗原的抗体进行了检测,并与昆明小鼠感染尾蚴１５ ｄ（ Ａ Ｍｉ１５ ）、４２ ｄ（ Ａ Ｍｉ４２）和未感染组（ Ａ Ｍ）作了对比。结果： Ｗ Ｍ Ｆ和 Ｂ Ｍ Ｆ的抗日本血吸虫抗体检出率以抗 Ｊ Ａ Ａｂ 最高（９４． ６％ 和 ９４． ４％ ）, 抗 Ａ Ｗ Ａ Ａｂ 其次（８５． ５％ 和 ８３． ３％ ）, 抗 Ｓ Ｅ Ａ Ａｂ （５８． １％ 和５９．４％ ）,抗 Ｃ Ａ Ａｂ（１４．３％ 和１３．９％ ）最低。 Ｂ Ｍ Ｆｉ１５ 的４ 种抗体水平较未感染组显著升高, 抗 Ｊ Ａ Ａｂ 和抗 Ａ Ｗ Ａ Ａｂ 的检出率为 １００％ ,抗 Ｓ Ｅ Ａ Ａｂ 为８４．４％ ,抗 Ｃ Ａ Ａｂ 为６５．６％ ; Ｗ Ｍ Ｆ、 Ｂ Ｍ Ｆ和 Ｂ Ｍ Ｆｉ１５ 的４ 种抗体水平呈相同趋势（ Ｊ Ａ＞ Ａ Ｗ Ａ＞ Ｓ Ｅ Ａ＞ Ｃ Ａ）, Ｂ Ｍ Ｆｉ１５     

日本血吸虫磷酸丙糖异构酶小鼠免疫试验

目的：探讨从日本血吸虫大陆株成虫分离的天然磷酸丙糖异构酶抗原（ＳｊｃＴＰＩ）免疫小鼠后对尾蚴攻击感染的保护性作用。方法：采用丙酮沉淀法从日本血吸虫大陆株成虫中提取天然的ＴＰＩ抗原，并以所提纯的ＳｊｃＴＰＩ抗原加福氏佐剂经皮下和肌肉注射免疫ＮＩＨ小鼠，攻击感染后６ｗｋ收集小鼠血清并计数成虫负荷及肝、肠组织虫卵数。同时设有日本血吸虫成虫抗原（ＳＷＡＰ）免疫对照组和攻击感染对照组。结果：天然ＳｊｃＴＰＩ抗原免疫小鼠后减虫率为２１．４％－２５．０％，肝组织减卵率达５７．８％－６０．３％；ＥＬＩＳＡ法检测ＴＰＩ免疫小鼠血清抗ＴＰＩ抗体ＯＤ值明显高于对照组小鼠的ＯＤ值（Ｐ＜０．０５）。结论：天然的ＳｊｃＴＰＩ抗原具明显的免疫原性和抗原性，可以继续进行编码ＴＰＩ基因的克隆与表达。