荜茇与其伪品假蒟子的鉴别

中药荜茇为胡椒科植物Piper longum L.的干燥近成熟或成熟果穗.近年来,笔者在工作中发现在用同科植物假药的干燥成熟果穗Piper sarmentosum.Roxb.充荜茇,二者同科同属,比较相似容易混淆.本文对二者从性状、显微、理化、薄层色谱及液相色谱方面进行比较鉴别,结果如下：     

荜茇化学成分及药理作用研究进展

荜茇为胡椒科植物荜茇PiperlongumL．的干燥近成熟或成熟的果穗。是中、藏、蒙、维医的常用药材,有温中散寒、下气止痛的功效,其主要活性成分为胡椒碱等酰胺类生物碱及挥发油。已有研究证明这类化合物具有催眠、镇静、抗惊厥、抗抑郁和骨骼肌松弛等作用临床主要用于胃痛、腹泻等本文就近年来国内外学者对荜茇的化学成分、药理活性等研究作一综述。1化学成分：荜茇果实中主要含有胡椒碱（Piperinel、派咤、N-异丁基癸二烯（反2,反4）酞胺和少量荜茇酞胺、四氢胡椒碱、棕桐酸、1-十一炭烯基-3,挥发油,4-甲撑二氧苯,还含有芝麻素,氨基酸,细辛脂素,发氏玉兰素,雨石酸木脂素,双异按脂素一,等成分。具体分类如下。     

荜茇致突变毒理研究

荜茇为胡椒科胡椒属植物,产于云南东南至西南部,广西、广东和福建有栽培。其药用部位为干燥近成熟或成熟的果穗,其味辛性热,无毒,温中下气,杀腥气,消食,除胃冷、阴疝和胸腹痛,为镇痛健胃的要药,主要用于胃寒引起的腹痛、呕吐、腹泻、冠心病心绞痛、神经性头痛及牙痛等症状。     

荜茇有效成分提取及抗炎作用的研究

目的：对荜茇有效成分进行提取,观察其对二甲苯致小鼠耳廓炎症的作用。方法：采用溶剂法提取荜茇有效成分,石油醚、乙酸乙酯萃取分离,得到三部分药液。采用二甲苯引起小鼠耳廓肿胀致炎造模方法,观察并记录小鼠耳廓肿胀程度。结果：服用荜茇的乙酸乙酯萃取物的小鼠,左右耳肿胀程度与地塞米松对照品接近。结论：荜茇提取物具有明显的抗炎作用。     

自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤促进荜茇酰胺的抗肿瘤作用

摘 要 目的 荜茇酰胺是一种中药单体,具有多种药理学作用。本研究旨在探讨自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤对荜茇酰胺抗肿瘤作用的影响。方法 实验分为对照组：采用生理盐水处理A549细胞48h;荜茇酰胺组：3μM荜茇酰胺处理细胞48h,荜茇酰胺+ N-乙酰-L-半胱氨酸（NAC）组：3μM荜茇酰胺和10mM NAC处理细胞48h;3-甲基腺嘌呤+荜茇酰胺组：3μM荜茇酰胺和10mM NAC处理细胞48h。采用CCK-8法测定细胞活力,使用流式细胞仪测定细胞内活性氧（ROS）水平,蛋白质印迹法检测细胞自噬蛋白（LC3B）的表达。结果 3μM荜茇酰胺处理A549细胞后,细胞ROS水平显著升高至1.49±0.18(P<0.05),细胞活力显著下降至60.1±10.2%（P<0.05）,LC3B-II表达显著增加（P<0.05）。荜茇酰胺与10mM NAC合用后,细胞ROS水平为0.98±0.04,细胞活力为97.7+4.0%,LC3B-II表达下降至用药前水平（P<0.05）。自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤处理肺癌细胞后,LC3B-II表达显著降低。3-甲基腺嘌呤+荜茇酰胺组A549细胞活力为24.8±1.3%,显著低于荜茇酰胺组（60.1±10.2%,P<0.05）。结论 荜茇酰胺通过ROS依赖途径促进细胞自噬。自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤增强荜茇酰胺的抗肿瘤作用。     

荜茇清除DPPH自由基能力的研究

目的:研究中药材荜茇清除DPPH自由基(DDPH·)能力.方法:用DPPH法对荜茇七种不同溶剂提取物体外抗氧化活性进行筛选,与抗坏血酸(VitC)比较.结果:荜茇95%乙醇的提取物对DDPH·的清除率最高;清除DDPH·50%时,荜茇95%乙醇提取物折算成药材荜茇所需用量与VitC相比相差约2×103倍.结论:荜茇具有一定的清除DPPH自由基能力.     

荜茇明碱抑制BMP2/pSmad1/5信号减轻高钙高磷诱导的主动脉瓣膜间质细胞钙化

目的：探究荜茇明碱对高钙高磷诱导的主动脉瓣膜间质细胞（aortic valve interstitial cell,AVIC）钙化的保护作用及其机制。方法：体外培养原代猪AVIC,通过高钙高磷诱导钙化并给予不同浓度荜茇明碱处理16 h后,流式细胞仪分析检测凋亡水平;AVIC在高钙高磷条件下,以2.5 mmol/L荜茇明碱或100 ng/mL骨形态发生蛋白2（bone morphogenetic protein 2,BMP2）处理,通过检测钙浓度、碱性磷酸酶（alkaline phosphatase,ALP）活性、茜素红染色反映钙化程度;Western blot、real?time PCR检测成骨相关蛋白和mRNA的表达。结果：①流式细胞分析发现,高钙高磷条件下,荜茇明碱低于5 mmol/L无明显促凋亡作用;②钙浓度、ALP活性、茜素红染色显示,2.5 mmol/L荜茇明碱显著抑制高钙高磷诱导的AVIC钙化;③Western blot、real?time PCR显示,2.5 mmol/L荜茇明碱抑制BMP2、pSmad1/5、RUNX2蛋白和mRNA的表达;④外源性重组BMP2可逆转荜茇明碱抗钙化的作用。结论：荜茇明碱通过抑制 BMP2/pSmad1/5/RUNX2 信号,减轻高钙高磷诱导的 AVIC钙化。     

荜茇酰胺抑制破骨细胞分化的机制研究

目的探讨荜茇酰胺对破骨细胞分化的影响及机制。方法通过CCK-8法评估荜茇酰胺对小鼠骨髓来源单核巨噬细胞（BMMs）增殖活性的影响,采用抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）染色评估其对BMMs破骨分化的影响,利用OsteoAssaySurface骨细胞表面培养板研究其对破骨细胞骨吸收能力的影响,并采用qRT-PCR法验证荜茇酰胺处理下BMMs破骨分化过程中核心转录因子活化T-细胞核因子1（NFATc1）和相关破骨特征基因在转录水平的变化。结果2μmol/L及以下浓度的荜茇酰胺对BMMs增殖无明显毒性反应,并且荜茇酰胺可浓度依赖性地抑制BMMs破骨分化过程,在1μmol/L荜茇酰胺干预下几乎无成熟破骨细胞生成。与此同时,荜茇酰胺可显著抑制破骨细胞的骨吸收功能。在机制上,荜茇酰胺可通过抑制NF-κB受体活化因子配体（RANKL）刺激BMMs破骨分化过程中核心转录因子NFATc1的表达,从而下调下游耐酒石酸酸性磷酸酶（ACP5）、破骨细胞相关受体（OSCAR）、组织蛋白酶K（CTSK）、基质金属蛋白酶9（MMP-9）等破骨特征基因的转录,抑制破骨分化过程。结论荜茇酰胺可通过下调RANKL刺激BMMs破骨分化过程中NFATc1的表达,抑制BMMs破骨分化过程及破骨细胞的骨吸收能力。     

荜茇挥发油的成分分析

荜茇为胡椒科植物PiperlongumL．的未成熟的果德。产于印尼、菲律宾、越南，我国云南有野生，海南岛有栽培。本品能温中收寒，下气止痛，治疗胃肠虚寒疼痛，头痛，龋齿痛等。果实含胡椒碱及挥发油，但挥发油的组成未见详细报道[1]。现用GC及GC－MS对本芝的挥发油作了分析，以了解其化学组成。1材料和仪器荜茇由广州市药品检验所提供。仪器为GC－14A（岛津）及5988AGC－MS联用仪（惠普）。2实验方法2．1挥发油的提取：用水蒸汽蒸馏法提取荜茇挥发油，溶于乙醚，以无水Na2SO4脱水，低温挥去乙酸，得合少量乙醇的挥发油。2．2挥发油的…     

自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤对荜茇酰胺抗肿瘤作用的影响

目的探讨自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤对荜茇酰胺抗肿瘤作用的影响。方法实验分为对照组:采用生理盐水处理A549细胞48h;荜茇酰胺组:3μM荜茇酰胺处理细胞48h;荜茇酰胺+N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC)组:3μM荜茇酰胺和10mM NAC处理细胞48h;3-甲基腺嘌呤+荜茇酰胺组:3μM荜茇酰胺和3mM 3-甲基腺嘌呤处理细胞48h。采用CCK-8法测定细胞活力,使用流式细胞仪测定细胞内活性氧(ROS)水平,蛋白质印迹法检测细胞自噬蛋白(LC3B)表达。结果 3μM荜茇酰胺处理A549细胞后,细胞ROS水平显著升高至(1.49±0.18)(P0.05),细胞活力显著下降至(60.1±10.2)%(P0.05),LC3B-II表达显著增加(P0.05)。荜茇酰胺与10mM NAC合用后,细胞ROS水平为(0.98±0.04),细胞活力为(97.7±4.0)%,LC3B-II表达下降至用药前水平(P0.05)。自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤处理肺癌细胞后,LC3B-II表达显著降低。3-甲基腺嘌呤+荜茇酰胺组A549细胞活力为(24.8±1.3)%,显著低于荜茇酰胺组(60.1±10.2)%(P0.05)。结论荜茇酰胺通过ROS依赖途径促进A549细胞自噬。自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤可增强荜茇酰胺的抗肿瘤作用。