DNA疫苗的作用机理以及抗肿瘤的临床应用进展

DNA疫苗诱发机体产生持久而强烈的免疫反应 ,随着分子生物技术的迅速发展 ,DNA疫苗的研究从理论的提出到技术的成熟 ,许多学者在DNA疫苗的作用机理、在抗肿瘤方面的应用以及DNA疫苗的安全性等方面做了大量卓有成效的探索 ,本文就此进行综述。     

DNA疫苗在病毒感染疾病中的应用进展

DNA疫苗属于继第一代减毒、灭活疫苗，第二代重组基因工程亚单位疫苗之后的第三代新型疫苗。DNA疫苗不仅能诱导体液免疫反应，而且还可以有效地激发细胞免疫。考虑到细胞免疫在病毒感染性疾病的机体免疫过程中发挥重要作用，且目前临床上对病毒感染性疾病的防治措施及其相对效果都不尽如人意，DNA疫苗在此方面更是被寄于厚望。本文对DNA疫苗的历史发展，针对病毒防治方面的部分疾病研究进展、问题及前景进行简要综述。     

单纯疱疹病毒DNA疫苗加分子佐剂的研究进展

迅速发展起来的DNA疫苗由于具有多项优点受到人们的高度重视，但其诱导的特异性免疫应答效果却不尽人意，因而妨碍了它们的实际应用。如何增强和提高DNA疫苗的免疫效果是新一代DNA疫苗分子设计和研究的关键问题，其中之一就是应用分子佐剂来优化DNA疫苗。本文就近几年在单纯疱疹病毒基因疫苗加分子佐剂方面的研究进展作一综述。     

DNA疫苗及其在流感病毒疫苗研究中的应用

DNA疫苗能够诱导广谱免疫反应，已被广泛应用于预防性疫苗和针对各种感染性疾病、肿瘤、自身免疫性疾病和过敏性疾病的免疫治疗的临床试验。自DNA疫苗技术出现，A型流感病毒就与其紧密地联系在一起，已被广泛应用于小鼠和其他动物模型以研究DNA疫苗的免疫作用和机理。     

DNA疫苗安全性的研究进展

DNA疫苗自问世以来就显示出传统疫苗无法比拟的优越性,在传染病、肿瘤等众多疾病的预防和治疗方面具有广阔的应用前景.目前制约DNA疫苗发展的因素主要来自两方面:一方面DNA疫苗在临床实验中有时不能有效激发全面的免疫应答,致使免疫效果不佳;另一方面则是DNA疫苗的安全性问题悬而未决.本文中主要从基因整合、生殖毒性、免疫耐受、自身免疫疾病和对环境的扩散等方面对DNA疫苗安全性进行探讨.     

DNA微阵列技术及其在生物医学中的应用

DNA微阵列技术是一种新型的有力工具，它可以同步、快速而有效地分析大量核苷酸杂交试验。DNA微阵列技术的应用包括：基因表达分析、多基因突变和多态性检测、疾病诊断和分型、研究疾病分子机制以及药物筛选 和疫苗开发等，本简要介绍了DNA微阵列技术并综述了其在这些方面的应用。     

治疗性HBV DNA疫苗的研究进展

乙型肝炎病毒（HBV）的持续感染可引起肝脏疾患，甚至肝硬化和原发性肝细胞癌。近年来，HBV DNA疫苗在治疗慢性HBV携带者和慢性乙型肝炎方面越来越引起人们的重视。本文主要就治疗性HBV DNA疫苗的构成、治疗慢性乙型肝炎的依据及其研究进展进行综述。     

丙型肝炎DNA疫苗研究进展

丙型肝炎是由丙型肝炎病毒感染引起的一种重要的世界性传染病，目前尚无高效的特异性治疗方法，亟需寻求一种预防HCV感染的疫苗。HCV DNA疫苗是近年发展起来的新型疫苗之一，与传统的HCV蛋白质疫苗相比，具有多种优点。近年来，国内外学者纷纷构建HCV四个不同区段(核心区、包膜区、结构区及非结构区)的DNA疫苗，免疫动物后，部分已显示出保护性反应。本文主要介绍HCV DNA疫苗构建方面的进展及其保护性反应，并展望其发展前景。     

单纯疱疹病毒DNA疫苗加分子佐剂的研究进展

迅速发展起来的DNA疫苗由于具有多项优点受到人们的高度重视,但其诱导的特异性免疫应答效果却不尽人意,因而妨碍了它们的实际应用。如何增强和提高DNA疫苗的免疫效果是新一代DNA疫苗分子设计和研究的关键问题,其中之一就是应用分子佐剂来优化DNA疫苗。本文就近几年在单纯疱疹病毒基因疫苗加分子佐剂方面的研究进展作一综述。     

DNA疫苗免疫原性的研究策略

DNA疫苗既能诱导体液免疫又能诱导细胞免疫，是近年来疫苗研究的热点领域，被称为疫苗史上的第三次革命。但DNA疫苗诱导特异性免疫应答的水平不高，限制了它的广泛应用。本对提高DNA疫苗免疫原性的几种策略进行综述。     

树突状细胞与DNA疫苗

随着对DNA疫苗(DNA Vaccine)研究的深入，树突状细胞(DC)在DNA免疫中的独特作用逐渐被认识。本文综述了DC和DNA疫苗在免疫生物学领域的最新进展，并阐述了DC在DNA疫苗引起的免疫应答中的作用。     

DNA疫苗在病毒感染疾病中的应用进展

DNA疫苗属于继第一代减毒、灭活疫苗,第二代重组基因工程亚单位疫苗之后的第三代新型疫苗.DNA疫苗不仅能诱导体液免疫反应,而且还可以有效地激发细胞免疫.考虑到细胞免疫在病毒感染性疾病的机体免疫过程中发挥重要作用,且目前临床上对病毒感染性疾病的防治措施及其相对效果都不尽如人意,DNA疫苗在此方面更是被寄于厚望.本文对DNA疫苗的历史发展,针对病毒防治方面的部分疾病研究进展、问题及前景进行简要综述.     

影响基因疫苗免疫效果的因素

基因免疫，即把外源目的基因克隆到真核表达载体，然后将重组的质粒DNA直接注射到动物体内，使外源基因在活体内表达，产生的抗原激活机体的免疫系统，引发免疫反应。Wolff等(1990年)发现小鼠的骨骼肌细胞能捕获含外源基因的质粒并表达外源基因，首次提出了基因免疫的概念。Tang等(1992年)将含生长激素基因的质粒导入小鼠表皮细胞，88％的被免疫小鼠产生了抗生长激素抗体，二次免疫后抗体水平显著提高。迄今已报道的DNA疫苗主要用于疾病防疫(如流感、艾滋病、结核病、肝炎、疟疾、科什曼病、牛疱疹病毒、狂犬病、脑炎病毒以及多种癌基因疫苗)、生育控制(如兔透明带蛋白、精子表面蛋白SP16基因疫苗、抑制素基因疫苗)、生长调控(如生长抑素基因疫苗)等方面。由于影响DNA疫苗免疫效果的因素很多，导致DNA疫苗的免疫效果不一，本文就影响DRA疫苗免疫效果的因素作一综述。     

塞姆利基森林病毒翻译增强序列对HIV Gag DNA疫苗抗原表达和免疫原性的调节

目的 研究塞姆利基森林病毒（Semliki forest virus，SFV）衣壳蛋白5’翻译增强区对基于该病毒复制子的HIV Gag DNA疫苗抗原表达水平和免疫原性的影响：方法将SFV衣壳蛋白（capsid，C蛋白）基因的5’端102bp翻译增强区插入到SFT复制子DNA疫苗载体pCMV-Rep的SFV亚基因启动子下游，得到DNA疫苗载体pCMV-RepC。将删除ATG的HIV-1 gag基因插入pCMV-RepC，使gag编码区与翻详增强区融合，得到DNA疫苗质粒pCMV-RepC-gag。同时，构建携带未融合翻译增强序列的DNA疫苗质粒pCMV-Rep-gag。Western blot检测翻译增强序列对Gag表达水平的影响。用上述两种DNA疫苗分别免疫BALB／c雌性小鼠，ELISA检测Gag特片的抗体反应，ELISPOT和细胞内因子染色技术检测细胞免疫应答。结果衣壳蛋白5’翻译增强区增强了Gag表达水平，对体液免疫应答没有显著影响，但显著增强了特异性细胞免疫应答水平。结论SFVC蛋白翻译增强区能显著提高SFV复制子DNA疫苗的抗原表达和抗原特异性细胞免疫反心。     

DNA疫苗及其优化策略

DNA疫苗既可以诱导细胞免疫又可以诱导体液免疫反应，是最有希望成功的新一代疫苗之一。但免疫原性相对较弱，限制了DNA疫苗的广泛应用，需要进一步优化。本文对DNA疫苗的历史，优缺点，免疫机制，尤其是优化策略进行了综述，并对DNA疫苗的应用前景进行了展望。     

DNA疫苗与抗肿瘤免疫

DNA疫苗是近年发展起来的新一代疫苗，能够诱导宿主体内细胞毒T细胞反应和抗体反应。本量实验研究证明，注射抗肿瘤DNA疫苗能获得肿瘤保护性免疫效应，在肿瘤免疫治疗中应用前景看好。本文对DNA疫苗抗肿瘤免疫的机制，影响因素及应用作一综述。     

插入IL-2基因优化HBV DNA疫苗的研究

目的：观察IL-2基因的插入对DNA疫苗免疫效应的影响，探讨优化DNA疫苗设计、提高DNA疫苗兔疫效应的途径。方法：采用PCR产物直接克隆和重组DNA技术构建了人IL-2和HBsAg融合基因的真核表达载体pcDNA3．1 -S/IL-2，通过脂质体基因转移技术导入Cos-7细胞中检测其瞬间表达，并经肌肉注射免疫C57Bl/6小鼠，以检测和比较它们的细胞和体液免疫应答。结果：通过酶切、PCR及测序证实已正确完整地插入 IL-2基因，成功构建了 pcDNA3．1 -S/IL-2重组质粒。体外转染Cos-7后可见基因的表达和分泌，pcDNA3．1 -S/IL-2可以提高免疫小鼠的抗 HBs抗体滴度和脾淋巴细胞诱生的IL-2的生物活性水平，增加 HBsAg特异性的脾淋巴细胞增殖指数。结论：IL-2和 HBsAg基因的融合表达对 DNA疫苗的免疫反应起协同和增强作用，提示IL-2基因插入可能是增强DNA疫苗的免疫效应的可行途径。     

电穿孔增强核酸疫苗免疫反应的研究进展

核酸疫苗自诞生以来在肿瘤、感染性疾病和自身免疫性疾病等方面显示出其独特的优越性。目前,研究如何增强核酸疫苗的免疫原性是一大热点,在众多方法中,电穿孔通过增加细胞对DNA的摄取,使表达的目的抗原增多,从而明显地增强了核酸疫苗诱导的免疫反应。就电穿孔技术在核酸疫苗研究领域的应用作一综述。     

表达HIV-1 B亚型env基因的质粒DNA及腺病毒载体疫苗的免疫原性研究

目的 构建表达中国B亚型HIV-1流行株env基因的DNA及重组腺病毒载体疫苗,将其用于预防或治疗HIV感染.方法 构建质粒DNA疫苗pVR-gp160及重组腺病毒载体疫苗rAdV-gp160.将这两种疫苗以不同的方式免疫BALB/c小鼠,分别采用ELISPOT方法 和ELISA方法 检测免疫小鼠中HIV-1 Gp120特异性细胞免疫反应及抗体反应.结果 DNA疫苗单独免疫及DNA疫苗初免/腺病毒疫苗加强免疫的联合免疫方案皆可诱导较高水平的Gp120特异性细胞免疫反应;而在体液免疫方面,各实验组产生的Gp120特异性抗体水平都较低.结论 所构建的DNA疫苗及rAdV疫苗能有效表达Gp160蛋白,并可有效激活机体的细胞免疫反应.     

DNA免疫的作用机制及影响因素

DNA免疫是指将某种蛋白质抗原基因的重组真核表达载体直接注射到动物体内，使外源基因在活体内表达，表达的抗原可激活机体的免疫系统，从而诱导特异性的体液免疫和细胞免疫应答。近年来，这一领域的研究进展迅速，不仅丰富了基础免疫学的内容，而且在应用研究中显示出其潜在的防治疾病及其他方面的应用价值。以这类新的重组质粒构建的DNA疫苗被喻为“第3代疫苗”，具有诸多传统疫苗没有的优越性，迄今已得到广泛应用。