缬沙坦对扩张型心肌病心衰大鼠心肌细胞凋亡相关蛋白的影响

目的 观察缬沙坦(Val)对扩张型心肌病(DCM)心衰大鼠心肌细胞凋亡相关蛋白的影响.方法 SD大鼠完全随机分为3组:模型组(DCM组,n=15),Val组(DCM+Val组,n=15),对照组(C组,n=10).DCM组及DCM+Val组给予阿霉素腹腔注射,DCM+Val组给予缬沙坦灌胃.8 w后,采用Western印迹法、免疫组化检测心肌组织中凋亡相关蛋白的表达情况,TUNEL法检测心肌细胞凋亡指数(CMAI).结果 ①Western 印迹结果显示,DCM组和DCM+Val组大鼠心肌组织中VDAC、Smac蛋白相对表达水平显著高于C组(均P<0.05);与DCM组相比,DCM+Val组大鼠心肌组织中两种蛋白的表达水平显著下降(均P<0.05).②免疫组化结果显示,DCM组和DCM+Val组VDAC、Smac阳性细胞数显著多于C组;与DCM组相比,DCM+Val组两种蛋白阳性的细胞数显著减少.③TUNEL检测结果显示, DCM组和DCM+Val组大鼠CMAI与C组相比显著升高(均P<0.05);与DCM组相比,DCM+Val组大鼠CMAI有所降低,但差别无统计学意义(P﹥0.05).结论 Val 对DCM心衰大鼠心肌细胞的凋亡有抑制作用.     

缬沙坦对2型糖尿病大鼠心肌细胞凋亡的影响

目的探讨缬沙坦对糖尿病大鼠心肌细胞凋亡的作用。方法随机选择29只健康雄性SD大鼠中的21只,以高糖高脂饲料喂养4周后腹腔注射链脲佐菌素30mg/kg,3d后测血糖≥16.7mmol/L者（n=19）入选糖尿病大鼠模型,并随机分为糖尿病组（DM组,n=9）和缬沙坦治疗组（VAL组,n=10）,另外8只健康雄性SD大鼠为对照组（CN组,n=8）。VAL组给予缬沙坦（20mg/kg.d）治疗6周,检测各组大鼠血生化和胰岛素水平,各组大鼠于第12周末处死,取部分左心室前壁组织以TUNEL法检测大鼠心肌细胞凋亡,免疫组化法检测Caspase-3、NF-κB的表达。结果与CN组相比,DM组和VAL组大鼠心肌细胞凋亡及Caspase-3和NF-κB的阳性表达显著增多,差异具有统计学意义（P〈0.05）;与DM组相比,VAL组大鼠心肌细胞凋亡及Caspase-3和NF-κB的阳性表达明显减少,差异具有统计学意义（P〈0.05）。结论缬沙坦能够抑制糖尿病大鼠心肌细胞的凋亡,具有心肌保护作用。     

急性心肌梗死患者血清中剪切型X-盒结合蛋白1表达与糖尿病及其他临床因素的相关性

目的 分析急性心肌梗死(AMI)患者入院24 h内血清中剪切型X-盒结合蛋白1(Spliced x box binding protein 1,XBP-1S)浓度与患者基本资料、临床指标及影像学指标的相关性。 方法 按XBP-1S血清浓度中位数164.7 pg/ml,将AMI患者86例分成2组:低表达组（< 164.7 pg/ml,n = 43）和高表达组（≥ 164.7 pg/ml,n = 43）,收集患者基本资料,临床资料和冠状动脉造影影像学资料进行组间比较。XBP-1S血清浓度与资料间的相关分析; 结果 组间比较发现高表达组糖尿病患病率显著高于低表达组（P < 0.05）;高表达组与低表达组两组冠状动脉粥样硬化病变血管分支数构成比有相关关系（P < 0.05）;XBP-1S血清浓度与血管的分支数呈正相关。 结论 在糖尿病患病率高的患者组中AMI起病急性期内血清中XBP-1S可能表达增高明显,并且与病变血管的分支数呈正相关。     

双调蛋白对糖尿病心肌病大鼠心肌细胞凋亡和氧化应激的影响

目的 探讨双调蛋白（amphiregulin,AREG）对糖尿病心肌病大鼠心肌细胞凋亡和氧化应激的的影响。方法 25 mmol/L葡萄糖和500μmol/L棕榈酸（HGHF）诱导大鼠心肌细胞（H9C2）18 h,建立体外糖尿病心肌病大鼠心肌细胞模型。采用实时定量聚合酶链反应（quantitative real time polymerase chain reaction,qRT-PCR）和蛋白质印迹（Western blotting,WB）检测AREG基因的表达,采用流式细胞分析和脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法（terminal deoxynucleotidyltransferase-mediated dUTP nick end labeling,TUNEL）染色观察siRNA下调AREG后H9C2细胞凋亡和氧化应激情况。通过qRT-PCR检测心肌细胞肥厚和纤维化的分子水平。结果 在HGHF处理的H9C2细胞中AREG表达上调。抑制AREG的表达,减轻了HGHF导致的大鼠心脏氧化应激的增强,且减少了心肌细胞的凋亡,改善了心肌肥厚和纤维化的分子指标。结论 AREG下调通过抑...     

内质网应激相关因子X-盒结合蛋白-1在人体肝癌组织中的表达

目的研究内质网应激(ERS)相关因子X-盒结合蛋白(XBP)-1在肝癌组织中的表达情况,以此证实肝癌演进中是否存在ERS反应的活化。方法病理学诊断确定的45例肝癌组织、15例癌旁组织和15例正常肝组织,采用逆转录(RT)-聚合酶链反应(PCR)和Western印迹法检测XBP-1 mRNA和蛋白表达。结果 RT-PCR结果表明,肝癌组织中XBP-1 mRNA表达(0.444 6±0.035 7)显著高于癌旁组织(0.421 8±0.033 8)、正常肝组织(0.402 7±0.026 9)(P<0.05)。Western印迹结果表明肝癌组织中XBP-1蛋白的表达量显著高于癌旁组织和正常肝组织(P<0.05)。结论肝癌发生及发展过程中存在ERS反应的激活。     

3-硝基酪氨酸与糖尿病心肌病大鼠心肌细胞凋亡的关系研究

目的探讨2型糖尿病大鼠心肌组织及血中3-硝基酪氨酸(3-nitmtynosine,3-NT)与糖尿病心肌病(diabeticcardiomyopathy,DCM)心肌细胞凋亡的关系。方法选取8周龄的雄性大鼠60只,将其随机分为4组,空白对照组、DCM组、糖尿病+缬沙坦预处理组、DCM+缬沙坦处理组,每组15只。用TUNEL法检测DCM心肌细胞的凋亡指数(AI);用免疫组化的方法检测心肌组织中3-NT的表达指数(EI);用ELISA法检测血清中3-NT的浓度。结果 (1)四组间SD大鼠的心脏重量指数比较有显著性差异(P<0.01),DCM组、DCM+缬沙坦处理组心脏重量指数>大于空白对照组、糖尿病+缬沙坦预处理组。(2)四组SD大鼠心肌组织免疫组化方法检测表明,心肌组织中3-NT的表达指数与心肌细胞的凋亡指数呈正相关(P<0.01),而血中3-NT的含量与心肌细胞的凋亡指数无相关关系(P>0.05)。(3)四组SD大鼠间的AI比较有显著差异(P<0.01)。两两比较各组AI,DCM组>糖尿病+缬沙坦预处理组、DCM+缬沙坦处理组>空白对照组。(4)四组SD大鼠免疫组化的3-NT表达指数比较有显著差异(P<0.01)。各组免疫组化的3-NT表达指数两两比较,DCM组显著大于其他三组。(5)四组SD大鼠血中3-硝基酪氨酸的浓度比较无显著统计学意义(P>0.05)。结论 (1)DCM大鼠心肌组织中3-NT的表达显著增多并与心肌细胞凋亡密切相关,缬沙坦能够抑制DCM大鼠心肌细胞中3-NT的表达,并由此抑制DCM大鼠心肌细胞凋亡。(2)循环血中的3-NT水平不能真实反映DCM大鼠心肌组织中3-NT表达水平及其对心肌细胞凋亡的影响。     

糖尿病大鼠心肌细胞凋亡及凋亡相关蛋白表达研究

目的　研究实验性糖尿病大鼠心肌细胞凋亡以及凋亡相关蛋白的表达。方法　链脲菌素 (STZ)法复制SD大鼠实验性糖尿病模型。于模型成功后 30、4 5、6 0、75及 90d取材。原位末端标记法 (TUNEL)和免疫组化法检测细胞凋亡及心肌组织中凋亡相关蛋白的表达变化。结果　健康对照大鼠心肌仅有少量凋亡细胞 ,p5 3、Fas和Bcl 2的免疫反应阳性 ,Bax免疫反应阴性。糖尿病 30d后 ,心肌的凋亡细胞阳性指数开始升高 ,糖尿病 90d仍持续较高水平。p5 3、Fas、Bcl -2和Bax分别于糖尿病 4 5d、4 5d、4 5d和 30d开始升高 ,并于糖尿病 6 0d、75d、75d和 6 0d达高峰。结论　糖尿病大鼠心肌细胞凋亡增加 ,凋亡相关蛋白的表达水平也增加。     

氧化应激与糖尿病心肌细胞凋亡

氧化应激是糖尿病重要的病理生理过程.氧化应激所导致的心肌细胞凋亡是糖尿病患者非缺血性心力衰竭发生的重要原因.线粒体功能障碍、NADH氧化酶异常以及晚期糖基化终末产物增加是心肌细胞活性氧簇的主要来源.产生的活性氧簇通过直接激活线粒体凋亡途径、肿瘤坏死凶子(TNF)α激活死亡受体途径、P53凋亡途径以及p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)途径,促进心肌细胞凋亡.但是目前针对糖尿病心脏病的抗氧化治疗效果并不理想,因此有必要进一步研究氧化应激导致心肌细胞凋亡的机制,以发现治疗糖尿病心脏病的新方法.     

X盒结合蛋白1在高迁移率族蛋白B1

目的　探讨活化的X盒结合蛋白1（XBP1）在高迁移率族蛋白B1（HMGB1）诱导人脐静脉血管内皮细胞凋亡中的作用及机制。方法　体外培养人脐静脉血管内皮细胞,将其分为正常对照组、HMGB1刺激组和慢病毒干扰＋HMGB1刺激组（即XBP1基因被沉默后加入HMGB1）。采用RT-PCR检测剪切型XBP1（sXBP1）的基因表达水平,Western　blot检测Caspase-3的蛋白表达水平,细胞荧光染色检测内皮细胞凋亡。结果　与正常对照组比较,HMGB1刺激组sXBP1的基因表达水平增加,Caspase-3的蛋白表达水平明显升高,细胞凋亡率明显增加（P均＜0.05）;与正常对照组比较,慢病毒干扰＋HMGB1刺激组sXBP1的基因表达水平无明显改变,Caspase-3的蛋白表达水平、细胞凋亡率差异无统计学意义（P>0.05）。与HMGB1刺激组比较,慢病毒干扰＋HMGB1刺激组sXBP1的基因表达水平降低,Caspase-3的蛋白表达水平降低,细胞凋亡率降低（P均＜0.05）。结论　XBP1对HMGB1诱导内皮细胞凋亡至关重要。     

X-染色体相关凋亡抑制蛋白相关因子1抑制肝癌细胞增殖和诱导凋亡的实验研究

目的 研究X-染色体相关凋亡抑制蛋白（XIAP）相关因子1（XAF1）对肝癌细胞增殖和凋亡的影凋亡响。方法 构建正义pcDNA3-XAF1和反义pcDNA3-XAF1-AS质粒，通过脂质体转染技术将质粒DNA转入SMMC7721肝癌细胞株并建立稳定高表达XAF1的肝癌细胞克隆。应用MTT、流式细胞仪、TUNEL法检测肝癌细胞的增殖和凋亡；应用RT-PCR和Western印迹法检测基因在mRNA和蛋白水平的表达。结果 XAF1在SMMC7721肝癌细胞株中有表达，但低于正常肝脏细胞水平。稳定高表达XAF1基因可抑制肝癌细胞的增殖和诱导，并能增加其对化疗药物5-氟尿嘧啶和羟基喜树碱的敏感性。结论 XAF1能抑制肝癌细胞增殖和诱导其凋亡。     

糖尿病大鼠心力衰竭时心肌细胞凋亡的研究

目的探讨糖尿病大鼠心力衰竭时是否存在心肌细胞凋亡.方法建立STZ糖尿病大鼠模型,饲养12周,经心功能检测后确认为糖尿病心力衰竭的大鼠,采用TUNEL法及TEM法,检测糖尿病大鼠左室心肌的凋亡细胞.结果 糖尿病大鼠出现心功能异常并可见凋亡的心肌细胞,而对照组左室心肌组织中未见心肌细胞凋亡.结论心肌细胞凋亡与糖尿病大鼠心力衰竭密切相关.     

五参口服液联合电针内关穴对糖尿病心肌病大鼠心率变异性及心肌细胞凋亡的影响

目的观察五参口服液联合电针内关穴对糖尿病心肌病(DCM)大鼠心率变异性(HRV)及心肌细胞凋亡的影响。方法 50只雄性Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、五参组、内关组和五参+内关组各10只,采用一次性腹腔注射链脲佐菌素(STZ)建立DCM大鼠模型,治疗8 w后,对HRV进行对照分析,处死大鼠,迅速取出心肌,心肌细胞凋亡指数检测采用TUNEL法测定。结果与正常组比较,模型组各HRV时域指标[24 h平均值的标准差(SDNN)、RR间期平均值标准差(SDANN)、HRVindex、相邻RR间期值的均方根(RMSDNN)、相邻R-R间期>50 ms的个数点总窦性心搏个数的百分比(PNN50)]及各HRV频域指标[总功率、极低频(VLF)、低频(LF)、高频(HF)]均明显降低(P<0.05),心肌细胞凋亡指数明显升高(P<0.05);与模型组比较,五参组时域指标RMSDNN及频域指标HF显著升高(P<0.05),内关组及五参+内关组各指标均显著升高(P<0.05),内关组及五参+内关组心肌细胞凋亡指数明显降低(P<0.01);与内关组比较,五参+内关组各HRV指标显著升高(P<0.05)。结论五参口服液联合电针内关穴治疗DCM大鼠能明显提高大鼠HRV各指标,且能显著降低心肌细胞凋亡指数,心肌细胞凋亡的改善可能是提高HRV的机制之一。     

X染色体连锁凋亡抑制蛋白对缺氧-复氧诱导的新生大鼠心肌细胞凋亡的影响

目的:采用X染色体连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)对缺氧-复氧诱导心肌细胞凋亡模型进行干预,以探讨脂质体介导XIAP基因转染对缺氧-复氧诱导的新生大鼠心肌细胞凋亡的影响.方法:体外培养新生大鼠心肌细胞,分为4组,①XIAP组:将pDsRed2-XIAP以脂质体转染到心肌细胞48 h后进行缺氧2 h-复氧1 h;②预处理组:先将心肌细胞进行缺氧预处理,然后进行缺氧2 h-复氧1 h;③单纯缺氧-复氧组:将心肌细胞直接进行缺氧2 h-复氧1 h;④常氧组:将心肌细胞在CO2孵箱中培养3 h.各组最后用流式细胞仪Annexin V FITC检测心肌细胞凋亡率结果组间差异.结果:①pDsRed2- XIAP可以通过脂质体转染的方式转染到心肌细胞;②与单纯缺氧-复氧组比较,XIAP组和预处理组心肌细胞凋亡率明显减低,P<0.01;③XIAP组与预处理组比较二者心肌细胞凋亡率相似,P>0.05.结论:以物理性的缺氧2 h-复氧1 h的方式能诱导所培养的心肌细胞发生凋亡;XIAP能明显减少缺氧-复氧诱导新生大鼠心肌细胞的凋亡;XIAP抑制凋亡的效应与缺氧预处理抑制凋亡的效应相似.     

苦瓜蛋白通过下调miR-23b-3p促进三磷酸腺苷结合盒转运体A1表达

目的前期工作发现苦瓜蛋白(MD28)可上调THP-1源性泡沫细胞三磷酸腺苷结合盒转运体A1(ABCA1)的表达而减少胞内的脂质蓄积,但其机制不清楚。文章拟从转录后水平分析其作用机制。方法首先用miRNA芯片技术分析经MD28干预后,50 mg/L ox-LDL处理48 h的THP-1源性泡沫细胞miRNA谱中下调1.5倍的micro RNA(miRNA),并与Genecards调控ABCA1基因表达的miRNA比较,找到二者共同miRNA,然后以荧光素酶报告基因系统验证其靶基因关系。qRT-PCR检测ABCA1 m RNA和miR-23b-3p的表达水平,Western blot检测蛋白表达水平,油红O染色测定胞内脂质蓄积。结果 miR-23b-3p是miRNA芯片和Genecards的交集,靶基因验证实验证实ABCA1是miR-23b-3p的靶基因。MD28剂量(0 g/L、0.4 g/L、1.2 g/L、3.6 g/L、5 g/L)和时间(0 h、6 h、12h、24 h、48 h)依赖性地上调ABCA1 m RNA及蛋白的表达水平,以1.2 g/L作用12 h最为显著。ox-LDL上调miR-23b-3p表达且被MD28抑制,MD28能减少胞内脂质蓄积,miR-23b-3p的抑制剂可拮抗MD28对ABCA1表达和胞内脂质蓄积的作用。结论 MD28通过下调miR-23b-3p介导其促进THP-1源性泡沫细胞ABCA1表达、减少胞内脂质蓄积作用。     

罗格列酮对糖尿病大鼠心肌组织水通道蛋白1表达的影响

目的 观察罗格列酮对糖尿病大鼠心肌组织水通道蛋白1 (AQP1)表达的影响,探讨罗格列酮对糖尿病大鼠早期心肌病变的干预作用.方法 将刚建立2型糖尿病模型的大鼠随机分为罗格列酮大、小剂量干预组各8例和模型组9例,以及正常大鼠10例,8 w后应用免疫组织化学和Western 印迹方法测定心肌组织AQP1的表达变化.结果 罗格列酮可降低血清心肌酶的释放,稳定心肌组织中AQP1蛋白的表达,且以大剂量组疗效显著,对早期糖尿病大鼠心肌具有一定保护作用.结论 罗格列酮可通过稳定早期糖尿病心肌组织中AQP1 蛋白的表达,在一定程度上缓解糖尿病心肌病变的发生与发展.     

c-myc、c-fos mRNA及相关蛋白在糖尿病大鼠心肌细胞中的表达

目的 观察2型糖尿病状态下大鼠心肌细胞中c-myc、c-fos mRNA及相关蛋白的变化.方法 50只雄性SD大鼠随机分为对照组(15只)和糖尿病组(35只).对照组喂养标准饲料,糖尿病组喂养高脂饲料.喂养8 w后,检测空腹血糖、口服糖耐量试验、胰岛素抵抗指数(IRI)及血糖钳技术,证实糖尿病组大鼠产生了胰岛素抵抗.大鼠腹腔内注射STZ 25 mg/kg,血糖＞7.8 mmol/L为糖尿病大鼠模型,继续用高脂饲料喂养6 w.14 w时,用RT-PCR方法检测两组大鼠心肌c-myc、c-fos mRNA变化,用Western blot方法检测心肌相关c-myc、c-fos蛋白变化.结果 高脂饲料喂养8 w时,糖尿病组空腹血糖高于对照组(P＜0.05);IRI较对照组明显升高(P＜0.05).14 w时,糖尿病组体重和空腹血糖高于对照组(P＜0.05),c-myc mRNA表达水平与对照组比较无显著性差异,c-fos mRNA表达水平较对照组明显降低(P＜0.05),c-myc蛋白表达水平与对照组比较无显著性差异,c-fos蛋白表达水平较对照组明显降低(P＜0.05).结论 c-myc、c-fos mRNA及其蛋白在糖尿病心肌中的表达可能存在时相性,c-fos mRNA及其蛋白在糖尿病心肌病变的分子水平信号通路中异常表达,可能与糖尿病心肌病的发生发展相关.     

缬沙坦联合美托洛尔对糖尿病性心肌病的影响

目的探讨对缬沙坦联合美托洛尔治疗糖尿病性心肌病的临床效果进行探讨。方法选取该院2013年4月—2014年4月所收治的糖尿病性心肌病患者70例作为研究对象,按随机表法将其分成两组,即观察组与对照组,对照组患者采取美托洛尔予以治疗,而观察组予以缬沙坦联合美托洛尔治疗,并对两组患者治疗前后的LVDd、LVPWd、IVsd、LA以及E/A值等进行观察与比较。结果观察组治疗后LVDd、LVPWd、IVsd、LA等指标均低于治疗前,且明显优于对照组,差异显著,有统计学意义（P〈0.05）。结论对糖尿病心肌病患者采取缬沙坦联合美托洛尔予以治疗,能够获得较好的治疗效果,且并未出现明显的不良反应,值得在临床上大力推广与使用。     

通心络对糖尿病心肌病大鼠左室功能及心肌细胞凋亡的影响

目的探讨通心络对糖尿病心肌病（DCM）大鼠左室功能及心肌细胞凋亡的影响。方法将45只SD大鼠随机分为正常对照组、DCM组和通心络治疗组,第12周末测定大鼠心室内压,分析其心功能;采用原位缺口末端标记法检测心肌细胞凋亡指数,免疫组化法测定Bcl-2,Bax及p53蛋白表达。结果与对照组、DCM组比较,治疗组左室收缩压、左室内压最大上升和下降速率降低,左心室舒张末期压升高（P〈0.01或〈0.05）;p53、Bax蛋白表达升高,Bcl-2蛋白表达降低,细胞凋亡指数下降（P〈0.01或〈0.05）。结论通心络可改善DCM大鼠的左室功能,通过多种途径有效减少其心肌细胞凋亡。     

利格列汀对糖尿病大鼠心肌细胞凋亡的影响

目的观察利格列汀对糖尿病大鼠心肌细胞凋亡的影响,探讨其对心肌细胞的保护作用。方法健康雄性Wistar大鼠36只随机分为正常对照组(A组,8只)和利格列汀对照组[B组,8只,3 mg/(kg·d)利格列汀]。饲养4 w后,A、B组腹腔注射等体积柠檬酸缓冲液,20只大鼠腹腔单次注射小剂量35 mg/kg链脲佐菌素(STZ),并于3 d后尾静脉取血测血糖浓度,血糖浓度≥16.7 mmol/L确定为建模成功,6 w后,17只存活的糖尿病大鼠随机数字表法分为糖尿病组(C组,8只)和糖尿病/利格列汀组[D组,9只,3 mg/(kg·d)利格列汀],持续药物治疗4 w,分别于1 w、4 w末采集数据。结果末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记(TUNEL)细胞凋亡检测,C组和D组治疗4 w时心肌细胞凋亡数量较1 w显著增多,凋亡率显著增加(P<0.05)。D组心肌细胞凋亡程度显著低于C组,凋亡率显著降低(P<0.05)。Western印迹检测,C和D组治疗4 w时caspase-3、Bax蛋白表达较1 w时显著增加(P<0.05),Bcl-2蛋白表达显著下降(P<0.05);治疗4 w时,C组caspase-3、Bax蛋白表达显著高于A、B组(P<0.05),Bcl-2蛋白表达显著低于A、B组(P<0.05);D组caspase-3、Bax蛋白水平显著低于C组(P<0.05),Bcl-2蛋白表达显著高于C组(P<0.05)。结论利格列汀可能通过降低caspase-3、Bax表达,上调Bcl-2表达,减少心肌细胞凋亡,发挥心肌保护作用。