RNA干扰抗乙型肝炎病毒治疗新进展

RNA干扰（RNA interferencing,RNAi）是短双链RNA,即小干扰RNA（small interferencing RNA,siRNA）介导的对同源基因转录后水平或者翻译水平的抑制作用.近年来应用RNAi技术治疗病毒感染性疾病的实验研究取得了很大的进展.RNAi作为一种新型的抗乙型肝炎病毒（HBV）基因治疗技术受到广泛关注,其高效、特异的抗病毒作用,设计灵活的多靶位效应使其成为一种前景广阔的基因治疗手段.     

RNAi在乙型病毒性肝炎治疗中的应用

目前乙型肝炎的抗病毒治疗效果并不令人满意，表现为干扰素长期有效率不高、核苷类似物易出现变异病毒株、需长期服用等。基因治疗作为一种全新的治疗手段，主要方法有RNAi技术、反义RNA技术、核酶技术等。RNAi是指由21～23个核苷酸组成的双链RNA（dsRNA）ph引发的生物细胞内同源基因转录后沉默的现象。其作为以HBV基因转录为靶点的基因治疗手段越来越受到关注。本文主要对RNAi技术在HBV基因治疗中的作用作一综述。     

RNA干扰技术在抗乙型肝炎病毒感染应用中的研究进展

RNA干扰(RNA interference, RNAi)技术能够特异性地降低目的基因的表达, 是目前最有效的基因沉默技术, 体内外研究均证实了RNAi在抗乙型肝炎病毒(hepatitis B virus, HBV)感染中的作用. 近年来, 为使RNAi更适应抗HBV感染临床应用的需要, 许多学者针对小干扰RNA(small interfering RNA, siRNA)靶序列、转导方法、短发夹状RNA(short hairpin RNA,shRNA)载体、各种联合策略的选择及化学修饰的应用等方面进行了大量研究. 本文综述RNAi技术, 尤其是HBV特异shRNA在抗HBV感染中应用的研究进展.     

应用干扰RNA技术抑制乙型肝炎病毒抗原的体外表达

RNA干预（RNAi）是双链RNA（dsRNA）启动的选择性基因沉默作用，是一种基因水平的调控机制。序列特异性小干扰RNA（siRNA）可特异性抑制病毒复制，而HepG2．2．15细胞系包含完整的HBV基因组，能介导HBV的高水平复制与表达，作为siRNA作用的靶向模型，实验结果更客观，更有说服力。     

RNA干扰和病毒性肝炎

乙型肝炎病毒（HBV）、丙型肝炎病毒（HCV）及丁型肝炎病毒（HDV）引起的慢性肝病,严重影响人们的健康,虽然疫苗、干扰素（IFN）和抗病毒核苷类药物正在不断发现和应用,但其治疗效果仍有不尽人意之处.近年来基因治疗领域的不断发展,尤其是RNA干扰（RNA interference,RNAi）技术为病毒性肝炎的治疗研究提供了新思路.本文将RNAi的发展及其对肝炎病毒的研究进展作一综述.     

聚合酶链反应扩增小分子干扰RNA表达框筛选抑制HBV DNA复制的小分子干扰RNA

一些短片段的双链RNA可以通过促使特定基因的mRNA降解来高效、特异地阻断体内特定基因表达，诱使细胞表现出特定基因缺失的表型，称为RNA干扰（RNAi）。小分子干扰RNA（siRNA）就是这种短片段双链RNA分子，能够以序列同源互补的mRNA为靶目标，降解特定的mRNA。本研究针对HBV DNA多聚酶区的siRNA，运用PCR扩增siRNA表达框的方法筛选出对HBV DNA抑制作用最强的siRNA，观察其对HBV DNA复制及HBsAg和HBeAg分泌的抑制作用。     

RNAi技术及其在病毒性肝炎中的研究进展

RNAi技术被《科学》杂志评选为2002年度世界十大科技发展之首,在各种疾病的基因治疗研究中发挥出了巨大的潜力.在抗肝炎病毒领域,RNAi技术可以抑制病毒复制,阻断病毒蛋白表达,且对RNA病毒和DNA病毒均有效.     

RNA干扰技术在肝癌研究中的应用

RNA干扰（RNAi）技术不仅是分析基因功能的实验工具，且是筛选药物靶点和合成基因药物治疗难以治愈的疾病（如癌症）的优秀工具。RNAi技术应用于肿瘤治疗的成功有赖于研制安全高效的传递系统，从而将小干扰RNA（siRNA）和短发夹RNA（shRNA）表达载体送入肿瘤细胞中。本文对国内外30篇相关文献进行综述，阐明RNAi的定义和机制．分析并展望RNAi技术在肝癌研究中的应用和前景。     

RNA干扰作为一种病毒性肝炎治疗手段的可能性（下）

若干研究已经探究了使用RNAi作为一种潜在的抗HCV感染干预治疗的可能性。作为正义的单链RNA病毒，通过负义的复制中间体提供了该技术的可能性，至少在理论上，RNAi能够清除来自受染细胞的病毒基因组、复制形式和mRNA种类并由此消除HCV感染。然而，在HCV复制的培养中缺乏适合的系统，使证明siRNA抑制病毒复制子RNA的复制可能性的研究受到了限制。在若干研究中已经证明了在NS3和NSSBORFs中siRNA对抗不同位点的作用。通过定量RT～PCR证明了在隐匿HCV复制子的细朐中HCV转录水平有21-23倍的降低。     

RNA干扰在慢性乙型肝炎方面的研究进展

慢性乙型肝炎是当前严重危害世界人类健康的传染病。乙型肝炎病毒（HBV）感染后大多数发展为慢性肝炎．最终可能发展为肝硬化、肝细胞癌。目前常用的抗HBV药物主要有干扰素和核苷（酸）类似物，但疗效都不很理想，特异性差，易出现耐药性。RNA干扰（RNA interference，RNAi）是一种普遍存在的自然现象，是近年来发现的一种高效、特异地阻断靶mRNA表达进而导致转录后基因沉默的现象。     

RNA干扰抗戊型肝炎病毒感染的研究进展

戊型肝炎病毒(hepatitis E virus, HEV)是一种可跨种间传播,严重危害人类健康的病毒性肝炎(hepatitis E, HE)的病原体,目前尚无有效的治疗方法和药物。RNA干扰（RNA interference, RNAi）是真核生物的一种自我保护机制,可以阻止病毒入侵宿主细胞。RNAi技术广泛应用于病毒基因的转录后调节,已经成功抑制了多种病毒的复制。现介绍RNAi的干涉机制在抗戊型肝炎病毒中的研究进展。     

何谓准种?有什么临床意义?

生物的变异是生物为适应环境的不断变化,维持生存和种族繁衍的需要而采取的一种十分重要和必要的应对措施。病毒也广泛存在和不断发生变异,尤其是RNA病毒,如HCV、HIV等。DNA病毒也可发生变异,尤其是HBV,其在复制过程中缺乏校对功能。HBV的变异率高于其它DNA病毒约4个数量级,但低于RNA病毒1～2个数量级。HBV的复制效率非常高,每天可生成     

小干扰RNA表达质粒载体的构建及其抗乙型肝炎病毒效应

近年研究表明,一些小的双链RNA可以高效特异地阻断体内基因表达,促进RNA降解,在细胞内发挥基因敲除作用,这种现象被称为RNA干扰(RNAi)[1]。RNAi技术已被广泛应用于治疗病毒、癌症等疾病的研究。本研究旨在探讨RNAi技术抗HBV的可行性,从而为RNAi治疗乙型肝炎提供实验基础。一、材料与方法1.细胞株和质粒:含H1启动子的转录载体pSilencer31H1hygro质粒购于Ambion公司,HepG2215细胞由本室引进并保存。2.主要试剂:T4DNA连接酶、T4磷酸激酶、SalⅠ(大连宝生物公司产品);脂质体转染试剂Metafectene(德国Biontex公司产品);HBsA…     

RNA干扰抗肝炎病毒治疗的希望与发展方向

RNA干扰(RNAi)是由小双链RNA有效地作用于同源RNA序列，经细胞内核酸酶作用使同源序列降解的过程。虽然最初的研究是观察其对细胞基因的下调作用，近来的一些研究表明RNAi在抗肝炎病毒等人类和动物病毒中也同样有效，所以RNAi有可能发展成为一个新的抗肝炎病毒治疗的方法。     

RNA干扰技术在病毒性心肌炎中的研究进展

随着RNA干扰(RNAi)研究的不断深入,RNAi技术作为一个全新的抑制基因表达的技术,越来越显示出其在抗病毒感染方面的作用。病毒性心肌炎最常见是由柯萨奇病毒感染引起的,利用RNAi技术特异性地针对病毒复制的相关基因进行靶向治疗,为治疗病毒性心肌炎提供了一条新途径。     

小RNAs治疗病毒性肝炎的研究

RNA干扰现象（RNAi）最早发现于线虫和植物中，是基因调节的一种进化中的保留途径，并且至少在一些生物中似乎是先天抗病毒防御机制的一部分。RNAi的核心效应器是非常小的（约21个核苷酸）双链RNA分子被称为短的抑制性RNAs（siRNAs）。在结合到RNA介导的沉默复合体（RJSC）且在完全或部分的互补状态下，siRNAs能够直接裂解或转录抑制mRNA。虽然大家很快就意识到RNAi作为一种抗病毒性感染的治疗性工具的潜在用途，但是因为这种途径在研究过程中出现了更为复杂的前景，最初的研究激情已经有点减弱了。例如，因为靶点是通过核苷酸互补被识别的，RNAi的一个优点似乎仅基于单独的序列信息，不需要进一步的了解病毒生活周期就可以被选择的高度特异和有效的抑制物。另外，不能期望通过进行一种简单的序列同源性研究来实现在缺乏对分子序列的互补物时对宿主转录子的抑制效应。但是，最近已研究清楚siRNAs还可以在部分核苷酸互补的情况下抑制mRNAs，因此造成非意愿或“脱靶”效应，这是非常难预见的。     

RNAi技术及其在病毒性肝炎中的研究进展

RNAi技术被《科学》杂志评选为2002年度世界十大科技发展之首,在各种疾病的基因治疗研究中发挥出了巨大的潜力。在抗肝炎病毒领域,RNAi技术可以抑制病毒复制,阻断病毒蛋白表达,且对RNA病毒和DNA病毒均有效。     

RNA干扰技术及其在寄生虫研究中的应用

RNA干扰（RNA interference,RNAi）是双链RNA（dSRNA）介导的序列特异靶基因转录后基因沉默的过程。RNAi天然存在于各种生物体中,如果蝇、线虫、原生动物、脊椎动物、高等植物等,在保持基因组的纯洁、抵抗病毒的入侵、控制生物发育、染色体的异染色质化等方面都具有非常重要的作用。自1998年Fire等首次将RNAi现象定义为转录后基因沉默（PTGs）后,应用RNAi技术进行基因功能的研究迅速在各种生物中开展起来。本文就RNAi技术及其在寄生虫领域中的研究结果作一综述。