植物内生真菌活性成分的研究

综述了近5年来从植物内生真菌中发现的具有生物活性的化合物及其作用机制,为新药研发提供新的天然产物和研究思路。其结构类型主要有萜类、酮类、异香豆素类、醌类、生物碱类、苯并呋喃类、多肽类等,其生物学活性主要为抗菌、抗肿瘤、抗疟、抗结核、抗氧化等作用,就目前植物内生真菌次生代谢产物研究存在问题及今后研究方向进行讨论。     

金叶女贞内生真菌分离及抑菌活性

［摘要］目的　探讨金叶女贞内生真菌的多样性及其次生代谢产物抑制细菌活性．方法　采用植物组织块培养分离法从金叶女贞茎和叶中分离内生真菌,分别进行YPD液体培养,将培养物过滤后用丙酮萃取次生代谢产物,以大肠杆菌（Escherichia coli）、绿脓杆菌（Pseudomonas aeruginosa）、金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）为试验指示菌株,用滤纸片法分别测定次生代谢产物对3种供试菌的抑菌活性．结果　从金叶女贞茎和叶中共分离得到29株内生真菌,有25株内生真菌对试验菌株有一定的抑制作用,占总分离菌株的86.2%．不具抗菌活性的菌株为4株,占总分离菌株的13.8%．结论　金叶女贞茎、叶中均存在丰富的内生真菌资源,其次生代谢产物具有良好的抑菌活性．     

中国南海黑乳海参共附生真菌Phialemonium sp.次生代谢产物的鉴定

［］　目的　对中国南海黑乳海参的共附生单胞瓶霉属真菌(Phialemonium sp.)的次生代谢产物进行研究。 方法　运用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20凝胶柱色谱、高效液相色谱等分离手段对真菌Phialemonium sp.的乙酸乙酯提取物进行分离纯化,利用现代波谱技术结合文献报道进行结构鉴定。 结果　共分离得到2个缩酚酸环醚化合物,emeguisin A和aspergillusidone C。结论　本研究是对黑乳海参共附生真菌Phialemonium sp.次生代谢产物的首次报道,2个缩酚酸环醚成分均为首次从该种真菌中分离得到。     

链霉菌 I06A-03304 产生的二酮哌嗪类化合物的纯化及结构鉴定

目的分离鉴定链霉菌106A-03304发酵液中具血管内皮细胞生长因子受体-2胞内酪氨酸激酶（VEGFR2-CD）抑制活性的次生代谢产物。方法采用大孔吸附树脂、羟丙基葡聚糖凝胶（SephadexLH-20）、C-18反相色谱（ODS）、高压液相色谱（HPLC）等分离手段对次生代谢产物进行分离纯化;通过二级质谱（ESI＋-MS2）、紫外光谱（UV）、红外光谱（IR）、核磁共振波谱（NMR）对其结构进行鉴定,以酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测其次生代谢产物对VEGFR2-CD的抑制活性。结果分离得到两个二酮哌嗪类化合物：3304A和3304C;化合物3304A的化学结构与环（脯氨酸-亮氨酸）一致,化合物3304C的化学结构与环（脯氨酸-苯丙氨酸）一致,均对VEGFR2-CD表现出-定的抑制活性。结论化合物3304A和3304C是具有VEGFR2-CD抑制活性的二酮哌嗪类次生代谢产物,并为本研究首次报道。     

真菌Tolypocladium sp.抗细菌次级代谢产物研究

目的 从黄河三角洲土壤来源真菌次级代谢产物中寻找抗细菌活性化合物。方法 利用化学和生物相结合的方法,筛选黄河三角洲土壤来源真菌中抗菌活性优异、代谢产物丰富的活性菌株,采用硅胶柱层析和制备HPLC等色谱技术对真菌次级代谢产物中抗菌活性组分进行分离纯化,采用¹H NMR、¹³C NMR数据及文献对比鉴定化合物结构。结果 从黄河三角洲土壤来源真菌中获得抗细菌活性菌株Tolypocladium sp.BYFY-1,从其大米发酵产物中分离得到化合物4个,分别是Tolypoalbin(1)、F-14329(2)、Pyridoxatin(3a和3b),其中化合物Pyridoxatin(3a和3b)对金黄色葡萄球菌(ATCC 29213)、粪肠球菌(ATCC 29212)、大肠杆菌(ATCC 25922)、铜绿假单胞菌(ATCC 27853)的MIC分别为8.0、16.0、32.0、128.0μg/mL。结论 首次报道了化合物Pyridoxatin的抗细菌活性,表明黄河三角洲真菌次级代谢产物是抗细菌活性化合物的重要来源。     

一株产生Bei醌类化合物真菌的化学成分研究（Ⅱ）

自报道了竹红菌甲素 [1]的结构以来 ,醌类化合物受到了国内外学者的广泛关注和研究 ,是一类具有多种生物和化学特性的化合物 ,有着极其广泛的理论研究和应用价值 [2 ] 。醌类化合物主要来源于一些真菌的代谢产物 ,个别来源于植物、蚜虫和海洋生物等。作者从云南省西北部山区分离到一株丝状真菌 ,已鉴定为子囊菌纲肉座菌科菌寄生菌属真菌 Ascomycetes hypocreaceae hyomyces( Fr.) Tul.sp.。经驯化在实验室内可合成多种醌类化合物。前文[3～ 5] 已报道了 5个已知化合物和 2个新化合物 ,在对其菌丝体化学成分的进一步研究中又分得5个…     

头孢霉属真菌次生代谢产物研究进展

头孢霉(Cephalosporium Corda)系半知菌类(Fungi Imperfecti)，丛梗孢目(Moniliales)，丛梗孢科(Moniliaceae)中的一属真菌。头孢霉属真菌中的某些种，可产生具有抗革兰阳性和阴性细菌及抗癌活性的次生代谢产物，如产黄头孢霉、顶头孢霉等真菌可产生头孢菌素C。因此，对该属真菌次生代谢产物的研究，是国内外学者们的重要研究课题。     

植物内生真菌的抗菌活性研究

目的　研究植物内生真菌的抗菌活性。方法　在紫金山和栖霞山采集的 18种健康植物中共分离得到了 1838株内生真菌 ,分属于 4 6个类群分别测定对发酵液乙酸乙酯提取物的抗菌活性 ,对药用植物络石活性菌株头孢菌Tj5R代谢产物进行富集与分离并进行活性追踪。结果　在检测的 2 33株内生真菌发酵液乙酸乙酯提取物的抗菌实验中 ,15 6株内生真菌的代谢产物对一种或多种测试真菌或细菌具有一定的抑制作用 ,其中 15株具有很强的抗菌活性。在药用植物络石的活性内生菌株头孢菌Tj5R富集的固体发酵代谢产物中分离得到的 8个化合物中有 3个化合物表现出抗菌作用 ,其中一个化合物对白色念珠菌的MIC值为 1.95 μg/mL ,比阳性对照酮康唑 (MIC值 3.9μg/mL)活性要强。 结论　内生真菌的代谢产物普遍具有一定的抗菌作用      

华南毛蕨内生真菌抑菌活性筛选及活性菌株Pestalotiopsis sp.CYC38代谢产物的研究

目的 筛选具有抑菌活性的华南毛蕨内生真菌及分析其中1株活性较强的菌株的代谢产物.方法 以敏感型金黄色葡萄球菌、耐药型金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌为供试指示菌,采用琼脂块法对43株内生真菌进行抑菌活性筛选,以Pestalotiopsis sp.CYC38作为目标菌株,对其次级代谢产物进行分离,并采用波谱学分析手段鉴定化合物结构.结果 43株内生真菌中有19株菌株至少对1种指示菌有抑菌作用,占分离菌株总数的44%;从高活性菌株CYC38的发酵产物中分离到2个化合物,分别鉴定为啤酒甾醇和1-(4-羟基苯基)-2氨基乙醇.结论 华南毛蕨内生真菌具有较好的抗菌活性,且对耐药型金黄色葡萄球菌也表现出良好的抑制作用,该结果为开发新型的抗耐药菌药物提供基础.     

深海来源淡紫拟青霉ZBY-1的代谢产物及其抗肿瘤活性

目的 阐明来自深海海水的淡紫拟青霉ZBY-1的代谢产物及其抗肿瘤活性.方法 采用活性跟踪分离模式,利用各种色谱技术分离纯化代谢产物;根据理化和波谱数据结合部分化合物的甲醇解反应鉴定化合物结构;采用MTT法测试抗肿瘤活性.结果 从淡紫拟青霉ZBY-1发酵产物中分离鉴定了9(11)-去氢过氧化麦角甾醇(1)、过氧化麦角甾醇(2)、(22E,24R)-5α,6α-环氧-3β-羟基麦角甾-22-烯-7-酮(3)和脑苷脂A(4)、B(5)、C(6)、D(7)等7个化合物.化合物1～3对人癌细胞K562、MCF-7、HL-60、BGC-823有较强抑制作用,IC50在9.5 ～ 59.6 mg/L之间,而4～7对上述4种癌细胞均无抑制活性.结论 本文是有关深海来源淡紫拟青霉代谢产物的首篇研究报道.化合物1～7为首次从淡紫拟青霉产物中分离得到,其中1和3首次从拟青霉属、3还首次从真菌中分离报道.化合物1对K562和BGC-823细胞以及3对上述4种癌细胞的抑制活性亦属首次测试报道.     

药用植物内生真菌产次生代谢产物的研究进展

植物内生真菌是一大类未被充分研究过的新的微生物资源,具有潜在的应用前景。随着对药用植物内生真菌研究的深入,从药用植物内生真菌中寻找新的生物活性成分已成为研究热点。总结近年药用植物内生真菌产生的抗肿瘤、抗菌等活性次生代谢产物最新的研究进展,内生真菌活性成分已成为发现新颖结构化合物及新药物的重要资源。     

滇重楼内生真菌的分离及其抑菌活性

目的 从滇重楼新鲜植株中分离内生真菌并研究其代谢产物抑制人体病原细菌的能力.方法 滇重楼新鲜植株表面消毒后, 采用YPD平板分离培养内生真菌.各菌株的液体发酵物经乙酸乙酯萃取并浓缩.然后, 以金黄色葡萄球菌、伤寒沙门菌、屎肠球菌3种可感染人体的细菌为指示菌, 采用滤纸片琼脂扩散法测定抑菌活性.结果 分离到54株内生真菌.其中20株内生真菌有抑菌活性, 活性菌株占总菌株数量的37%.其中, J09对上述3种细菌的抑菌圈直径分别为 (49.67±1.25) mm、 (50.33±0.52) mm、 (37.00±1.63) mm, 经形态学观察及分子生物学鉴定, J09为灰黄青霉.同时, 经高效液相色谱检测确定, 该抑菌成分并非青霉素或灰黄霉素.结论 内生真菌 (J09) 的代谢产物抑菌活性较强, 具有开发抗菌药物的潜在价值.     

仿刺参共附生放线菌Brevibacterium sp.中的环二肽成分的分离和鉴定

目的 对仿刺参共附生放线菌Brevibacterium sp.的次生代谢产物进行研究.方法 运用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20凝胶柱色谱、高效液相色谱(HPLC)等现代色谱技术对放线菌的乙酸乙酯提取物进行分离纯化,在核磁共振(NMR)、质谱(MS)等现代波谱技术及与文献比对的基础上对其结构进行鉴定.结果 共分离得到7个环二肽类化合物,分别鉴定为:环-(L-脯氨酸-L-苯丙氨酸)(1)、环-(L-脯氨酸-L-甲硫氨酸)(2)、环-(L-脯氨酸-L-酪氨酸)(3)、环-(L-脯氨酸-L-缬氨酸)(4)、环-(L-脯氨酸-L-脯氨酸)(5)、环(L-缬氨酸-甘氨酸)(6)、环-(L-脯氨酸-L-亮氨酸)(7).结论 本研究是对仿刺参共附生微生物次生代谢产物研究的首次报道,这7个化合物均为首次从放线菌Brevibacterium sp.中分离得到.     

一株南海海洋真菌Sporothrix sp.#4335的甾体类代谢产物研究

目的研究分离自香港近海岸的红树林样品Kandelia candel的树皮中,种属已鉴定为Sporothrixsp的海洋真菌Sporothrixsp.#4335的代谢产物。方法用硅胶柱层析法分离代谢产物。结果分离得到3种甾体类化合物。结论化合物的结构通过解析波谱数据分别鉴定为麦角甾醇,过氧化麦角甾醇,麦角甾-7,22(E)-二烯-3β,5α,6β-三醇。     

异香豆素对老年痴呆小鼠β淀粉样蛋白的影响

目的 建立老年痴呆(AD)小鼠模型,探讨异香豆素对AD小鼠的治疗作用及其机制.方法 将50只昆明小鼠分为:对照组、模型对照组、低剂量异香豆素治疗组、中剂量异香豆素治疗组和高剂量异香豆素治疗组,每组各10只;水迷宫实验检测各组小鼠的逃避潜伏时间和平台跨越次数;放射免疫法测定细胞培养上清Aβ含量.结果 老年痴呆小鼠模型组与对照组对照比较,逃避潜伏时间出现显著性的延长(P<0.01),平台跨越次数显著性的减少(P<0.01).异香豆素治疗后老年痴呆小鼠的逃避潜伏时间和平台跨越次数得到显著性的改善(P<0.05).对照组、模型对照组、低剂量异香豆素治疗组、中剂量异香豆素治疗组、高剂量异香豆素治疗组脑组织Aβ的表达水平分别为(1.01±0.44)pg/ml、(12.89±3.21)pg/ml、(10.45±2.06)pg/ml、(7.18±1.92)pg/ml、(4.07±1.24)pg/ml,各组之间具有统计学差异(P<0.01).结论 异香豆素具有抗AD小鼠痴呆的活性,减少AD小鼠脑组织Aβ的生成是其主要的作用机制.     

六种粘细菌095B06次生代谢产物的分离、鉴定及初步生物学活性研究

目的:研究粘细菌的活性次生代谢产物的分离、鉴定及生物学活性.方法:利用稻瘟霉模型筛选活性菌株,对活性菌株Myxococcus xanthus 095B06发酵液的甲醇提取物采用硅胶柱色谱、凝胶柱色谱、高效液相色谱等手段进行分离纯化化学成分,通过1HNMR、13CNMR和ESI-MS对化合物进行结构鉴定,利用纸片扩散法和四甲基偶氮唑盐比色法对单体化合物进行生物活性评价.结果和结论:从粘细菌095B06发酵液中分离鉴定了4个大环内酯类化合物、1个甾醇类化合物及1个生物碱类化合物,它们分别为Avermectin A1a(1)、Avermectin A2a(2)、Avermectin B1a(3)、Avermectin B2a(4)、麦角甾-7,22-双烯-3,5,6-三醇(赛勒维甾醇)(5)和4-喹啉羧酸(6).化合物1～5为首次从粘细菌中分离得到,且化合物2和4对肿瘤细胞SMMC-7721具有较强的抑制作用,其IC50均为5 μg/ml.     

真菌诱导子在药用植物细胞培养中的作用机制和应用进展

在药用植物细胞培养中,真菌诱导子被识别后,通过信号传导途径,引起植物基因表达发生变化,从而调节植物次生代谢产物合成途径中相关酶的活性,最终刺激植物发生防御反应,诱导特定次生代谢产物的生成和积累。因此,真菌诱导子对植物细胞培养的诱导途径主要包含信号识别、转导以及由信号转导介导的胞内应答。真菌诱导子在药用植物中的应用十分广泛,主要涉及到诱导生物碱、萜类、皂苷等天然产物的生成和积累。     

天然核苷类成分的化学结构和药理活性研究进展

核苷类化合物是抗病毒及抗肿瘤方面的热点药物之一,目前关于核苷的合成及检测已有了广泛的研究,但从天然产物中分离报道的核苷类化合物较少。通过对国内外文献调研,本论文从核苷的来源、化学结构以及药理活性等方面进行综述,分析天然核苷的种类特点及药理作用,为核苷类成分的进一步应用和开发研究提供参考。     

忽地笑内生菌的分离及发酵产物抑菌活性研究

目的 探讨忽地笑内生菌的分离及发酵产物抑菌活性.方法 从忽地笑鳞茎中分离内生菌,分别进行发酵培养,采用其发酵浓缩液做体外抑菌试验,观察对常见病原菌的抑制作用.结果 从忽地笑鳞茎中分离出10株内生菌,其中真菌L-10对金黄色葡萄球菌和白色念珠菌均有不同程度的抑制作用,其抑菌圈直径分别达到15、11 mm.结论 忽地笑内生菌可以产生具有抑菌活性的次生代谢产物,为新型抗菌药物的筛选提供了新的分离途径.     

红树林内生真菌抗细菌和抗真菌活性的初步研究

目的分离和筛选具有抗细菌和抗真菌活性的红树林内生真菌。方法从红树林植物桐花树、海漆、秋茄、木榄、白骨壤、银叶树中分离到60株内生真菌,对其代谢产物进行抗菌检测,通过滤纸片法来检测内生真菌代谢产物抗细菌和抗真菌活性。结果共有35株内生真菌具有抗细菌活性,占待侧菌株总数的58.3%,其中以不产孢类、青霉属、曲霉属、镰孢属为主,分别占活性菌株总数的51.4%、8.6%、8.6%、8.6%;共有49株内生真菌具有抗真菌活性,占待侧菌株总数的81.7%,其中以不产孢类和盘长孢属为主,分别占活性菌株总数的44.9%、17.1%。结论红树林内生真菌是抗菌活性物质的一个潜在的、丰富的资源库,值得进一步研究和开发。