白介素1β对肾小球系膜细胞表达纤维蛋白溶解酶原激活物抑制物-1和纤维连接蛋白的影响

目的探讨白介素１β（ＩＬ１β）对人肾小球系膜细胞表达纤维蛋白溶解酶原（纤溶酶原）激活物抑制物１（ＰＡＩ１）和纤维连接蛋白（ＦＮ）的影响。方法应用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交检测体外培养的肾小球系膜细胞在ＩＬ１β刺激后ＰＡＩ１和ＦＮ的ｍＲＮＡ表达,采用纤维蛋白平板法检测系膜细胞培养上清中ＰＡＩ１的活性,利用ＥＬＩＳＡ法检测ＦＮ的水平。结果ＩＬ１β刺激组系膜细胞ＰＡＩ１和ＦＮｍＲＮＡ的表达显著增高（与对照组比,Ｐ＜００５）,细胞培养上清中ＰＡＩ１的活性和ＦＮ的水平亦明显增加（与对照组比,Ｐ＜００１）。结论ＩＬ１β可以上调系膜细胞ＰＡＩ１和ＦＮ蛋白质及ｍＲＮＡ的表达,提示ＩＬ１β可能通过抑制细胞外基质降解和增加细胞外基质合成而导致细胞外基质的积聚。     

氧化低密度脂蛋白刺激人肾小球系膜细胞产生单核细胞趋化蛋白-1由核因子-κB活化调控

目的 研究核因子ＫＢ（ＮＦ－ＫＢ）在氧化低密度脂蛋白（Ｏｘ- ＬＤＬ）诱导的体外培养的人肾小球系膜细胞表达单核／巨噬细胞趋化蛋白－１（ＭＣＰ－１）中的作用。方法 采用凝胶迁移率变动分析检测ＮＦ－ＫＢ的ＤＮＡ结合活性变化，以免疫组织化学观测细胞内ｐ６５的核转位，用细胞ＥＬＩＳＡ法检测细胞内 ＭＣＰ－１及ＩＫＢα蛋白含量变化。结果 不同浓度（１０、２５、５０、１００μｇ／ｍｌ）Ｏｘ－ＬＤＬ刺激肾小球系膜细胞均可引起细胞ＮＦ-ＫＢ的ＤＮＡ结合活性增强、ＩＫＢα蛋白表达下降以及ＭＣＰ－１蛋白表达增强，以５０μｇ／ｍｌ刺激１ｈ ＮＦ－ＫＢ活化及ＩＫＢα表达减弱最明显，作用２４ｈＭＣＰ-１表达水平最高。ＮＦ－ＫＢ俯活化的同时伴有ｐ６５核转位。上述效应可被ＮＦ－ＫＢ特异性抑制剂吡咯二硫氨基甲酸酯（ＰＤＴＣ）所抑制。结论Ｏｘ－ＬＤＬ刺激人肾小球系膜细胞产生ＭＣＰ－１是由ＮＦ－ＫＢ调控，ＮＦ－ＫＢ参与了脂质肾损害的发病过程。     

内皮素在大鼠系膜增生性肾小球肾炎中的表达

目的 研究内皮素－１（ＥＴ－１）在系膜增生性肾小球肾炎（ＭｓＰＧＮ）模型中的表达。方法 以小鼠抗大鼠Ｔｈｙ１．１单克隆抗体单次尾静脉注射诱导的大鼠ＭｓＰＧＮ模型,,病理观察分析该模型的系膜细胞和系膜基质增生;Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交分析肾小有内此素（ｐｐＥＴ－１）ｍＲＮＡ表达水平;放射免疫分析（ＲＩＡ）测定肾小球ＥＴ－１蛋白水平。结果 在大鼠ＭｓＰＧＮ模型中,第２ｄ系膜细胞溶解消失,第４ｄ系膜细胞增生     

腹膜透析对转化生长因子β1在残存肾中表达的影响

探讨清除循环中毒素后生长因子和残存肾小球的改变。方法采用分子杂交技术和组织病理分析方法在肾次全切除的残存肾大鼠模型上研究腹膜透析（ＰＤ）对转化生长因子β１（ＴＧＦ－β１）ｍＲＮＡ在残存肾中表达的影响和肾小球硬化的变化。分模型组和ＰＤ组，第８周ＰＤ组开始作腹膜透析至第１２周。分别在第７周和１２周各组杀检６只作肾病理检查（ＨＥ．ＰＡＳ染色）和ＴＧＦ－β１ｃＤＮＡ缝隙点样杂交。结果在实验的第７周两组间肾小球硬化指数（ＧＳＩ）及ＴＧＦ－β１ｍＲＮＡ表达均无显著性差异。第十二周，ＰＤ组的ＧＳＩ及ＴＧＦ－β１ｍＲＮＡ表达均显著低于模型组。ＧＳＩ改变程度与ＴＧＦ－β１ｍＲＮＡ表达丰度变化呈明显正相关（ｒ＝０．６５Ｐ＜０．０５）。结论腹膜透析可明显减少ＴＧＦ－β１ｍＲＮＡ的表达并延缓残存肾小球的硬化     

增殖性肾炎患者肾小球细胞胰岛素样生长因子—1的表达及其意义

目的　探讨人类增殖性肾炎（ＰＧＮ） 肾小球中胰岛素样生长因子１（ＩＧＦ１） 的表达及其意义。方法　采用原位杂交、免疫组织化学方法检测肾活检组织中ＩＧＦ１ ｍＲＮＡ及其蛋白质表达，并分析其与患者肾小球内细胞外基质（ＥＣＭ） 增生的关系。结果　增殖性肾炎组中ＩＧＦ１ 的表达水平显著高于非增殖性肾炎组和正常组（ Ｐ＜０－０１），ＩＧＦ１ 表达水平与ＥＣＭ 增生程度呈正相关。结论　肾小球局部ＩＧＦ１ 基因异常表达参与了ＰＧＮ的发病机制。     

纤溶酶原激活物抑制物—1／绿色荧光蛋白融合基因表达载体的？…

目的 以绿色荧光蛋白为报告基因,构纤溶酶原激活物抑制物－１与ＧＦＰ融合基因的真核表达质粒,在活细胞状态下观察ＰＡＩ－１／ＧＦＰ融合蛋白在大鼠系膜细胞中表达。方法 利用聚合酶以应（ＰＣＲ）从含有编码人类ＰＡＩ－１（ｈＰＡＩ－１）全长ｃＤＮＡ序列的质粒ｐＵＣ１９－ＰＡＩ－１中扩增出ｈＰＡＩ－１的编码区全长ｃＤＮＡ序列,定向克隆至真核表达载体ｐＣＭＸ－ＣＦＰ。利用脂质体为转染载体,将表达质粒转染至体外培     

不同种类透析膜对单个核细胞激活产生细胞因子的影响

目的 了解不同种类透析膜对外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）产生白细胞介素－１β（ＩＬ－１β）、肿瘤坏死因子α（ＴＮＦα）、ＩＬ－６的影响。方法 分离培养ＰＢＭＣ，用放射免疫（ＲＩＡ）法测定培养上清液中ＩＬ－１β、ＴＮＦα、ＩＬ－６。结果 用铜仿（ＣＵ）膜透析，透前ＰＢＭＣ产生的ＩＬ－１β、ＴＮＦα、ＩＬ－６高于对照组；其次是聚甲基丙烯酸甲脂膜（ＰＭＭＡ）膜和ＨＥ膜。透析过程中ＰＢＭＣ产生的细胞因子都明     

IL-6、IL-1和PDGF对大鼠肾小球系膜细胞生长的影响

目的：探讨白细胞介素－６（ＩＬ－６）、白细胞介素－１（ＩＬ－１）和血小板源生长因子（ＰＤＧＦ）对大鼠肾小球系膜细胞（ＭｓＣ）增殖的影响。方法：采用改良的ＭＴＴ法和ＢｒｄＵ掺入法检测ＳＤ大鼠体外ＭｓＣ悬液中加入ＩＬ－６、ＩＬ－１及ＰＤＧＦ后１２ｈ及２４ｈ的增殖情况。分７组进行观察。结果：ＩＬ－６组、ＩＬ－１组和ＰＤＧＦ组１２ｈ及２４ｈ的光密度（ＯＤ值）与标记指数（ＬＩ）均为２％ＦＣＳ组也均高,但所有实验组均不能达２０％ＦＣＳ组的细胞增殖水平。联合应用双因子刺激１２ｈ及２４ｈ均未见明显的协同促增殖作用。结论：ＩＬ－６、ＩＬ－１及ＰＤＧＦ均能在一定程度上刺激大鼠肾小球ＭｓＣ增生。联合应用双因子刺激无明显的协同效应。     

LFA-1共刺激诱导狼疮性肾炎外周血单个核细胞IL-10表达的研究

目的：探讨淋巴细胞功能相关抗原－１（ＬＦＡ－１）对活动性狼疮肾炎（ＬＮ）外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）白介素 １０（ＩＬ－１０）的调节作用。方法：利用半定量 ＲＴ－ＰＣＲ技术观察 ＬＦＡ－ １共刺激对活动性 ＬＮ患者 ＰＢＭＣ ＩＬ－１０ ｍＲＮＡ表达的影响。结果：单独抗ＣＤ３抗体（３０ ｎｇ／ｍｌ）能诱导ＬＮ 患者ＰＢＭＣ ＩＬ－１０ ｍＲＮＡ轻微表达（０．４３＋０．０３ｖｓ ０．５５±０．４４,Ｐ＜０．０５）而在抗ＣＤ３抗体（３０ ｎｇ／ｍｌ）存在的情况下,抗ＬＦＡ－１抗体（２ μｇ／ｍｌ,相当于ＬＦＡ－１配体）共刺激时明显增加了ＰＢＭＣ ＩＬ—１０ ｍＲＮＡ表达（１．３１±０．０８ｖｓ ０．５５＋０,０４,Ｐ＜０．０１）。ＬＦＡ－１中和抗体明显抑制了这种共刺激诱导的ＩＬ—１０ ｍＲＮＡ表达（１．３１±０．０８ｖｓ ０．６４ ±０．０３,Ｐ＜０．０１）。抗ＬＦＡ－１抗体单独刺激时并不引起 ＩＬ－１０ ｍＲＮＡ表达变化（Ｐ＞０．０５）。结论：ＬＦＡ－１作为共刺激分子诱导 ＩＬ－ １０ ｍＲＮＡ表达可能是其参与 ＬＮ发病的机制之一。     

细胞因子IL-1β和TNF-α mRNA在生育者精子的表达

目的 证实生育者精子可以合成细胞因子白细胞介素－１β（ＩＬ－β）和肿瘤坏死因子－α（ＴＮＦ－α）。方法 应用逆转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）和序列测定技术检测１０名正常生育者精子ＩＬ－１β和ＴＮＦ－α ｍＲＮＡ的表达。结果 １０名生育精子均有ＩＬ－１β和ＴＮＦ－α ｍＲＮＡ的表达,其ｃＤＮＡ序列与人其它组织细胞ＩＬ－１β和ＴＮＦ－α ｃＤＮＡ的序列完全一致。结论 生育者精子可以合成ＩＬ－１β和Ｔ     

血管紧张素转化酶抑制剂减轻肾小球硬化机制的探讨

目的探讨血管紧张素转化酶抑制剂对肾小球细胞外基质产生和降解的作用。方法用５／６肾切除的方法诱导大鼠肾小球硬化模型并给予血管紧张素转化酶抑制剂苯那普利（６ｍｇｋｇ－１／ｄ）治疗６周，观察了大鼠血压、蛋白尿和残余肾组织的病理改变以及用免疫组化和Ｎｏｒｔｈｅｒｎｚ印迹杂交的方法检测了纤维连接蛋白沉积和血管紧张素Ⅱ１Ａ（ＡＴ１Ａ）受体、纤溶酶原激活物抑制物－１（ＰＡＩ－１）及转化生长因子β（ＴＧＦβ）基因的表达。结果苯那普利治疗能明显降低５／６肾切除大鼠血压、尿蛋白排泄和减轻肾脏的病理改变，并且减少了残余肾组织中纤维连接蛋白的沉积以及降低了ＡＴＩＡ受体、ＰＡＩ－１和ＴＧＦβ基因的表达。结论通过抑制ＰＡＩ－１和ＴＧＦβ基因的表达，苯那普利减少了细胞外基质的产生并促使其降解，这可能是血管紧张素转化酶抑制剂减轻肾小球硬化的重要途径之一。     

黄芪当归合剂对肾病综合征鼠肾转化生长因子β1的影响

目的探讨黄芪当归合剂降脂及减少肾小球细胞外基质沉积的作用是否与肾脏转化生长因子（ＴＧＦ）β１表达的改变有关。方法用嘌呤霉素致肾病综合征大鼠，随机分肾病对照、中药、西药治疗三组。用免疫组化及原位杂交观察肾脏ＴＧＦβ１表达及细胞外基质（ＥＣＭ）沉积。以计算机图象分析进行半定量比较。结果正常组，可见ＴＧＦβ１蛋白及ｍＲＮＡ于肾小管上皮细胞微弱表达，肾小球系膜区ＴＧＦβ１ｍＲＮＡ弱表达。其余各组ＴＧＦβ１蛋白表达位于肾小管上皮细胞，ｍＲＮＡ表达位于肾小球系膜细胞及肾小管上皮细胞，而后者表达更明显。两治疗组ＴＧＦβ１表达较肾病组明显降低（Ｐ＜０．００１），两治疗组间比较，无显著性差异。两治疗组细胞外基质沉积均明显少于肾病对照组。结论黄芪当归合剂及ＨＭＧＣｏＡ还原酶抑制剂对肾病综合征鼠能明显减少肾小球细胞外基质沉积，同时使ＴＧＦβ１表达的下调。提示黄芪当归合剂可能通过这一下调作用减少肾小球细胞外基质的沉积     

黄芪皂甙对人系膜细胞基质分泌和β1整合素表达的影响

目的 了解黄芪皂甙对人肾小球系膜细胞（ＨＭＣ）的影响。方法 应用不同浓度的黄芪皂甙或黄芪皂甙血清处理经人理组血小板衍化生长因子（ＰＤＧＦ－ＢＢ）刺激的培养的人系膜细胞，分别采用四甲基偶氮唑蓝（ＭＴＴ）法和酶联免疫吸附（ＥＬＩＳＡ）方法检测系膜细胞的增殖和Ⅳ型胶原分泌情况，用逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）法检测β１整合素基因的表达。结果 经黄芪皂甙或黄芪血清处理７２ｈ后，由ＰＤＧＦ－ＢＢ诱导的     

电针对神经损伤后神经生长因子mRNA及胰岛素样生长因子-1 mRNA表达的影响

目的 观察电针对神经损伤后神经生长因子（ＮＧＦ） ｍＲＮＡ和胰岛素样生长因子－１（ＩＧＦ－１）ｍＲＮＡ表达的影响。方法 ＳＤ大鼠９０只切断右侧坐骨神经并缝合,随机分成对照组与实验组。实验组每天电针４５分钟。分别于术后１、２、４、６及１０周取吻合口远段的神经,抽提总ＲＮＡ。采用逆转录－多聚酶链反应技术检测损伤神经组织中ＮＧＦ、ＩＧＦ－１ ｍＲＮＡ的表达水平。结果 实验组ＮＧＦ ｍＲＮＡ的表达自伤后第     

TGF—β1,PAI—1与糖尿病肾病

糖尿病时,多种机制引起转化生长因子β１（ＴＧＦ－β１）和纤溶酶原激活物抑制物１（ＰＡＩ－１）在肾脏局部过度表达。ＴＧＦ－β１有抑制细胞有丝分理解,促进细胞外基质（ＥＣＭ）合成,抑制其降解的作用,ＰＡＩ－１则抑制ＥＣＭ降解,二者共同作用,导致肾脏肥大和ＥＣ积聚。近年来,二者对糖尿病的诊断和治疗的临床意义备受人们的关注。     

类胰岛素生长因子—1及其受体mRNA在培养肌腱细胞内的表达

为了进一步探讨类胰岛素生长因子－１（ＩＧＦ－１）受体系统在培养肌腱细胞群体生命活动中的变化，采用地高辛标记的ＩＧＦ－１及其受体基因的寡核苷酸探针，对原代、第６代及第１３代肌腱细胞ＲＮＡ进行杂交，探测ＩＧＦ－１及其受体在上述细胞中的ｍＲＮＡ表达。结果发现，上述三种细胞均表达ＩＧＦ－１受体ｍＲＮＡ；只有原代和第６代细胞表达ＩＧＦ－１ｍＲＮＡ，而第１３代细胞不表达ＩＧＦ－１ｍＲＮＡ。提示，ＩＧＦ－１ｍＲＮＡ不表达可能是导致第１３代肌腱细胞增殖能力下降的原因之一。     

NF—kB及其能脏疾病关系研究进展

ＮＦ－ｋＢ是参与基因转录的蛋白质分子，广泛存在于机体各种组织细胞中。当细胞受到外界面素刺激时，胞质内ＮＦ－ｋＢ与抑制蛋白（ＩｋＰｓ）分离并活化，进入细胞核内与ＤＮＡ结合启动基因转录，调节包括细胞因子和炎症介质（如ＩＬ－２、ＩＬ－２ａ、ＩＬ－６、ＩＬ－８，ＶＣＡＭ、ＩＣＡＭ、Ｅ－ｓｅ－ｋｅｃｔｉｎ、ＩＦＮ－β、ＭＣＰ－１、ＲＡＮＴＥＳ等）在内的众多蛋白质表达，从而参与调节组织细胞的生理、病理反应。在     

p38信号通路在脂多糖诱导的大鼠系膜细胞产生白细胞介素1？…

目的 探讨ｐ３８信号通路在肾小球系膜细胞促炎介质白细胞介素１（ＩＬ－１）β表达中的作用。方法 采用免疫沉淀法,免疫复合物蛋白激酶测定,Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔｔｉｎｇ检测ｐ３８信号通路在脂多糖（ＬＰＳ）诱导的肾小球系膜细胞炎症反应中的活化程度,应用逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）和ＥＬＩＳＡ糖（ＬＰＳ）诱导的肾小系膜细胞炎症反应中的活化程度,应用逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）和ＥＬＩＳＡ     

白细胞介素10抑制核因子кB介导的肾小管上皮细胞表达细胞间黏附分子1

目的研究白细胞介素１０（ＩＬ－１０）对人近端肾小管上皮细胞（ＨＫ－２细胞）在促炎症因子肿瘤坏死因子α（ＴＮＦα）作用下表达细胞间黏附分子１（ＩＣＡＭ－ｌ）及其相关核转录途径的影响。方法 用ＨＫ－２细胞作靶细胞，用细胞酶联免疫吸附法（ＥＩＪＳＡ）和Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交观察ＩＣＡＭ－１的蛋白和基因的表达，以电泳迁移率变动法测定转录因子核因子ｋＢ （ＮＦｋＢ）和激活蛋白 Ｉ（ＡＰ－１）的活性。结果ＴＮＦα呈剂量依赖地诱导ＨＫ－２细胞ＮＦｋＢ的活化及ＩＣＡＭ－１的基因和蛋白表达，这些作用可以被ＮＦｋＢ的抑制剂对甲苯磺－Ｌ－苯丙氨酸氯甲基甲酮（ＴＰＣＫ）所抑制，但ＴＮＦα对ＨＫ－２细胞的ＡＰ－１活性无影响。 ＩＬ－１０（１～ ２０ｎｇ／ｍｌ）可抑制 ＴＮＦα诱导的 ＨＫ－２细胞 ＩＣＡＭ－ｌ基因和蛋白表达及 ＮＦｋＢ的活化。结论ＴＮＦα诱导人肾小管上皮细胞ＨＫ－２的ＮＦｋＢ活化，进而促进ＩＣＡＭ－ｌ基因和蛋白表达，ＩＬ－１０可抑制ＴＮＦα诱导的上述炎症效应。     

系膜增殖性肾炎患者肾小球细胞IL-6、GP130和JunB mRNA表达及其意义

目的探讨白细胞介素６（ＩＬ－６）信号传递过程中某些成份（ＧＰ１３０、ＪｕｎＢ）在ＭｅｓＰＧＮ分子发病机制的作用。方法用原位杂交技术观察了ＭｅｓＰＧＮ患者肾活检组织肾小球细胞中ＩＬ－６、ＧＰ１３０、ＪｕｎＢｍＲＮＡ表达，并分析了其与患者肾小球系膜扩张、系膜细胞增殖程度、尿蛋白排泄量之间的关系。结果ＩＬ－６、ＧＰ１３０、ＪｕｎＢｍＲＮＡ表达分别是７．１±０．８、８．６±０．９、６．９±０．８，明显高于正常对照组（Ｐ＜０．０１），且相互间呈正相关；ＩＬ－６、ＧＰ１３０基因表达量与系膜扩张、尿蛋白排泄量呈正相关，中度系膜增殖性肾炎组、尿蛋白＞３．５克／日组，ＩＬ－６，ＧＰ１３０基因表达量明显高于轻度系膜增殖性肾炎组与尿蛋白＜３．５克／日组。结论ＩＬ－６及其信息传递中的ＧＰ１３０、ＪｕｎＢ基因异常表达在ＭｅｓＰＧＮ分子发病机制起一定作用。