骨髓间充质干细胞移植治疗大鼠急性放射性肺损伤

背景:针对放射性肺损伤,临床上除了糖皮质激素及抗生素等对症处理外,尚缺乏有效的治疗手段。近年来研究表明,骨髓间充质干细胞表现出强大的组织修复能力。目的:观察骨髓间充质干细胞对大鼠放射性肺损伤的治疗作用,并初步探讨其作用机制。方法:体外分离、培养并鉴定雄性SD大鼠骨髓间充质干细胞。应用直线加速器照射60只雌性SD大鼠胸部,建立大鼠放射性肺损伤模型,随机分为骨髓间充质干细胞治疗组和生理盐水对照组。骨髓间充质干细胞治疗组经大鼠尾静脉输注骨髓间充质干细胞2×109L-1,生理盐水对照组注射等量生理盐水,分别于照射后1,2,4,6周时进行相关指标检测。结果与结论:照射后第1,2,4周时,骨髓间充质干细胞治疗组大鼠肺系数明显低于生理盐水对照组(P0.05)。镜下见骨髓间充质干细胞治疗组大鼠肺组织炎症渗出较少,肺泡、肺泡壁结构基本完整,纤维化程度等均明显轻于生理盐水对照组。照射2周时骨髓间充质干细胞治疗组血清转化生长因子β1、羟脯氨酸水平显著低于生理盐水对照组(P0.05)。照射2,4,6周时骨髓间充质干细胞治疗组肺组织超氧化物歧化酶活力显著高于生理盐水对照组(P0.05),照射4,6周时骨髓间充质干细胞治疗组丙二醛含量显著低于生理盐水对照组(P0.05)。照射6周时骨髓间充质干细胞治疗组的肺表面活性物质B表达显著高于生理盐水对照组。PCR方法检测肺、肝脏、胰腺、肾脏等器官组织均有不同程度的Sry基因表达,尤以肺显著。结果表明骨髓间充质干细胞可以迁移到放射性损伤的肺组织,促进放射性肺损伤组织的修复,其治疗机制可能与抑制炎症反应、抗氧化、减轻肺组织纤维化等有关。     

灯盏细辛联合骨髓间充质干细胞移植对脑梗死的保护作用机制

背景：通过细胞移植重建损伤脑组织成为治疗脑梗死的新途径,骨髓间充质干细胞成为近年来细胞移植治疗领域的重要种子细胞之一。 目的：探讨灯盏细辛注射液联合骨髓间充质干细胞移植对急性脑梗死大鼠S100B蛋白及超氧化物歧化酶表达的影响。 方法：采用线栓法制作大鼠急性脑梗死模型,建模成功后将80只SD大鼠随机分为对照组、灯盏细辛组、骨髓间充质干细胞组及联合组。分别于治疗前后用酶联免疫法检测各组大鼠血清S100B蛋白水平,黄嘌呤氧化酶法检测各组大鼠血清超氧化物歧化酶的表达;通过NIHSS神经功能评分观察模型大鼠的神经行为学变化,通过TTC染色测定脑梗死体积。 结果与结论：在治疗后第3,7,14天,灯盏细辛组、骨髓间充质干细胞组的S100B蛋白水平明显低于对照组,但高于联合组,差异有显著性意义(P < 0.05);灯盏细辛组、骨髓间充质干细胞的超氧化物歧化酶表达水平明显高于对照组,低于联合组,差异有显著性意义(P < 0.05);治疗后第1,2,3周各组的NIHSS神经功能评分比较,联合组<灯盏细辛组及骨髓间充质干细胞组<对照组,差异有显著性意义(P < 0.05);在治疗后2周联合组的脑梗死体积明显小于灯盏细辛组及骨髓间充质干细胞组,灯盏细辛组及骨髓间充质干细胞组又明显小于对照组,差异有显著性意义(P < 0.05)。结果表明灯盏细辛注射液联合骨髓间充质干细胞移植能够抑制急性脑梗死大鼠S100B蛋白表达,提高超氧化物歧化酶活性,从而起到脑保护作用。 中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞;骨髓干细胞;造血干细胞;脂肪干细胞;肿瘤干细胞;胚胎干细胞;脐带脐血干细胞;干细胞诱导;干细胞分化;组织工程     

骨髓间充质干细胞对脓毒症急性肺损伤大鼠肺泡巨噬细胞NF-κB的调控

背景:骨髓间充质干细胞对急性肺损伤具有治疗作用,但其机制尚不清楚,探究其机制可使广大急性肺损伤患者获益。目的:探讨骨髓间充质干细胞治疗大鼠脓毒症急性肺损伤的可能机制。方法:136只成年Wistar大鼠随机均分为3组:假手术组、脓毒症组和骨髓间充质干细胞治疗组,后2组采用盲肠结扎穿孔术建立脓毒症急性肺损伤模型,假手术组大鼠仅翻动盲肠,不结扎穿孔。骨髓间充质干细胞治疗组术后经股静脉注射骨髓间充质干细胞悬液1 m L(1×109L-1),其他2组同法注射生理盐水1 m L,6 h后测定3组大鼠血清中白细胞介素10、巨噬细胞炎性蛋白2水平,取肺组织进行苏木精-伊红染色,光镜下观察肺组织病理结构的改变。2支气管肺泡灌洗法获取大鼠肺泡巨噬细胞,所获肺泡巨噬细胞接种于24孔培养板,分为3组:对照组加入生理盐水,脓毒症模型组加入脓毒症大鼠血浆,骨髓间充质干细胞干预组加入脓毒症大鼠血浆和骨髓间充质干细胞共同干预,于37℃、体积分数为5%CO2培养箱孵育1 h。留取肺泡巨噬细胞,采用激光扫描共聚焦显微镜检测肺泡巨噬细胞NF-κB(P65)蛋白入核情况。结果与结论:1动物实验:与假手术组相比,脓毒症组、骨髓间充质干细胞治疗组血清巨噬细胞炎性蛋白2水平升高(P0.05),但骨髓间充质干细胞治疗组巨噬细胞炎性蛋白2水平明显低于脓毒症组(P0.05);各组血清白细胞介素10水平差异无显著性意义(P0.05);脓毒症组和骨髓间充质干细胞治疗组肺内大量炎性细胞浸润、肺间质水肿、肺内出血,但骨髓间充质干细胞治疗组症状较脓毒症组有所减轻。2细胞实验:与对照组相比,脓毒症模型组、骨髓间充质干细胞干预组肺泡巨噬细胞的NF-κB(P65)蛋白入核明显升高(P0.05),但骨髓间充质干细胞干预组明显低于脓毒症模型组(P0.05)。结果表明骨髓间充质干细胞在脓毒症急性肺损伤时可能调控肺泡巨噬细胞NF-κB(P65)蛋白入核,使其减少促炎细胞因子巨噬细胞炎性蛋白2表达,进而减少中性粒细胞浸润起到肺保护作用,暂不能说明骨髓间充质干细胞对白细胞介素10有影响。     

骨髓间充质干细胞旁分泌对急性心肌梗死心肌的保护作用（英文）

背景:成人心肌细胞缺乏再生能力,使用细胞疗法再生和修复心肌,可能提高心肌缺血性损伤后功能。目的:探索骨髓间充质干细胞治疗急性心肌梗死中可能的作用机制。方法:密度梯度离心法从SD大鼠中分离培养骨髓间充质干细胞。20只大鼠以开胸冠状动脉结扎法制备急性心肌梗死模型后,随机等分为模型组和骨髓间充质干细胞组,骨髓间充质干细胞组大鼠于冠状动脉结扎后通过尾静脉注射骨髓间充质干细胞。结果与结论:造模6个月后,与模型组相比,骨髓间充质干细胞组大鼠心脏功能明显改善,心肌组织血管密度增加,细胞凋亡数量减少,心脏组织中炎症因子血管内皮生长因子、von Willebrand因子、肿瘤生长因子3β和白细胞介素1βmRNA表达明显增加。提示骨髓间充质干细胞通过调节心脏炎症因子与血管因子的分泌起到保护急性心肌梗死后心肌细胞的作用。     

骨髓间充质干细胞防护肾脏衰老的作用及其机制

背景：骨髓间充质干细胞具有分化成肾小管上皮细胞的功能,故推测,间充质干细胞可能具有治疗慢性肾功能减退的作用。 目的：研究骨髓来源的大鼠间充质干细胞防护肾脏衰老的作用及其可能的机制。 方法：实验建立衰老大鼠模型,尾静脉移植骨髓来源的大鼠间充质干细胞,应用荧光染料羟基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺脂标记体外培养大鼠骨髓来源的间充质干细胞,将其回输肾脏衰老大鼠体内,应用荧光显微镜下观察间充质干细胞是否能够归巢于肾脏;全自动生化仪测定各组大鼠血清中尿素氮及肌酐水平变化;采用免疫荧光法,利用计算机图像叠加技术,观察蓝色荧光4’,6-二脒基-2-苯基吲哚分别与红色荧光的肾小管上皮细胞特异性蛋白-角蛋白的叠加情况。 结果与结论：骨髓来源的大鼠间充质干细胞能够归巢到衰老大鼠的肾脏。与衰老大鼠模型组相比,经过间充质干细胞生物治疗后的衰老大鼠血清中尿素氮及肌酐水平显著降低(P < 0.05),肾脏组织可见少量4’,6-二脒基-2-苯基吲哚及异硫氰酸荧光素标记的角蛋白双染阳性细胞。结果显示,骨髓来源的大鼠间充质干细胞通过向肾小管上皮分化,这可能是其改善衰老大鼠肾脏的机制之一。中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞;骨髓干细胞;造血干细胞;脂肪干细胞;肿瘤干细胞;胚胎干细胞;脐带脐血干细胞;干细胞诱导;干细胞分化;组织工程全文链接：     

骨髓间充质干细胞修复损伤肾小管上皮细胞:可能与可行?

背景:研究表明骨髓间充质干细胞在急性肾损伤后能够通过直接分化为肾小管上皮细胞而促进肾功能的恢复,其修复肾脏的作用机制尚不清楚,能否直接分化为肾小管上皮细胞,目前仍有争议。目的:观察骨髓间充质干细胞输注后急性肾衰竭小鼠肾功能改变,外源性骨髓间充质干细胞在肾组织的分布以及是否向肾小管上皮细胞分化。方法:骨髓间充质干细胞来源于绿色荧光蛋白转基因小鼠。8～10周龄的健康雌性昆白小鼠90只随机随机分为3组。急性肾衰竭组和骨髓间充质干细胞组注射顺铂建立急性肾衰竭模型,骨髓间充质干细胞组在建模后24h经尾静脉输注绿色荧光蛋白转基因小鼠的骨髓间充质干细胞悬液。正常对照组不进行任何干预。建模后第1,4,7,14,28天测定血尿素氮和血肌酐,观察肾组织病理变化,荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白阳性的骨髓间充质干细胞在肾组织的分布,共聚焦显微镜下观察骨髓间充质干细胞向肾小管上皮细胞的分化情况。结果与结论:骨髓间充质干细胞组顺铂注射4～14d后,尿素氮、肌酐值比急性肾衰竭组明显降低(P0.01或P0.05)。骨髓间充质干细胞组第4天肾组织中可见绿色荧光的绿色荧光蛋白细胞,分布在外髓质区肾小管,第7天仍可见少量荧光细胞,同时表达肾小管上皮特异性的功能蛋白megalin。结果提示骨髓间充质干细胞在损伤肾脏可直接分化为肾小管上皮细胞,并改善急性肾衰竭小鼠的肾功能。     

骨髓间充质干细胞对阿霉素肾病大鼠肾脏nephrin表达的影响

背景:目前对于骨髓间充质干细胞移植治疗急性肾损伤的研究较多,但对治疗慢性肾脏疾病的研究报道甚少。目的:观察经腹主动脉近肾动脉处移植的骨髓间充质干细胞对阿霉素肾病大鼠足细胞的修复作用及对肾脏Nephrin mRNA表达的影响。方法:全骨髓法+贴壁筛选法分离培养纯化SD大鼠骨髓间充质干细胞用于移植。SD大鼠随机数字表法分为3组:正常组为正常SD大鼠,无任何干预措施;模型组大鼠尾静脉1次注射阿霉素5mg/kg+当日腹主动脉注入生理盐水1mL;骨髓间充质干细胞治疗组大鼠尾静脉1次注射阿霉素5mg/kg+当日腹主动脉注入干细胞1×107个,体积约1mL。各组于处理后7,14,28d3个时间点各取8只大鼠用于取材。流式细胞仪对骨髓间充质干细胞表面分子进行鉴定,磺基水杨酸-硫酸钠比浊法测24h尿蛋白,全自动生化分析仪测血生化指标(白蛋白、血脂),苏木精-伊红染色及透视电镜下观察肾组织的病理变化,RT-PCR检测肾组织NephrinmRNA的表达。结果与结论:①与正常组相比,模型组大鼠均出现肾病综合征表现,以腹水、大量蛋白尿、低蛋白血症、高胆固醇血症及足细胞足突广泛融合为特征;骨髓间充质干细胞治疗组较模型组则有明显改善。②与正常组相比,模型组大鼠肾组织Nephrin mRNA表达明显降低(P0.05);骨髓间充质干细胞治疗组与模型组相比,肾组织Nephrin mRNA表达有所回升(P0.05)。提示骨髓间充质干细胞移植能明显增加阿霉素肾病大鼠肾组织nephrin mRNA的表达,并对受损的肾脏组织起到一定的保护作用。     

法舒地尔联合骨髓间充质干细胞移植治疗大鼠急性心肌梗死:有协同治疗作用吗?

背景:RhoA激酶抑制剂法舒地尔能有效抑制心肌梗死后的心肌肥大。目的:观察法舒地尔联合骨髓间充质干细胞移植对急性心肌梗死模型鼠心功能的影响,探讨两者是否具有协同治疗作用。方法:体外培养扩增SD大鼠骨髓间充质干细胞,另选取42只雌性SD大鼠结扎前降支,建立急性心肌梗死模型,随机分成3组。干细胞组,干细胞+法舒地尔组梗死心肌中移植骨髓间充质干细胞,干细胞+法舒地尔组同时给予法舒地尔治疗,梗死组不干预。4周后,以二维超声心动图分析心功能变化,SRY-PCR检测大鼠Y染色体上特有的基因SRY,Western-Blot检测RhoA蛋白表达,并进行病理观察。结果与结论:与梗死组比较,干细胞组和联合组左室舒张末内径及左室收缩末内径均显著减小(P0.01),射血分数均显著升高(P0.01),其中干细胞+法舒地尔组变化幅度优于细胞移植组(P0.05)。干细胞组和联合组基因有SRY表达,梗死组未检测到基因SRY。干细胞+法舒地尔组RhoA蛋白表达水平较梗死组、干细胞组显著降低(P0.05)。病理观察干细胞组和联合组心肌修复优于梗死组,干细胞+法舒地尔组较干细胞组明显。结果表明单纯骨髓间充质干细胞移植以及法舒地尔联合骨髓间充质干细胞移植均可改善心肌梗死大鼠心功能,减少心室扩张程度,两者联合情况下效果最佳,对心肌梗死具有协同治疗作用。     

骨髓间充质干细胞移植联合依达拉奉治疗大鼠脑梗死

背景：依达拉奉具有清除自由基和抑制脂质过氧化反应的作用,能够改善中枢神经系统损伤区的微环境。 目的：观察骨髓间充质干细胞移植联合依达拉奉治疗大鼠脑梗死的效果。 方法：采用线栓法建立大鼠大脑中动脉阻塞模型,随机分为3组,对照组经尾静脉注射细胞培养液,骨髓间充质干细胞组经尾静脉注射2.0×109 L^-1的骨髓间充质干细胞悬液,依达拉奉+骨髓间充质干细胞组经尾静脉注射2.0×109 L^-1骨髓间充质干细胞悬液同时经腹腔注射依达拉奉3 mg/(kg•d),连续5 d。移植后行神经功能缺损评分,应用RT-PCR测定脑梗死组织水通道蛋白9及水通道蛋白4 mRNA的表达,并经全脑冷冻切片苏木精-伊红染色及荧光显微镜观察细胞自然存活及分布情况。 结果与结论：移植后24 h,3 d各组间神经功能缺损评分差异无显著性意义(P > 0.05),移植后2周,依达拉奉+骨髓间充质干细胞组大鼠神经功能缺损评分低于骨髓间充质干细胞组及对照组(P < 0.05-0.01)。骨髓间充质干细胞组大鼠脑梗死周围组织水通道蛋白9 及水通道蛋白4 mRNA的表达高于依达拉奉+骨髓间充质干细胞组,却低于对照组(P < 0.05)。依达拉奉+骨髓间充质干细胞组CM-Dil阳性细胞和神经元数量多于骨髓间充质干细胞组及对照组(P < 0.05)。提示移植的骨髓间充质干细胞可移行至大鼠脑梗死灶周围并存活,分化为神经元样细胞。联合注射用依达拉奉治疗可明显改善脑梗死大鼠的神经学功能。     

骨髓间充质干细胞移植联合依达拉奉抑制脑梗死后的神经元凋亡

背景：国内外多项研究证实骨髓间充质干细胞移植对脑梗死组织具有一定的神经保护作用。依达拉奉是一种新型强效小分子羟自由基清除剂,可通过清除脑梗死产生的自由基,抑制神经细胞损伤,从而起到脑保护作用。 目的：观察骨髓间充质干细胞移植联合依达拉奉对大鼠脑梗死组织水通道蛋白4、Bcl-2、脑源性神经营养因子表达的影响。 方法：选取Wistar大鼠80只,建立右侧大脑中动脉闭塞模型,随机分为对照组、骨髓间充质干细胞组、依达拉奉组和联合治疗组。建模6 h后通过尾静脉分别注入移植液,对照组注射培养液,骨髓间充质干细胞组注射骨髓间充质干细胞,依达拉奉组给予依达拉奉注射液,联合组同时注入骨髓间充质干细胞和依达拉奉注射液。分别在伤后72 h将大鼠麻醉后断头取脑,应用RT-PCR、Western Blot法检测脑组织中水通道蛋白4、Bcl-2、脑源性神经营养因子基因表达和蛋白合成变化。伤后12,24,36 h取大鼠脑组织以TUNEL法测定细胞凋亡情况。 结果与结论：RT-PCR、Western Blot结果显示,在骨髓间充质干细胞与依达拉奉联合治疗组中,Bcl-2、脑源性神经营养因子的表达明显高于骨髓间充质干细胞组、依达拉奉组及对照组(P < 0.05);而水通道蛋白4的表达低于其余各组(P < 0.05)。TUNEL测定结果显示,联合治疗组中免疫组化呈棕色的凋亡细胞明显少于单独治疗组及对照组。提示骨髓间充质干细胞移植与依达拉奉联合应用治疗大鼠脑梗死,可进一步促进损伤局部脑源性神经营养因子及Bcl-2的表达,对神经细胞凋亡具有明显的抑制作用,同时可下调水通道蛋白4水平,减轻脑水肿程度,二者联合运用的效果明显优于单独治疗组。中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞;骨髓干细胞;造血干细胞;脂肪干细胞;肿瘤干细胞;胚胎干细胞;脐带脐血干细胞;干细胞诱导;干细胞分化;组织工程全文链接：     

淫羊藿联合骨髓间充质干细胞移植治疗肾病大鼠的作用

BACKGROUND: A large number of studies have shown that bone marrow mesenchymal stem cells (BMSCs) with differentiation ability can be used to treat kidney injury. Epimedium has good anti-inflammatory and immune restoration ability. OBJECTIVE:To observe the effect of epimedium with BMSC transplantation on rat’s kidney disease caused by adriamycin nephrosis. METHODS: Fifty rats were equivalently randomized to receive no treatment in control group, tail vein injection of normal saline plus intragastric injection of normal saline in model group, tail vein injection of BMSCs plus intragastric injection of epimedium decoction in combined group, tail vein injection of BMSCs in BMSCs group, and intragastric injection of epimedium decoction in epimedium group. Rat models of adriamycin nephrosis were made in the latter four groups through tail vein injection of doxorubicin hydrochloride, while rats in the control group were only given the same volume of normal saline. Twenty-four hours after modeling, rats in the latter four groups began to be given the corresponding treatments. Epimedium decoction was given in the combined and epimedium groups at a dose of 1 mL/d, for consecutive 1 week.  RESULTS AND CONCLUSION:Compared with the model group, mitigated kidney injury and reduced urinary protein level were found in rats undergoing BMSCs and/or epimedium decoction treatment; the levels of plasma albumin and catalase were significantly increased in the combined group and epimedium group, while the levels of serum cholesterol, triglycerides and malondialdehyde decreased; the mRNA expression of transforming growth factor β1 in the kidney tissues was dramatically declined in the combined group and BMSC group. To conclude, the combined use of epimedium and BMSCs is superior to their use alone in the treatment of kidney disease.     

Effect of combination of vitamin E and umbilical cord-derived mesenchymal stem cells on inflammation in mice with acute kidney injury

Background: The objective of this study is to investigate the effect of combination of umbilical cord-derived mesenchymal stem cell (UC-MSC) and vitamin E (VitE) on inflammation in mice with acute kidney injury (AKI).

Methods: UC-MSCs were isolated from pregnant wistar mice and cultured. A total of 90 female wistar mice were randomly divided into control group, AKI group, AKI?+?VitE group, AKI?+?UC-MSC group, and AKI?+?VitE?+?UC-MSC group (18 mice in each group) which were given no treatment, normal saline, VitE, UC-MSC, and VitE?+?UC-MSC, respectively. The renal pedicles on both sides were clipped for 50?min with micro-artery clips to induce AKI. Six mice were sacrificed at days 1, 3, and 7, while blood and kidney tissues were collected to detect levels of blood urea nitrogen (BUN) and creatinine (Scr). Kidney tissues were stained by HE staining to observe pathological changes; levels of interleukin-lβ, TNF-α, interleukin-10, and β-FGF were measured by ELISA.

Results: Compared with the control group, AKI mice showed higher levels of serum BUN and Scr, tubular swelling and necrosis suggesting that AKI model was successfully established. Mice in AKI?+?VitE group, AKI?+?UC-MSC group, and AKI?+?VitE?+?UC-MSC presented better renal function than mice of AKI group. Mice from AKI?+?VitE?+?UC-MSC group showed the best renal function with the least renal tubular injury (p?p?p?Conclusions: Combination of UC-MSC and VitE significantly inhibited inflammatory reaction in kidney through the regulation of inflammatory cytokines in the microenvironment of kidney with AKI. Combination of UC-MSC and VitE presented therapeutic effect on AKI than the single use of UC-MSC or VitE.     

高压氧联合骨髓间充质干细胞移植修复缺氧缺血性脑损伤

背景：单纯骨髓间充质干细胞移植对脑梗死组织的修复作用并不理想,需要结合药物及生物工程材料等手段进行综合治疗。 目的：验证高压氧结合骨髓间充质干细胞移植修复大鼠缺氧缺血性脑损伤的效果。 方法：体外培养大鼠骨髓间充质干细胞。应用线栓法建立大脑中动脉阻塞大鼠模型,按随机区组法分为3组,即对照组、骨髓间充质干细胞移植组及高压氧+骨髓间充质干细胞移植组。静脉移植后24 h,3 d及伤后1,2 周行Longa行为学评分,检测神经功能的损伤情况。移植2周后,应用RT-PCR法测定生长相关蛋白43 mRNA的表达,并以BrdU免疫组化和苏木精-伊红染色行梗死处组织学检查以证实恢复程度。 结果与结论：移植后1周,高压氧+骨髓间充质干细胞移植组大鼠神经功能障碍评分低于骨髓间充质干细胞移植组,骨髓间充质干细胞移植组低于对照组(P  < 0.05)。2周后脑梗死周围组织生长相关蛋白43 mRNA的表达高压氧+骨髓间充质干细胞移植组高于骨髓间充质干细胞移植组,骨髓间充质干细胞移植组高于对照组(P < 0.05)。BrdU免疫组化和苏木精-伊红切片中的神经元数量高压氧+骨髓间充质干细胞移植组多于骨髓间充质干细胞移植组,骨髓间充质干细胞移植组多于对照组(P < 0.05)。提示高压氧联合骨髓间充质干细胞静脉移植治疗大鼠缺氧缺血性脑损伤可明显改善大鼠的神经功能,效果优于单纯骨髓间充质干细胞移植。     

不同剂量骨髓间充质干细胞移植对大鼠矽肺纤维化形成的影响

 目的：研究外源性骨髓间充质干细胞（BMSCs）移植对大鼠矽肺纤维化的疗效,并探讨其量效关系。方法：体外分离、培养雄性5周龄SD大鼠BMSCs。将50只健康SD雌性大鼠随机分为5组：对照组、矽肺模型组、BMSCs治疗A组（1×10⁹ /L）、BMSCs治疗B组（3×10⁹ /L）和BMSCs治疗C组（5×10⁹ /L）,每组10只。采用非暴露式气管插管一次性灌注二氧化硅（SiO2）粉尘混悬液法建立大鼠矽肺模型,并给予不同剂量BMSCs干预治疗,各组大鼠于21 d处死取材。采用HE染色和Masson染色观察肺组织形态学变化;免疫组织化学法检测肿瘤坏死因子α（TNF-α）和转化生长因子β（TGF-β）的定位和分布;免疫印迹法检测TNF-α、TGF-β、Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原的蛋白表达量;免疫荧光法检测性别决定区Y(SRY)蛋白证实BMSCs的归巢。结果：矽肺模型组较对照组大鼠有明显炎症细胞浸润、矽结节形成、胶原沉积等病理改变,BMSCs治疗A组较矽肺模型组病理改变有所缓解,BMSCs治疗B组病情缓解更加显著,但BMSCs治疗C组较矽肺模型组病理改变加重。大鼠肺组织TNF-α、TGF-β、Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原表达的情况：BMSCs治疗C组>矽肺模型组>BMSCs治疗A组>BMSCs治疗B组>对照组,除BMSCs治疗C组与矽肺模型组比较差异无统计学意义外（P>0.05）,其它各组间比较差异均有统计学意义（P<0.05）。激光扫描共聚焦显微镜观察到BMSCs治疗B组大鼠肺组织中SRY阳性表达,心、肝、脾、肾组织中未见明显表达。结论：外源性BMSCs移植对大鼠矽肺纤维化有一定的拮抗作用,并且存在剂量-效应关系。     

骨髓间充质干细胞修复急性呼吸窘迫综合征

BACKGROUND:To date little is reported clinically on bone marrow mesenchymal stem cells (BMSCs) for acute respiratory distress syndrome (ARDS). OBJECTIVE:To study the effect of BMSCs in ARDS rats. METHODS:Sixty-three Sprague-Dawley rats were randomly assigned into normal control group, model and BMSCs groups (n=21 per group), followed by establishment of ARDS models. After awakening, rats in the model group were given no treatment, while those in the BMSCs group given tail vein injection of fluorouracil-labeled BMSCs. Then, pathological observation of the lung tissue was conducted using hematoxylin-eosin staining, and ELISA method was employed to detect interleukin-1β level in the rat lung tissue homogenates. Repair effects on lung injury were compared between two groups. RESULTS AND CONCLUSION:Hematoxylin-eosin staining showed that inflammation, edema and congestion in the rat lung tissue were vanished gradually, but no consolidation was found in the BMSCs group, while there was visible edema and congestion in the lung tissue of rats in the model group. Compared with the model group, pulmonary edema and interleukin-1β level in the lung tissue were significantly reduced in the BMSCs group (P < 0.05). Therefore, the whole bone marrow culture method is suitable to obtain BMSCs that have desired effects on ARDS in rats. In ARDS rats, due to inhalation of lipopolysaccharide, BMSCs can be directly involved in lung epithelial repair by reducing the release of inflammatory factors.     

电针刺激联合BMSCs移植对脑出血大鼠出血灶周边区水通道蛋白4表达的影响

目的　探讨骨髓间充质干细胞（BMSCs）移植与电针刺激联合治疗对脑出血大鼠出血灶周边区水通道蛋白4（AQP-4）表达的影响。 方法　向成年SD大鼠右侧尾状核注射肝素和胶原酶诱导脑出血,并于术后第3天向出血灶移植BMSCs后施以电针刺激（Ea-BMSCs组）,同时设置BMSCs移植组（BMSCs组）、生理盐水移植组（Control组）和电针刺激组（Ea组）。各组分别于治疗后1、3、5、7和14 d收集脑组织标本,采用干湿法检测脑组织水含量,免疫组化和Western Blotting检测出血灶周边区AQP-4的表达变化。采用单因素方差LSD法进行统计分析。 结果　① AQP-4表达在软脑膜、大脑皮质、侧脑室脉络组织以及出血灶周边脑区,且与GFAP共表达于星形胶质细胞上。② 各实验组脑组织水含量在第3天开始升高,第5天达峰值,随后逐渐降低。③各组AQP-4蛋白在第3天开始升高,第5天达峰值,Control组和Ea组在达峰值后未见升高,而BMSCs组和Ea-BMSCs组在第14天再度出现峰值。 ④在第5天和第7天时,Ea-BMSCs组、BMSCs组AQP-4表达均低于Control组（P＜0.05）,Ea-BMSCs组与BMSCs组之间表达无差异;在第14天时,Ea-BMSCs组AQP-4表达高于Control组和BMSCs组（P＜0.05）。 结论　电针刺激联合BMSCs移植可显著降低脑组织水含量,可能与电针刺激使移植后表达上调的AQP-4活化发挥水转运功能有关。     

黄芪皂甙Ⅳ联合骨髓间充质干细胞对脑缺血再灌注大鼠血管生成的影响

目的研究黄芪皂甙Ⅳ联合骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cell,BMSCs)移植对大鼠脑缺血再灌注模型血管生成和神经功能的影响。方法采用线栓法建立大鼠大脑中动脉缺血模型,随机分为模型组、黄芪皂甙Ⅳ组、BMSCs组、黄芪加BMSCs组(联合组),应用PKH-26染色标记移植的BMSCs,NSS法检测神经功能恢复情况,免疫组化染色检测基质细胞衍生因子-1(stromal cell-derived factor-1,SDF-1)和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)蛋白表达,CD34标记血管内皮细胞并计数微血管密度(MVD)。结果与模型组和黄芪皂甙Ⅳ组比较,黄芪加BMSCs组和BMSCs组均能使大鼠神经功能损害评分降低,以黄芪加BMSCs组恢复最为明显(P<0.05)。与模型组比较,黄芪皂甙Ⅳ组SDF-1蛋白表达显著增加(P<0.05)。黄芪加BMSCs组PKH-26标记的细胞个数显著高于BMSCs组(P<0.05)。治疗组VEGF和MVD表达均显著高于模型组,其中黄芪加BMSCs组表达最为显著(P<0.05)。结论联合组促进脑缺血损伤血管生成和神经功能恢复的作用优于单独治疗组,其机制可能与黄芪皂甙Ⅳ上调脑缺血区SDF-1表达,促进移植的BMSCs迁移和存活有关。     

Protective action of ultrasound-guided intraparenchymal transplantation of BMSCs in adriamycin nephropathy rats through the RIPK3/MLKL and NLRP3 pathways

BackgroundBone marrow stromal cells (BMSCs) are an effective new strategy for the treatment of kidney diseases. At present, noninvasive and efficient transplantation approaches to homing BMSCs to the renal parenchyma is still a serious challenge. The aim of this study was to investigate the feasibility and potential mechanism of ultrasound-guided intraparenchymal transplantation of BMSCs for the treatment of adriamycin nephropathy (AN) in rats.Materials and methodsA rat AN model was induced by 2 injections of doxorubicin. The rats were randomly divided into 4 groups (n = 10 animals in each group) : normal group (N group, no treatment), control medium group (CM group, transplant medium 1.0 mL), adriamycin nephropathy group (ADR group, phosphate buffered saline 1.0 mL), or BMSCs group (BMSCs fluid 1.0 mL). Intraparenchymal injection was completed under ultrasound guidance. After 4 weeks of treatment, blood samples were collected for serum biochemical measurements and ELISAs. The kidneys were removed for histopathological examination, electron microscopy, terminal deoxynucleotidyl transferase dUTP nick end labelling (TUNEL), and western blot analysis.ResultsNo deaths occurred in any group after BMSCs transplantation through the renal parenchyma under ultrasound guidance. Compared with the N and CM groups, in the ADR group, blood serum creatinine (SCr), blood urea nitrogen (BUN) and urine albumin (ALb) were higher, glomerular and tubular dilatation was observed, the number of apoptotic cells was higher, and the protein levels of receptor-interacting protein kinase 3 (RIPK3)/mixed lineage kinase domain-like protein (MLKL) and nucleotide leukin-rich polypeptide 3 (NLRP3), key components of pathways in rat kidney, were significantly higher. Compared with those in the ADR group, the levels of SCr, BUN, ALb and serum proinflammatory cytokines in the BMSCs group were lower, the pathological structure of the kidney was improved, the number of apoptotic cells was lower, and the levels of RIPK3/MLKL and NLRP3 were significantly lower.ConclusionUltrasound-guided intraparenchymal transplantation of BMSCs regulated the RIPK3/MLKL and NLRP3 pathways in a minimally invasive and safe manner, thereby inhibiting renal necrosis and inflammation and playing a protective role in rat AN.     

促红细胞生成素对急性肾损伤大鼠肾小管细胞凋亡和p-MAPKAPK-2表达的影响

目的:探讨促红细胞生成素(EPO)对急性肾损伤大鼠肾小管细胞凋亡和MAPKAPK-2水平的影响.方法:30只SD雄性大鼠分为假手术组、模型组、EPO治疗组,假手术组仅分离肾被膜后逐层关闭腹腔;模型组采用缺血再灌注法建立急性肾损伤模型;EPO治疗组为急性肾损伤大鼠腹腔注射EPO 50 U/kg,每周3次,共6周,其余大鼠...     

骨髓间充质干细胞调节大鼠视神经损伤后小胶质细胞的活化

背景:外伤性视神经损伤是引起视力丧失的重要原因,治疗方法也比较局限,为探求更好的治疗方法,该实验从小胶质细胞方向入手进行探究。在神经病理条件下,激活小胶质细胞能够维持中枢神经系统的稳定,但小胶质细胞过度活化会产生大量的炎症因子,使损伤进行性加重。目的:探讨视神经损伤后小胶质细胞活化情况以及骨髓间充质干细胞对其过度表达的调节作用。方法:选取8周龄SD大鼠18只,将其随机分为移植组、模型组和假手术组,每组6只,其中模型组、移植组选取左眼进行视神经钳夹造模后分离视网膜和视神经,假手术组只分离视网膜和视神经,不进行钳夹,移植组在损伤后立即向左眼玻璃体内注入第3代骨髓间充质干细胞(注入细胞1×108,细胞量为2μL),模型组、假手术组玻璃体内注入等量的PBS,术后15 d全部处死,在灌流固定后取视网膜连带视神经用于苏木精-伊红染色和免疫组织化学检测。结果与结论:模型组视神经及视网膜小胶质细胞活化标记物Ox-42以及炎症因子TNF-α的表达量均高于假手术组(P<0.05),移植组视神经及视网膜中Ox-42和TNF-α表达量降低(P<0.05)并且接近假手术组水平。结果表明,小胶质细胞的过度活化与视神经损伤相关,骨髓间充质干细胞可以抑制小胶质细胞过度活化及炎症因子的释放,从而在一定程度上保护视网膜和视神经免受损伤。