中华鳖MHC Iα2链基因克隆及序列分析

目的：为了探明中华鳖ＭＨＣ的结构与功能和寻找该种群的分子标记，对中华鳖ＭＨＣｃｌａｓＩα２基因中由两个半胱氨酸形成二硫键的区域进行了克隆和序列分析。方法：根据人和动物的ＭＨＣＩａα２链中两个半胱氨酸侧翼的保守序列设计了混合型引物，采用ＰＣＲ法从中华鳖基因组ＤＮＡ中克隆了ＭＨＣＩα２链（ＴｒｓｉＢＸ１）。结果：经氨基酸序列的同源性分析，ＴｒｓｉＢＸ１存在抗原多肽结合位点（Ｔ１４３、Ｋ１４６、Ｗ１４７、Ｙ１５９）以及β２微球蛋白结合位点（Ｑ１１５、Ａ１１７、Ｄ１１９、Ｇ１２０、Ｄ１２２），并与人和动物的ＭＨＣＩａα２存在４１１％～６３９％同源性。结论：ＴｒｓｉＢＸ１属ＭＨＣｃｌａｓｓＩａ类基因，可作为中华鳖种群的分子标记。     

逆转录病毒载体介导的同种MHC基因在小鼠胸腺的 …

通过胸腺内注射质粒ＰＸＮ（Ｎ２－Ｂ１９－Ｈ－２Ｋ＾ｂ），表达外源性主要组织相容性抗原复合物（ｍａｊｏｒｈｉｓｔｏ－ｃｏｍｐａｔｉｂｉｌｉｔｙｃｏｍｐｌｅｘ，ＭＨＣ）抗原，为下一步诱导异基因小鼠器官移植耐受作准备。方法：通过ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠有腺内注射射质粒ＰＸＮ（Ｎ２－Ｂ１９－Ｈ－２Ｋ＾ｂ），将外源性的编码Ｃ５７ＢＬ／６小鼠ＭＨＣⅠ类抗原的Ｈ－２Ｋ＾ｂｃＤＮＡ转移到ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠胸腺，用聚合酶链反     

转染B7—1基因至鼻咽癌细胞株及其诱导的细胞免疫应答

通过包装细胞把逆转录病毒载体ｐＬＸＳＮ／Ｂ７－１导入鼻咽癌细胞株ＣＮＥ１，利用ＲＴ－ＰＣＲ及ＦＡＣｓ等技术证实Ｂ７－１的表达情况，同时检测了ＣＮＥ１细胞表面ＭＨＣＩ抗原。在此基础之上，观察了表达Ｂ７－１的ＣＮＥ１细胞（ＣＮＥ１／Ｂ７－１）对健康个体ＰＢＬ（外周血淋巴细胞）的增殖及细胞因子分泌的影响，结果表明：ＣＮＥ１／Ｂ７－１可以促进ＰＢＬ的增殖及细胞因子的分泌，且增高水平的细胞因子主要是ＩＬ－２和ＩＦＮ－γ。提示：ＣＮＥ１／Β７－１诱导的免疫应答以细胞免疫为主。     

抑制性底物杂交(SSH)技术研究BXSB小鼠的差异表达基因

目的：利用抑制性底物杂交技术（Ｓｕｐｐｒｅｓｓｉｏｎ ｓｕｂｔｒａｃｔｉｖｅ ｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ，ＳＳＨ），以ＢＸＳＢ狼疮小鼠为模型，研究系统性红斑狼（ＳＬＥ）发病相关基因。方法：分离ＢＸＳＢ和Ｃ５７－ＢＬ－６小鼠骨髓细胞，ｍＲＮＡ，反转录构建ｃＤＮＡ文库，利用技术研究ＢＸＳＢ小鼠差异表达基因。结果：获得了１２个阳性克隆，其中有３个克隆编码ＴＣＲ、ＭＨＣⅡ类分子及逆转录病毒基因表达产物，均     

Iloprost对内皮细胞抗血栓功能的影响

以体外培养的猪主动脉内皮细胞（ＥＣ）为模型研究Ｉｌｏｐｏｓｔ对ＥＣ抗血栓功能的影响。用放免法、发色底物法测定培养液中６－酮－ＰＧＦ１α（６－ｋｅｔｏ－ＰＧＦ１α），血栓素Ｂ２（ＴＸＢ２）含量，纤溶酶原激活物（ＰＡ），纤溶酶原激活物抑制物（ＰＡＩ）活性及ＥＣ环磷酸腺苷（ｃＡＭＰ）含量。结果表明：Ｉｌｏｐｒｏｓｔ中以使ＥＣ生成６－ｋｅｔｏ－ＰＧＦ１α，ｃＡＭＰ含量显著增多，ＴＸＢ２含量显著减少，并使Ｐ     

慢性阻塞性肺病患者血浆血栓素B_2和6－酮－前列腺素F_（1α）含量的变化及其与肺动脉高压的关系

为了探讨慢性阻塞性肺病（ＣＯＰＤ）患者血栓素Ａ_２（ＴＸＡ_２）和前列环素（ＰＧＩ_２）与肺动脉高压的关系，我们对伴有和不伴有肺动脉高压的３０例缓解期ＣＯＰＤ患者血浆中血栓素Ｂ_２（ＴＸＢ_２）及６－酮－前列腺素Ｆ_（１α）（６－ｋｅｔｏ－ＰＧＦ_（１α））的含量变化进行了观察，还对７例伴肺动脉高压的ＣＯＰＤ患者不同病期的肺动脉平均压（ＰａＰ）、血浆ＴＸＢ_２及６－ｋｅｔｏ－ＰＧＦ_（１α）．水平作了对比分析。结果发现，缓解期ＣＯＰＤ患者中，伴肺动脉高压者血浆ＴＸＢ_２明显增高，６－ｋｅｔｏ－ＰＧＦ_（１α）显著下降，ＴＸＢ_２／６－ｋｅｔｏ－ＰＧＦ_（１α）明显增大，与不伴肺动脉高压者比较，差异非常显著（Ｐ均＜０．０１），而不伴肺动脉高压者的这些指标与正常人的比较，则无统计学意义（Ｐ均＞０．０５）；与急性期比较，ＣＯＰＤ患者缓解期ＰａＰ明显下降，ＴＸＢ_２亦显著降低，６－ｋｅｔｏ－ＰＧＦ_（１α）明显升高，ＴＸＢ_２／６－ｋｅｔｏ－ＰＧＦ_（１α）缩小（Ｐ均＜０．０１）；相关分析发现，伴肺动脉高压者ＰａＰ与ＴＸＢ_２呈明显正相关，与６－ｋｅｔｏ－ＰＧＦ_（１α）呈负相关（ｎ＝２８，ｒ＝＋０．４６、－０．３９，Ｐ均＜０．０５）     

肾性高血压大鼠左心室肌球蛋白重链同型基因的表达

目的和方法：用二肾一夹（２Ｋ１Ｃ）肾性高血压大鼠模型，利用分子生物学实验方法，探讨心肌肥厚发生和逆转以及肌球蛋白重链（ＭＨＣ）基因表达的改变。结果：（１）２Ｋ１Ｃ肾性高血压大鼠术后第２～１２周，动脉血压持续升高；左心室重量和体重比值明显升高；左心室α－ＭＨＣｍＲＮＡ表达明显减弱；β－ＭＨＣｍＲＮＡ表达明显增强。（２）在术后第４周给予巯甲丙脯酸和术后第８周切除肾动脉狭窄侧肾脏可使２Ｋ１Ｃ肾性高血压大鼠动脉血压下降；左心室肥厚发生逆转；抑制左心室α－ＭＨＣｍＲＮＡ表达减弱和β－ＭＨＣｍＲＮＡ表达增强。结论：在２Ｋ１Ｃ肾性高血压过程中，动脉血压升高是左心室肥厚、左心室肌球蛋白ＭＨＣ基因表型转换的重要因素；血管紧张素Ⅱ可能参与２Ｋ１Ｃ肾性高血压过程中的心肌肥厚和ＭＨＣ同型基因表型的转换     

系统性硬化病血管内皮活性因子测定的临床意义

目的：从蛋白分子水平探讨血管内皮活性因子同系统性硬化病的关系。方法：选择４２例ＳＳｃ病人采用放射免疫测定法检测血浆内皮素（ＥＴ）、血栓素Ｂ２（ＴＸＢ２）、６－酮－前列腺素Ｆ１α（６－Ｋ－ＰＧＦ１α）,采用Ｇｒｉｓｓ方法检测血浆一氧化氮（ＮＯ）水平,关免疫法检测细胞间粘附分子－１（ＩＣＡＭ－１）、选择素（Ｐ－Ｓ）。结果;所有ＳＳＣ患者均存在高ＥＴ、ＴＸＢ２、ＩＣＡＭ－１、Ｐ－Ｓ血症,存在低ＮＯ、６－     

人整合素分子α4亚基片段的克隆及大肠杆菌的表达

目的 克隆并原核表达α４亚基笥段。方法 从ＩＬ－６细胞系中提取总ＲＮＡ,以ＲＴ－ＰＣＲ方法分两段扩增人整素分子α４亚基片段２．０ｋｂ ｃＤＮＡ,将两片段连接,并将其中的１．７ｋｂ基因片段亚克隆至表达载体ＰＧＥＸ－ＫＧ中,ＩＰＴＧ诱导表达。结果 ＲＴ－ＰＣＲ扩增并克隆了α４的两段ＣＤＮＡ,序列分析表明：与文献报道的μ４ＣＤＮＡ序列基本一致。两片段成功连接后将其中的１．７ｋｂ亚克隆至表达载体ＰＧＥＸ－     

血管紧张素Ⅱ对培养新生大鼠心肌细胞MHC基因表达的影响

目的：本研究新生大鼠原代培养心肌细胞上，观察血管紧张素Ⅱ（ＡｎｇⅡ）对心肌细胞ＭＨＣ基因表达的影响。方法和结果：（１）在培养新生大鼠心肌细胞中，用１０－７ｍｏｌ／ＬＡｎｇⅡ处理后，６ｈ就引起α－ＭＨＣｍＲＮＡ水平的迅速增加，１２ｈ达峰值，为对照组的１７５倍（Ｐ＜００５）。β－ＭＨＣｍＲＮＡ水平也有所增加，为对照组的１２５倍（Ｐ＜００１），两者均呈量效关系。（２）ＡｎｇⅡ受体阻断剂ｓａｒａｌａｓｉｎ可阻断ＡｎｇⅡ诱导的α－ＭＨＣ和β－ＭＨＣ基因的表达。结论：ＡｎｇⅡ可能通过ＡｎｇⅡ受体的介导作用，诱导心室肌细胞α－ＭＨＣ和β－ＭＨＣ基因表达增加     

人细胞色素P4502B6的GST融合蛋白及其抗体的制备

目的：获得纯化抗原用于制备ＣＹＰ２Ｂ６多克隆抗体方法：ＰＣＲ扩增目的基因片段,亚克隆入融合蛋白表达载体ＰＧＥＸ－３ｂ,构建了重组质粒ＰＧＥＸ／２Ｂ６。然后将该重组质粒转化大肠杆菌ＤＨ５α,ＩＰＴＧ诱导表达,ＳＤＳ＿ＰＡＧＥ分离,获纯化融合蛋白ＧＳＴ－２Ｂ６。用ＧＳＴ－３Ｂ２免疫ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠,自腹水中获取ＣＹＰ２Ｂ６多克隆抗体。结果：融合蛋白ＧＳＴ－２Ｂ６（ＣＹＰ２Ｂ６２０２￣３５２ａａ）,并获     

B群脑膜炎奈瑟氏菌外膜蛋白抗原性分析

挑选了１０株具有代表性的菌株，提取了它们的外膜蛋白（ＯＭＰｓ），ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析发现：１０株菌的ＯＭＰｓ带谱不完全相同，但都含有１，２／３，４和５类外膜蛋白，而且纯化的１类外膜蛋白（ＯＭＰ１）显示一条分子量为（４１或４３）×１０＾３的蛋白带。从中选两株菌５４２８５２（Ｂ：ＮＴ：Ｐ１．２：Ｌ３，７，９：克隆Ｉ：ＲＦＬＰ－ｂ２０）和３４０７（Ｂ：１５：Ｐ１．２：Ｌ３，７，９，克隆群Ｉ：ＲＦＬＰ－ｂ     

细胞因子处理联合B7—1基因转染制备有效的肝癌疫苗

在体外用ＩＦＮ－γ和ＴＮＦ－α等细胞因子处理的Ｂ７－１表达阳性的Ｈｅｐａｌ－６，观察其对小鼠肝癌表面ＭＨＣ Ｃｌａｓｓ Ｉ和ＩＣＡＭ－１表达的调节作用和对体内外抗肿瘤免疫反应的影响。结果发现：单独Ｂ７－１基因转染的Ｈｅｐａｌ－６的致癌性消失，但仅能诱导部分细胞毒性和部分保护性免疫反应，而Ｂ７－１基因转染与细胞因子处理联合应用则能诱导强的细胞毒杀伤活性和完全的抗Ｈｅｐａｌ－６保护性免疫反应。结论Ｂ７－     

肾上腺素受体亚型的调节及其交互作用

肾上腺素受体亚型分为三大类９个亚型，α１受体（α１Ａ，α１Ｂ，α１Ｄ）、α２受体（α２Ａ，α２Ｂ，α２Ｃ）和β受体（β１，β２，β３）。新亚型的确切功能尚不十分清楚，但生物学效应均由Ｇ蛋白所介导：α１－ＡＲ主要偶联Ｇαｑ，α２－ＡＲ主要偶联Ｇαｉ，β－ＡＲ主要偶联Ｇαｓ。各亚型既受到许多因素的调节，同时又产生交互作用。激动剂长期作用于ＡＲ，可引起受体的同源性脱敏或异源性脱敏。肾上腺素受体基因遗传改变在心血管病的发生、发展过程中起着重要作用     

利用CDR3谱型分析法检测T细胞群的克隆性扩增

介绍一种快速、简便检测Ｔ细胞群克隆性扩增的方法。Ｔ细胞抗原受体（ＴＣＲ）α和β链与抗原／ＭＨＣ复合物相互反应是由ＣＤＲ１、ＣＤＲ２和ＣＤＲ３环完成 的；其中ＣＤＲ３环是由Ｖ－（Ｄ）－Ｊ片断所组成直接与抗原相结合，因此长度及序列在不同的Ｔ细胞克隆之间均有变化，而单一Ｔ细胞克隆则长度、序是一致。     

蜂毒多肽BVI-2对T细胞及THP-1细胞功能的影响

目的：探讨蜂毒多肽ＢＶＩ中有效的抗炎成份及其作用机制。方法：观察蜂毒多肽对小鼠脾淋巴细胞转化、ＩＬ－１合成及ＴＨＰ－１细胞合成ＴＮＦα的影响。结果：蜂毒多肽ＢＶ、ＢＶＩ、ＢＶＩ－２可抑制ＣｏｎＡ（２．５μｇ／ｍｌ）诱导的小鼠脾淋巴细胞转化、ＩＬ－１合成及ＰＭＡ（１００ｎｇ／ｍｌ）诱导的ＴＨＰ－１细胞合成ＴＮＦα。结论：利用高效液相色谱相分离得到的蜂毒多肽ＢＶＩ－２具有一定的抗炎作用。     

慢性肾衰及血液透析过程中多肽生长因子与凋亡因子表达

目的：探讨慢性肾功能衰竭（ＣＲＦ）患者及血液透析（ＨＤ）过程中多肽生长因子及凋亡因子的含量变化及相互关系。方法：采用流式细胞术及放射免疫分析分别测定ＣＲＦ及ＨＤ前后外周血单核细胞（ＰＢＭＣ）中ＣＤ９５、Ａｐｏ２．７和ＢＣｌ－１蛋白的阳性细胞数及血清中ＴＧＦ－α、ＩＧＦ－Ⅱ的含量。结果：ＣＲＦ（非透析组）ＣＤ９５、Ａｐｏ２．７、ＩＧＦ－Ⅱ明显高于对照组，差异显著。ＢＣｌ－２与ＴＧＦ－α含量均明显低于     

红细胞作载体的谷胱甘肽过氧化物酶用于脑缺血—再灌注的研究

目的和方法：采用红细胞（Ｅｒｙｔｈｒｏｃｙｔｅｓ，ＲＢＣ）作为谷胱甘肽过氧化物酶（ｇｌｕｔａｔｈｉｏｎｅｐｅｒｏｘｉｄａｓｅ，ＧＳＨ－Ｐｘ）的载体，将包载ＧＳＨ－Ｐｘ的ＲＢＣ（ＲＢＣ－ＧＳＨ－Ｐｘ）用于兔脑缺血－再灌注（ｉｓｃｈｅｍｉａ－ｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎ，Ｉ－Ｒ）研究。结果：包入采用低渗透析法，渗透压达到１３２ｍＯｓｍ。采用５１Ｃｒ标记法测定的兔ＲＢＣ的循环半寿期为（１３４±１５）ｄ（ｎ＝６），ＲＢＣ－ＧＳＨ－Ｐｘ的半寿期为（７３±２５）ｄ（ｎ＝５）。２，３，５—氯化三苯基四氮唑（ＴＴＣ）染色结果表明，ＲＢＣ－ＧＳＨ－Ｐｘ对Ｉ－Ｒ损伤的脑组织有明显的保护作用。ＲＢＣ－ＧＳＨ－Ｐｘ对一氧化氮（ｎｉｔｒｉｃｏｘｉｄｅ，ＮＯ）浓度的升高有抑制作用。结论：采用ＲＢＣ作ＧＳＨ－Ｐｘ的载体是可行的     

EphB2配体结合域基因片段的高效表达

目的;对酷氨酸蛋白激酶受体ＥｐｈＢ２胞外的配体结合区基因进行表达研究。方法：编码ＥｐｈＢ２胞外的配体结合区基因片段克隆于ｐＢｕｅｓｃｒｉｐｔＳＫ（－）质粒中,经全自动序列分析仪测正确后,再克隆重组人表达载体ｐＧＥＸ４Ｔ－１,构高效表达克隆ｐＨＴ。转化大肠杆菌ＤＨ５α表达。结果：经ＩＰＴＧ诱导５ｈ,蛋白表达即达高峰,ＳＤＳ ＰＡＧＥ及凝胶密度扫描分析,表达出约４１ＫＤ大小的蛋白,占菌体总蛋白的３５％     

慢性肺心病血栓素B_2和6－酮－前列腺素F_（1α）与血液流变学改变

慢性肺心病血栓素Ｂ_２和６－酮－前列腺素Ｆ_（１α）与血液流变学改变牛秀英我们对慢性肺心病急性发作期和缓解期患者的血栓素Ａ２（ＴＸＡ２）和ＰＧＩ２的稳定产物ＴＸＢ２、６－Ｋｅ－ｔｏ－ＰＧＦ（１α）和血液流变学进行了观察，试图了解它们在肺心病中的变化及相...