泰山蛹虫草菌产胞外多糖发酵工艺的研究

目的研究蛹虫草菌产胞外多糖的最佳发酵培养基和发酵条件。方法采用干重法测定菌丝生物量。采用硫酸-苯酚法测定多糖含量。结果蛹虫草产胞外多糖最佳发酵培养基组成为:蔗糖6%,硝酸钾0.2%,酵母膏2%,MgSO4.7H2O 0.02%,K2HPO40.04%,FeSO4.7H2O 0.002%;优化发酵培养条件为:接种量6%,初始pH7.0,温度24℃。结论在优化的培养基组成和发酵条件下,蛹虫草胞外多糖产量为4.84 g/L,菌丝体干重为21.12g/L。     

灵芝真菌发酵胞外多糖反馈抑制的初步研究

探讨了灵芝胞外多糖自身反馈抑制作用。在摇瓶中考察了灵芝真菌发酵菌丝体生长、胞外多糖(EPS)和胞内多糖(IPS)合成的动态过程。在培养168h时，生物量达到最大值3．18g／L(干重)，培养216h时，胞外多糖达到最高浓度1．24g／L，EPS和生物量的变化趋势大致呈正相关。在摇瓶培养基中添加同源胞外多糖，以浓度梯度实验法考察培养基中的同源胞外多糖浓度对灵芝真菌发酵胞外多糖产量的影响，结果表明：培养基中添加的同源胞外多糖浓度高于0．59g/L时，EPS的产生受到明显抑制，其趋势是随着培养基中同源灵芝胞外多糖浓度的增加，反馈抑制作用逐渐增强，当培养基中添加的同源胞外多糖浓度高于2．34g/L时，菌丝的生长和胞外多糖的产生完全受到抑制。     

桦褐孔菌胞外多糖合成的深层发酵条件研究

目的探索桦褐孔菌深层发酵体系中胞外多糖积累的最佳碳、氮源和pH值。方法采用深层发酵法培养桦褐孔菌,通过添加不同的碳、氮源和改变pH值观察胞外多糖的积累。发酵液中的总糖用硫酸-蒽酮法测定,还原糖以DNS法测定,总糖减去还原糖即为胞外多糖的量。结果桦褐孔菌深层发酵体系中有利于胞外多糖合成的最佳碳源为2%的麦芽糖,氮源为0.4%的蛋白胨,最适pH值为5.5。结论最佳单因子组合对桦褐孔菌胞外多糖积累有协同效应,组合后的发酵体系中胞外多糖的量达7.8g/L。     

灵芝真菌发酵生产灵芝多糖和灵芝酸

提出了灵芝真菌同时高效生产灵芝多糖和灵芝酸的发酵过程。在摇瓶中考察了氮源、接种量、起始葡萄糖浓度和装液量对灵芝细胞生长及灵芝多糖和灵芝酸生产的影响。结果表明 ,酵母膏和蛋白胨复配作为氮源有利于细胞生长。接种量对细胞量有一定影响 ,但是对产物积累量影响更大。在 50 g/ L起始糖浓度下 ,细胞干重达到 1 6.7g/ L,胞内多糖、胞外多糖和灵芝酸分别达 1 .1 9g/ L,0 .854g/ L和 2 1 2 .3mg/ L。考察装液量发现 ,小装液量有利于提高细胞生长速率和产物的生产速率     

双孢蘑菇胞外多糖及胞内多糖的分离纯化和化学结构分析

目的：研究双孢蘑菇胞内多糖及胞外多糖的化学结构。方法：采用葡聚糖凝胶纯化、高效液相色谱、紫外光谱、薄层层析、气相色谱、红外光谱、核磁共振氢谱、高碘酸氧化、Ｓｍｉｔｈ降解等色谱及化学方法测定。结果：胞内多糖及胞外多糖均由单一葡聚糖组成,具有β型糖苷键。结论：对双孢蘑菇胞内多糖及胞外多糖的结构研究为首次报道。     

隐孔菌的发酵培养及成分分析

采用ＧＣ－ＭＳ－ＤＳ测定隐孔菌菌丝的挥发油成分,结果表明,在检出２０种成分中包括倍半萜类化合物４种,芳香族化合物１０种,脂肪族化合物６种,与野生隐孔菌挥发油成分组成相比共有１３种成分相同,占检出成分的６５％。挥发油含量高于野生隐孔菌挥发油含坦。通过ＴＯＴ百分比测定,芳香族和脂肪族含量均高于野生隐孔菌,萜类含量二者基本相近。     

松木层孔菌胞外多糖的组成分析及免疫学活性研究

目的 研究松木层孔菌胞外多糖的单糖组成和免疫学活性。方法 使用冻融分级、酶+seveg法脱蛋白和Sepharose CL-6B层析纯化松木层孔菌胞外粗多糖(CPPE),得到级分PPE,用HPLC分析其均一性和分子量,用气相色谱法测其单糖组成。结果 经HPLC验证,PPE为均一组分,分子量为3.9×10⁴ Da。气相色谱分析表明,PPE为甘露聚糖。淋巴细胞增殖实验显示,PPE能促进小鼠淋巴细胞的增殖,同时也可协同有丝分裂原ConA和LPS促进小鼠脾T、B淋巴细胞的增殖。结论 PPE具有提高机体免疫力的功能。     

灵芝菌固体发酵三七药渣工艺研究

目的：优化灵芝菌固体发酵三七药渣的发酵工艺,缩短发酵周期,为三七药渣再利用研究提供新的思路。方法运用单因素试验法,以菌蕾形成时间为考察指标,筛选出最佳发酵条件。结果灵芝菌发酵三七药渣最优发酵工艺为：三七药渣粉末（过10目筛）,加入1.5％生长因子CaCO3,加适量水（使含水量达60％）,接种量（V/V）＝1：1~1.5：1,在（28±1）℃下,避光培养。结论灵芝菌固体发酵三七药渣的工艺稳定、可靠、高效、产物得率高,为三七药渣的进一步研究和开发利用奠定了基础。     

里氏木霉产胞外多糖发酵条件的优选研究

目的：建立简便有效的里氏木霉胞外多糖提取发酵工艺,为木霉胞外多糖的进一步开发利用奠定基础。方法以粗胞外多糖产量为指标,采用单因素试验优化发酵培养基配方,利用正交试验对摇瓶培养过程中的发酵液初始 pH、孢子接种量、发酵温度及发酵时间进行优选。结果里氏木霉发酵最佳控制参数为：培养基配方为蔗糖50 g/L、酵母粉20 g/L、K2HPO4·3H2O 8 g/L、MgSO40.5 g/L;发酵条件为发酵液初始 pH5.0、孢子接种量10%、发酵温度28℃、发酵时间190 h。优选发酵条件下里氏木霉粗胞外多糖产量达到21.6 g/L（RSD=2.54%, n=3）。结论优化的里氏木霉胞外多糖发酵提取工艺是一种简便、合理、可行和产量较高的提取工艺。     

金耳胞外多糖的结构分析

金耳Tremellaaurantialba系银耳科中名贵药食真菌,具有止咳化痰、补气养心、平肝益胃等功效[1,2]。金耳子实体多糖和菌丝体多糖的结构和药效均有报道[3～10],本实验对从发酵液中提取的胞外多糖进行了分离纯化并对其结构作了初步研究。1实验部分1.1仪器与药品:Biof-2050发酵罐(上海高机实业总公司生产);SYNDER-UF402型超滤装置(SYNDER美国);KA-1000型台式离心机(上海安亭科学仪器厂);玻璃色谱柱(1cm×50cm、1.5cm×60cm);HL-2恒流泵(上海精科实业有限公司制造);TH-1000梯度混合仪(上海沪西仪器厂);BSA-100自动分部收集器(上海长宁…     

灵芝多糖对小鼠腹腔巨噬细胞蛋白激酶A活性的影响

为观察灵芝多糖（ＧＬＢ７）体外对小鼠腹腔巨噬细胞（ＭΦ）蛋白激酶Ａ（ＰＫＡ）活性的影响,采用反相离子对高效液相色谱法测定ＭΦ中ＲＫＡ活力。结果表明ＧＬＢ７（４０ｍｇ／Ｌ）能引起小鼠腹腔ＭΦ中ＰＫＡ活性明显升高,１０ｍｉｎ达峰值,３０ｍｉｎ恢复到基础水平。提示灵芝多糖的免疫增强作用与其增强ＭΦ中ＰＫＡ活性有关。     

超声循环提取灵芝中三萜类化合物的研究

目的 研究超声循环技术在灵芝中三萜类化合物提取中的应用。方法 在常规提取方法的基础上，增加超声循环的处理步骤。结果 通过试验对比，超声循环提取所需各种溶剂用量减少，提取时间缩短，目的产物提取率提高了40%。与常规方法提取得到的目的产物之间存在着良好的相关性。结论 超声循环技术用于灵芝中三萜类化合物的提取具有良好的应用前景。     

灵芝液体发酵产漆酶最佳培养基和培养条件研究

目的研究灵芝液体发酵产漆酶的最佳培养基和培养条件。方法以灵芝S3号菌株为试验材料,以灵芝漆酶活性为衡量指标,通过正交试验分别对灵芝液体发酵培养基及培养条件进行优化筛选。结果筛出最佳培养基组成为葡萄糖30g/L、棉花0.2%、磷酸氢二铵0.66g/L、干酪素0.5%、聚山梨酯-800.15%;优化培养条件为初始pH5.5、装液量75mL、接种量12.5%、菌龄5×24h、培养时间9×24h。结论优化培养基及培养条件后,发酵液中灵芝漆酶活性显著提高。     

赤芝子实体中三萜酸类成分及其抗人乳腺癌SKBR3细胞增殖活性

目的 研究赤芝Ganoderma lucidum子实体中三萜酸类成分及其抗肿瘤活性。方法 用硅胶柱色谱、反相ODS柱色谱、反相HPLC等方法分离得到13个化合物,利用波谱学方法鉴定它们的化学结构,并进一步确定各化合物对乳腺癌SKBR3细胞的生物活性。结果 分离得到13个三萜酸类的化合物,分别鉴定为灵芝烯酸C（1）、灵芝酸C2（2）、灵赤酸A（3）、灵芝酸G（4）、灵芝烯酸B（5）、灵芝酸B（6）、灵芝酸H（7）、灵芝烯酸A（8）、灵芝酸I（9）、灵芝酸A（10）、灵芝烯酸K（11）、灵芝烯酸D（12）、灵芝酸D（13）。化合物6在20 μmol/L浓度下对人乳腺癌细胞SK-BR-3的抑制率为40.3%。结论 化合物11是首次从该植物中分离得到的,化合物6对人乳腺癌细胞SK-BR-3显示了一定的抑制活性,其他化合物在该浓度下未显示活性。     

RP—HPLC法测定不同部位灵芝中灵芝酸B含量

目的：测定灵芝中具有苦味的成分灵芝酸B在灵芝中不同部们的含量,方法：采用RP－HPLC法测定灵芝菌盖的表皮层,木栓层,菌柄,孢子粉,菌盖子实体等部位分中灵芝酸B的含量,结果：灵芝药材中灵芝酸B主要集中在灵芝的表皮部位,其它部位则较少,结论：为寻找灵过的有效成分分布规律提供了客观依据。     

草栽与段木栽培的灵芝活性成分的分离与鉴定 I.多糖肽成分的提取、纯化及性质

目的　研究草栽和段木栽培灵芝的多糖性质和含量 ;考察以草代木栽培灵芝的可行性的研究。方法　提取、分离、逆相透析方法研究二者子实体多糖。应用气相色谱、凝胶渗透色谱法测定多糖的组成、摩尔比和相对分子质量。 IR,1 H- NMR和 1 3C- NMR等光谱确定多糖肽化合物结构。结果　草栽灵芝多糖肽 ( GL PG )和段木多糖肽( GL PW)的重均相对分子质量 ( Mw)分别为 5 .13× 10 5和 5 .85× 10 5;黏均相对分子质量 ( Mη)分别为 6 .2 1× 10 5和6 .96× 10 5,二者具有相同的相对分子质量分布及光谱数据。从光谱分析中看出各单糖间的苷键构型相似 ,均以β-苷键为主 ;糖肽部分均含有相同的 16种氨基酸 ,糖的组份为鼠李糖、木糖、果糖、半乳糖、葡萄糖等 ,GL PW还含有微量甘露糖。结论　草栽灵芝与段木灵芝多糖肽的主要理化特性相似 ,其提取率比段木灵芝约高 2 .8倍 ,为草栽灵芝的综合开发与药用提供了科学依据。     

灵芝多糖乙酰化及其抗氧化活性研究

目的 通过化学修饰改变灵芝多糖分子结构,并研究其体内抗氧化活性。方法 乙酰化修饰灵芝多糖（Ganoderma lucidum polysaccharide,GLP）,得到GLP乙酰化衍生物（GLP acetyl derivatives,GLPa）;将昆明种小鼠随机分成空白对照组,阳性对照组,GLP高、低剂量组及GLPa高、低剂量组,测定小鼠血清和肝脏丙二醛（malondialdehyde,MDA）、总抗氧化能力（total antioxidant capacity,T-AOC）和过氧化氢酶（catalase,CAT）;建立高脂血症大鼠抗氧化损伤模型,考察GLP及GLPa的抗氧化能力。结果 GLPa及GLP均可以显著提高正常小鼠肝组织CAT活力及T-AOC,降低小鼠血清及肝脏MDA含量,GLPa抗氧化活性明显优于GLP,且与给药剂量相关。此外,GLPa及GLP还可以显著降低四氧嘧啶致高脂大鼠的氧化损伤程度,提高其血清超氧化物歧化酶活力及肝脏T-AOC,并降低其血清MDA含量。结论 乙酰化修饰可显著提高灵芝多糖的抗氧化活性。     

灵芝复方诱导HL-60白血病细胞凋亡的研究

应用体外集落与液体培养、细胞形态学观察、ＤＮＡ片段凝胶电泳及ＤＮＡ片百分率测定等方法观察灵芝复方对人骨髓ＣＦＵ－ＧＭ生长及ＨＬ－６０细胞增殖和凋亡的作用。发现灵芝复方在一定浓度范围内对人骨髓ＣＦＵ－ＧＭ生长有促进作用，而对白血病系ＨＬ－６０细胞集落生长则表现了剂量依赖性抑制；细胞形态学经为芝复方对ＨＬ－６０细胞凋亡具有剂量和时间依赖性诱导作用。８和１６ｍｇ／ｍｌ灵芝复方作用４８ｈ，可使ＨＬ－６０细