希髓解毒方对MDS-RA骨髓培养体系IL-3、IFN-γ的影响

探讨益髓解毒方对骨髓增生异常综合征难治性贫血(MDS-RA)造血刺激因子和造血抑制因子的影响。通过Iscove‘s液体培养体系培养，观察MDS-RA患者骨髓单个核细胞经益髓解毒方不同剂量作用后，培养体系上清液造血刺激因子IL-3和造血抑制因子IFN-1变化。结果：益髓解毒方大剂量组对IL-3和IFN-1均有促进作用。提示：益髓解毒方有促进造血刺激因子和造血抑制因子恢复动态平衡的良性趋向作用。     

益髓解毒方对骨髓增生异常综合征骨髓细胞治疗反应性的体外研究

目的 :探讨益髓解毒方治疗骨髓增生异常综合征 -难治性贫血 ( MDS-RA)的作用机理。方法 :通过体外培养 ,观察 MDS-RA患者骨髓单个核细胞经益髓解毒方不同剂量作用后 ,细胞增殖、凋亡的变化。结果 :MDS-RA骨髓单个核细胞在培养的第 4天细胞凋亡明显增加 ,高凋亡发生在细胞分裂的 S期。益髓解毒方大剂量组对细胞凋亡有直接的抑制作用 ,经其处理过的骨髓单个核细胞体外培养 CFU -GM集落数增加。结论 :益髓解毒方有明显促进造血祖细胞增殖、抑制过度凋亡的作用。     

补肾益髓法对慢性再生障碍性贫血IL-3、SCF、IFN-γ、TNF-α mRNA表达的影响

目的通过观察补肾益髓中药对慢性再生障碍性贫血患者造血调控因子表达的影响,探讨补肾中药的调节机制。方法将120例患者随机分为补肾益髓法治疗组90例,西药对照组30例;另取志愿献髓者骨髓10例作为正常健康人对照组。通过RT-PCR法观察其骨髓造血细胞调控因子干细胞因子(SCF)、白细胞介素3(IL-3)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、干扰素γ(IFN-γ)mRNA的半定量表达情况。结果两组患者治疗前SCF、IL-3表达水平明显低于健康人组(P<0.01),治疗后升高(P<0.05),治疗组高于对照组;治疗前TNF-α、IFN-γ表达水平明显高于健康人组(P<0.01),治疗后降低(治疗组P<0.01,对照组P<0.05),治疗组低于对照组(TNF-α P<0.01,IFN-γ P<0.05)。结论补肾益髓法中药可调节紊乱的免疫状态,增强正调控因子的作用,解除过高的负调控因子对造血细胞的过度抑制而达到治疗目的。     

叶绿素铜钠盐对AA模型小鼠的实验研究

目的:探讨叶绿素铜钠盐对再生障碍性贫血治疗的作用机制。方法:建立免疫介导再生障碍性贫血小鼠模型,分别胃饲3种不同剂量叶绿素铜钠25,50,100 mg/(kg.d),以环孢菌素[25 mg/(kg.d)]为阳性对照组,正常对照组及模型对照组胃饲生理盐水,连续15 d。检测血清及骨髓α肿瘤坏死因子,γ干扰素、白介素-6含量。结果:免疫介导再生障碍性贫血模型小鼠血及骨髓IFN-γ、IL-6、TNF-α水平升高,叶绿素铜钠盐组模型小鼠血及骨髓IFN-γ、IL-6、TNF-α水平降低。结论:叶绿素铜钠盐通过调节造血调控因子IFNγ-、TNF-α及IL-6的代谢,促进造血干/祖细胞的造血功能,从而有效治疗AA。     

补肾益髓法对慢性再生障碍性贫血IL-3、SCF、IFN—Y、TNF—αmRNA表达的影响

目的 通过观察补肾益髓中药对慢性再生障碍性贫血患者造血调控因子表达的影响，探讨补肾中药的调节机制。方法 将120例患者随机分为补肾益髓法治疗组90例，西药对照组30例；另取志愿献髓者骨髓10例作为正常健康人对照组。通过RT-PCR法观察其骨髓造血细胞调控因子干细胞因子（SCF）、白细胞介素3（IL-3）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）、干扰素γ（IFN-γ）mRNA的半定量表达情况。结果两组患者治疗前SCF、IL-3表达水平明显低于健康人组（P〈0．01），治疗后升高（P〈0．05），治疗组高于对照组；治疗前TNF-α、IFN-γ表达水平明显高于健康人组（P〈0．01），治疗后降低（治疗组P〈0.01，对照组P〈0．05），治疗组低于对照组（TNF-α P〈0．01，IFN—γ P〈0．05）。结论 补肾益髓法中药可调节紊乱的免疫状态，增强正调控因子的作用，解除过高的负调控因子对造血细胞的过度抑制而达到治疗目的。     

补肾益髓方对慢性再生障碍性贫血骨髓分泌造血细胞因子的影响

目的 :研究补肾益髓方对慢性再生障碍性贫血患者骨髓分泌造血细胞因子的调控作用 ,探讨补肾益髓方治疗慢性再生障碍性贫血的作用机制。方法 :6 0例患者随机分为治疗组 4 0例 ,对照组 2 0例 ,于治疗前后进行骨髓细胞培养 ,用ELISA法测细胞因子分泌水平。结果 :治疗前正向调节因子 (IL 3)降低 ,负向调节因子 (IFN γ、TNF α)升高 ;治疗后正向调节因子上升 ,负向调节因子下降 ,且治疗组优于对照组。结论 :慢性再生障碍性贫血患者骨髓细胞分泌细胞因子功能紊乱 ,补肾益髓方对骨髓分泌造血细胞因子水平具有调节作用。     

蚕沙提取物对再生障碍性贫血小鼠细胞因子影响的实验研究

目的：探讨蚕沙提取物对再生障碍性贫血的治疗作用并机制。方法：建立免疫介导的再生障碍性贫血小鼠模型，胃饲3种不同剂量叶绿素铜钠，以环孢菌素为阳性组，正常组及模型组胃饲生理水，连续15天。检测血清及骨髓α肿瘤坏死因子，γ干扰素、白介素-6含量。结果：模型组小鼠血及骨髓IFN-γ、IL-6、TNF-α水平升高，蚕沙提取物组小鼠血及骨髓IFN-γ、IL-6、TNF-α水平降低，与模型组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。结论：蚕沙提取物通过调节造血调控因子IFN-γ、TNF-α及IL-6的水平，改善造血功能。     

补肾泻肝方对再生障碍性贫血外周血IFN-γ、IL-2的影响

目的:探讨补肾泻肝方对慢性再生障碍性贫血(CAA)患者外周血γ-扰素(IFN-γ)、白介索-2(IL-2)的影响。方法:CAA患者60例分为肾阴虚、肝火伏热组(35例),肾阳虚、阴亏瘀热组(25例),采用酶联免疫法测定补肾泻肝方治疗前后外周血IFN-γ、IL-2,并与正常对照组(20名)比较。结果:总有效率88.33％,基本治愈、缓解率55％,肾阴虚组的疗效优于肾阳虚组。治疗前治疗组IFN-γ、IL-2水平与正常对照组比较明显增高(p<0.001,p<0.001),肾阴虚组与肾阳虚组治疗前后比较有显著差异(p<0.001,p<0.05)。结论:补肾泻肝方通过降低再障患者体内IFN-γ、IL-2水平,以解除负调控因子对造血抑制,促进骨髓造血功能恢复的作用。     

补肾生血解毒方对再生障碍性贫血小鼠白细胞生成的影响

目的:探讨补肾生血解毒方对理化因素致骨髓抑制造成再生障碍性贫血(AA)模型小鼠白细胞生成的影响.方法:BALB/C小鼠随机分为空白组、模型组和补肾生血解毒方小、中、大剂量组,除空白组以外其余各组小鼠以⁶⁰Co-γ射线复合环磷酰胺致小鼠骨髓造血抑制,补肾生血解毒方小、中、大剂量组分别给予不同剂量中药灌胃,其余2组予等量生理盐水灌胃.血细胞计数仪检测小鼠外周血中白细胞(WBC)的改变,酶联免疫吸附测定(ELISA)检测外周血血清中粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)含量的差异,real-time PCR检测骨髓细胞中GM-CSF受体α、β基因表达的改变.结果:与模型组比较,补肾生血解毒方可以明显提高AA模型小鼠外周血白细胞数量(小剂量作用14d),显著增加外周血血清中GM-CSF含量和骨髓细胞中GM-CSF受体基因的表达.结论:补肾生血解毒方治疗AA发挥疗效作用,可能与提高GM-CSF活性和诱导造血细胞分化为成熟的白细胞,并促进其增殖、发挥免疫调节作用有关.     

补髓生血颗粒对再生障碍性贫血大鼠造血祖细胞的影响

目的:观察补髓生血颗粒对再生障碍性贫血模型大鼠造血祖细胞增殖的影响。方法:Wistar大鼠经60Co-γ射线8.0Gy照射造成再障模型,分别给予再障生血片及低、中、高剂量补髓生血颗粒,连续给药3周后,采用甲基纤维素半固体集落培养方法培养骨髓红细胞集落形成单位(CFU-E)、粒-巨噬细胞集落形成单位(CFU-GM),观察补髓生血颗粒对再障模型大鼠造血祖细胞集落形成的影响。结论:补髓生血颗粒可刺激造血祖细胞的增殖,促进再障大鼠骨髓CFU-E、CFU-GM集落的形成,对再障大鼠骨髓抑制状态有显著改善作用。     

补肾益髓生血法对苯与环磷酰胺诱导AA大鼠Th1/Th2细胞分泌细胞因子影响的实验研究

目的:探讨补肾益髓生血法对苯与环磷酰胺诱导AA大鼠血清细胞因子的作用。方法:清洁级SD大鼠85只,随机分为正常组10只,造模组75只,造模组皮下隔天注射苯(1 mL/kg)7周,取材前2周连续隔天腹腔注射CTX(25 mg/kg)3次,建立苯与环磷酰胺诱导AA大鼠模型。三周后灌胃前,按体质量随机分为模型组、康力龙组、益髓生血组、温肾生血组和滋肾生血组。第七周处死大鼠,股动脉取血,静置离心后,取上层血清,放免法检测血清中IFN-γ、TNF-α、IL-2、IL-4、IL-5、IL-10细胞因子的表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠血清IFN-γ明显升高(P0.05),IL-2显著升高(P0.01),TNF-α有升高趋势,经过治疗后,IFN-γ、IL-2、TNF-α均有降低趋势;与正常组比较,模型组IL-4、IL-5水平明显降低(P0.05),IL-10显著降低(P0.01),经过治疗后,IL-4、IL-5、IL-10均有升高趋势。结论:补肾益髓生血法可降低AA大鼠血清细胞因子IFN-γ、IL-2、TNF-α负调控,增加细胞因子IL-4、IL-5、IL-10正调控,对AA大鼠免疫和造血系统有一定的调节作用,且滋肾生血方疗效优于益髓生血颗粒、温肾生血方。     

益髓解毒方治疗骨髓增生异常综合征RA型经验

提出骨髓增生异常综合征RA型主要病机是髓枯气血乏为本,热毒内伏为标,以益髓解毒方加减治疗MDS-RA,疗效较好,并以案例说明。     

补肾活血方治疗免疫介导型再生障碍性贫血小鼠的实验研究

目的观察中药补肾活血方治疗免疫介导型再生障碍性贫血小鼠的疗效,并探讨其作用机制。方法建立免疫介导型再生障碍性贫血动物模型,观察中药补肾活血方的疗效,并从造血祖细胞集落培养和骨髓基质细胞黏附功能,造血调控因子等方面探讨其作用机制。结果中药补肾活血方可改善免疫介导型再障小鼠的外周血象,增加骨髓有核细胞计数,延长其生存期,促进红系造血祖细胞 CFU-E、BFU-E 的增殖、分化,调节 T 细胞亚群,抑制 Ts 的活性,促进白细胞介素-10(IL-10)的分泌,抑制造血负调控因子白细胞介素-2(IL-2)、干扰素-γ(IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的活性。结论中药补肾活血方通过促进 CFU-E、BFU-E的增殖、分化以及调节细胞免疫功能而达到治疗的目的。     

健脾药对免疫介导再生障碍性贫血小鼠IL-3、IFN-γ影响的实验研究

目的：检测免疫介导再生障碍性贫血(简称再障)小鼠骨髓造血细胞在含健脾药血清的液体培养体系中IL-3、IFN-γ的浓度，探讨健脾药治疗再障的作用机理。方法：用健脾药灌喂SD大鼠，抽取、制备含中药血清；Balb／C小鼠经^60Co5．5Gyγ射线照射后由尾静脉输入取自DBA／2小鼠胸腺淋巴结混合细胞悬液形成免疫介导再障模型。在含健脾药血清的液体培养体系中培养再障小鼠骨髓造血细胞，检测培养体系中IL-3、IFN-γ的浓度。结果：健脾药对再障小鼠IL-3、IFN-γ的总量无明显影响。结论：健脾药可能通过使局部IFN-γ浓度降低进而影响造血干／祖细胞增殖、分化。     

滋肾益髓汤治疗难治性贫血26例

采用滋肾益髓补气法,自拟基本方(生黄芪、女贞子、旱莲草、生熟地、仙灵脾、鹿角胶、赤芍、当归、丹参等)治疗MDS-RA26例,疗程2～3个月,总有效率73％,显效率46.14％。提示本方有调节机体免疫功能,改善骨髓病态造血作用。     

三拗汤对支气管哮喘大鼠Th1,Th2转录调节机制的研究

目的:重点探讨三拗汤对哮喘大鼠Th1/Th2细胞的调节作用,并深入研究其对转录因子GATA-3和T-bet水平的干预作用.方法:以鸡卵清蛋白腹腔注射并雾化吸入复制大鼠哮喘模型,分别以不同剂量三拗汤及地塞米松灌服,检测用药前后哮喘大鼠肺泡灌洗液中细胞因子IL-4和IFN-γ含量;RT-PCR方法检测肺组织中T-bet和GATA-3 mRNA表达水平.结果:中药中剂量组大鼠BALF中IL-4水平较其他组明显减低,IFN-γ水平升高,IL-4/IFN-γ较哮喘组明显减小,肺组织GATA-3和T-bet转录因子mRNA表达水平分别与IL-4及IFN-γ变化水平相一致.结论:中药三拗汤可能通过对哮喘大鼠Th1/Th2细胞转录因子的调节作用,达到抑制哮喘大鼠气道炎症的目的.     

补血合剂对慢性再生障碍性贫血患者造血细胞调节因子的影响

目的:研究补血合剂对慢性再生障碍性贫血患者造血细胞调节因子的影响。方法:对慢性再生障碍性贫血患者随机分组后,治疗组西药加补血合剂,对照组单纯西药治疗。抽取骨髓,对骨髓细胞分离培养,收集培养上清液和骨髓单个核细胞,用双抗夹心ELISA法测定培养上清液中造血细胞调节因子(IL-3、TNF-α、IFN-γ)的活性并比较其水平变化。结果:造血细胞调节因子水平:治疗组与对照组治疗前IL-3水平明显低于正常对照组,P<0.05,TNF-α、IFN-γ水平明显高于正常对照组,P<0.05;治疗后IL-3水平升高,与治疗前相比有显著性差异,P<0.05;治疗后TNF-α、IFN-γ水平降低,与治疗前相比有显著性差异,P<0.05。治疗后治疗组IL-3水平高于对照组,P<0.05;TNF-α、IFN-γ水平低于对照组,P<0.05;IL-3水平升高的差值与TNF-α、IFN-γ水平下降的差值,肾阳虚组均高于肾阴虚组,有显著性差异,P<0.05。结论:补血合剂能提高正调节因子IL-3的水平,降低负调节因子TNF-α、IFN-γ的水平,肾阳虚型患者的治疗效果优于肾阴虚型患者,为中药治疗慢性再生障碍性贫血的作用机制提供依据。     

益髓理血饮对二甲基苯蒽诱导骨髓增生异常综合征模型大鼠骨髓病态造血的影响及机制

目的:探讨中药复方益髓理血饮对二甲基苯蒽(DMBA)诱导的骨髓增生异常综合征(MDS)模型大鼠骨髓病态造血的改善作用及其机制。方法:将清洁级雄性SD大鼠分为正常对照组、模型组、复方皂矾丸阳性组及益髓理血饮低、高剂量组,每组12只。用DMBA诱导建立大鼠MDS模型,于造模第14天开始分组给药,连续30 d。给药后第31天处死各组大鼠,检测各组大鼠骨髓增生程度、病态造血,血清IL-3、TNF-α含量,股骨CD34表达及原始细胞所占比。结果:与正常对照组比较,模型组骨髓增生程度和骨髓病态造血明显,各给药组骨髓增生和病态造血明显改善;模型组血清IL-3含量显著降低(P0.01),TNF-α含量显著升高(P0.01),治疗后各给药组IL-3含量显著升高(P0.05),TNF-α含量降低(P0.05);模型组股骨CD34及髓CD45阳性表达(P0.01),治疗后股骨CD34表达和原始细胞比例均显著降低(P0.05)。以上改善均以高剂量组最为明显。结论:益髓理血饮治疗骨髓增生异常综合征能改善骨髓增生程度和病态造血,升高血清IL-3含量,降低血清TNF-α含量,减少股骨CD34阳性表达,降低股骨原始细胞比例。     

益髓生血颗粒对β-地中海贫血患者SCF及EPOR mRNA表达的影响

目的 :探讨益髓生血颗粒对造血刺激因子SCF及受体EPOR的mRNA表达的影响 ,以阐述益髓生血颗粒的疗效机制及中医肾益髓生血的分子基础。方法 :收集、观察临床资料 ,并于治疗前、给药 4、8、12周分别记录和常规血检 1次。于治疗前和治疗后现场取样 ,采用RT -PCR法检测造血刺激因子SCF及EPORmRNA表达。结果 :治疗后 ,外周血EPOR、SCFmRNA表达明显增强 ,电泳带明显变亮。结论 :益髓生血颗粒可能是通过影响造血刺激因子SCF以及EPORmBNA表达来促进骨髓造血 ,提高Hb、RBC的水平 ,达到治疗 β -地中海贫血的目的 ;造血刺激因子SCF以及EPORmRNA表达的变化 ,为中医肾藏精、主骨、生髓理论提供了分子基础     

益血生髓颗粒对苯试剂诱导的再生障碍性贫血小鼠造血功能及T细胞亚群的影响

目的:研究益血生髓颗粒对苯试剂诱导的再生障碍性贫血(AA)模型小鼠造血及免疫功能的影响。方法:72只SPF级BALB/c小鼠随机分为正常对照组、AA模型组、益血生髓颗粒低剂量组(低剂量组)、益血生髓颗粒高剂量组(高剂量组)和司坦唑醇阳性药组(阳性对照组),除正常对照组其他各组小鼠注射苯和玉米油混合液2 ml/kg,每周4次,建立AA模型,正常组注射同体积玉米油,7周后,低剂量组用药1.2 g/(kg·d),高剂量组用药4.8 g/(kg·d),阳性对照药组予司坦唑醇2 mg/(kg·d),连续给药15 d后,检测血细胞(WBC、RBC、HGB、PLT)、骨髓有核细胞数(BMNC)、T淋巴细胞亚群(CD3⁺CD4⁺、CD3⁺CD8⁺、Th₁、Th₂)、血清白介素2(IL-2)、粒细胞集落刺激因子(G-CSF)、巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)和HE染色骨髓病理学的变化情况。结果:与AA模型组比较,低、高剂量组和阳性对照组小鼠外周血四种血细胞数量、血清M-CSF、CD3⁺CD4⁺T和CD4⁺/CD8⁺比值升高(P<0.05),CD3⁺CD8⁺T、IL-2水平和Th₂细胞百分数降低(P<0.05),骨髓病理学显示骨髓组织增生较模型组活跃,造血细胞增多,非造血细胞减少。结论:益血生髓颗粒可通过对AA小鼠T细胞亚群的免疫调节和促进造血细胞增殖达到一定恢复造血功能的作用。