分泌型短蛋白聚糖髓芯蛋白的mRNA在大鼠垂体中的表达

目的：研究分泌型短蛋白聚糖(brevican)髓芯蛋白的mRNA在大鼠垂体组织中的表达。方法：采用RT-PCR和原位杂交方法。结果：RT-PCR反应得到一段约400bp的DNA片段；原位杂交结果显示，腺垂体和神经垂体均可见分泌型brevican髓芯蛋白mRNA阳性细胞，胞质中可见杂交信号。腺垂体中分泌型brevican髓芯蛋白mRNA阳性细胞大小不一。结论：神经垂体和腺垂体均有分泌型brevican髓芯蛋白mRNA表达，brevican可能不是中枢神经系统特有的细胞外基质成分。     

细胞周期依赖激酶抑制剂Olomoucine对活化星形胶质细胞神经蛋白聚糖、短蛋白聚糖表达的抑制作用

目的研究细胞周期依赖激酶抑制剂Olomoucine对星形胶质细胞活化后神经蛋白聚糖(Neurocan)、短蛋白聚糖(Brevican)表达的抑制作用。方法应用睫状神经营养因子(CNTF)刺激法建立体外培养星形胶质细胞的活化模型,实验分3组:对照组、活化组与抑制组。对照组:正常培养的星形胶质细胞;活化组:星形胶质细胞加入20 ng/ml睫状神经营养因子(CNTF)处理24 h;抑制组:星形胶质细胞用20 ng/ml睫状神经营养因子预处理24 h,加入100μmol/L Olomoucine。应用ELISA法检测不同时间点(12 h、24 h、48 h)各组细胞上清液中Neurocan、Brevican含量变化,半定量RT-PCR检测各组细胞GFAP mRNA及Neurocanm RNA、Brevican mRNA的表达变化。结果(1)活化组上清液中Neurocan、Brevican的含量在12 h、24 h、48 h随着时间的延长逐渐增加,与对照组比较差异有显著性(P0.01);抑制组上清液中Neurocan、Brevican含量随着时间的延长较活化组明显降低,与对照组、活化组比较差异有显著性(P0.01)。(2)活化组细胞GFAP mRNA、Neurocan mRNA、Brevican mRNA表达明显增加,与对照组比较差异有显著性(P0.01);抑制组细胞GFAP mRNA、Neurocan mRNA、Brevican mRNA表达均明显下调,与活化组比较差异有显著性(P0.01)。结论细胞周期依赖激酶抑制剂Olomoucine可抑制活化星形胶质细胞神经蛋白聚糖、短蛋白聚糖表达。     

电针对急性脑梗死大鼠皮层神经蛋白聚糖表达的影响

目的 探讨电针治疗对脑梗死后不同时间点神经蛋白聚糖(neurocan)表达的影响.方法 将90只SD大鼠采用随机数字表分为假手术组、大脑中动脉闭塞(MCAO)模型组、电针治疗组.用电凝法建立MCAO模型,选取内关、外关、足三里、三阴交四穴给予电针刺激,连续治疗4周.选取1、2、4周三个时间点用免疫荧光检测neurocan蛋白的分布,应用实时荧光定量RT-PCR、Western blot方法 检测neurocan tuRNA、neurocan蛋白的表达情况. 结果 neurocan主要分布于梗死灶周同区域的胶质细胞及细胞间隙.MCAO模型组neurocanmRNA表达在梗死后1周明显增高,且梗死后2周(0.806±0.224)表达达峰值,持续至梗死后4周仍表达仍增多;电针治疗组neurocanmRNA表达在电针治疗后1周明显降低,而后逐渐下降,至4周(0.031±0.018)达最低值.MCAO模型组neurocan蛋白表达明显增高.且有逐渐升高趋势,术后4周(0.878±0.049)达最高值;电针治疗组neurocan蛋白表达在电针治疗后2周明显降低,而后逐渐下降,至4周(0.292±0.042)达最低.以上差异均有统计学意义(P均<0.05). 结论 电针对脑梗死后neurocan的表达增加起抑制作用,这可能是电针抑制胶质瘢痕形成的机制之一.     

伽玛刀治疗分泌型垂体腺瘤

目的 评价伽玛刀治疗分泌型垂体腺瘤在控制肿瘤生长和改善内分泌异常方面的作用和疗效。方法从1997年7月到2002年12月,对106例接受伽玛刀治疗分泌型垂体腺瘤患者随访期12～69个月。对其影像学,内分泌水平,临床症状和并发症进行统计研究。结果106例患者均完成随访,对随访终点指标的评价表明随着时间的延长．垂体腺瘤瘤体得到有效控制、激素水平逐步下降、临床症状得到改善和并发症少。结论伽玛刀治疗垂体腺瘤对控制肿瘤生长和改善内分泌异常的作用均是安全和有效的,且并发症少。     

蛋白质组学在垂体腺瘤差异表达蛋白检测中的应用进展

双向聚丙烯酰胺凝胶电泳与质谱技术、生物信息学的结合,使得将蛋白质组学技术应用于临床肿瘤的研究中成为可能。比较蛋白质组学中的很多方法已经应用于肿瘤研究的不同领域。垂体腺瘤是临床常见颅内良性肿瘤,因激素分泌异常和肿瘤占位压迫引起一系列临床症状。应用比较蛋白质组学研究垂体腺瘤,发现差异表达蛋白质,并对这些差异表达蛋白质的翻译后修饰,尤其是对磷酸化修饰方面进行深入研究,有望为研究垂体腺瘤的分子发生机制、生物标志物、早期诊断和治疗提供新的思路。     

切口蛋白受体3在非功能性垂体腺瘤中的表达

目的 探讨切口蛋白受体3(notch3)在非功能性垂体腺瘤发病机制中的作用. 方法 收集无锡市第二人民医院神经外科自2005年1月至2011年12月收治的16例被病理证实为非功能性垂体腺瘤的肿瘤标本,以及5例正常垂体组织(通过通过组织捐赠获得),采用逆转录-聚合酶链反应、免疫印迹法、免疫组化等方法观察notch3 mRNA及蛋白在非功能性垂体腺瘤和正常垂体组织中的表达情况. 结果 在非功能性垂体腺瘤组织中,notch3mRNA及蛋白表达均显著上调,高于正常垂体组织,差异有统计学意义(P＜0.05). 结论 Notch3蛋白的过度表达可能在非功能性垂体腺瘤的生长过程中具有重要意义.     

趋化因子mRNA在多发性硬化中的表达

目的：本研究观察了多发性硬化（MS）患者趋化因子mRNA在周围血及CSF中的表达。方法：采取MS得外周血及CSF,以其他非炎性神经系统疾病（OND）及健康人（HC）为对照组,分离单个核细胞（MNC）,在完全培基中与自身抗原MBP,对照抗原AChR培养,3d后收集细胞,涂片,用地高辛标记的寡核苷酸探针进行原位杂交（ISH）,检测C－C趋化因子单核细胞炎性蛋白－1α/β(MIP-1α/β）,单核细胞趋化蛋白（MCP－1）及正常T细胞表达及分泌的调节活性因子（RANTES）mRNA的表达。结果：MS患者外周血中MIP－1α／β,MCP－1及RANTES mRNA阳性细胞表达,与OND组及HC组相比明显增高,差异显著,MS患者CSF中MNC的MIP1α及RANTES mRNA高于OND组,差异有显著性;MS急性期外周血中MBP刺激的MIP－1αmRNA与MS缓解期相比差异不明显,而急性期MBP刺激的MCP－1 mRNA阳性细胞数多于其缓解期;MS患者急性期CSF内RANTES mRNA阳性细胞数高于缓解期。结论：趋化因子可能参与MS的发病,与炎性细胞进入CNS有关。RANTES及MCP－1与MS的缓解－复发有关。     

人类大鼠肉瘤蛋白同源蛋白和高迁移率族蛋白A1在垂体腺瘤中的表达与侵袭性的关系

目的 研究人类大鼠肉瘤蛋白同源蛋白(V-Ha-Ras harvey rat sarcoma viral oncogene homolog,HRAS)和高迁移率族蛋白A1(High-mobility group A1,HMGA1)在侵袭性和非侵袭性垂体腺瘤组织中的表达情况及二者与垂体腺瘤侵袭性的关系.方法 60例垂体腺瘤手术标本按侵袭性垂体腺瘤综合判定方法分为侵袭组和非侵袭组,采用RT-PCR法检测HRAS和HMGA1的mRNA表达水平,采用免疫组织化学法及western blot法检测HRAS和HMGA1的蛋白表达水平,分析侵袭组和非侵袭组HRAS和HMGA1表达水平的差异.结果 60例垂体瘤患者中,28例为侵袭性垂体腺瘤,32例为非侵袭性垂体腺瘤.侵袭性垂体腺瘤组HRAS阳性表达率(22/28)、免疫印迹灰度值(1.25±0.16)、mRNA表达量(0.96±0.16)均高于非侵袭性腺瘤组(15/32、0.76±0.10、0.54±0.15)(P＜ 0.05),侵袭性垂体腺瘤组HMGA1阳性表达率(20/28)、免疫印迹灰度值(0.98±0.12)、mRNA表达量(1.12±0.20)均高于非侵袭性腺瘤组(14/32、0.66±0.09、0.52±0.19)(P＜ 0.05),差别具有统计学意义.结论 HRAS和HMGA1在侵袭性垂体腺瘤中表达上调,提示二者与垂体腺瘤侵袭性行为的发生有关.     

侵袭性垂体腺瘤的蛋白表达研究进展

侵袭性垂体腺瘤是指垂体腺瘤浸润性生长,侵犯硬脑膜、海绵窦、骨质等周围组织结构,手术治疗困难,术后容易复发,患者预后差.一般认为它介于良性的垂体腺瘤与恶性的垂体癌之间.为了探索侵袭性垂体腺瘤的发生机制,提高其诊断和治疗水平,越来越多的研究者着眼于侵袭性垂体腺瘤的蛋白表达特点.     

颞叶癫痫大鼠海马TrkB mRNA及其蛋白表达的动态变化

目的 探讨颞叶癫痫发作大鼠海马TrkB mRNA及其蛋白表达的动态变化特征。方法 建立匹罗卡品(PILO)颞叶癫痢大鼠模型,应用原位杂交及免疫组织化学方法分别检测致(?)大鼠海马齿状回、CA3区及CA1区TrkB nRNA及其蛋白质表达的变化。结果 PILO致(?)后3～6 h,海马齿状回颗粒细胞层、CA1、CA3区锥体细胞层TrkB mRNA表达显著增高(P<0.01),稍后TrkB蛋白表达也随之增高。第7-30 d,TrkB mRNA及其蛋白在齿状回、CA3区呈现第二次表达增强。结论在癫(?)发作早期,TrkB表达增强,提示其可能参与急性癫痫状态的发生;后期表达增强则可能参与了海马的可塑性反应而与慢性自发性发作形成有关。     

重症肌无力伴胸腺瘤患者胸腺组织蛋白4.1R mRNA的表达研究

目的探讨蛋白4.1R在重症肌无力(myasthenia gravis,MG)伴胸腺瘤患者胸腺组织中的表达情况。方法运用半定量RT-PCR方法检测7例胸腺瘤MG与7例正常对照组胸腺组织中蛋白4.1R的表达。结果胸腺瘤MG组胸腺组织中蛋白4.1R mRNA的相对表达水平为0.84±0.46,与对照组0.43±3.69相比明显增高,差异有统计学意义(P0.05)。结论蛋白4.1R在胸腺瘤MG患者胸腺组织中mRNA水平表达异常,可能干扰胸腺细胞的信号传导,从而影响胸腺细胞的增殖和活化,参与了MG的发生。     

Interleukin-18 mRNA expression in the rat pituitary gland

Substance P (SP) is a modulatory, pro-inflammatory neuropeptide. We investigated the role of the SP receptor, neurokinin-1 (NK-1), in EAE. Our data show that in the chronic phase, mice lacking NK-1 have improved mobility and decreased numbers of LFA-1 high CD4+ T cells and MOG-specific, IFN-γ producing CD4+ T cells. SR140333, an NK-1 antagonist, administered alone during the chronic phase of EAE was not sufficient to ameliorate symptoms. These results indicate that SP, through NK-1, contributes to maintenance of CNS inflammation, and combining NK-1 antagonists with conventional anti-inflammatory treatments may enhance the success of treatments for diseases like multiple sclerosis.     

Expression of mitochondrial tricarboxylate carrier TCC mRNA and protein in the rat brain

The tricarboxylate carrier protein catalyzes an electroneutral exchange across the mitochondrial inner membrane of tricarboxylate, dicarboxylate or phosphoenolpyruvate. We examined expression and localization of mitochondrial tricarboxylate carrier TCC mRNA and protein in the rat brain. TCC mRNA was ubiquitously expressed in all rat tissues examined and was abundant in brain, liver and kidney. TCC protein as well as mRNA was widely expressed in brain, and the protein expression was strong in neuronal cells in the hippocampus, the olfactory bulb, the corpus mamillare and the cerebellum. Our results suggest that this tricarboxylate carrier protein may contribute to biosynthesis and bioenergetics in neuronal cells in brain.     

Pro-opiomelanocortin mRNA and peptide co-expression in the developing rat pituitary.

Pro-opiomelanocortin (POMC) is synthesized in both the pituitary gland and the brain. Various peptide products of this precursor, namely beta-endorphin, ACTH and alpha-MSH are co-localized in the anterior lobe corticotrophs, all intermediate lobe cells and in hypothalamic neurons. Messenger RNA (mRNA) for POMC has further been shown to exist in these tissues. In this study, we have shown that POMC mRNA, and peptide accumulation as detected by in situ hybridization and immunocytochemistry, respectively, occur simultaneously within the rat pituitary gland during ontogeny and that their maturation occurs in parallel during prenatal and early postnatal development.