血清γ—GT活性固定时间测定法

γ－ＧＴ测定有利于筛选肝胆疾病，辅助诊断原发性肝癌，区别于阻塞性或肝细胞性黄疸；判断急性肝炎是否治愈；肯定慢性肝炎及肝硬化的活性期及预后。区别升高的ＡＫＴ是骨源性或肝源性等作用。本法根据ＩＦＣＣ推荐方法（１），自配试剂用固定时间法测定γ－ＧＴ活性，用酶活性在４３－１６５Ｕ／Ｌ血清测定，Ｃγ＝３．１０％，ＳＤ＝３．０２Ｕ／Ｌ。与美国ＢＥＣＫＭＡＮ试剂盒比较（４），γ＝０．９８７１相关密切，精密度和准     

3－磷酸甘油脱氢酶偶联法测定血清醛缩酶活性

探讨用３－磷酸甘油脱氢酶偶联法测定血清中醛缩酶（ＡＬＤ）活性的最佳反应条件。反应体系的终末浓度：ＴＥＡ１００ｍｍｏｌ／Ｌ，ＦＤＰ４ｍｍｏｌ／Ｌ，碘乙酸０．２２ｍｍｏｌ／Ｌ，ＮＡＤＨ０．２６ｍｍｏｌ／Ｌ，ＧＤＨ≥１０００Ｕ／Ｌ，ＴＰＩ≥１５００Ｕ／Ｌ，ＬＤ≥１０００Ｕ／Ｌ。最适ｐＨ在７．８～８．０，Ｋｍ为７．２×１０－３ｍｍｏｌ／Ｌ。批内ＣＶ：酶活性在７．３４Ｕ／Ｌ和６５．０６Ｕ／Ｌ时，ＣＶ分别为５．７％和１．４％；批间ＣＶ：酶活性在１１．８９Ｕ／Ｌ和１００．０８Ｕ／Ｌ时，ＣＶ分别为６．０％和３．３％，酶活性线性范围至少可达１８０Ｕ／Ｌ。健康人６０名，ＡＬＤ活性为４．５３±１．１７（ｘ±ｓ）Ｕ／Ｌ，男女两组均值无显著性差异。本文对ＴＥＡ－ＨＣｌ（ｐＨ８．０）、Ｔｒｉｓ－ＨＣｌ（ｐＨ８．０）和Ｃｏｌｉｄｉｎｅ－ＨＣｌ（ｐＨ７．５）三种缓冲液用于ＡＬＤ活性测定效果进行了评价，结果表明在ＴＥＡ缓冲液中所测ＡＬＤ活性最高；ＴＥＡ和Ｃｏｌｉｄｉｎｅ两种缓冲液的浓度在２５～１５０ｍｍｏｌ／Ｌ范围内对ＡＬＤ活性无影响，Ｔｒｉｓ缓冲液在５０ｍｍｏｌ／Ｌ时测得酶活性较高，缓冲液浓度过高或过低，酶活性均有所下降     

γ-GT试剂在四种反应温度中的试剂空白速率

我们发现γ－ＧＴ试剂的空白速率冬季高于夏季，且同一试剂在不同仪器中有明显差别，遂对γ－ＧＴ试剂在不同反应温度中的试剂空白速率作了一组试验。现报告如下。１材料和方法１．１仪器和试剂ＣＯｂａｓＦＡＲＡ离心式自动分析仪。γ－ＧＴ测定试剂盒（底物为Ｌ－γ－谷...     

匀相法直接测定血清低密度脂蛋白胆固醇

目的 探讨匀相法直接测定血清低密度脂蛋白胆固醇的价值。方法 用９７０７Ａ ＬＤＬ－ｃ试剂盒及ＢＥＣＫＭＡＮ ＣＸ７自动生化分析仪直接测定血清ＬＤＬ－ｃ含量。 结果（１）批内变异ＣＶ％为．５５２％￣０．８０５％,批间变异ＣＶ％〈１％;（２）线性关系良好,直线范围可达４．９５９ｍｍｏｌ／Ｌ;（３）经与聚乙烯硫酸沉淀（ｐｖｓ）法测定对照３０例,ｒ＝０．９４１,Ｐ〈０．０５,呈显著相关,回归方程为Ｙ＝０．     

用GCNA作基质终点比色法测定血清LDL－VLDL－GGT

用ＧＣＮＡ作基质终点比色法测定血清ＬＤＬ－ＶＬＤＬ－ＧＧＴ孙明洪（新余钢铁公司第一医院，江西新余３３６５１３）我们参考文献［１，２］，用ＰＥＧ６０００分离ＬＤＬ、ＶＬＤＬ，γ－Ｌ－谷氨酰－３－羧基－４－硝基苯胺（ＧＣＮＡ）作基质，混合有机酸中止反应，...     

3—磷酸甘油脱氢酶偶联法测定血清醛缩酶活性

探讨用３－磷酸甘油脱氢酶偶联法测定血清中醛缩酶（ＡＬＤ）活性的最佳反应条件。反应体系的终末浓度；ＴＥＡ１００ｍｍｏｌ／Ｌ，ＦＤＰ４ｍｍｏｌ／Ｌ，磷惭酸０．２２ｍｍｏｌ／Ｌ，ＮＡＤＨ０．２６ｍｍｏｌ／Ｌ，ＧＤＨ≥１０００Ｕ／Ｌ，ＴＰＩ≥１５００Ｕ／Ｌ，ＬＤ≥１０００Ｕ／《Ｌ。最适ＰＨ在７．８－８．０，Ｋｍ为７．２×１０＾－３ｍｍｏｌ／Ｌ批内ＣＶ；酶活性在７．３４Ｕ／Ｌ和６５．０９６Ｕ／Ｌ时，ＣＶ分别     

用亚乙基封闭的G7—pNP作底物偶联多功能的α—葡萄糖苷酶测定淀粉酶

建立了用亚乙基封闭的Ｇ７－ｐＮＰ（ＥＰＳ）作底物并偶联多功能α－葡萄糖苷酶测定α－淀粉酶（Ａｍｙ）的方法学。ＥＰＳ的稳定性好，工作试剂贮２～８℃可稳定２１天；室温（３０℃）稳定７天。由于多功能的α－葡萄糖苷酶对所有的ＥＰＳ残基（Ｇ１～Ｇ５）有相同的水解力，使色团ｐＮＰ１００％回收，通过计算ｐＮＰ的摩尔消光系数容易做到标准化。本法的延滞相较短（＜９０秒），零级反应时间＞１０分钟，线性范围达２０００Ｕ／Ｌ，分析总ＣＶ＜３．０％，本法（Ｙ）与ＢＭ公司的试剂（Ｘ）比较：ｒ＝０．９９８８，Ｙ＝１．０５４Ｘ－６．６。     

用Triton X－100作加速剂测定胆红素

本文应用Ｔｒｉｔｏｎｘ─１００作为加速剂，利用重氮试剂配制成单一测定Ｔ．Ｂｉｌ试剂。该试剂能适用于自动生化分析仪和手工测定Ｂｉｌ，最大吸收波长５４８ｎｍ，摩尔吸光系数ε＝７１．６×１０￣３，胆红素在３０７．８μｍｏｌ／Ｌ内线性良好，平均回收率１００．８５％，批内ＣＶ＝１．１０４％，血清中Ｈｂ≥５ｇ／Ｌ时，ＴＧ≥８ｍｍｏｌ／Ｌ时对Ｂｉｌ测定产生明显影响。经与Ｔｒａｃｅ试剂实验对照，γ＝０．９９８７．ｔ＝０．０２９４，Ｐ＞０．０５。γ＝０．９２２２．ｔ＝０．０９１．Ｐ＞０．０５。     

尿酶对碘造影剂肾毒性的早期评估

前瞻性观察１６例肾功能正常患者造影前、造影后２４，４８ｈ肾功能动态变化。造影后２４ｈ血尿素氮（ＢＵＮ）、血清肌酐（ＳＣｒ）无显著变化（Ｐ＞０．０５）、尿谷氨酰转肽酶（γ－ＧＴ）、Ｎ－乙酰基－β－Ｄ氨基葡萄糖苷酶（ＮＡＧ）、乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）较造影前显著增高（Ｐ＜０．０１）。造影后４８ｈＢＵＮ，ＳＣｒ显著增高（Ｐ＜０．０ｌ），尿γ－ＧＴ，ＮＡＧ，ＬＤＨ显著恢复（Ｐ＜０．０５）；但仍明显高于造影前，差异有显著性（分别Ｐ＜０．０１，０．０１，０．０５）。提示在肾功能正常患者泛影葡胺对肾小管损害呈一过性，尿γ－ＧＴ是评估碘造影剂肾毒性亚临床期敏感指标     

2-(8′-羟基喹啉-5′-磺酸-7′-偶氮)-变色酸测定血清镁

目的建立简便、灵敏、试剂稳定性好的２－（８′－羟基喹啉－５′－磺酸－７′－偶氮）－变色酸（８Ｑ５ＳＡＣ）血清镁测定法。方法用国内合成的８Ｑ５ＳＡＣ作显色剂，ＥＧＴＡ掩蔽钙，在甘氨酸－ＮａＯＨ缓冲体系中以分光光度法测定血清镁。结果该法线性０～３ｍｍｏｌ／Ｌ，平均回收率９８．１％，变异系数１．９２％～２．９８％。与Ｃａｌｍａｇｉｔｅ法对照，ｒ＝０．９９６，Ｐ＞０．２；与ＭＴＢ法对照，ｒ＝０．９８３，Ｐ＞０．２；测试灵敏度分别是上述方法的２．５倍和４．３倍。结论该法简便、灵敏、试剂稳定性明显优于ＭＴＢ法和Ｃａｌ－ｍａｇｉｔｅ法，适于血清镁的常规手工分析和自动分析。     

2—（8′—羟基喹啉—5′—磺酸—7′—偶氮）—变色酸测定血清镁

目的 建立简便，灵敏，试剂稳定性好的２－（８′－羟基喹啉－５′－磺酸－７′－偶氮）－变色酸（８Ｑ５ＳＡＣ）血清镁测定法，方法 用国内合成的８Ｑ５ＳＡＣ作显色剂，ＥＧＴＡ掩蔽钙，在甘氨酸－ＮａＯＨ缓冲体系中以分光光度法测定血清镁。结果 该法线性０～３ｍｍｏｌ／Ｌ，平均回收率９８．１％，变异系数１．９２％～２．９８％，与Ｃａｌｍａｇｉｔｅ法对照，ｒ＝０．９９６，Ｐ〉０．２；与ＭＴＢ法对照，ｒ＝０．９８     

神经生长因子对大鼠脑缺血后海马CA1区神经细胞凋亡的影响

目的：研究神经生长因子（ＮＧＦ）对缺血性脑损伤中神经细胞凋亡的影响。方法：采用大鼠全脑缺血模型，ＴＵＮＥＬ方法原位标记ＤＮＡ片段，观察脑室内注射ＮＧＦ后海马ＣＡ１区神经细胞凋亡的变化。结果：使用ＮＧＦ后３日海马ＣＡ１区ＴＵＮＥＬ阳性神经细胞数为锥体细胞总数的１３．９％±１１．６％，与缺血对照组（２１．３％±１３．７％）比较显著减少（Ｐ＜０．０１）。结论：外源性ＮＧＦ对脑缺血所致的神经细胞凋亡可能具有一定的保护作用     

66例老年冠心病患者脂蛋白分析

目的 探讨老年冠心病（ＣＨＤ）患者的脂蛋白特点。方法 取健康老年组与ＣＨＤ组做对照，分别做血清十项指标检测。包括ＴＣ，ＴＧ用酶法测定，ＨＤＬ－Ｃ．ａｐｏＡ．Ｂ．ＣⅡＣⅢ．Ｅ及Ｌｐ（ａ）用免疫比浊法测定。ＬＤＬ－Ｃ依据公式计算。结果 健康老年组与ＣＨＤ组比较，ＴＣ．ＴＧ．ＨＤＬ－Ｃ．ＬＤＬ－Ｃ．ａｐｏＡ，ａｐｏＢ，Ｐ〈０．００１；ａｐｏＣⅡ，Ｐ〈０．０１。ＴＧ．ＴＣ分别与ａｐｏＣⅡ．ａｐｏＣⅢ极相关     

猪肾“轻型”GGT的提纯及动力学研究

为了制备ＧＧＴ测定的标准品，研究了猪肾“轻型”γ－谷氨酰移换酶（ＧＧＴ）的提取方法及动力学特性。这种“轻型”酶的比活性达３２０ｋＵ／ｇ蛋白，几乎不含其它杂酶类，每１００ＵＧＧＴ中仅含０．２６Ｕ的乳酸脱氢酶。聚丙烯酰胺梯度凝胶电泳显示一条ＧＧＴ活性区带。其催化特性和人血清ＧＧＴ非常相似，最适ｐＨ为７．８，对供体底物Ｌ－γ－谷氨酰－３－羧基－４－硝基苯胺的米氏常数（ＫＤｍ）为０．９６ｍｍｏｌ／Ｌ，对受体底物甘氨酰甘氨酸的米氏常数（ＫＡｍ）为１２．７ｍｍｏｌ／Ｌ。     

一种新的中性粒细胞碱性磷酸酶染色方法

一种新的中性粒细胞碱性磷酸酶染色方法韩建勋宋星宇陈晓丹杨双发夏兰在我国，中性粒细胞碱性磷酸酶（ＮＡＰ）染色通常用Ｇｏｍｏｒｉ’ｓ或Ｋａｐｌｏｗ’ｓ法及其相应改良法［１，２］。我们将非放射性标记ＤＮＡ的ＢＣＩＰ－ＮＢＴ碱性磷酸酶显色系统［３］应用于ＮＡ...     

血清α-醋酸萘酯酶同工酶琼脂糖凝胶电泳法及临床应用

为简化α－醋酸萘酯酶同工酶检查技术，建立琼脂糖凝胶电泳法。１０ｇ／Ｌ琼脂糖－ＰＶＰ和ｐＨ７．４０．１ｍｏｌ／ＬＴｒｉｓ－ＨＣｌ缓冲液，泳池ｐＨ８．６，μ＝０．０６巴比妥缓冲液，滤纸刺槽加样，电压１５０Ｖ，电流２ｍＡ／ｃｍ电泳４０ｍｉｎ，搭桥填充染色。染色液由α－醋酸萘酯ｐＨ６．２０．１ｍｏｌ／ＬＰＢ液和固蓝Ｂ盐组成，３７℃染色２０ｍｉｎ，醋酸漂洗比色。结果对照组（ｎ＝３０）α－ＡＮＥ同工酶谱带３～４条（Ｅ１、Ｅ１ａ、Ｅ２、Ｅ３）着色强度Ｅ３＞Ｅ１＞Ｅ１ａ＞Ｅ２，ｘＥ３占８８％，Ｅ１～Ｅ２１２％左右，相对电泳位置Ｅ１：ｐｒｅＡｌ／Ａｌ，Ｅ１ａ：Ａｌ／α１，Ｅ２：ｐｒｅ－α２，Ｅ３：α２／β，Ｒｆ分别为０．５４５、０．５２７、０．４３６、０．３６４。Ｅ３区组成复杂，用ＮＡＮＡ酶水解和ＷＧＡ亲加试验证明它富含ＳＡ和ＧｌｃＮＡＣ的一组不均一的糖蛋白。谱形异常的典型病例有Ⅰ型在症糖尿病和部分肝癌患者，它除有正常谱带外，前者多Ｅ４和Ｅ５，其色度比（％）Ｅ４０．１１４，Ｅ５０．１９８，相对电泳位置在β和β与Ｐｒｅ－γ之间，Ｒｆ＝０．２５４，０．１８２。肝癌病人谱带也多１～２条（Ｅ５和Ｅ６）位于Ａ／ｐｒｅ－γ和ｐｒｅ－γ，     

钼酸铵显色法测定血清过氧化氢酶

介绍一种简便的以钼酸铵显色的血清过氧化氢酶分光光度测定法。该法酶活性在１００ｋＵ／Ｌ内呈良好线性。批内变异ＣＶ＝３．６％，天间变异ＣＶ＝４．５７％。平均回收率为１００．１４％。高ＴＧ、高Ｂｉｌ血清标本，可使Ａ值增加，但不影响Ｃａｔ测定值。ＶｉｔＣ、肝素均可使酶活性减低。由于红细胞内富含Ｃａｔ，溶血标本能显著增加酶活性。血清标本酶活性在－４℃４８ｈ内无变化，在－２５℃能保持５～６周。３８８例体检健康者血清Ｃａｔｘ＝５７．６１ＫＵ／Ｌ，经Ｄ检验，当Ｐ＝０．０５时，属正态分布；Ｐ＝０．１时，属非正态分布。中位数（Ｍｄ）＝５６．２２ＫＵ／Ｌ，百分位数法计算，其９５％范围为２１．５８～１０８．８７（ｋＵ／Ｌ）。初步观察１１９例患者Ｃａｔ活性，显示各类癌症患者Ｃａｔ活性明显减低。     

改良凝胶吸附法制备的凝血酶原复合物

采用ＤＥＡＥ－ＳｅｐｈａｄｅｘＡ５０和ＤＥＡＥ－ＳｅｐｈａｒｏｓｅＣＬ－６Ｂ凝胶从人血浆中吸附制备经Ｓ／Ｄ病毒灭活处理后的ＰＣＣ制品，ＤＥＡＥ洗脱液经Ｓ／Ｄ处理（０．３％磷酸三丁脂和１％Ｔｗｅｎ８０，６～８ｈ，２４℃）后，使所加入具有感染剂量（＞１０６）的标志病毒ＶＳＶ、Ｓｉｎｄｂｉｓ、ＨＩＶ均被有效灭活；ＰＣＣ制品中Ⅱ、Ⅶ、Ⅸ、Ⅹ因子的比活性（Ｕ／ｍｇ）分别为０．７９９±０．３４９、０．３４３±０．２５２、０．７４７±０．３４８、０．５８０±０．１９９（ｎ＝７），均比传统ＰＣＣ提高１．５～２．５倍（其中ＦⅨ∶Ｃ的比活性提高有显著性，ｔ＝３．１０５，Ｐ＜０．０１），同时也优于国内同类制品（ｔ＝２．３６０，Ｐ＜０．０５），对其杂蛋白（ＡＴ－Ⅲ、Ｆｎ、ＰＫＡ、Ｐｌｇ、ⅧＲ∶Ａｇ抗Ａ、抗Ｂ凝集素）的分析也反映出ＰＣＣ纯度有所提高。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ、ＩＥ、ＣＩＥ电泳图谱及ＨＰＬＣ层析图谱证实上述结果，ＰＣＣ中ＴＮＢＰ残留量≤１０μｇ／ｍｌ，Ｔｗｅｅｎ８０残留量≤１００μｇ／ｍｌ，均在安全范围内。     

T淋巴细胞识别自体慢性粒细胞白血病肿瘤细胞抗原的研究

目的：验证慢性粒细胞白血病（ＣＭＬ）患者体内是否存在细胞毒Ｔ淋巴细胞前体细胞，并鉴定其表型和功能特征。方法：用混合淋巴瘤细胞培养技术，用自体瘤细胞和细胞因子刺激扩增ＣＭＬ患者骨髓和外周血单个核细胞（ＭＮＣ）。结果：ＣＭＬ缓解期和慢性期均存在对自体和异体ＣＭＬ细胞杀伤活性的Ｔ淋巴细胞，这些细胞对自体和异体正常ＭＮＣ没有杀伤活性，对正常ＣＦＵ－ＧＭ无抑制作用。而ＬＡＫ细胞对自体ＣＭＬ细胞无杀伤活性（＜１０％），只对异体ＣＭＬ细胞有杀伤活性。上述Ｔ细胞包括ＣＤ３＋ＣＤ５６＋非主要组织相容性抗原（ＭＨＣ）限制性Ｔ细胞，和ＣＤ３＋ＣＤ６－ＭＨＣ限制性Ｔ细胞。用自体ＣＭＬ细胞刺激可增加Ｔ细胞激活抗原ＣＤ２５和ＨＬＡ－ＤＲ的表达。上述Ｔ细胞对自体ＣＭＬ细胞呈较弱的增殖反应，对异体ＣＭＬ细胞几乎无增殖反应，对载有ＢＣＲ－ＡＢＬ肽的自体缓解期ＥＢ病毒转染Ｂ细胞也无增殖反应。结论：ＣＭＬ细胞可能有共同的肿瘤抗原，后者可以被Ｔ细胞识别，但尚无证据表明是ｐ２１０的融合区序列。     

尿液中α-淀粉酶的提纯及性质研究

为了制备淀粉酶测定的参考品，从正常人尿液中提取了α－淀粉酶（Ａｍｙ）并对其特性进行了研究。该提制品淀粉酶的经活性达８４．３ｋＵ／ｇ蛋白，几乎不含其它杂酶（测不到ＡＬＴ、ＳＡＴ、ＬＤ、ＣＫ、ＧＧＴ、ＣｈＥ、ＡＬＰ活性浓度）。ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电脉显示一条Ａｍｙ区带。其催化特性和人血清Ａｍｙ非常相似，用亚乙基封闭的Ｇ７－ＰＮＰ（ＥＰＳ）作底物，偶联多功能α－葡萄糖苷酶测定其米氏常数为０．１８９ｍｍ