GH与EGFR受体后信号交联在GH促进青春期大鼠生长板软骨细胞增殖中的作用

目的: 观察促性腺激素释放激素类似物(GnRHa)处理后青春期大鼠生长板体外培养的软骨细胞内是否存在生长激素(GH)与表皮生长因子受体(EGFR)之间的信号交联(cross-talk)。方法: 3周龄雌性SD大鼠开始注射GnRHa至7周龄;随后分离培养5-8只大鼠胫骨生长板软骨细胞,在GH作用前分别加入JAK2阻断剂AG490(1 nmol/L、10 nmol/L和100 nmol/L)、EGFR酪氨酸激酶阻断剂AG1478(0.1 nmol/L、1 nmol/L和10 nmol/L)和表皮生长因子(EGF)中和抗体(0.1 mg/L、1 mg/L和10 mg/L);采用四氮甲基唑蓝(MTT)以及免疫组化法测定增殖细胞核抗原(PCNA),观察不同阻断剂对软骨细胞增殖的影响;采用Western blotting检测软骨细胞p-ERK1/2及p-EGFR的表达。结果: GH作用后具有浓度依赖性地促进软骨细胞增殖和增加p-ERK1/2及p-EGFR水平的作用,100 μg/L时作用最为明显。AG490及AG1478几乎能完全抑制GH促进软骨细胞增殖和激活ERK1/2及EGFR的作用。 而EGF中和抗体仅能部分抑制GH的作用。结论: GH通过激活JAK2而激活其下游的ERK通路,实现其直接促细胞增殖效应。GH亦能通过激活EGFR及其信号转导通路促进细胞增殖效应,表明GH通路和EGF通路间存在相互作用。     

雌激素与C型利尿钠肽介导的青春期线性生长的关系

 目的：探讨青春期女孩雌激素与C型利尿钠肽（C-type natriuretic peptide, CNP）介导的长骨生长的关系,及两者在中枢性性早熟女孩GnRHa治疗相关身高增长减速中的作用。方法：（1）检测56例正常不同青春发育期女孩空腹血清雌二醇（E2）、CNP的N端前肽（N-terminal propeptide of CNP, NT-proCNP）、胰岛素样生长因子1（insulin-like growth factor 1, IGF-1）以及骨形成生化标志物N端中段骨钙素（N-terminal mid-fragment of osteocalcin, N-MID OC）的浓度。（2）检测13例特发性中枢性性早熟（idiopathic central precocious puberty, ICPP）女孩在促性腺激素释放激素类似物（gonadotropin-releasing hormone analogue, GnRHa）治疗开始、治疗6个月末及12个月末时血清E2、NT-proCNP、IGF-1和N-MID OC水平,并计算身高增长速度（height velocity, HV）。结果：(1) 在56例正常不同青春发育期女孩中,与青春前期相比,血清NT-proCNP、IGF-1、E2和N-MID OC浓度均自青春早期开始升高（P<005或P<0.01）;血清NT-proCNP在青春中期维持高水平,至青春后期达峰值（P<005）;血清IGF-1和E2浓度于青春中期继续升高（P<0.01）,亦至青春后期达峰值（P<0.01）;血清N-MID OC浓度于青春中期达到峰值（P<0.05）,青春后期则开始下降（P<0.05）。(2) ICPP女孩GnRHa治疗6个月末HV、血清NT-proCNP和血清N-MID OC均较治疗开始时显著下降（P<0.05）,但与12个月末相比无显著差异;GnRHa治疗开始、治疗6个月末和12个月末后血清IGF-1浓度无显著差异;治疗后血清E2显著下降并回复至青春前期水平（P<0.05）。结论：女孩血清NT-proCNP水平随青春发育进程升高,与血清E2和IGF-1浓度平行,提示女孩青春期升高的雌激素在一定程度上可诱导CNP介导的青春期生长加速。ICPP女孩经GnRHa治疗后,随着雌激素受抑,生长速度减慢,血清NT-proCNP浓度下降,并与生长速度和骨形成平行,提示GnRHa致ICPP女孩生长减速部分缘于雌激素被抑制后CNP介导的长骨生长减慢。