整合素在成年中枢神经系统中的分布和作用

整合素在成年ＣＮＳ中，主要分布在血管结构、神经纤维网、海马等部位，α４β１ 等在介导外周白细胞穿过血脑屏障中起作用，β１ 等增强星形胶质瘤细胞与ＥＣＭ分子的粘附，αＶβ３ 等促进恶性胶质瘤细胞入侵正常脑组织。此外，整合素还与阿耳茨海默氏病的发生、脑的衰老和ＣＮＳ生理可塑性形成等过程密切相关。本文尚提及其配体ＥＣＭ分子，如生腱蛋白、层粘连蛋白等的表达水平与ＣＮＳ损伤呈正相关。     

整合素β1与胶质瘤侵袭性的相关性研究

目的 探讨整合素β１在人脑胶质瘤细胞粘附和侵袭过程中的作用。方法 用免疫组化ＳＡＢＣ法，检测整合素β１在人脑胶质瘤细胞ＳＨＧ４４中的表达；用细胞粘附实验检测其在ＳＨＧ４４细胞粘附中的作用。结果 整合素β１可在人脑胶质瘤细胞ＳＨＧ４４中表达，抗整合素β１抗体可明显抑制人脑胶质瘤细胞ＳＨＧ４４对胶原蛋白Ｉ和胶原蛋白Ⅳ细胞外基质蛋白的粘附。结论 整合素β１在人脑胶质瘤细胞的粘附和侵袭过程中必不可少，抑制     

成年大鼠星形细胞经LPS、前炎症因子和免疫调节因子刺激后β-趋化因子的分泌

目的研究在中枢神经系统（ＣＮＳ）的炎症性疾病中,作为构成血脑屏障结构的组成部分之一,可引起白细胞浸润的星形细胞分泌趋化因子的影响因素。方法通过星形细胞体外培养,经不同细胞因子刺激,用原位杂交检测成年大鼠星形细胞β－家系趋化因子的ｍＲＮＡ表达。结果ＩＦＮ－γ可引起ＭＣＰ－１,ＲＡＮＴＥＳ,ＭＩＰ－１α和ＭＩＰ－１β的ｍＲＮＡ表达;ＴＮＦ－α可引起ＲＡＮＴＥＳ和ＭＩＰ－１β的ｍＲＮＡ表达;ＬＰＳ可引起ＭＩＰ－１α和ＭＩＰ－１β的ｍＲＮＡ表达。ＴＧＦ－β和ＩＬ－１０下调由ＬＰＳ引起的ＭＣＰ－１和ＭＩＰ－１α和ＭＩＰ－１βｍＲＮＡ表达。ＴＧＦ－β和ＩＬ－１０可抑制由ＴＮＦ－α引起的ＭＣＰ－１和ＲＡＮＴＥＳ的ｍＲＮＡ表达。ＩＬ－１０还可下调由ＴＮＦ－α引起的ＭＩＰ－１βｍＲＮＡ表达。结论成年大鼠体外试验中的星形细胞可由ＬＰＳ和前炎症因子刺激,产生β－家系趋化因子ｍＲＮＡ的表达。而调节因子如ＴＧＦ－β和ＩＬ－１０可抑制由ＩＦＮ－γ、ＴＮＦ－α和ＬＰＳ引起的β－家系趋化因子的ｍＲＮＡ表达。     

成年大鼠星形细胞经LPS,前炎症因子和免疫调节因？…

目的 研究在中枢神经系统（ＣＮＳ）的炎症性疾病中,作为构成血脑屏障结构的组成部分之一,可引起白细胞浸润的星形细胞分泌趋化因子的影响因素。方法 通过星形细胞体外培养,经不同细胞因子刺激,用原位杂交检测成年大鼠星形细胞β－家系趋化因子的ｍＲＮＡ表达。结果 ＩＦＮ－γ可引起ＭＣＰ－１,ＲＡＮＴＥＳ,ＭＩＰ－１α和ＭＩＰ－１β的ｍＲＮＡ表达;ＬＰＳ可引起ＭＩＰ－１α和ＭＩＰ－１β的ｍＲＮＡ表达。ＴＧＦ－β     

蛋白激酶C在鼻咽癌细胞周期中的作用

目的：探讨蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ）调控人鼻咽癌细胞ＣＮＥ－２Ｚ生长的机制，研究ＰＫＣ与ＣＮＥ－２Ｚ细胞周期的关系。方法：使用同位素标记有丝分裂法测细胞周期总时间及流式细胞仪（ＰＣＭ）测细胞周期；ＭＴＴ法测细胞增殖，蛋白－ＤＮＡ双参数法检测ＰＫＣα亚型在细胞周期中的分布。结果：细胞周期总时间为１８．５ｈ；各时相分别为Ｇ１期８．７ｈ，Ｓ期７．１ｈ，Ｇ２／Ｍ期３．９ｈ。作用于ＰＫＣ蛋白催化区的ＰＫＣ抑制剂Ｓ     

饰胶原蛋白聚糖与肾脏疾病

饰胶蛋白聚糖（ｄｅｃｏｒｉｎ,ＤＣＮ）是一种富含亮氨酸的小分子蛋白聚糖（ＳＬＲＰｓ）,普遍存在于ＥＣＭ中,ＤＣＮ能调节胶原合成;能与ｆｉｂｒｏｎｅｃｔｉｎ（ＦＮ）和ｔｈｒｏｍｂｏｓｐｏｎｄｉｎ－１（ＴＳＰ－１）结合,参与调节细胞的增生、迁移,并能中和ＴＧＦ－β活性及作为ＴＧＦ－β活性的一种负反馈调节因了。近来发现可以利用ＤＣＮ中和ＴＧＦ－β活性、减轻ＥＣＭ沉积这一特性治疗肾脏疾病。     

髓磷脂碱性蛋白促进单个核细胞对内皮细胞的粘附效应

目的：探讨ＭＢＰ对外周血单个核细胞（ＰＢＭＮＣ）与人脐静脉内皮细胞（ＨＵＶＥＣ）粘附性的影响,以揭示中枢神经系统（ＣＮＳ）炎症时ＰＢＭＮＣ进入ＣＮＳ的可能原因。方法：用细胞粘附试验,研究ＰＢＭＮＣ与ＨＵＶＥＣ的粘附性,用细胞免疫化学法、ＦＡＣＳ分别观察ＶＣＡＭ－１和ＩＣＡＭ－１的表达。结果：ＭＢＰ活化的ＰＢＭＮＣ与ＭＢＰ刺激的ＰＢＭＮＣ培养上清作用的ＨＵＶＥＣ的粘附性较对照有显著提高。ＩＣＡＭ＿１     

胸腺基质细胞的抗原提呈作用

目的 研究胸腺基质细胞的抗原提呈能力。方法 应用ＯＶＡ－特异的、受Ｉ－Ａ＾ｄ分子识别限制的辅助Ｔ细胞杂交瘤（３ＤＯ．１８．３）识别提呈的ＯＶＡ的ＣＮＢｒ水解片段而被活化后产生ＩＬ－２,测定ＩＬ－２活性来分析胸腺基质细胞的抗原提呈作用。结果ＩＦＮ－γ能促进ＭＴＥＣＩ和ＭＴＳＣ４表达Ｉ－Ａ＾ｄ分子,并促进ＭＴＳＣ４表达Ｂ７－１分子。经ＩＦＮ－γ作用后,ＭＴＥＣ１和ＭＴＳＣ４均有抗原提呈能力,ＭＴＳＣ     

EBV-LMP及二甲基亚砜对人鼻咽癌细胞生长分化的影响

目的：研究ＥＢＶ－ＬＭＰ及二甲基亚砜（ＤＭＳＯ）对人鼻咽癌（ＮＰＣ）细胞体外生长分化的影响。方法：以人高分化鼻咽癌细胞株（ＣＮＥ１）为对象，采用电穿孔基因转染技术，将重组ＥＢＶ－ＬＭＰ表达质粒转染ＣＮＥ１细胞，以载体质粒转染及ＣＮＥ１细胞为对照，用细胞体外增殖实验、流式细胞仪和免疫组化等方法，观察细胞生长分化的变化情况。结果：ＥＢＶ－ＬＭＰ在体外可明显促进ＣＮＥ１细胞的增殖，实验组与空白组及阴性对照组比较Ｐ＜０．０１，实验组Ｓ期细胞明显增多，细胞角蛋白表达显著下降（Ｐ＜０．０５），有向低分化鳞癌发展倾向；ＤＭＳＯ诱导后ＣＮＥ１细胞增殖力明显下降（Ｐ＜０．０１），细胞角蛋白表达显著增高（Ｐ＜０．０１）；ＬＭＰ可明显抑制ＤＭＳＯ对ＣＮＥ１细胞的诱导分化作用，转染细胞诱导后增殖力和角蛋白表达无显著改变（Ｐ＞０．０５）。结论：ＤＭＳＯ可在一定程度上诱导ＣＮＥ１细胞分化；ＥＢＶ－ＬＭＰ对ＣＮＥ１细胞生长有明显的促进作用，可抑制细胞分化及降低细胞对终末分化信号的反应，有助于深入研究ＮＰＣ的发生机理及防治     

小鼠胸腺基质细胞系（MTEC1）对裸鼠骨髓细胞的诱…

在体外建立的小鼠胸腺基质细胞系（ＭＴＥＣ１）及其培养上清（ＭＴＥＣ１－ＳＮ）与裸鼠骨髓（ＢＭ）细胞共同培养，通过直接荧光素标记抗体，ＦＡＣＳ分析其细胞表面标志表明，ＭＴＥＣ１及ＭＴＥＣ１－ＳＮ均有诱导促进Ｔｈｙ·１＾－ＣＤ＾－４ＣＤ＾－８的ＢＭ细胞表达Ｔｈｙ·１，ＣＤ４及ＣＤ８分子的作用。在培养或共育三天时，ＭＴＥＣ１－ＳＮ可促进ＢＭ细胞分化形成ＣＤ＾＋４Ｔｈｙ·１＾－，ＣＤ＾－４Ｔｈｙ·１＾＋细     

促炎症细胞因子刺激人类关节骨膜Ｂ型细胞表达粘附分子

目的：透析相关性淀粉样变（ＤＲＡ）病人关节滑膜组织粘附分子表达增强,并与局部炎与细胞浸润密切相关。旨在探讨ＤＲＡ时秀导滑膜细胞分子表达上调的机制,方法：分离正常人关节滑膜Ｂ型细胞,与晚期糖基化终产物修饰的β微球蛋白（ＡＧＥ－β２m）、天然β２m、肿瘤坏死因子－α（ＴＮＦ－α）,白细胞介素－１β（ＩＬ－１β）在体外共同培养,用荧光单克隆抗体染色,流式细胞仪检测定量分析滑膜Ｂ型细胞表面细胞间粘附分子－１（ＩＣＡＭ－１）,血管细胞间粘附分子－１（ＶＣＡＭ－１）、Ｅ－选择素（Ｅ－selectin)的表达,结果：正常关节滑膜Ｂ型细胞表达ＩＣＡＭ－１、ＶＣＡＭ－１,但不表达Ｅ－selectin.IL-1β、ＴＮＦ－α能以时间和剂量依赖的方式上调滑膜Ｂ型细胞ＩＣＡＭ－１、ＶＣＡＭ－１的表达,但无诱导Ｅ－selectin表达的作用。ＡＧＥ－β２m 和β２m对Ｂ型细胞粘附分子的表达无直接影响,结论：ＤＲＡ时关节组织存在的促炎症细胞因子可能上调滑膜细胞粘附分子的表达,从而促使局部的单核细胞浸润。     

单克隆抗体2A7亲和层析法纯化红细胞膜表面的CD59分子

用抗ＣＤ５９单抗２Ａ７与ＣＮＢｒ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ偶联制备亲和层析柱，从正常人红细胞膜蛋白抽提物中分离纯化出ＣＤ５９分子。本法纯化的ＣＤ５９分子量为１８－２０ＫＤａ对还原剂敏感，与ＭｃＡｂｓｓＭＥＭ４３和１Ｆ５有高亲和性，再掺入豚鼠红细胞后，能够抑制人体补体的反应性溶血，本文还对三株抗ＣＤ５９单抗２Ａ７，ＭＥＭ４３及１Ｆ５的抗原特异性进行了初步分析。     

新生儿缺氧缺血性脑病细胞因子的变化及临床意义

目的：研究新生儿缺氧缺血性脑病（ＨＩＥ）患儿细胞因子ＩＮＦ－α、ＩＬ－１β和ＩＬ－６的变化及其与ＨＩＥ严重程度的关系和临床意义。方法：用ＥＬＩＳＡ方法测定了５０例ＨＩＥ患儿血浆及外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）体外培养产生的细胞因子ＴＮＦ－α、ＩＬ－１β和ＩＬ－６的水平。结果：ＨＩＥ患儿血浆及ＰＢＭＣ体外培养产生的ＴＮＦ－α、ＩＬ－１β水平均显著高于对照组；而且重度ＨＩＥ患儿急性期血浆及ＰＢＭＣ体外培养产生的ＴＮＦ－α、ＩＬ－β和ＩＬ－６水平均显著高于对照组和轻度ＨＩＥ组，其恢复期血浆ＴＮＦ－α、ＩＬ－１β则显著降低，但血浆ＩＬ－６水平仍明显高于对照组。结论：ＨＩＥ患儿血浆及激活的ＰＢＭＣ产生的ＴＮＦ－α和ＩＬ－１β水平与ＨＩＥ的严重程度有关，ＩＬ－６的产生可能与脑损伤后的修复机制有关，测定这些细胞因子对病情的监测具有一定意义。     

EB病毒潜伏膜蛋白对人鼻咽癌细胞系CNE1生长分化的影响

目的 研究ＥＢ病毒潜伏膜蛋白（ＥＢＶ－ＬＭＰ）对人高分化鼻咽癌细胞生长分化的影响。方法 以人高分化鼻咽癌细胞株（ＣＮＥ１）为对象,采用电穿孔基因转染技术,将重组ＥＢＶ－ＬＭＰ表达质粒转染ＣＮＥ１细胞。以载体质粒转染及ＣＮＥ１细胞为对照,用细胞体外增殖实验、流式细胞信（ＦＣＭ）和裸鼠体内丰瘤实验等,观察细胞生长分化的变化。结果 ＥＢＶ－ＬＭＰ在体外可明显促进ＣＮＥ１细胞地增殖,实验组平均吸光度（Ａ）     

SEPT7基因抑制人胶质瘤细胞系U251MG侵袭的研究

目的 研究SEPT7基因对人胶质瘤细胞系U251MG侵袭的抑制作用及其可能的分子机制.方法 以腺病毒为载体转导SEPT7(rAd5-SEFF7)入U251人脑胶质瘤细胞系;Transwell法和3-D Matrigel法观察U251胶质瘤细胞侵袭能力的变化,划痕实验和2-D Matrigel法观察细胞迁移能力的变化.应用蛋白印记检测MMP2,MMP9,MT1-MMP,TIMP1和TIMP2的表达变化,蛋白印记和免疫荧光检测整合素αvβ3的表达,以及应用激光扫描共聚焦显微镜观察细胞骨架蛋白tubulin-α结构的变化.结果 转染SEPT7后U251MG细胞的侵袭和迁移能力明显受到抑制、细胞MMP2、MMP9、MT1-MMP和整合素αvβ3的表达下调、TIMP1和TIMP2的表达则上调;肿瘤细胞的微管蛋白tubulin-α结构出现了重新分布,发生了扭曲及聚集现象,接近于正常的非肿瘤细胞的tubulin-α结构.结论 SEPT7基因可以抑制胶质瘤细胞的侵袭和迁移能力,其分子机制可能通过逆转MMPs/TIMPs的失衡状态,降低整合素αvβ3的表达,以及改变细胞骨架tubulin-α的结构而实现的.SEPT7可作为基因治疗胶质瘤的重要候选基因.     

本刊2006年第8期重点内容预告

2006年第8期重点号为神经系统疾病，主要栏目和文章如下。专家论坛：脑肿瘤：从形态分类到分子分类。论著：脑多形性黄色瘤型星形细胞瘤的临床病理观察；中枢神经系统非典型畸胎样／横纹肌样瘤临床病理及免疫表型特征；阿尔茨海默病发病机制中β淀粉样蛋白对星形胶质细胞和神经细胞α7尼古丁受体的影响；整合素β1及纤连蛋白、层粘连蛋白对胶质瘤细胞浸润性的影响。     

降钙素基因相关肽对人血管平滑肌细胞增殖的抑制作用

目的：从细胞周期的角度探讨降钙素基因相关肽（ＣＧＲＰ）地人血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）增殖的影响,揭示其抗动脉粥样硬化的作用机制。方法：流式细胞仪分析ＣＧＲＰ对ＶＳＭＣ细胞周期的影响,免疫组织化学检测细胞周期蛋白Ｄ１、Ｅ的表达。结果：ＣＧＲＰ使细胞停留于Ｇ０／Ｇ１期,并能降低细胞中周期蛋白Ｄ１、Ｅ的表达。结论：ＣＧＲＰ可能是通过抑制周期蛋白Ｄ１、Ｅ的积累,使人ＶＳＭＣ停留于Ｇ０／Ｇ期,限制细胞周期的     

丙型肝炎病毒感染慢性化的分子生物学机制

丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）感染有较高的慢性化比例。ＨＣＶ的核心蛋白对于淋巴毒素β受体（ＬＴ－βＲ）,肿瘤坏死因子α受体（ＴＮＦαＲ）,包膜糖蛋白Ｅ２对Ｔ细胞受体（ＴＣＲ）,非结构蛋白ＮＳ５Ａ对双链ＲＮＡ结合蛋白ＰＫＲ和干扰素α（ＩＦＮα）诱导的抗病毒蛋白ＭｘＡ等机体免疫系统的调变作用是ＨＣＶ感染慢性化的主要分子生物学机制。     

EBV—LMP及二甲基亚砜对人鼻咽癌细胞生长分化的 …

目的：研究ＥＢＶ－ＬＭＰ及二甲基亚砜（ＤＭＳＯ）对人鼻咽癌（ＮＰＣ）细胞体外生长的影响，方法：以人高分化鼻咽癌细胞体（ＣＮＥ１）为对象，采和电穿孔基因转染技术，将重组ＥＢＶ－ＬＭＰ表达质粒转染ＣＮＥ１细胞，以载体质粒转染及ＣＮＥ１细胞为对照。用细胞体外增殖实验，流式细胞仪和免疫组化方法，细胞生长分化的变化情况，结果：ＥＢＶ－ＬＭＰ在体外可明显促进ＣＮＥ１细胞的增殖，实验组与空白组及阴性对照组比较（     

实验性肺纤维化大鼠肺组织整合素α5β1和转化生长因子-β的表达

目的　研究纤维连接蛋白受体整合素α５β１ 在大鼠肺纤维化中的作用。方法　用免疫组化方法观察实验性大鼠肺纤维化纤维连接蛋白（ＦＮ） 及其受体整合素α５β１ 和转化生长因子β（ＴＧＦβ）表达的动态变化;用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ 印迹杂交和免疫细胞化学方法观察ＴＧＦβ对体外培养的大鼠肺成纤维细胞整合素α５β１ ｍＲＮＡ和蛋白表达的影响。结果　（１）实验组１～３ 天,病灶内上皮细胞和内皮细胞整合素α５β１ 表达明显增强,炎细胞及增生的间质细胞亦呈阳性反应。以后,整合素α５β１ 阳性反应主要见于明显增生的间质细胞,并与ＴＧＦβ阳性分布相似。ＦＮ的变化与整合素α５β１ 的变化同步。（２）ＴＧＦβ作用后,大鼠肺成纤维细胞整合素α５β１ ｍＲＮＡ 及其蛋白表达增强（α５、β１ ｍＲＮＡ 杂交条带的积分光密度值,依次分别是对照的６．６ 、４．４ 倍;α５β１ 蛋白染色积分光密度值为对照的３．６ 倍） 。结论　整合素α５β１在肺间质细胞活化、增殖、分化及细胞外基质合成中起了极其重要作用。