金属蛋白酶抑制基因RECK在肝细胞癌中的表达及生物学意义

目的探讨金属蛋白酶抑制基因RECK在肝细胞癌（hepatocellular carcinoma,HCC）中的表达及其临床意义。方法用实时逆转录聚合酶链反应（real-time RT-PCR）技术和免疫组化方法分别检测61例HCC、癌旁组织及18例正常肝组织中RECK mRNA和蛋白表达情况。结果 RECK mRNA在HCC中表达水平（0.0269±0.0026）低于癌旁肝组织（0.0378±0.0031,P〈0.05）。RECK蛋白在HCC组织中阳性表达率（59.0%）也显著低于癌旁肝组织（78.7%,P〈0.05）。RECK在HCC组织中的阳性检出率与肿瘤大小、是否复发、有无门脉癌栓、肿瘤有无完整包膜等临床因素显著相关（P〈0.05）,而与年龄、性别、有无肝硬化、乙肝表面抗原、AFP水平等无关。对61例患者的随访资料进行生存分析显示,RECK阳性组3年生存率83.9%,明显高于RECK阴性组52.1%（P〈0.05）。结论 RECK可能参与HCC的发生发展,有可能成为预测HCC浸润与转移的参考指标。     

肝细胞肝癌组织中survivin和caspase 3、Ki67的表达及意义

目的研究survivin和caspase 3、Ki67在肝细胞肝癌(HCC)及癌旁肝组织中的表达及其意义.方法利用RNA提取试剂获取新鲜肝癌组织RNA,用RT-PCR方法测定survivin基因mRNA;用免疫组化方法检测肝细胞肝癌及其癌旁组织中caspase 3和Ki67蛋白的表达.结果17例新鲜HCC组织,survivin基因表达阳性13例,阳性率为76.5%,癌旁肝组织和正常肝组织survivin表达全为阴性.13例survivin表达阳性的肝癌组织其caspase 3蛋白表达平均染色强度为0.98±0.35,显著低于4例survivin表达阴性的HCC组织1.36±0.47(P＜0.01),而survivin表达阳性的HCC组织其Ki67表达强度平均评分为2.787±0.71,又显著高于survivin表达阴性的HCC组织1.662±0.38(P＜0.01).88例肝癌组织caspase 3蛋白的阳性表达率明显低于癌旁肝组织(18.5%vs38.6%,P＜0.01),caspase 3蛋白的表达强度与HCC的分化程度相关,分化愈差,caspase 3蛋白表达愈弱(F=8.651,P＜0.01);Ki67在肝癌组织中其平均表达强度评分为2.44±1.12,在癌旁肝组织中为散在灶性表达,Ki67表达强度评分与HCC分化程度有关,分化愈差,Ki67表达强度评分愈高(F=9.121,P＜0.01).结论本文结果提示在HCC发生过程中survivin的表达或许可通过抑制caspase3而抑制细胞凋亡,促使细胞增殖,使HCC呈现无限制的生长及恶性程度不断增高.     

增殖细胞核抗原在肝细胞癌中的表达及其与预后的关系

目的：探讨增殖细胞核抗原（PCNA）表达与肝细胞癌临床病理参数与预后的关系。方法：采用SABC法检测42例肝细胞癌与癌旁组织中PCNA的表达。结果：PCNA在肝细胞癌中的阳性表达率显著高于癌旁组织（P＜0．05），且PCNA的表达与Edmondson-Steiner分级呈正相关（P＜0．01）。在浸润型（IHCC）有转移组中PCNA分值均显著高于膨胀型（EHCC）无转移组（P＜0．01）。肿瘤直径≤3cm者PCNA分值也明显低于＞3cm者（P＜0．05）。PCNA高增殖组患者生存期明显低于低增殖组（P＜0．05）。结论：PCNA反映癌细胞的增殖程度，可作为判断肝细胞癌恶性程度及其预后的指标。     

肝细胞癌P16蛋白表达及其意义

目的 探讨P16蛋白在肝细胞癌(HCC)中的表达及其临床意义。方法 应用免疫组织化学技术(S-P法)检测68例肝细胞癌(HCC)中P16蛋白的表达。同时进行增殖细胞核抗原(PCNA)检测,计算细胞增殖指数(proliferation index.PI)。结果 HCC中P16蛋白阳性表达率为42.7％,而癌旁肝组织及肝硬化组织P16蛋白阳性表达率分别为94.7％和90.0％。HCC P16阳性表达率明显低于癌旁组织及肝硬化组织(P<0.01)。P16蛋白低表达与HCC临床分期,组织分化程度及细胞增殖指数相关(P<0.05)。结论 P16蛋白低表达有促进HCC增殖的作用,可作为HCC恶性程度的一项指标。     

p57^kip2蛋白：晚期肝癌的预后因素

目的：检测细胞周期抑制因子p57^kip在肝癌（HCC）中的表达水平,探讨它与各种临床病理因素、增殖凋亡的关系及其预后价值。方法：用免疫组织化学方法检测40例肝癌组织、40例癌旁组织和15例正常肝脏组织中p57^kip的表达水平;用DNA缺口末端标记技术检测肝癌组织中细胞凋亡水平。结果：p57^kip在肝癌组织中的阳性率42.5%,显著低于癌旁肝组织（72.5%）和正常肝脏组织（93.3%）（P〈0.05）,p57^kip的缺失表达与晚期肝癌和肝外转移有关（P〈0.05）。HCC组织中存在增殖凋亡异常（P〈0.05）。p57^kip的阳性表达与HCC组织低增殖有关（P〈0.05）,与细胞凋亡无关（P〉0.05）。TNM分期、肝外转移,AFP水平与p57^kip蛋白表达与HCC预后有关（P〈0.05）,且p57^kip和临床分期是HCC的独立预后因素（P〈0.05）。结论：p57^kip参与了肝癌的发生发展,可用于预测晚期肝癌预后。     

肾透明细胞癌组织肾母细胞瘤过表达基因表达临床意义的探讨

目的：探讨肾母细胞瘤过表达基因（NOV）对肾透明细胞癌分级、分期、大小、增殖状态和预后的影响。方法：应用免疫组化法检测54例肾透明细胞癌组织NOV蛋白的表达,分析其与肾透明细胞癌分期、分级、大小、Ki-67指数的相关性,并比较NOV阳性组和阴性组的生存率差异。结果：NOV在肾脏透明细胞癌组织中的染色强度明显低于癌旁正常肾组织,22例（100％）癌旁正常肾组织均呈强阳性染色,54例肾癌组织中24例（44．4％）为弱阳性染色,8例（14．8％）为中等阳性染色;癌组织总阳性率（59．3％）亦显著低于癌旁正常肾组织（100％）,P〈0．05。NOV阳性组的Ki-67指数（2．6±1．5）％,明显低于NOV阴性组的（4．2±2．1）％,P〈0．05。NOV表达与肿瘤分期及大小无相关性,P〉0．05。NOV阳性组术后5年特异生存率（82．6％）显著高于阴性组（50．3％）,P〈0．05。结论：NOV对肾透明细胞癌起抑制作用,可作为预后判断的肿瘤标志。     

Caspase-3和P—gP在原发性肝细胞癌中的表达和相关性研究

目的通过检测原发性肝细胞癌及其癌旁组织中Caspase-3和P-糖蛋白（P—gp）的表达,了解两者与原发性肝细胞癌临床病理特征之间的关系及两者的相关性,为原发性肝细胞癌的治疗提供一定的理论依据。方法采用免疫组织化学Envision^TM二步法检测50例原发性肝细胞癌及其癌旁组织中Caspase-3和P—gp的表达,并结合患者的临床病理特征、随访资料进行分析。结果Caspase-3在原发性肝细胞癌组织中的表达低于癌旁组织（P〈0．05）;Caspase-3在原发性肝细胞癌组织中的表达与Edmonson病理分级、有无包膜有关（P〈0．05）。P—gP在原发性肝细胞癌组织中的表达高于癌旁组织（P〈0.05）;肝癌组织中P—gp的表达与Edmonson病理分级、是否有肝硬化有关（P〈0．05）。Caspase-3和P-gP的表达呈负相关（r=-0．600,P=0．000）。Caspase-3阳性表达的患者预后较好,P—gP阴性表达的患者预后也较好。结论Caspase-3可能促进原发性肝细胞癌细胞凋亡,抑制原发性肝细胞癌的发生;P-gP与原发性肝细胞癌的耐药性有关,还可能具有抗凋亡作用。Caspase-3低表达或失表达可能与原发性肝细胞癌细胞凋亡抵抗和多药耐药有关。     

胃癌中survivin和caspase-3的表达及其临床意义

背景与目的：细胞凋亡调控失衡在肿瘤发生发展中具有重要意义,survivin和caspase-3对细胞凋亡和细胞周期调控起着重要作用。本研究通过检测survivin和caspase-3在胃癌组织中的表达,探讨其与胃癌临床病理因素之间的相关性及作用机制。方法：采用RT-PCR及免疫组织化学法分别检测79例不同病理分期的胃癌组织及30例癌旁组织中survivin和caspase-3的表达。结果：caspase-3及survivin mRNA表达与肿瘤的浸润深度、淋巴结转移和TNM分期显著性相关,差异均有统计学意义（P〈0.05）;survivin和caspase-3 mRNA在胃癌组织中的表达差异有统计学意义（P〈0.01）。结论：Survivin、caspase-3的表达与胃癌的发生和发展密切相关, 其作用机制可能是通过survivin分子的高表达而抑制caspase-3的表达,从而抑制胃癌细胞凋亡最终导致胃癌病程的演进。     

环氧化酶-2与基质金属蛋白酶-2在肝细胞癌中的表达及其相关性研究

目的探讨环氧化酶-2（cyclooxygenase-2,COX-2）与基质金属蛋白酶-2（matrix metallo-proteinase-2,MMP-2）在肝细胞肝癌（hepatocellular carcinoma,HCC）中表达的相关性和临床意义。方法应用免疫组化SP法检测51例HCC组织、36例癌旁组织COX-2和MMP-2的蛋白表达。结果COX-2在HCC组织、癌旁组织中的阳性表达率分别为80.4%和47.8%（P〈0.05）,COX-2的表达与HCC肿瘤大小、静脉浸润以及肿瘤TNM分期相关（P〈0.05）;MMP-2在HCC组织、癌旁组织中的阳性表达率分别为68.6%和25.0%（P〈0.05）,MMP-2的表达与HCC静脉浸润、肿瘤TNM分期相关（P〈0.05）。COX-2与MMP-2同时阳性表达者25例。结论COX-2和MMP-2在HCC组织中表达上调,在HCC组织中的表达呈正相关（P〈0.01）,证实COX-2和MMP-2在HCC发生发展过程中起重要作用。     

膀胱癌PCNA蛋白表达及其与复发的关系

[目的]探讨增殖细胞核抗原（proliferating cell nuclear antigen,PCNA）蛋白在膀胱癌中的表达情况,并分析其与临床病理特征及复发的关系。[方法]148例膀胱移行细胞癌患者标本,25例癌旁正常组织标本作为对照,采用免疫组化SP法检测PCNA蛋白的表达。[结果]癌旁正常组织中PCNA蛋白的阳性表达水平明显低于肿瘤组织（16.0%vs50.7%,P〈0.001）。PCNA蛋白的表达与膀胱癌的分级、分期、复发有关（P〈0.05）,与患者的年龄、性别、肿瘤数目及肿瘤大小无关（P〉0.05）。本组104例浅表性膀胱癌（Ta～T1）随访2～95个月,其中复发64例,复发组与未复发组PCNA蛋白的阳性表达率分别为56.3%和15.0%（P=0.001）。[结论]PCNA蛋白在膀胱癌中高表达,其高表达提示预后不良。     

Ｓｕｒｖｉｖｉｎ在喉鳞癌中的表达及其与肿瘤细胞增殖和凋亡的关系*

目的　分析Ｓｕｒｖｉｖｉｎ在喉鳞癌中的表达及其与肿瘤细胞增殖、凋亡的关系,并探讨其与喉鳞癌临床病理特征之间的关系。方法　应用免疫组化染色技术检测Ｓｕｒｖｉｖｉｎ和Ｋｉ-６７在８６例喉鳞癌组织及３２例正常喉黏膜上皮组织中的表达;ＴＵＮＥＬ法检测喉鳞癌细胞的凋亡情况。结果　Ｓｕｒｖｉｖｉｎ在喉鳞癌组织中阳性表达率为６０.５％,高于正常喉黏膜上皮组织的１２.５％（Ｐ＜０.０５）,Ｓｕｒｖｉｖｉｎ阳性表达率与肿瘤临床分期、病理分级、淋巴结转移有关（Ｐ＜０.０５）;喉鳞癌Ｓｕｒｖｉｖｉｎ阳性组中凋亡指数（ＡＩ）低于阴性组（Ｐ＜０.０５）,增殖指数（ＰＩ）高于阴性组（Ｐ＜０.０５）,且Ｓｕｒｖｉｖｉｎ表达与ＡＩ呈负相关（ｒ＝－０.８３１,Ｐ＜０.０５）,与ＰＩ呈正相关（ｒ＝０.８８３,Ｐ＜０.０５）。结论　Ｓｕｒｖｉｖｉｎ在喉鳞癌中高表达,可能与喉鳞癌细胞的增殖和凋亡均有一定的关联。     

Ｓｕｒｖｉｖｉｎ和Ｃａｓｐａｓｅ-３在脑胶质瘤中的表达及其与细胞凋亡的关系

目的：探讨Ｓｕｒｖｉｖｉｎ和Ｃａｓｐａｓｅ-３在脑胶质瘤中的表达及其意义。方法：采用免疫组化法、原位杂交法分别检测６８例脑胶质瘤和１０例内减压脑组织中Ｓｕｒｖｉｖｉｎ、Ｃａｓｐａｓｅ-３蛋白及其ｍＲＮＡ的表达情况;原位末端标记法（ＴＵＮＥＬ）法检测胶质瘤细胞凋亡情况。结果：Ｓｕｒｖｉｖｉｎ蛋白及其ｍＲＮＡ在脑组织与胶质瘤中的阳性表达率有显著差异,两者在脑胶质瘤Ⅲ、Ⅳ级组织中的表达明显高于Ⅰ、Ⅱ级;Ｃａｓｐａｓｅ-３蛋白及其ｍＲＮＡ在脑组织与胶质瘤中阳性表达率均无显著差异。脑胶质瘤组织中Ｓｕｒｖｉｖｉｎ和Ｃａｓｐａｓｅ-３的表达呈负相关。脑胶质瘤组织细胞的凋亡指数（ＡＩ）范围是７％ ～２９％,平均（１６５９±６１９）％;Ｓｕｒｖｉｖｉｎ阳性组的ＡＩ值明显小于阴性组（Ｐ＜０.０５）;Ｃａｓｐａｓｅ-３阳性组的ＡＩ值明显大于阴性组（Ｐ＜０.０５）。结论：Ｓｕｒｖｉｖｉｎ与凋亡途径的关键因子Ｃａｓｐａｓｅ-３关系密切,若把Ｓｕｒｖｉｖｉｎ作为靶点来阻断抗凋亡途径,促进肿瘤细胞凋亡,将会是很好的抗肿瘤策略。     

肝细胞癌中Ｓｕｒｖｉｖｉｎ、ＥＧＦＲ和ＶＥＧＦ的表达及临床意义

目的　研究Ｓｕｒｖｉｖｉｎ、ＥＧＦＲ和ＶＥＧＦ在肝细胞癌中的表达情况,为肝癌预后判断和靶向治疗提供理论依据。方法　应用免疫组织化学ＰＶ６０００法检测８１例人肝细胞癌组织、癌旁组织Ｓｕｒｖｉｖｉｎ、ＥＧＦＲ和ＶＥＧＦ的表达并分析其与相关临床病理特征的关系。结果　肝细胞癌组织与癌旁组织Ｓｕｒｖｉｖｉｎ的阳性率无显著差别;肝细胞癌组织ＥＧＦＲ、ＶＥＧＦ的阳性率分别为４９.４％、６３.０％,显著高于癌旁组织的阳性率２１.０％、４４.４％（Ｐ＜０.０５）。Ｓｕｒｖｉｖｉｎ的表达与肿瘤的ＴＮＭ分期和肿瘤直径有关（Ｐ＜０.０５）;ＥＧＦＲ的表达与病理分化和术后复发转移有关（Ｐ＜０.０５）;ＶＥＧＦ的表达与ＴＮＭ分期、术前局部转移及术后复发转移有关（Ｐ＜０.０５）。ＥＧＦＲ与ＶＥＧＦ表达呈正相关（ｒ＝０.３０７,Ｐ＝０.００７）。ＴＮＭ分期、Ｓｕｒｖｉｖｉｎ、ＥＧＦＲ是肝细胞癌的独立预后因子（Ｐ＜０.０５）。结论　肝细胞癌组织Ｓｕｒｖｉｖｉｎ、ＥＧＦＲ和ＶＥＧＦ表达水平较高,其中Ｓｕｒｖｉｖｉｎ、ＥＧＦＲ可以作为肝细胞癌的预后因子。ＥＧＦＲ与ＶＥＧＦ表达正相关,对研发多靶点药物或联合使用多种靶向药物有一定指导意义。     

Survivin蛋白及β-catenin蛋白在原发性肝癌组织中的表达及其临床意义

目的：研究肝癌组织中克隆细胞凋亡抑制蛋白（survivin蛋白）及β-连环素蛋白（β—catenin蛋白）的表达及其临床意义。方法：应用免疫组织化学染色法对47例原发性肝癌组织、10例肝硬化组织、4例正常肝组织中survivin蛋白及β-连环素蛋白（β—catenin蛋白）的表达情况进行检测，并结合原发性肝癌临床生物学特性进行分析。结果：在正常肝组织中survivin蛋白无表达、β-catenin蛋白无异常表达；在肝硬化组织中，survivin蛋白无表达、有2例（20％）β—catenin蛋白出现异常表达；在47例肝癌组织中有30例（63．8％）survivin蛋白表达阳性，31例（65．9％）β—catenin蛋白出现异常表达（P〈0．01）。Survivin蛋白、β—catenin蛋白表达与患者的年龄、性别、肿瘤大小无关。Survivin蛋白在原发性肝癌复发组的表达率为92．9％（26／28），无复发组的表达率为21．1％（4／19）；β—catenin蛋白在原发性肝癌复发组中的异常表达率为89．2％（25／28），在无复发组的表达率为31．6％（6／19）（P〈0．05）。在survivin蛋白表达阳性的30例原发性肝癌组织中有28例（93．3％）β-catenin蛋白出现异常表达，而在β—catenin蛋白出现异常表达的31例原发性肝癌组织中有28例（90．3％）survivin蛋白表达阳性，两种蛋白在原发性肝癌组织的表达具有一致性，且呈正相关（r=0．6324）。结论：Survivin蛋白与β-catenin蛋白与原发性肝细胞癌复发密切相关，它们可能成为预测肝癌术后有无复发的一项指标。Survivin蛋白与β-catenin蛋白的表达在原发性肝细胞性肝癌中具有密切的关系，且呈正相关。     

ADAM-9在肝细胞肝癌中的表达及意义

目的：研究ADAM-9在肝细胞肝癌（HCC）中的表达及其与临床病理参数、预后之间的关系。方法：利用免疫组化方法检测167例HCC组织中ADAM-9的表达情况。结果：167例HCC标本中,49例（29%）标本为ADAM-9阴性,118例（71%）标本为ADAM-9阳性;而在56例正常肝组织中间质ADAM-9的表达阳性率为38%,两者比较有显著差异（P〈0.05）。HCC组织ADAM-9阳性细胞表现出典型的细胞膜和细胞质型表达。单因素分析结果显示ADAM-9在HCC癌组织的表达与肿瘤的大小、分化程度、侵袭转移、高AFP水平和复发有关,差异均具有统计学意义（P〈0.05）;K-M生存曲线显示ADAM-9阴性表达组生存率高于ADAM-9阳性表达组,差异具有统计学意义（P〈0.05）。多因素COX逐步回归分析结果显示ADAM-9是总体生存率的独立因素（P〈0.05）。结论：ADAM-9在HCC中的过表达,对HCC的发生、侵袭转移及预后起重要作用。     

乳腺癌组织中survivin和增殖细胞核抗原的表达及其临床意义

目的探讨乳腺癌组织中survivin和增殖细胞核抗原（PCNA）的表达及其临床价值。方法回顾性分析枣庄市立医院2001年1月至2006年12月手术治疗的156例乳腺癌患者的临床病理学资料（患者术前均未行化疗或放射治疗）。采用免疫组织化学SP法检测癌组织石蜡切片中survivin及PCNA的表达。定性资料间的比较,依据不同分析目的分别采用线性趋势检验、Kappa检验或χ^2检验;应用多因素Logistic回归分析与survivin及PCNA阳性表达有关的因素。结果乳腺癌中survivin及PCNA阳性表达与肿瘤病理分型、肿瘤大小无关（P〉0．050）,但其与组织学分级、临床分期、淋巴结转移数目相关（P〈0．050）。Survivin及PCNA阳性表达随着癌组织分化程度降低,淋巴结转移数目增加,临床分期增高而增强。多因素Logistic回归分析显示组织学分级是影响survivin及PCNA阳性表达的最主要因素（P〈0．050）。乳腺癌中survivin和PCNA的表达密切关联（Kappa值为0．256,P〈0．001）。Survivin和PCNA双阳性患者复发转移率高于双阴性患者（χ^2=6．510,P=0．011）。结论联合检测survivin及PCNA可作为判断乳腺癌生物学行为和预后的重要指标。     

Survivin在乳腺癌中的表达及其与Caspase-3、PCNA表达的关系

目的探讨Survivin在乳腺癌发生、发展中的作用及其与Caspase-3蛋白表达和细胞增殖的相互关系.方法用免疫组化S-P法检测Survivin在正常乳腺组织(10例)、乳腺囊性增生组织(18例)、不典型增生组织(20例)和乳腺癌组织(50例)中的表达以及Caspase-3、PCNA在乳腺癌组织中的表达.结果Survivin蛋白在正常乳腺组织无表达,在乳腺囊性增生组织、不典型增生组织、乳腺癌组织中的阳性率分别为5.6%(1/18)、45.0%(9/20)、72.0%(36/50),差异有显著性(P＜0.05).Survivin蛋白的表达与临床分期和淋巴结转移有关(P＜0.05),与年龄、是否绝经、肿瘤大小和组织学分级均无关.Survivin与Caspase-3的表达呈负相关(P＜0.01).Survivin蛋白表达阳性的乳腺癌PCNA的标记指数明显高于Survivin蛋白表达阴性的乳腺癌细胞PCNA的标记指数(P＜0.01).结论Survivin蛋白在乳腺癌中表达上调,提示其通过抑制凋亡在乳腺癌发生、发展中起重要作用,可能成为乳腺癌基因治疗的新靶点.Survivin通过与激活的Caspase-3结合,抑制其活性,从而阻止细胞凋亡.Survivin不仅参与凋亡的调控,还促进了细胞增殖.     

CD133在肝癌组织中的表达及其临床意义

 摘要：目的 研究肝癌组织中CD133蛋白表达及其临床意义。方法 应用免疫组织化学染色方法（ABC法）检测190例原发性肝细胞肝癌患者手术切除肿瘤组织中CD133蛋白的表达,分析其与临床病理特征和预后的关系。结果 42例(22.1%)患者肿瘤组织中CD133蛋白表达阳性。肝癌组织中CD133蛋白表达与肝癌分化程度相关,42例CD133阳性肝癌中,低分化肝癌（Ⅲ+Ⅳ）为34例（17.9%）,高分化肝癌（Ⅰ+Ⅱ）为8例（4.2%）,差异有统计学意义（p<0.001）;同时CD133蛋白表达程度与肝癌镜下血管侵犯相关,42例CD133阳性肝癌中,存在镜下血管侵犯为33例（17.4%）,无镜下血管侵犯为9例（4.7%）,差异有统计学意义（p=0.016）。单因素方差分析结果表明肝癌分化程度、淋巴结转移、肉眼血管侵犯、镜下血管侵犯、肝癌TNM分期以及CD133蛋白表达情况与肝癌切除术后患者无瘤生存有关（p<0.05）。多因素方差分析结果表明CD133蛋白表达情况与镜下血管侵犯是预测肝癌切除术后患者无瘤生存的独立预测指标。生存分析表明CD133蛋白表达阳性组术后无瘤生存期明显短于CD133阴性组。结论 肝癌组织中CD133蛋白的表达与肝癌的侵袭转移及预后密切相关。