血CRP和Wnt5a水平的动态变化对脓毒症诊疗的临床意义

目的探讨动态监测血C反应蛋白（C reactire protein,CRP）和Wnt5a水平的相关变化对脓毒症患者诊疗的临床意义。方法选择2010-01/2014-02月作者科室收住的脓毒症患者15例,将15例脓毒症患者随机配对分为常规治疗组,常规治疗＋胰岛素组,常规治疗＋强化胰岛素组。在入科的第2,4,6,8天检测CRP及Wnt5a水平,同时行血培养,根据血培养结果分为血培养阳性组和血培养阴性组。结果在脓毒症血培养阳性组第2,4,6,8天,Wnt5a水平及第6,8天的CRP水平明显高于血培养阴性组;三组患者中CRP水平与Wnt5a随时间呈下降趋势,在ROC曲线中,Wnt5a有更好的敏感性和特异性。结论脓毒症患者血清Wnt5a水平较CRP水平与脓毒症严重程度有着更明显的相关性,动态监测Wnt5a水平变化有助于脓毒症严重程度的判断及临床治疗。     

脓毒症患儿不同血糖水平对脏器损伤、氧化应激反应及Wnt5a炎症通路的影响

目的:探讨脓毒症患儿不同血糖水平对脏器损伤、氧化应激反应及Wnt5a炎症通路的影响。方法:回顾性收集2014年1月~2015年12月间广东省惠州市中心人民医院收治的脓毒症患儿70例,根据血糖水平分为脓毒症A组(血糖>10mmol/L)29例、脓毒症B组(血糖≤10mmol/L)41例,另取同期在广东省惠州市中心人民医院接受疫苗接种、血糖水平正常的健康小儿50例作为健康对照组。入院后当日,采用放射免疫法检测肝功能指标;采用全自动生化仪检测氧化应激指标;采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测Wnt5a炎症通路指标含量。结果:脓毒症A组患者的肝功能指标TBIL、ALT、AST含量高于脓毒症B组及健康对照组(P<0.05);氧化应激指标AOPPs、LHP、ROS、MDA含量高于脓毒症B组及健康对照组,GSH-Px含量小于脓毒症B组及健康对照组(P<0.05);血清Wnt5a炎症通路指标IL-1β、IL-6、IL-12、MIP-1β含量高于脓毒症B组及健康对照组(P<0.05)。结论:高血糖的脓毒症患儿肝功能损伤较重,氧化应激及炎症反应程度剧烈,是病情严重及预后不佳的重要指标。     

血清降钙素原测定有助于早期诊断烧伤后脓毒症

目的:观察烧伤后全身性炎症反应综合征(SIRS)、脓毒症患者血清降钙素原(PCT)水平变化.方法:本组共计67例烧伤患者,其中无感染组(对照组)40例,SIRS组27例,伴有脓毒症组6例.应用半定量固相免疫测定法测定患者血清PCT水平.结果:无感染患者血中PCT正常或轻度升高,SIRS患者血中PCT中重度升高,而感染脓毒症患者血中PCT明显高于非感染性SIRS患者.同时SIRS组和脓毒症组患者之间的体温、心率、呼吸和白细胞计数等传统炎症指标无明显差异.结论:血清PCT值有助于早期诊断烧伤后脓毒症.     

重度烧伤患者早期血清降钙素原检测的临床意义

目的探讨重度烧伤患者早期血清降钙素原（PCT）检测的临床意义。方法收集重度烧伤患者52例,按烧伤面积分成A、B两组;按是否发生脓毒症分为非脓毒症组和脓毒症组。分别观察不同分组患者烧伤后入院时、入院后1d、3d及5d血清PCT变化。结果B组烧伤患者血清PCT水平白入院后1d起明显高于A组患者,差异均有统计学意义（均P〈0．05）;脓毒症组患者血清PCT水平自入院后1d起明显高于非脓毒症患者,差异均有统计学意义（均P〈0．05）。结论血清PCT水平与烧伤面积有关,烧伤面积越大,早期PCT水平升高越明显,并且烧伤脓毒症患者早期即可出现血清PCT的升高,血清PCT检测有助于预测烧伤脓毒症的发生。     

重度烧伤并发脓毒症64例血清TNF-α、IL-1β、IL-6水平测定及其相关性分析

目的:探讨烧伤脓毒症患者的血清TNF-α、IL-1β、IL-6水平与相应治疗方案的相关性。方法:将我院收治的96例重度烧伤患者,依据并发和未并发脓毒血症分为未并发脓毒症组、脓毒症存活组和脓毒症死亡组,对重度烧伤并发脓毒症的相关因素进行分析,并采用ELISA试剂盒对三组患者治疗前后血清中TNF-α、IL-1β、IL-6水平进行检测,分析其与脓毒症的相关性。结果:相比未并发脓毒症组,脓毒症存活组和脓毒症死亡组患者在治疗前血清中TNF-α、IL-1β、IL-6水平明显上升(P<0.05);脓毒症存活组不同时间点的3种因子比较均有显著性差异(P<0.05),而脓毒症死亡组无显著性差异(P>0.05)。结论:烧伤脓毒症患者血清中炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6水平可作为烧伤并发脓毒症及后期治疗效果的预测指标。     

参草通脉颗粒对慢性心衰大鼠Wnt信号通路配体表达的影响

目的 分析参草通脉颗粒治疗慢性心衰的疗效机理.方法 应用冠脉结扎法,制备CHF大鼠模型,应用参草通脉颗粒和赖诺普利对照治疗,测定大鼠血清中Wnt3a、Wnt5a、Wnt11配体蛋白水平.结果 模型组大鼠血清中Wnt3a、Wnt5a、Wnt11蛋白水平明显降低;经药物干预后,参草通脉颗粒组和赖诺普利组大鼠血清中Wnt3a、Wnt5a、Wnt11蛋白水平明显升高,且参草通脉颗粒组效果优于赖诺普利组(P<0.01).结论 参草通脉颗粒通过调控经典和非经典Wnt通路,治疗慢性心衰疗效显著.     

血清sTREM-1联合SIRS评分对烧伤患者并发脓毒症的诊断效能

目的 探讨烧伤患者血清可溶性髓样细胞触发受体1(sTREM-1)及全身炎症反应综合征(SIRS)评分的变化,以及两指标对烧伤患者并发脓毒症的诊断价值。方法 选择2019年3月—2020年10月山东省立第三医院收治的193例烧伤患者,其中局部感染65例(局部感染组),合并脓毒症38例(脓毒症组),单纯烧伤90例(单纯烧伤组)。检测血清sTREM-1水平,进行SIRS评分,采用受试者工作特征曲线(ROC)分析sTREM-1联合SIRS评分诊断烧伤并发脓毒症的价值。结果 脓毒症组血清sTREM-1水平[(169.83±31.54)ng/mL、(124.05±24.09)ng/mL、(72.18±11.58)ng/mL],SIRS评分[3.5(2.0,4.0)分、1.5(1.0,2.0)分、0.5(0,1.0)分]高于局部感染组和单纯烧伤组(P<0.05),局部感染组血清sTREM-1水平、SIRS评分高于单纯烧伤组(P<0.05)。Logistic回归分析结果显示,高水平sTREM-1(OR=2.003,95%CI:1.945～2.135)是烧伤患者合并脓毒症的危险因素(P<...     

血清降钙素原对烧伤脓毒症患者预后的临床意义

目的:探讨血清降钙素原(procalcitonin,PCT)对烧伤脓毒症患者预后的临床意义。方法:将46例烧伤脓毒症患者根据预后情况分为存活组27例与死亡组19例。46例烧伤脓毒症患者在确诊为脓毒症时及确诊后的第1、3、5、7、9天检测血清PCT和Hs-CRP及进行急性生理学及慢性健康状况评分(APACHEⅡ评分)。在烧伤脓毒症确诊时绘制46例患者血清PCT值的受试者工作特征(ROC)曲线,分析其对死亡的预测效果。结果:死亡组血清PCT在确诊脓毒症时及确诊后的第1、3、5、7、9天一直维持较高的水平,存活组血清PCT下降,且死亡组均高于存活组(P<0.05);死亡组Hs-CRP和APACHEⅡ评分在确诊脓毒症时及确诊后的第1天与生存组比较差异无显著性(P>0.05);死亡组Hs-CRP和APACHEⅡ评分在确诊脓毒症后的第3、5、7、9天高于生存组(P<0.05)。46例烧伤脓毒症患者的血清PCT水平对死亡预测的ROC曲线下总面积为0.931,11.23 ng/m L为血清PCT的最佳阈值,灵敏度为90.6%,特异性度为100%。结论:血清PCT值可作为烧伤脓毒症患者预后判断指标,为后期临床治疗提供依据,降低病死率。     

严重烧伤后高迁移率族蛋白B1的变化及其与脓毒症的关系

目的动态观察严重烧伤患者血浆中高迁移率族蛋白B1(HMGB1)水平的变化并探讨其与脓毒症及内毒素血症的关系。方法25例烧伤总体表面积大于30%患者,根据是否并发脓毒症分组(脓毒症组14例、非脓毒症组11例),采用酶联免疫吸附实验及改良基质显色法鲎实验分别检测患者伤后1、3、5、7、14、21、28d血浆HMGB1及内毒素含量的变化。结果严重烧伤患者伤后第1天血浆中HMGB1含量显著升高,其中伤后第7、21、28天脓毒症组HMGB1含量显著高于非脓毒症组(P<0.05)。脓毒症患者存活组伤后第3、21天HMGB1含量显著低于非存活组(P<0.05,P<0.01),血浆中HMGB1含量与是否易并发脓毒症有关,但与烧伤总体表面积无相关性(P>0.05)。伤后第3、5、7、21天血浆HMGB1与内毒素含量呈显著正相关(P<0.05,P<0.01)。结论HMGB1作为重要的晚期炎症介质参与严重烧伤后脓毒症的病理生理过程,其诱生与内毒素刺激密切相关,动态观察其水平有助于烧伤后病程监测及患者预后判断。     

脓毒症患者中血清程序化细胞死亡因子5水平的变化

目的:探讨血清程序化细胞死亡因子5(programmed cell death 5 protein,PDCD5)水平在全身炎症反应综合征(systemic inflammatory response syndrome,SIRS)、脓毒症及重症脓毒症患者中的变化。方法:78例患者纳入本研究,其中SIRS(脓毒症除外)患者28例、脓毒症(重症脓毒症除外)患者23例、重症脓毒症患者27例,并选取健康对照22例,分别收集其静脉血清,采用酶联免疫吸附法检测PDCD5水平,比较PDCD5水平的差异。采用Spearman相关分析评价血清PDCD5水平与急性生理和慢性健康状况评分Ⅱ(acute physiology and chronic health evaluationⅡ,APACHEⅡ)积分、超敏C反应蛋白(high-sensitivity C-reactive protein,hs-CRP)、白细胞计数、中性粒细胞计数和年龄等因素的相关性。结果:在SIRS组、脓毒症组及重症脓毒症组中,血清PDCD5水平分别为(19.07±8.91)、(29.03±13.27)及(42.83±17.32)μg/L,显著高于健康对照组的(0.32±0.02)μg/L(P<0.05);血清PDCD5水平在SIRS组、脓毒症组及重症脓毒症组中呈现依次升高的变化规律,组间差异具有统计学意义(P<0.05)。此外,血清PDCD5水平与APACHEⅡ积分呈正相关(r=0.572,P<0.05)。结论:脓毒症患者血清PDCD5水平随着病情加重呈升高趋势,提示PDCD5表达上调在脓毒症发生、发展中可能起到一定作用。     

Wnt5a基因在急性髓细胞白血病病例中的表达分析

目的检测Wnt5a基因在良性血液病、急性髓细胞白血病及缓解病例骨髓中的表达情况,探讨Wnt5a在急性髓细胞白血病发生中的作用。方法RT-PCR方法检测18例良性血液病病例,30例急性髓细胞白血病初诊病例和25例缓解病例骨髓中Wnt5amRNA的表达情况;免疫细胞化学法检测对应骨髓中Wnt5a蛋白的表达情况。结果Wnt5a mRNA在良性血液病、急性髓细胞白血病病例和缓解病例中的阳性表达率分别为88.9%(16/18)、30%(9/30)和68.0%(17/25),半定量值分别为(0.3826±0.1908)、(0.1041±0.0590)和(0.2606±0.1466)。统计学分析Wnt5a mRNA在初诊病例中的表达明显低于缓解病例(P0.05),缓解病例与良性血液病之间无明显差异(P0.05);Wnt5a蛋白在良性血液病中阳性表达,在急性髓细胞白血病初诊病例中低表达或表达缺失,在缓解病例中表达恢复。结论Wnt5a基因在急性髓细胞白血病初诊病例中表达缺失而在治疗缓解病例中表达恢复,提示急性髓系白血病的发生可能与Wnt5a基因表达缺失或下调有关,Wnt5a可以作为一个髓系白血病诊断、指导治疗和疗效评价的指标。     

Wnt5a与髓细胞白血病发生关系的研究

目的观察Wnt5a在髓细胞白血病中的表达以及外源性Wnt5a对K562细胞生长的影响。方法RT-PCR检测5例急性髓细胞白血病、6例慢性髓细胞白血病外周血或骨髓标本及白血病细胞系中Wnt5a的表达。用AdWnt5a和AdG-FP腺病毒转染CHO细胞制备的条件培养液分别处理K562细胞1～5d,采用细胞计数、台盼蓝染色、细胞形态等方法观察Wnt5a对K562细胞生长影响。结果6例慢性髓细胞白血病均未表达Wnt5a,5例急性髓细胞白血病中4例不表达或弱表达,仅1例完全缓解的病人高表达Wnt5a。K562、HL-60细胞中Wnt5a也不表达,Jurkat细胞高表达。以GFP条件培养液处理细胞为对照,Wnt5a条件培养液处理K562细胞生长明显受到抑制,但未影响细胞的存活率。与对照相比细胞形态上出现了分化的表型。结论Wnt5a在急慢性髓细胞白血病外周血或骨髓中以及髓系白血病细胞株中均表达缺失或降低,并且外源性的Wnt5a可抑制K562细胞生长并有诱导其分化的现象,提示Wnt5a的表达下调可能与髓细胞白血病的发生有关。     

Wnt5a在小鼠牙骨质发育中的表达特点及其对成牙骨质细胞分化的影响

目的：探讨Wnt家族5A蛋白（Wnt5a）在小鼠出生后牙骨质中的表达特点以及其对体外培养成牙骨质细胞分化的影响,阐明Wnt非经典通路调控牙根发育的机制。方法：选择出生后0.5、4.5、10.5、16.5、20.5、24.5、26.5和30.5d昆明小鼠并按以上相应时间点分组,每组3只;在相应时间点采用脱臼法处死小鼠,分离下颌第一磨牙及牙周组织。免疫组织化学染色法观察小鼠牙体和牙周组织中Wnt5a的表达特点。将小鼠成牙骨质细胞OCCM30分为实验组和对照组。实验组加入200μg·L^-1重组Wnt5a蛋白,对照组无添加;提取细胞总RNA。RT-PCR法检测2组OCCM30细胞中Ocn、Opn、Alp、Bsp、Wnt5a和Runx-2基因的相对表达水平。结果：小鼠出生后0.5d,第一磨牙牙胚中无Wnt5a阳性表达;出生后4.5d,成釉细胞和成牙本质细胞中Wnt5a阳性表达较强;出生后16.5d,可见成牙骨质细胞中Wnt5a呈阳性表达;出生后20.5~30.5 d,成牙本质细胞和牙周膜细胞中Wnt5a呈阳性表达。与对照组比较,实验组成牙骨质细胞中Ocn和Alp基因相对表达水平降低（P<0.05）。结论：Wnt5a在牙根发育过程中的表达特点为从无到有,呈现规律性表达;Wnt5a下调分化基因的表达,在牙骨质发育中发挥重要作用。     

肥胖及超重人群中血清Wnt5a水平与肝脏脂肪变和纤维化 程度的相关性研究

目的 探讨肥胖及超重人群中血清Wnt5a水平与肝脏脂肪变及纤维化程度的相关性。方法 134例在我院体检中心参加体检并在内分泌代谢科就诊,同时完成了瞬时弹性扫描仪（Fibroscan）检查的肥胖或超重患者,根据Fibroscan检测结果〔肝脏实时受控衰减参数（controlled attenuation parameter, CAP）评估肝脏脂肪变性程度,瞬时肝脏弹性测量值（elasticity,E）评估纤维化程度〕分为正常对照组（27例）、轻度非酒精性脂肪肝（non-alcoholic fatty liver disease, NAFLD）组（51例）和中重度NAFLD组（56例）。同时测量腰围（waist circumstance, WC）、臀围（hip circumstance, HC）,进行糖耐量试验和胰岛功能试验,检测血清转氨酶、血脂等,并采用酶联免疫吸附法（ELISA）测定血清Wnt5a和β-连环蛋白（β-catenin）水平。结果 对照组、轻度NAFLD组和中重度NAFLD组3组间年龄、性别、体质量指数（BMI）、WC、HC差异均无统计学意义（ P>0.05）。3组间空腹及餐后2 h血糖、空腹胰岛素水平和胰岛素抵抗指数差异有统计学意义（ P<0.05）,而餐后2 h胰岛素水平差异无统计学意义（ P>0.05）。轻度NAFLD组与对照组的CAP值、E值、血清Wnt5a和β-catenin水平相当,差异均无统计学意义（ P>0.05）。中重度NAFLD组CAP值、E值和血清Wnt5a均高于对照组和轻度NAFLD组,差异有统计学意义（ P<0.05）。Spearman相关分析显示,血清Wnt5a水平与CAP值呈负相关（相关系数 r=-0.19, P<0.000 1）,与E值无显著相关关系（ r=0.02, P=0.241）。结论 血清Wnt5a水平与NAFLD有关,在肥胖或超重合并NAFLD的发病不同阶段可能起着不同的病理生理作用。     

肾癌组织中Wnt5a的表达及其临床意义

目的探讨Wnt5a在肾癌组织中的表达与病理意义以及对肾癌细胞增殖及侵袭潜能的影响,为寻找肾癌有效的治疗途径及预后判定指标提供依据。方法对43例肾癌组织标本和11例正常肾组织标本中的Wnt5amRNA和Wnt5a蛋白表达水平进行检测,分析肾癌组织Wnt5a mRNA表达与临床病理特征的关系,及Wnt5a蛋白表达与预后的关系。结果 Wnt5a mRNA和Wnt5a蛋白在肾癌组织中的阳性表达率均显著高于正常肾组织（P〈0.05）。肾鳞癌的Wnt5a mRNA表达水平明显高于肾腺癌（P〈0.01）;低分化组显著高于高分化组（P〈0.01）。Wnt5a蛋白阳性的肾癌患者2年生存率明显低于阴性患者（P〈0.01）。结论 Wnt5a表达水平在肾癌细胞中明显增高,且与肾癌的细胞分化程度、组织类型及预后密切相关,提示Wnt5a可能参与肾癌的发生发展过程。     

稳定过表达Wnt5a对K562细胞生物学性状的影响

目的 构建稳定过表达Wnt5a的K562细胞株,并观察稳定过表达Wnt5a对K562细胞牛物学性状的影响.方法 构建质粒pSEB-Wnt5a;包装得到含有逆转录病毒的上清,感染K562细胞,筛选出感染成功的细胞;Western blot检测蛋白的表达;细胞计数、瑞氏染色、透射电子显微镜观察对细胞生物学性状的影响.结果 成功构建了质粒pSEB-Wnt5a;筛选得到了感染成功的细胞;感染pSEB-Wnt5a逆转录病毒的K562细胞Wnt5a蛋白表达水平明显高于感染空病毒载体的细胞;与K562-vector细胞相比,K562-Wnt5a细胞的增殖被明显抑制,并出现了向成熟分化的形态学特征.结论 成功构建了稳定过表达Wnt5a的K562细胞株;稳定过表达Wnt5a抑制K562细胞增殖并可以促进其向成熟分化,提示Wnt5a在白血病发生中可能起到抑癌基因的作用.     

Wnt-5a与肿瘤的研究进展

Wnt途径是一种对控制胚胎发育起重要作用的信号传导途径,而其不恰当地活化参与人类多种肿瘤的发生.新近多项肿瘤相关研究显示,Wnt-5a是一个良好的肿瘤侵袭和预后标记物,但令人费解的是,它在不同肿瘤中具有截然不同的表达方式.现就近年来Wnt-5a与肿瘤间的相关性研究进展作一综述.     

Wnt5a对人肺腺癌A549细胞凋亡的调控作用及其机制

目的：探讨Wnt5a对人肺腺癌A549细胞株凋亡的调控作用,并阐明其机制。方法：选择人肺腺癌A549细胞,采用Wnt5a处理的A549细胞作为处理组,以C培养液处理的A549细胞作为对照组,采用TUNEL染色法检测Wnt5a诱导的A549细胞凋亡小体,Annexin Ⅴ-FITC/PI双标法检测2组A549细胞凋亡率,采用DCFH-DA荧光探针法检测2组A549细胞活性氧（ROS）水平,采用JC-1染色法检测2组A549细胞线粒体跨膜电位水平,蛋白免疫印迹法检测2组A549细胞中凋亡相关蛋白表达水平。结果：与对照组比较,处理组A549细胞在处理12、24和48h后细胞凋亡率明显升高（P<0.01）,ROS水平升高（P<0.05）,线粒体膜电位水平下降（P<0.05）,促凋亡蛋白BAX的表达量上调,AIF蛋白表达量下调。结论：Wnt5a对人肺腺癌细胞凋亡具有调控作用,其通过线粒体凋亡途径发挥诱导细胞凋亡作用。     

Wnt5a基因在淋巴细胞系恶性肿瘤中的表达分析

目的检测Wnt5a基因在淋巴细胞系恶性肿瘤患者骨髓中的表达,探讨Wnt5a基因与淋巴细胞系恶性肿瘤发生的关系。方法采用氯化氨试剂裂解红细胞收集有核细胞;半定量RT-PCR方法检测19例淋巴细胞系恶性肿瘤、11例治疗缓解淋巴细胞系恶性肿瘤、27例正常人骨髓标本和10例脐带血CD34^＋细胞中Wnt5a mRNA的表达;免疫细胞化学法检测部分标本中Wnt5a蛋白表达。结果Wnt5a mRNA在正常人、淋巴细胞系恶性肿瘤病例、治疗缓解病例和脐带血CD34^＋细胞中的阳性表达率分别为88．9％（24／27）、10．5％（2／19）、72．7％（8／11）、100％（10／10）,半定量均值分别为（0．4015&#177;0．150）、（0．1139&#177;0．048）、（0．3570&#177;0．141）、（0．2475&#177;0．095）。经统计学分析Wnt5a mRNA在淋巴细胞系恶性肿瘤病例中的表达明显低于正常人（P〈0．05）;治疗缓解病例与正常人间没有显著性差异（P〉0．05）,而与未缓解病例间有差异（P〈0．05）;在脐带血CD34^＋细胞中的表达低于正常人（P〈0．05）但高于淋巴细胞系恶性肿瘤病例（P〈0．05）;Wnt5a蛋白在正常人中阳性表达,而在淋巴细胞系恶性肿瘤病例中低表达或表达缺失。结论Wnt5a基因在淋巴细胞系恶性肿瘤病例中表达缺失而在治疗缓解病例中表达恢复,提示淋巴细胞系恶性肿瘤的发生可能与Wnt5a基因表达缺失或下调有关,Wnt5a可以作为一个淋巴细胞系恶性肿瘤诊断与疗效评价的指标。