十二烷基硫酸钠制备脱细胞真皮基质的实验研究

目的探讨十二烷基硫酸钠制备脱细胞真皮基质的最佳浓度及作用时间。方法取临床截肢患者废弃的皮肤,分成90块,随机分成6组,每块约1cm×1cm,分别置于0.1%、0.25%、0.5%、1.0%、2.5%、5.0%十二烷基硫酸钠溶液中脱细胞,每隔8h取材一次,分别取材15次。取材标本行大体和组织学观察。结果肉眼观察:十二烷基硫酸钠作用8h后,0.25%组可将表皮与真皮完整分离;光镜检查显示:0.25%十二烷基硫酸钠在作用40h后,能将真皮内的细胞及细胞碎片脱净,形成脱细胞真皮基质。制备的脱细胞真皮基质,主要由胶原纤维网架构成,其他组作用120h也无法形成真正的脱细胞真皮基质。结论十二烷基硫酸钠制备脱细胞真皮基质的最佳浓度为0.25%,最佳时间为40h。与其他方法比较,具有简便、快捷、有效、价廉、宜推广等特点,可为临床急诊的修复争取宝贵的时间。     

一种脱细胞真皮基质制备方法的研究

目的:研究脱细胞真皮基质(acel lular dermal matrix,ADM)的一种新的制备方法.方法:取大鼠背部皮肤制成厚度0.8m的脱毛皮片,置入1mol/L NaCl溶液中24h,揭去表皮层,再浸入0.5%Triton X-100溶液中室温震荡48h,得到ADM.取标本行组织学观察,并行异体移植实验.结果:NaCl-Triton法制作的ADM,细胞成分脱除彻底,胶原纤维排列规则,没有明显的免疫原性,生物相容性好.结论:采用NaCl-Triton法制备ADM,价廉而有效,利于推广应用.     

脱细胞真皮基质的研究进展

烧伤或皮肤组织缺损的创面修复多采用自体中厚或全厚皮片移植 ,供皮区损伤较重易形成疤痕 ,影响外观及功能。而早期自体薄厚皮片 (autologeus thin split- thickness skin,auto- TTS)或刃厚皮移植 ,则往往由于皮片薄、缺少有效的真皮成分和引导性组织再生的作用 ,皮片成活后常形成不同程度的瘢痕增生和挛缩畸形 ;在关节等功能部位更易造成功能障碍 ,影响患者生活质量。近年来脱细胞真皮基质(acellular dermal matrix,ADM)作为一种新型真皮替代物不但受到烧伤与整形外科界的重视 ,也引起了整个美容医学的兴趣。本文对其综述如下 :1　 ADM…     

异体脱细胞真皮基质的研究与应用

脱细胞真皮基质 (ａｃｅｌｌｕｌａｒｄｅｒｍａｌｍａｔｒｉｘ ,ＡＤＭ)是异体皮经特殊处理 ,去除其细胞成分后得到的一种真皮替代品。由Ｌｉｖｅｓｅｙ[1] 开发研制 ,Ｌｉｆｅｃｅｌｌ公司生产 ,商品名为ＡｌｌｏＤｅｒｍ ,已获美国ＦＤＡ批准应用于临床 ,近几年在烧伤和整形外科领域中得到了广泛的应用和发展。1　脱细胞真皮基质的制备方法ＡＤＭ的制备包含去表皮、脱真皮细胞及冷冻干燥处理 3个基本步骤 ,有两种方法。一是尸体皮经高渗盐水和 12烷基硫酸钠 (ＳＤＳ)处理 ,形成ＮａＣｌ ＳＤＳＡＤＭ[1,2 ] ;二是经ＤｉｓｐａｓｅⅡ处理…     

烧伤变性脱细胞真皮基质可再生利用的实验研究

目的 探讨烧伤变性脱细胞真皮基质(DADM)作为真皮替代物用于创面修复的可行性. 方法 (1)取12只Wistar大鼠,其中9只背部造成深Ⅱ度烫伤(以下称烧伤)创面,分别于伤后1、2、3d(每时相点3只)取创面全厚皮肤,用2.5 g/L胰蛋白酶-体积分数0.5％ Triton X-100行脱细胞处理制成DADM,相应称为DADM-1 d、DADM-2 d、DADM-3 d;余下3只大鼠不致伤,同法制备ADM作为对照.对ADM和各DADM行大体、组织学观察及微生物学和生物力学检测(极限抗拉强度、最大拉力、断裂伸长率、应力-应变关系).(2)另取64只Wistar大鼠,按随机数字表法分为ADM组、DADM-1d组、DADM-2 d组、DADM-3d组,每组16只.于各大鼠背部制作一2.0 cm×1.8 cm大小皮瓣,将前述ADM和DADM-1 d、DADM-2d、DADM-3 d切制成1.8cm×1.5 cm大小后分别埋植于皮瓣下.术后1、3、5、9周,每组每时相点取4只大鼠,肉眼观察创面愈合情况及埋植物的变化,并对埋植物行组织学观察.对数据行单因素方差分析及t检验. 结果 (1)新鲜制备的各DADM呈乳白色,质地柔软有弹性,韧性较ADM弱.光学显微镜下见ADM和各DADM中均无上皮结构和细胞存在,DADM胶原纤维增粗程度不均匀,排列紊乱,嗜伊红性增强.各DADM微生物学检测结果均为阴性.DADM-1d、DADM-2 d、DADM-3 d之间极限抗拉强度、最大拉力、断裂伸长率和应力-应变关系比较,差异均无统计学意义(F值为0.088～3.591,P值均大于0.05);其中DADM-3d此4项指标值最高,分别为(13.0±2.4) MPa、(61 ±4)N、(173±7)％、(45 7±2.0)％.ADM此4项指标各为(19.0±2.6) MPa、(95±4)N、(201±5)％、(62.5±2.2)％,与3种DADM两两比较均偏高(t值为6.424 ～17.125,P值均小于0.01).(2)埋植术后1周,各组大鼠创面无渗出或红肿,埋植物未收缩或卷曲;创面有炎性细胞浸润并有Fb及毛细血管长入.术后3周时,DADM-1d、DADM-2 d、ADM组埋植区毛发生长正常,DADM-3 d组埋植区毛发较稀疏;各组炎性细胞减少,Fb增多,有新生小血管长入,DADM-3 d组炎性细胞减退稍延迟.术后第5周,各组埋植区毛发恢复正常,埋植物收缩、变薄,表面纤维膜包裹紧密,有较大血管束长入;各组真皮基质与周围正常组织融合.术后第9周,ADM和DADM均为薄、软白色组织片,与皮瓣内面连接紧密;各组无炎性细胞浸润,胶原纤维排列规则、致密,与正常胶原组织融合. 结论 烧伤DADM无明显免疫原性,生物相容性好,经离体改造有望成为创面修复治疗中的真皮替代物.     

含银异种脱细胞真皮基质的实验研究

目的了解含银异种脱细胞真皮基质(Xeno-ADM)的多项生物学性状,观察其移植效果。方法制备单纯xeno-ADM,再用2 g／L硝酸银浸泡,制成含银xeno-ADM。检测两种xeno-ADM对笔者单位烧伤患者创面常见菌的抑菌效果,并进行组织学观察;测量含银xeno-ADM的Ag+含量。在27只家兔背部制作全层皮肤缺损创面,分为A、B、C组,每组9只。A组移植自体刃厚皮,B组移植单纯xeno-ADM+自体刃厚皮,C组移植含银xeno-ADM+自体刃厚皮。术后2、4、6周取移植部位皮肤标本作形态学观察,并计算创面收缩率;术后2周计算移植皮片(未)成活率,并检测各组家兔淋巴细胞增殖活性。结果(1)含银xeno-ADM对创面常见菌的抑菌效果明显优于单纯xeno-ADM (P<0．05)。两种xeno-ADM中的表皮已完全除去,胶原纤维粗细均匀、排列规则、无明显变性,真皮中无细胞及细胞碎片。含银xeno-ADM的Ag+含量为(2．7±0．7)mg／g。(2)术后6周,A组家兔移植皮片呈暗红色,挛缩明显,易破溃,胶原纤维排列紊乱;B、C组移植皮片颜色接近周围正常皮肤,光滑无瘢痕,质地良好,胶原纤维排列有序,表皮-真皮连接结构和基底细胞桥粒、半桥粒结构以及基底膜重建明显。术后2、4、6周,A组家兔创面收缩率均明显高于B、C组(P<0．05);B、C两组创面收缩率相似(P>0．05)。术后2周,C组皮片完全成活率为91．7％,显著高于A组(77．8％)及B组(80．6％);3组家兔淋巴细胞增殖活性相似(P>0．05)。结论含银xeno-ADM脱除了基质中有免疫原性的细胞成分,保留了组织的基本结构和完整的胶原纤维支架,且具有较好的局部抗菌效果,不失为一种良好的真皮替代物。     

复合型脱细胞真皮基质的研究进展

脱细胞真皮基质作为一种良好的组织修补材料,现已在多学科领域得到广泛应用,但单纯脱细胞真皮基质却很难很好的满足多学科领域的不同要求.复合型脱细胞真皮基质是在脱细胞真皮基质结构基础上研发的新型生物材料,具有更加优良的特性,可以更好的满足不同的移植环境.本文对近几年复合型脱细胞真皮基质的研究进展作一综述.     

脱细胞真皮基质作为Beagle犬骨髓基质细胞移植载体的实验研究

目的探讨脱细胞真皮基质（Acellular dermal matrix,ADM）作为Beagle犬骨髓基质细胞（Bone marrow stromalcells,BMSCs）移植载体的可行性。方法将BMSCs复合到ADM载体上,体外观察ADM与BMSCs的生物相容性：ADM—BMSCs复合物植入裸鼠皮下,以单纯ADM为对照组,分别于术后4周和8周进行大体标本观察及组织学分析。结果体外观察ADM与BMSCs的生物相容性良好。裸鼠皮下植入实验显示,实验组4周后ADM部分降解吸收,BMSCs生长良好,出现新生组织,部分形成类骨样结构;8周后,ADM大部分吸收,形成大量的新生组织和类骨样结构;对照组新生组织形成较少,ADM支架材料降解速度与实验组类似。结论ADM可作为Beagle犬BMSCs的移植载体。     

异种脱细胞真皮基质抗原性的实验研究

目的　观察不同方法制备的异种脱细胞真皮基质 (Xeno -ADM )埋植物的抗原性差异。　方法　将猪断层中厚皮片采用胰蛋白酶 +tritonX 10 0等处理 ,制成Xeno -ADM ,分为戊二醛交联的Xeno ADM1组、网状交联的Xeno ADM2 组、未交联的Xeno ADM3 组、动物先用Xeno ADM蛋白致敏后再移植交联的Xeno ADM4组和未交联的异体兔Allo ADM对照组。分别将移植物埋植于 5组共计 2 5只日本白兔的耳部和背部皮下 ,术后 2～ 32周检测兔血清抗ADMs抗体效价 ,并观察移植物大体和组织学变化。　结果　Xeno ADM4埋植物组血清抗Xeno ADM蛋白抗体效价最高 ;排除致敏因素的影响 ,Xeno ADM各组血清抗体滴度依次为 :Xeno ADM3 组 >Xeno ADM2 组 >Xeno ADM1组 (P<0 .0 5～ 0 .0 0 1) ;在Allo ADM组中 ,有 4 0 %的血清样本呈现出抗Allo ADM蛋白抗体阳性。组织学上 ,Xeno ADM移植部位有激烈而持久的炎症反应 ,明显强于Allo ADM异体埋植对照组 ;ADM被降解吸收的程度依次为 :Xeno ADM3 >Xeno ADM2 >Xeno ADM4>Xeno ADM1>Allo ADM (P <0 .0 5～ 0 .0 0 1) ,在交联型ADM组易产生异物巨细胞反应。　结论　Xeno ADM的免疫原性强于Allo ADM ,诱导宿主产生IgG限制的免疫反应 ;大张变性的ADM埋植物能降低抗原 抗体反应 ,减缓炎症免疫反应导致的ADM     

异种脱细胞真皮基质作为软组织填充物的生物相容性研究

目的 探讨异种脱细胞真皮基质(Xeno-ADM)作为软组织填充物植入大鼠体内的生物相容性,为临床软组织缺损凹陷修复提供参考依据.方法 72只SD大鼠随机分为3组:异种组、异体组和自体对照组.分别将Xeno-ADM、异体脱细胞真皮基质和自体真皮植入各组大鼠背部皮下.术后2～32周,根据病理组织学和形态学变化,评估Xeno-ADM的生物相容性.结果 移植早期(<16周),异种组移植物炎性反应程度较异体组强烈,外周包膜厚度较异体组更厚,血管化程度低于异体组.16～32周,异种组与异体组炎性反应无明显区别,外周包膜形成不明显.结论 Xeno-ADM具有良好的生物相容性,适合作为一种生物软组织填充材料.     

应用脱细胞异体真皮植入Bucks筋膜下加大阴茎

目的探讨一种加大阴茎的手术方法。方法将脱细胞异体真皮填充在阴茎Bucks筋膜与白膜之间加大阴茎。结果自2002年3月以来,我们在临床应用12例,术后自然状态下阴茎周径加大13～31cm,平均26cm,术后3个月有正常的性生活。1例因包扎过紧至阴茎皮肤部分坏死,经转移阴囊皮瓣修复愈合。结论该方法用于阴茎加大,创伤小、操作简便、效果确实,无不良反应。     

低浓度胰蛋白酶消化加反复冻融法制备猪脱细胞真皮基质

目的建立一种新的制作脱细胞猪真皮基质的方法。方法采用0．5g／L胰蛋白酶消化断层猪皮，去除表皮和真皮中部分细胞成分，然后反复冻融进一步去除真皮内残留的细胞成分。分别行大体观察、组织学观察及免疫组织化学等检测。结果制备的猪脱细胞真皮基质内细胞成分可被完全去除，表面保留完整的基底膜，胶原结构排列紧密。结论低浓度胰蛋白酶消化加反复冻融，是制备异种脱细胞真皮基质较为简便、有效的方法。     

无细胞真皮基质的研制

目前治疗大面积深度烧伤的方法是刃厚自体皮移植 ,后者因缺乏足够的真皮成分 ,常常造成瘢痕和挛缩。因此 ,研制一种含有足够量真皮成分的永久性皮肤替代物将具有很大的临床意义。将异体 (或异种 )皮用高渗盐溶液处理以去除表皮 ,去污剂处理以去除真皮中细胞成分 ,得到一种无细胞真皮基质。经光镜和透射电镜观察证实 ,它去除了表皮全层和真皮中所有细胞成分 ,保留了完整的基底膜复合物 ,胶原束结构和排列保持正常 ,弹力纤维亦正常存在。与AlloDerm相比 ,无细胞真皮基质具有以下主要优点 :①由于延长去污剂的作用时间 ,真皮中残留的细胞成分被完全清除 ,因此制得的真皮基质更为理想 ;②AlloDerm用同种异体皮制备 ,而无细胞真皮基质除用同种异体皮外 ,亦可用异种猪皮制备 ,因此来源广泛 ,价格低廉     

脱细胞异体真皮基质补片治疗巨型脐膨出

目的探讨使用脱细胞异体真皮基质生物补片修补术治疗新生儿巨型脐膨出的优势。方法回顾性分析我院近期采用脱细胞异体真皮基质生物补片治疗的巨型脐膨出病例3例,探讨在适应症、手术操作、呼吸机使用、术后并发症等方面的优缺点。结果 3例患儿中,除1例患儿因复杂先心病,家属要求放弃治疗自动出院外,2例患儿恢复良好,痊愈出院,随访至今,无并发症发生。结论脱细胞异体真皮基质补片修补治疗巨型脐膨出效果良好,为巨型脐膨出与腹壁广泛缺损的Ⅰ期修补提供了一种良好的外科治疗方法。     

脱细胞异种(猪)真皮基质作为填充材料的初步研究与应用

目的：为临床修复体表凹陷畸形寻求良好的填充材料。方法：用自制脱细胞异种（猪）真皮基质，植入兔皮下，定时进行测量，并进行光镜及电镜观察。临床应用2例。结果：脱细胞异种（猪）真皮基质植入后观察1年，仅在4周内有极轻微的炎性反应，无排斥反应，2周左右有成纤维细胞及毛细胞血管长入，吸收率低于对照组。2例临床应用填充效果较满意，质地较软，无破溃、外露。结论：脱细胞异种（猪）真皮基质组织相容性好，吸收率低，质地软，是一种有良好前景的软组织填充材料。     

无细胞真皮基质与自体皮片复合移植的临床应用

目的：改善烧伤创面移植皮片愈合后皮肤的外形和功能,并减轻供皮区瘢痕增生。方法：应用自制的无细胞真皮基质与自体刃厚皮片复合移植于4例切（或削）痂后的烧伤创面。结果：未发现对复合移植皮片的排异反应。创面愈合后,大体观察发现移植自体网状皮片及自体小皮片的轮廓界面变得不明显或基本消失,自体大张皮片与真皮基质复合移植区出现较厚而特殊的脱屑,均反映了愈合过程的特殊性。光镜和电镜观察发现复合皮片移植区棘细胞间桥粒清晰,基底膜连续而完整等。与对照部位相比,复合皮片移植区瘢痕增生减轻,未见明显挛缩,皮肤弹性较好。结论：在3－4个月的观察期内,自体刃厚皮片与无细胞真皮基质复合移植后,功能和形态等同或优于单纯自体刃厚皮片移植。     

应用异种脱细胞真皮的眼睑原位重建术的实验研究

目的探讨应用异种(猪)脱细胞真皮施行兔眼睑原位重建术后的组织相容性,比较异种(猪)脱细胞与异体巩膜替代睑板后的组织转归。方法采用兔眼睑缺损动物模型,随机分别给予异种(猪)脱细胞真皮、兔异体巩膜施行眼睑原位重建术。活体观察动物术后和移植物情况,于术后1、2、4、6、8和12周,取带植片的眼睑,光镜下观察替代材料和自体睑板交界处的组织病理学改变,包括炎症反应、纤维血管化情况和融合情况;取4、8和12周标本做透射电镜观察上述组织的超微结构改变。结果光镜和电镜下二者反应类似,差异无统计学意义。组织学检查显示异种脱细胞真皮引起的免疫和炎症反应轻微。结论异种(猪)脱细胞真皮在植入兔眼睑后有较好的组织相容性,并可引导新生胶原的生长,起到替代睑板的作用。