青蒿素,青蒿酯和蒿甲醚对抑制性细胞的作用

用超适剂量免疫法（ＳＯＩ）诱导小鼠Ｔｓ细胞活性，发现青蒿素青蒿酯均对ＳＯＩ诱导供体鼠ＴＳ细胞的产生有显著抑制作用，但两者却能增强受体鼠效应阶段Ｔｓ细胞的活性。蒿甲对ＳＯＩ诱导供体鼠产生的ＴＳ细胞没有影响，且不能增强受体鼠效应阶段ＴＳ的活性。     

RP-HPLC法测定小鼠血浆中蒿甲醚的浓度

目的建立测定小鼠血浆中蒿甲醚浓度的方法。方法采用RP-HPLC法,色谱柱为Diamonsil C18柱(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-水(体积比85∶15);流速为1.0 mL/min;检测波长为210 nm;柱温为室温。利用甲基叔丁基醚对小鼠血浆及组织中蒿甲醚及蒿乙醚进行提取后进行测定。结果蒿甲醚与蒿乙醚的色谱峰分离良好并且出峰时间相近,以蒿乙醚为内标测定血浆中蒿甲醚符合方法学要求,血浆标准曲线在一定范围内线性关系良好(R2=0.9991,n=5),高、中、低3个浓度的回收率均为97%以上,日内及日间RSD均小于3%。结论建立的方法可简单快速测定蒿甲醚在小鼠血浆中的浓度,为内标法测定蒿甲醚在动物血浆中的浓度提供思路。     

青蒿素、青蒿酯和蒿甲醚对抑制性T细胞的作用

用超适剂量免疫法（ＳＯＩ）诱导小鼠Ｔｓ细胞活性，发现青蒿素、青蒿酯均对ＳＯＩ诱导供体鼠Ｔｓ细胞的产生有显著抑制作用，但两者却能增强受体鼠效应阶段Ｔｓ细胞的活性。蒿甲醚对ＳＯＩ诱导供体鼠产生的Ｔｓ细胞没有影响，且不能增强受体鼠效应阶段Ｔｓ的活性。     

青蒿素、青蒿琥酯和蒿甲醚在健康人试验中出现发热反应的回顾分析

青蒿素及其衍生物在健康人试验中,8名受试者接受青篙素水/油混悬剂肌注,2例出现发热反应。青蒿素栓15名受试者中,2名发热。蒿甲醚肌注45名志愿者中,21名(46.7％)发热。发热率、发热程度和持续时间同剂量之间呈量效关系。唯青蒿琥酯静注18名和口服11名受试者没有出现发热反应。     

红花中黄酮醇类成分的分离和鉴定

红花为一活血化瘀代表性药 ,其提取物具抗心肌缺血、抗血小板激活因子、抗炎等多方面的心血管药理活性。多年来 ,国内外对红花进行了大量研究 ,发现红花中含有黄酮类、脂肪酸等多种成分[1,2 ] ,我研究室试验结果表明 ,多种黄酮醇为红花的抗血小板激活因子有效成分 [3] ,其中本文报道的杨梅素为我室首次从红花中分离鉴定的成分。1　仪器与试剂Nicolet 2 0 SXB型红外分光光度计 ,KBr压片 ,JEOL JNM- AL30 0型核磁共振波谱仪 ,Varian IN-OVA- 5 0 0型核磁共振波谱仪 ,TMS为内标 ,KYKY- 1型质谱仪 ,Autospec- Ulitima ATOF型质谱…     

吴茱萸中二种黄酮类化合物的分离和鉴定

吴茱萸Evodia rutaecarpa(Juss．)Benth．为芸香科植物吴茱萸的干燥将近成熟果实。属温里祛寒类中药。有温中散寒、疏肝止痛之功效，常用于治疗脘腹冷痛、呕吐腹泻、头痛、胃痛、疝痛、腹痛和痛经等。《本草纲目》称吴茱萸“开郁化滞，治吞酸、厥阴、痰涎头痛、阴毒腹痛、疝气血痢和喉舌口疮”。近     

人参四逆汤活性成分的分离和鉴定

目的 研究人参四逆汤的活性成分。方法 利用硅胶色谱柱分离技术，通过理化方法及光谱分析鉴定其化学结构。结果 从人参四逆汤水溶液中，分得7个化合物，分别鉴定为人参皂苷-Rb1、-Rb21、-Rc、-Rd、-Re、-Rg1和尿嘧啶。结论 首次从人参四逆汤水溶液中分得这些化合物。     

赤芝孢子中油酸的分离及鉴定

赤芝为多孔菌科灵芝属真菌植物〔1〕。目前,人们在重视灵芝保健作用和药用成分研究的同时,对灵芝的生殖细胞-孢子药用价值的研究也逐渐加强,现有的临床应用及研究表明,其粗制剂试用于多种疑难疾病和萎缩性肌强直、多发性硬化、内脏多动症等均有较满意的疗效〔2～4〕。新近的研究结果也表明了灵芝孢子在体外可以抑制多种肿瘤细胞的生长并可抑制艾滋病(HIV-1)的蛋白酶活性〔5,6〕。目前已从灵芝孢子中分离到了二十四烷酸、二十二烷酸、硬脂酸、硬脂酸硫、棕榈酸等长链脂肪酸以及蛋白质、糖肽类、维生素类、胡萝卜素、固醇类、三萜类、生物碱…     

MTBE对大鼠中枢神经系统Fos蛋白的影响

目的通过研究甲基叔丁基醚(MTBE)对大鼠中枢神经系统Fos蛋白的影响,探讨MTBE对中枢神经系统急性毒作用部位。方法54只健康成年SD大鼠,体重180～220g,随机分为9组,腹腔注射MTBE原液染毒,以未染毒为对照,染毒剂量分别为700、1050、1400mg/(kg·bw),染毒后用免疫组织化学方法检测Fos蛋白的表达并用相对灰度值定量。结果未染毒对照组脑组织神经元内仅有少量Fos蛋白表达,MTBE急性染毒后在大脑皮质、丘脑、下丘脑、小脑皮质神经元内Fos蛋白表达均有明显增多,Fos蛋白表达的相对灰度值随着MTBE染毒剂量的增加,其表达逐渐增强,其中MTBE对大脑皮质、小脑皮质的毒作用较丘脑、下丘脑更为明显;各部位Fos蛋白在MTBE染毒后0.5h时表达开始增加,1.0h达到高峰,2.0h时开始减弱,8.0h时Fos蛋白表达恢复到染毒前水平。结论MTBE可诱导大脑皮质、小脑皮质、丘脑和下丘脑Fos蛋白的表达增强,大脑皮质、小脑皮质、丘脑和下丘脑是MTBE的急性毒作用部位。     

双氢青蒿素对前列腺癌PC-3细胞体内生长及Caspase-3表达的影响

目的：研究双氢青蒿素（DHA）对前列腺癌PC-3细胞裸鼠种植瘤生长的抑制作用及对半胱天冬酶_3（Caspase-3）表达的影响,并探讨其可能的作用机制．方法：采用人前列腺癌PC·3细胞株建立裸鼠种植瘤模型,将20只模型鼠随机分为对照组,二甲基亚砜（DMSO）溶剂组,DHA0．1,0．2mmo/kg组．各组经13d干预后,计算抑瘤率;光镜及电镜观察肿瘤组织形态学变化,以Hoechst33258染色,荧光显微镜观察细胞凋亡,免疫组织化学法检测Caspase-3的表达水平．结果：DHA0．1,0．2mmol／kg组瘤质量明显〈对照组及DMSO溶剂组（P〈0．05）,DHA0．1,0．2mmol／kg组抑瘤率分别为69．221％,63．186％．光镜及电镜可观察到典型的凋亡细胞和凋亡小体;Hoechst33258染色可见DHA0．1,0．2mmol／kg组凋亡细胞明显增多,其凋亡细胞密度显著增大（P〈0．05）;免疫组化结果显示,DHA0．1,0．2mmol/fkg组Caspase-3表达明显升高（P〈0．05）．结论：DHA能够抑制前列腺癌PC．3细胞裸鼠种植瘤的生长,其机制可能与上调凋亡相关基因Caspase-3表达有关．     

双氢青蒿素对前列腺癌裸鼠种植瘤生长及VEGF表达的影响

目的：研究双氢青蒿素（DHA）对前列腺癌PC-3细胞裸鼠种植瘤的抑制作用及对VEGF表达的影响,并探讨其作用机制.方法：采用人前列腺癌PC-3细胞建立裸鼠种植瘤模型,20只模型鼠随机分为对照组;二甲基亚砜（DMSO）溶剂组（DMSO1mL/kg）;DHA实验1组（DHA100μmol/kg）;DHA实验2组（DHA200μmol/kg）.经13d干预后,计算抑瘤率.采用光镜及电镜观察肿瘤组织形态学变化;采用免疫组织化学法检测VEGF的表达水平;采用体视学分析肿瘤微血管密度（MVD）.结果：DHA实验1,2组抑瘤率分别为63.186%,69.221%.光镜及电镜下观察可见DHA实验1组和实验2组肿瘤组织内凋亡细胞明显增多,出现典型的凋亡小体.免疫组化结果显示VEGF表达DHA实验1组和实验2组均低于对照组及DMSO溶剂组（P〈0.05）,但2个DHA实验组组间相比较差异无统计学意义;DMSO溶剂组与对照组组间相比较差异也无统计学意义.2个DHA实验组MVD均低于对照组（P〈0.05）,但2个DHA实验组之间相比较差异无统计学意义;DMSO溶剂组与对照组组间相比较差异也无统计学意义.结论：DHA具有较强的抗肿瘤作用,其机制与下调凋亡相关基因VEGF有关.     

阴离子色谱-脉冲安培检测法测定酒中氨基酸

目的建立不同种类酒中氨基酸的高效阴离子交换色谱分离-脉冲安培检测法测定。方法样品用去离子水稀释后经滤膜过滤直接进样,采用梯度洗脱、阴离子交换色谱-积分脉冲安培检测法测定了黄酒、清酒、葡萄酒和啤酒中的氨基酸。结果五种黄酒氨基酸平均含量是3155．15mg／L,清酒氨基酸平均含量为2435．53mg／L,葡萄酒氨基酸平均含量为1158．66mg／L,啤酒氨基酸平均含量为773．54mg／L。结论利用阴离子交换色谱分离-脉冲安培检测法测定不同种类酒中的氨基酸,样品前处理简单,方法适用性宽,测定重复性好,灵敏度高,定性定量准确,结果满意。     

薄层扫描法测定穿心莲中穿心莲内酯、脱水穿心莲内酯的含量

采用薄层扫描法测定了 15批穿心莲商品药材中穿心莲内酯、脱水穿心莲内酯的含量 ,并进行了比较。结果脱水穿心莲内酯高于穿心莲内酯的占 2 6 .7% ,穿心莲内酯高于脱水穿心莲内酯的占 5 3.3% ,两者含量差异在±10 %以内的占 2 0 .0 %。     

双氢青蒿素对前列腺癌裸鼠种植瘤Bcl-2和Bax表达的调控

目的研究双氢青蒿素(DHA)诱导前列腺癌细胞凋亡作用及其机制。方法采用人前列腺癌PC-3细胞株建立裸鼠种植瘤模型,将20只模型鼠随机平均分为对照组、溶剂(DMSO)组、DHA200μmol/kg体质量组和DHA100μmol/kg体质量组,经13d干预后,电镜观察肿瘤组织形态学表现;免疫组化检测凋亡相关基因Bcl-2、Bax的表达水平;TUNEL法检测肿瘤组织细胞凋亡。结果与对照组及DMSO组比较,DHA治疗组电镜观察肿瘤组织中散在凋亡细胞及凋亡小体;免疫组化检测凋亡相关基因Bcl-2表达减弱、Bax表达增强,差异均有统计学意义(P<0.05);TUNEL检测结果显示肿瘤组织细胞凋亡率明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论DHA具有较强的诱导前列腺癌细胞凋亡作用,这种作用可能是通过下调Bcl-2和上调Bax表达实现的。     

中国广西涠洲岛海域海绵Callyspongia sp.的化学成分研究

目的:对采自中国广西涠洲岛海域海绵Callyspongia sp.的化学成分进行分离和结构鉴定。方法:采用硅胶薄层色谱、柱色谱、凝胶渗透色谱LH-20,半制备HPLC等方法对采自中国广西涠洲岛海域海绵Callyspongia sp.的次生代谢产物进行化学分离,并通过核磁共振谱(1D、2D NMR)、质谱 (ESI - MS)等方法,确定化合物的结构。结果:共分离得到8个化合物,分别为牛磺酸（1）、乙酰牛磺酸（2）、N-甲基吡啶-2-羧酸盐（3）、zooanemonin（4）、N-丁基乙酰胺（5）、尿嘧啶（6）、3-甲基尿嘧啶（7）、苯甲酸（8）。结论:化合物1-5和7-8均为首次从该属海绵中分离得到。     

表皮干细胞的分离及鉴定

表皮干细胞(epiderimal stem cells,ESCs)在体内数量很少,且缺乏特异性标志物,分离鉴定存在一定困难.目前,分离ESCs主要根据细胞动力学特点,以及特异性标志物标记后经流式细胞术分选来完成,已发现多种ESCs特异性标志物可用于其分离及鉴定.     

双氢青蒿素对雄激素非依赖性前列腺癌细胞中mTOR表达和分布的影响

目的 探讨双氢青篙素时雄激素非依赖性前列腺癌C4-2B细胞的增殖和凋亡以及mTOR表达水平和分布定位的影响.方法 体外培养C4-2B细胞给予不同浓度的双氢青蒿素处理,以MTT法检测细胞增殖率;以RT-PCR检测细胞mTOR mRNA表达的情况;流式细胞术检测细胞凋亡率;透射电镜观察细胞超微结构的变化;激光共聚焦显微镜免疫荧光分析法评价mTOR蛋白的表达水平和亚细胞定位分布.结果 双氢青蒿素抑制C4-2B细胞的增殖呈时间和剂量依赖性(P＜0.01);RT-PCR和免疫荧光细胞化学实验的结果表明,C4-2B细胞有mTOR mRNA和蛋白的表达,且随双氢青蒿素浓度的升高而增高(P＜0.05);FCM显示C4-2B细胞的凋亡率随双氢青蒿素浓度的升高而增加(P＜0.01);电镜观察到典型凋亡的形态学变化;激光共聚焦检测结果显示,mTOR不仅有胞膜和胞质的定位,胞核也有少量表达,随双氢青蒿素浓度的升高,胞核内的表达增加.结论 双氢青蒿素抑制C4-2B细胞增殖并诱导其凋亡,呈时间和剂量依赖性.C4-2B细胞对双氢青蒿素的反应性可能与mTOR的表达和核易住激活有关.     

Inhibition of lymphangiogenesis,nodal and lung metastasis by dihydroartemisinin in mice bearing Lewis lung carcinoma

Objective：To investigate the activity of anti-malarial dihydroartemisinin （DHA） on tumor growth, lymphangiogenesis, nodal and lung metastasis and survival in mice bearing Lewis lung carcimoma （LLC）. Methods： The models of C57BL/6 mice transplantation tumors were established via subcutaneous injection of LLC cells and divided into 4 groups： control group, DHA group, DHA＋ferrous sulfate （FS） group and FS group, with 25 mice in each group. Tumor volumes and weights, nodal and lung metastasis, and survival were monitored. Tumor lymphatic microvessel density （LMVD） was determined by lymphatic vessel endothelial hyaluronan receptor-1 （LYVE-1） immnohistochemistry. After LLC cells were treated with DHA or DHA＋FS, protein and mRNA levels of vascular endothelial growth factor （VEGF） -C were evaluated by Western blotting and real time quantitative RT-PCR, respectively. Results： Oral administration of DHA or DHA＋FS inhibited lymph node and lung metastasis, and prolonged survival. However, no significant tumor growth retardation effect was observed when mice were treated with DHA alone. The inhibited tumor metastasis was related to the decreased LMVD in the peritumoral regions, but not in the intratumoral regions. DHA significantly down-regulated the expression of VEGF-C protein and mRNA in LLC cells. Conclusion： DHA effectively inhibits LLC transplantation tumor lymphangiogenesis, nodal and lung metastasis, and may be a promising chemotherapeutic agent for controlling lung cancer metastasis by decreasing VEGF-C expression.