先天性脊柱骨骺发育不良的产前快速分子诊断

目的:对先天性脊柱骨骺发育不良提供1种快速分子产前诊断技术. 方法:对该患者于孕14周进行羊膜囊穿刺,获取羊水20 ml,提取羊水细胞基因组DNA.选用3个短串连重复(STR)序列位点,进行荧光PCR检测,以排除母源细胞污染.在此基础上,对COL2A1基因的第23外显子进行扩增,并以此为模板,针对COL2A1基因的第23外显子1510G→A 的突变进行SSP-PCR.根据是否存在特异性的扩增条带进行判断,对初次扩增的产物测序,以证实巢式SSP-PCR的结果. 结果:对D13S 317、D18S51和D21S11位点的STR检测结果排除母源细胞的污染. 羊水样本仅在野生型反应管中有扩增产物,表明胎儿是COL2A1基因的第23外显子1510 G的纯合子,未带COL2A1基因的第23外显子1510G→A 的突变.测序结果与SSP-PCR结果一致. 结论:SSP-PCR技术快速简便、敏感特异,可作为该突变的快速分子诊断.其他已知点突变遗传病的快速分子诊断也可以考虑使用SSP-PCR技术进行.     

一例Ⅰ型成骨不全家系的基因定位及突变检测

目的 对国内1例成骨不全(OI)家系进行基因突变及突变效应分析,为研究中国人群的成骨不全基因突变特点提供线索.方法 对成骨不全Ⅰ型胶原基因COL1A1和COL1A2所在的17号染色体和7号染色体分别进行连锁分析,对致病基因做初步判断,然后用聚合酶链反应扩增致病基因外显子,并测序检出基因突变.结果 该家系为COL1A1基因突变,所有患者在该基因的第8个内含子剪切受体位点处为AG→GG(IVS8-2A＞G)突变.结论 对比COL1A1基因突变数据库,该突变为一新发现突变.     

一例Ⅰ型成骨不全家系的基因定位及突变检测

目的对国内1例成骨不全(OI)家系进行基因突变及突变效应分析,为研究中国人群的成骨不全基因突变特点提供线索。方法对成骨不全Ⅰ型胶原基因COL1A1和COL1A2所在的17号染色体和7号染色体分别进行连锁分析,对致病基因做初步判断,然后用聚合酶链反应扩增致病基因外显子,并测序检出基因突变。结果该家系为COL1A1基因突变,所有患者在该基因的第8个内含子剪切受体位点处为AG→GG(IVS8-2A>G)突变。结论对比COL1A1基因突变数据库,该突变为一新发现突变。     

先天性脊柱骨骺发育不全

目的：研究罕见的先天性脊柱骨骺发育不全（SEDC）的遗传家系，提供骨遗传病资源。方法：对一SEDC家系进行调查，并对1例先证者的临床各相关检查、影像学及染色体进行分析一结果：发现SEDC家族中四代9例患者有共同的临床特征，主要侵犯脊椎、髋关节、股骨头、颈椎：结论：SEDC遗传方式为常染色体显性遗传。可能为胚胎期基因缺陷致骨骺生长层发育障碍：进一步的分子病因学研究可为该病的家系遗传预测提供依据。     

迟发性脊柱骨骺发育不良家系基因诊断及遗传学发病机制分析

目的 迟发性脊柱骨骺发育不良(spondyloepiphyseal dysplasia tarda,SEDT)是一种X-连锁隐性遗传的骨软骨发育不良疾病,主要特征包括非匀称性短躯干型身材矮小及特征性的X线片表现.目前,导致该病的已知致病基因为SEDL基因.该文的主要目的是对一个来自湖南的SEDT家系进行基因诊断和遗传学发病机制分析.方法 对一例迟发性非匀称性短躯干型身材矮小的患者进行家系分析和临床诊断;采集患者及其母亲外周血,进行DNA抽提后,对SEDL基因4个外显子的编码区进行PCR扩增;琼脂糖凝胶电泳分析PCR产物是否存在及其大小;对未成功扩增的外显子进行长PCR扩增,并对长PCR扩增得到的截短PCR产物进行测序分析.结果 患者存在一个大小为1327bp的缺失,该缺失包括部分第5内含子和第6外显子编码区;患者母亲为该缺失的携带者.对缺失序列及其侧翼序列进行分析,发现第5内含子存在一个Alu序列,与第6外显子非编码区4个Alu序列序列高度相似;提示这些Alu序列的存在可能是SEDL基因发生类似缺失突变的遗传性发病机制的分子结构基础.结论 该文在一个湖南家系中发现的SEDL基因缺失突变,即包括第6外显子编码区在内的1 327 bp缺失,是一个新发现的国际上尚未报道的突变.对SEDL基因的突变检测有助于患者迟发性脊柱骨骺发育不良的确诊,也为女性携带者的诊断,产前诊断和遗传咨询奠定重要的前提基础.     

成骨不全症家系基因突变位点的检测

目的检测一I型成骨不全症家系中4例患者的基因突变位点。方法收集该家系患者外周血标本及健康人对照外周血标本,采用聚合酶链式反应、直接测序对COL1A1基因突变位点检测。结果该家系中成骨不全患者均存在COL1A1基因第23号外显子上一处G-C突变,在家系内非患者及正常对照者均未发现该突变。结论本研究为I型成骨不全的突变位点提供了新的证据,为进一步讨论COL1A1基因型和成骨不全临床分型之间的关系提供了研究基础。     

COL2A1基因突变致先天性脊柱骨骺发育不良的软骨组织超微结构观察

目的:先天性脊柱骨骺发育不良(SEDC)是常染色体显性遗传疾病,主要累及患者脊柱和长骨骨骺,发病率约为1 ∶ 100000.研究编码Ⅱ型胶原α1链的COL2A1基因G504S突变致SEDC的软骨组织超微结构改变. 方法:对SEDC引产胎儿和正常对照的软骨组织分别用苏木精-伊红(H-E)染色和甲苯胺蓝染色,在光镜下观察其形态学改变,并重点应用透射电镜和扫描电镜观察软骨组织的超微结构变化. 结果:在光镜下未观察到引产胎儿软骨组织明显变化,而在透射电镜下观察到引产胎儿软骨细胞粗面内质网异常膨大,形成包涵体结构,细胞外基质胶原纤维数量减少.扫描电镜下发现,引产胎儿软骨胶原纤维为不规则"草莓样"结构. 结论:COL2A1基因G504S突变导致软骨细胞和胶原纤维超微结构的改变,可能是SEDC发生的基础.     

先天性白内障一家系的致病基因研究

目的 对一个来自浙江省杭州地区的三代先天性白内障家系进行常染色体显性遗传基因的突变分析,以寻找其可能的致病基因及突变位点。方法 该家系共10例成员,其中包括4例患者。10 例家系成员在浙江省人民医院眼科中心接受眼科专科检查及全身检查,以排除存在白内障以外的眼部及全身疾患。10例家系成员各抽取外周血5ml,提取基因组DNA。针对国内外文献报道的与常染色体显性遗传先天性白内障相关的18 个基因（CRYAA、CRYAB、CRYBA1、CRYBA2、CRYBA4、CRYBB1、CRYBB2、CRYGC、CRYGD、CRYGS、GJA3、GJA8、MIP、BFSP、HSF4、PITX3、EPHA2、PAX6）设计引物,进行PCR 扩增,对扩产物进行测序和序列分析,了解这10例家系成员的以上基因是否存在相应的序列。结果 临床眼科检查显示该家系先天性白内障类型为粉尘状白内障。候选基因序列测定显示在CRYAA 第1 个外显子中第6 位碱基发生C→T 置换,氨基酸同为天门冬氨酸。该家系中所有患者均有此改变,而所有的正常家系成员均无此改变。结论 CRYAA 第1个外显子中第6位碱基发生C→T的同义突变可能是导致该家系先天性白内障发生的致病原因。     

成骨不全家系一个新的Ⅰ型胶原α1链蛋白基因突变

目的 对Ⅰ型胶原α1链蛋白基因（COL1A1基因）进行测序研究，旨在寻找已知或未知的COL1A1基因突变位点，探讨我国成骨不全的发病机制。方法 研究一常染色体显性遗传成骨不全家系的临床特征，设计引物对家系中患者和正常人的COL1A1基因外显子进行扩增和测序分析，同时对群体中无血缘关系的50名健康对照者进行限制性内切酶分析。结果 发现家系中成骨不全患者COL1A1基因的第3470位点的碱基G→A的突变，导致G1157D，而在家系内非患者及正常对照者中均无发现。结论 COL1A1基因突变也是中国人群中成骨不全致病原因之一，现发现的突变属成骨不全一个新的致病基因突变。甘氨酸转变成天冬氨酸的这种突变对成骨不全表型具有重要的影响。     

一个中国先天性有汗性外胚层发育不良家系的GJB6基因筛查

目的: 先天性有汗性外胚层发育不良是一种常染色体显性遗传病,GJB6基因突变与之相关。调查一个来自中国的先天性有汗性外胚层发育不良家系与GJB6基因的关系。方法: 收集一个共有17个家系成员(患者8人,5男3女)的先天性有汗性外胚层发育不良家系,采集家系成员的外周血,抽提DNA。然后针对GJB6基因的每个外显子设计引物,应用聚合酶链式反应(PCR)方法扩增GJB6基因的整个编码区,测序、筛查突变。结果: 通过对家系患者的GJB6基因筛查,发现了一个杂合错义突变c.31G>A(p.G11R)。结论: GJB6基因错义突变c.31G>A(p.G11R)导致该家系先天性有汗性外胚层发育不良。     

药物经济学概论

药物经济学是将经济学的基本原理、方法和分析技术运用于临床药物治疗过程,以求最大限度的合理利用卫生资源的一门新兴边缘学科。随着澳大利亚和加拿大安大略省政府要求对药物进行经济学评价,药物经济学研究开始被越来越多的国家所鼓励和采用,主要被应用于药品定价、决定药品补偿和共付状况、制定医院用药目录或诊疗规范以及促进合理处方等方面。药物经济学研究仍需进一步的规范,应从多方面评价其质量。     

基于WOS的中美医学信息学研究热点对比分析

以Web of Science（WOS）核心合集为数据源,检索中、美两国近10年在医学信息学领域发表的文献,采用共词分析方法与TDA软件和SPSS 20.0软件对数据进行清理和聚类分析,并通过Ucinet和NetDraw对关键词的分布进行可视化分析,总结两国在医学信息学领域的研究热点。经聚类和可视化分析发现,两国医学信息学研究既存在一致性也存在差异性,一致性表现在计算机技术在医院管理和临床诊疗中的应用,差异性表现在美国医学信息学科整体发展水平较高、对医学信息和数据的利用更为充分、医学信息学教育体系更为完善、循证医学研究水平及层次较高。     

1035名健康小儿发碘分析

目的评价北京地区儿童碘营养状况。方法分别对城区、郊区、郊县各两个的10个居民点1035名0～12岁健康儿童取头发标本,采用紫外/可见分光光度计分析头发碘含量;结果发碘均值0.7845±0.4821μg·g~(-1),高碘率36.1％,低碘率13.1％,正常50.7％:城区、郊区、郊县儿童高碘率分别为49.9％、30.2％27.9％;0～3、3～6岁、6～12岁组儿童高碘率分别为52.2％、41.5％、23.7％;男女之间碘值无差别。结论各居住区、年龄组、不同性别儿童碘含量普遍增高(P<0.05或P<0.001),北京地区儿童日常食用加碘盐已能满足生理需要,加用含碘食品或药品可导致碘过量,对儿童健康构成潜在危害。     

拉曼光谱法测定连翘苷含量的探讨

目的建立含量测定方法,对拉曼光谱内标法中2种参量的定量分析结果进行比较,确定拉曼内标定量法最适合的参量。方法分别以拉曼峰的相对峰强和峰面积比值作为参量,以不同采收时期和不同产地的连翘叶为对象,采用内标法进行连翘苷的含量测定。以相对峰强为参量时,选取样品溶液拉曼光谱中连翘苷苯环振动(1 319.1 cm-1处的强峰)和溶剂甲醇中CH3-O反对称伸缩振动(2 974.7 cm-1)作为定量峰和内标参比峰;以峰面积比值作为参量时,选取连翘苷苯环振动(1 319.1 cm-1处的强峰)和溶剂甲醇中CH3-O对称伸缩振动(3 020.9 cm-1)作为定量峰和内标参比峰。分别以定量峰与内标峰强和峰面积的比值为纵坐标,以连翘苷浓度为横坐标绘制标准曲线,并对线性和加样回收率进行比较。结果以2种参量作为响应值用于拉曼光谱定量分析,均有良好的线性,相关系数r分别为0.998 0和0.997 6;回收率均在100.04%～101.30%之间,回收完全;对2种参量的测定结果进行线性拟合,得出回归方程C2=1.030 4C1-0.033 1,r=0.999 6。结果表明两者测得结果一致,利用2种参量进行定量分析都能取得准确结果。结论无论以相对峰强,还是以峰面积比值作为参量都可以用于拉曼光谱定量分析,2种参量的测定结果基本一致。拉曼光谱用于连翘苷的定量分析具有操作简便、迅速等优点,可以用于中草药的含量测定。     

基于共词分析的国外医学信息学研究热点

对PubMed数据库2010-2012年发表的医学信息学领域的文献进行分析,确定高频主题词,构造高频主题词共现矩阵并转化为相异矩阵,利用SPSS软件对相异矩阵进行多维尺度分析和聚类分析,指出国外医学信息学的研究热点。     

基于共词分析的我国医学信息学国际发文热点研究

以Web of Science为数据源,检索我国医学信息学领域国际发文量,利用SPSS20．0软件对文献关键词进行因子聚类分析,总结出6大研究主题：核医学图像数据库存储研究;计算机自然语言处理和文本挖掘在中国传统医学诊断中的运用;统计方法和计算机处理对临床医学和研究型数据的分析和系统构建;计算机和网络在医院信息系统、临床管理系统、护理系统研发与管理中的运用;统计方法和计算机技术在临床辅助检查心电图和临床疾病的治疗与诊断、临床决策中的运用;电子医学记录和健康记录的安全管理。     

多功能的微机化流动注射分析系统

研制了一种以APPLE Ⅱ或TRS-80微机为主控机的多功能流动注射分析系统。可进行流动注射分析和停流动力学的测定,可自动求峰高、半峰宽、峰面积,求校正曲线和插值计算样品浓度及有关动力学参数等,并自动打印出峰曲线,工作曲线及样品浓度等数据结果。硬件接口卡中的八通道A/D转换器,能方便地与多种检测器进行联接。其软件采用BASIC语言编写,使得本系统具有很强的通用性和可开发性。经对Fe(Ⅱ)与Bipy反应体系的流动注射分析和HgCl_2催化的[Fe(CN)_6]~(4-)与Bipy反应体系的停流动力学研究,所得结果与文献值完全一致,表明本系统的设计是稳定可靠的。     

蚯蚓及其体腔液生化成分分析

采用常规生化方法,测得新鲜太平Ⅱ号蚯蚓及其体腔液中营养物质分别为蛋白质8.21g％和0.33g％,还原糖465.0mg％和53.58mg％,总氨基酸4932mg％(必需氨基酸1479mg％)和19.65mg％。还测得蚯蚓含脂肪1.5g％,核酸0.42g％,以及其它营养物质。     

缺氧条件下血管紧张素-2对血管内皮细胞内皮素分泌的影响及茶多酚的保护作用

目的:观察缺氧条件下血管紧张素-2对培养的血管内皮细胞分泌内皮素的影响及茶多酚的保护作用。方法:将培养的血管内皮细胞分为空白对照组、单纯缺氧组、血管紧张素-2组和血管紧张素-2+茶多酚组,采用低压舱对培养的血管内皮细胞进行缺氧,采用放射免疫方法测定各组样本细胞培养液中的内皮素浓度。结果:血管紧张素-2组的内皮素浓度显著高于单纯缺氧组,加入茶多酚后,血管内皮细胞的内皮素浓度显著降低。结论:缺氧条件下,血管紧张素-2可显著增加培养的血管内皮细胞的内皮素浓度,茶多酚可显著降低血管紧张素-2引起的内皮素浓度的增加,从而起到保护作用。     

微悬臂传感器在生物、药物和环境分析中的应用

微悬臂传感器作为一种新型的超灵敏传感器,在生物、药物及环境分析中显示出超凡的应用前景,已成为当今传感器领域中一个热点。现对微悬臂的工作原理及其应用作较为全面的综述,并对该研究方向的前景提出展望。