GBEE对荷瘤小鼠IL-2、IL-12、TNF-α及TGF-α水平的影响

目的:研究银杏外种皮提取物(GBEE)的抗肿瘤作用及其对荷瘤小鼠免疫功能的影响。方法:采用ICR小鼠,建立S180移植瘤模型,GBEE连续灌胃16天,观察荷瘤小鼠移植瘤抑制率;体外培养荷瘤小鼠脾脏细胞,应用LPS诱生IL-12,应用ConA诱生IL-2;采用双抗体夹心ABC-ELISA法测定IL-12及荷瘤小鼠血清TNF-α含量;采用MTT法检测IL-2活性;采用放射免疫分析法测定荷瘤小鼠血清TGF-α的含量。结果:GBEE可明显抑制小鼠S180移植瘤的生长,其中200 mg/(kg.d)剂量组抑瘤率达38.36%;GBEE可提高荷瘤小鼠血清TNF-α含量,促进脾淋巴细胞IL-12的形成,增强脾脏T淋巴细胞IL-2活性,降低荷瘤小鼠血清TGF-α水平。结论:GBEE可抑制瘤细胞分泌TGF-α,具有显著抗肿瘤作用;可促进细胞因子IL-2、IL-12和TNF-α的生成,具有增强荷瘤机体免疫功能的作用。GBEE的免疫增强效应可能是其发挥抗肿瘤作用的重要途径之一。     

十全大补汤对荷瘤鼠脾细胞增殖、IL-6及TNF-α水平的影响

十全大补汤 (ＳｈｉｑｕａｎＤａｂｕＴａｎｇ ,ＳＤＴ )为气血双补剂 ,临床上常用于治疗病后体力低下 ,疲劳倦怠 ,食欲不振等。以荷瘤乳腺癌小鼠作为研究对象 ,初步观察了ＳＤＴ对小鼠体重、瘤重及脾细胞增殖反应与巨噬细胞分泌的ＩＬ 6和ＴＮＦ α的影响 ,为该方的临床应用提供用药依据。1　材料与方法实验动物为健康雌性ＴＡ2小鼠 ,5～ 6周龄 ,体重 18～2 2ｇ,由天津医科大学实验动物科学部提供。瘤株为移植性小鼠乳腺癌ＭＡ37,购自天津医科大学实验肿瘤研究室。ＳＤＴ按中药配伍原则组方 ,用传统方法煎成汤剂 ,浓缩成5 0 %浓度 ;ＬＰＳ…     

亮菌多糖对S180荷瘤小鼠免疫功能的研究

目的研究亮菌多糖对荷瘤小鼠免疫功能的影响。方法用S180瘤细胞建立动物模型,通过腹腔注射观察亮菌多糖对荷瘤小鼠淋巴细胞增殖反应、NK细胞活性及IL-2诱生的影响。结果亮菌多糖能够显著提高荷瘤小鼠淋巴细胞的增殖能力、NK细胞活性、显著促进脾细胞产生IL-2。结论亮菌多糖能够显著提高机体免疫调节功能。     

玉屏风散对S180荷瘤小鼠Th1／Th2型细胞因子的影响

目的探讨玉屏风散对荷瘤小鼠Th1／Th2型细胞因子产生的影响。方法采用体外培养S180肉瘤细胞，接种C57BL／6纯系小鼠，建立荷瘤小鼠模型，设正常对照、荷瘤对照及玉屏风散给药组，检测各组脾脏T淋巴细胞增殖能力及Th1（IL-2、IFN-γ）和Th2（IL-4、IL-10）细胞因子产生水平。结果荷瘤组T细胞增殖能力明显下降，Th2型细胞因子IL-10的产生明显增加，与正常对照组比较均有统计学意义（P〈0．01），而IL-4的含量略有增加，但无统计学意义。Th1型细胞因子IL-2及IFN-γ的产生明显减少，与正常对照组比较有统计学意义（P〈0．01，P〈0．05）。玉屏风散给药对T细胞增殖能力及细胞因子的产生有较为明显的调节作用，与荷瘤组比较T细胞增殖能力及IL-2、IFN-γ的产生明显增加（P〈0．01），Th2型细胞因子IL-10的血清含量下降（P〈0．01）．IL-4的含量略有下降，但与荷瘤对照组比较无统计学意义。结论玉屏风散可有效调节荷瘤小鼠的免疫功能，促进荷瘤鼠Th1型细胞因子的产生，有效纠正荷瘤导致Th1／Th2的失衡，增强机体的抗肿瘤免疫功能。     

黄芪多糖对遗传性糖尿病小鼠肝糖原含量的影响

目的:探讨黄芪多糖(APS)对遗传性糖尿病小鼠(KKAy)肝糖原含量及磷酸化糖原合成酶(GS)表达的影响。方法:雌性KKAy小鼠和C57BL/6J小鼠随机分为:糖尿病组(DM组,n=8)、糖尿病APS治疗组(DA组,n=8)、正常对照组(C组,n=10)和APS对照组(CA组,n=10)。APS治疗8周后观察动物一般情况、血糖和血清胰岛素水平;计算HomaIR;测定肝组织糖原含量;免疫印迹法观察磷酸化GS的表达情况。结果:DM组较C组体重、血糖、血胰岛素及HomaIR均显著升高(P<0.01);DM组肝糖原含量减少,且显著低于DA组(P<0.01);胰岛素刺激后磷酸化GS表达量:DM组高于DA组(P<0.01)和C组(P<0.01);以上结果在两对照组间无差异(P>0.05)。结论:APS能够明显降低KKAy血糖,增加肝糖原的含量,减轻肝脏胰岛素抵抗,其机制可能与减少磷酸化GS的表达,从而增加肝糖原的合成有关。     

黄芪对贫血小鼠骨髓基质细胞分泌TNF-α的影响

骨髓基质细胞可分泌细胞因子包括肿瘤坏死因子 (ＴＮＦ)调控造血。中医补气要药黄芪能够增强和调节免疫系统 ,为探讨黄芪补气补血的生物学机理 ,本文观察了黄芪对贫血小鼠骨髓基质细胞分泌ＴＮＦ的影响。1　材料方法1 1　实验动物 :8～ 12周龄ＢＡＬＢ ｃ雄性小鼠 ,体重 18～ 2 0ｇ,成都中医药大学实验动物中心提供。1 2　药品与材料 :黄芪注射液 (Ａｓｔｒａｇａｌｕｓｍｅｍｂｒａｎａｃｅｕｓｉｎｊｅｃ ｔｉｏｎ ,ＡＭＩ) :(成都地奥九泓制药厂 ) ,1ｍＬ相当于原生药黄芪2ｇ;ｒｈＴＮＦ :(美国基因公司 ) ;放线菌素Ｄ(ＡＭＤ)、四甲基偶…     

黄芪多糖对小鼠胸腺细胞凋亡的调节作用

以地塞米松磷酸钠 (Ｄｅｘ ｐ)诱导的胸腺细胞凋亡和胸腺细胞的自发凋亡为研究模型 ,通过流式细胞仪、电镜检测胸腺细胞亚二倍体百分率和形态结构的变化 ,探讨黄芪多糖 (ＡＰＳ)对小鼠胸腺细胞凋亡的调节作用。ＡＰＳ由北京中医药大学提供。 2～ 4周龄昆明小白鼠 ,同济医科大学实验动物中心提供。用直观图展示细胞凋亡特征性Ａｐ峰。细胞凋亡用流式细胞仪检测。ＡＰＳ对胸腺细胞凋亡的影响用流式细胞仪和电镜检测。由Ｄｅｘ ｐ处理的胸腺细胞出现染色质固缩成块位于核周边 ,呈明显的凋亡。Ｄｅｘ ｐ (10 7ｍｏｌ Ｌ) ＡＰＳ 40 0 μｇ ｍ…     

灵芝活性多糖GLIS对正常和荷瘤小鼠骨髓巨噬细胞的激活作用

为研究灵芝活性多糖GLIS对正常和荷瘤小鼠巨噬细胞的激活作用,用灵芝活性多糖GLIS刺激体外培养的正常和荷瘤小鼠的巨噬细胞,检测GLIS刺激后巨噬细胞分泌至培养基中的TNF-α、IL-1β和NO的含量,以及小鼠巨噬细胞对乳胶颗粒的吞噬率的变化,并检测GLIS刺激的巨噬细胞对肿瘤细胞的抑制作用,同时研究灵芝活性多糖GLIS组成的糖和蛋白部分对活性的影响。结果显示经灵芝活性多糖GLIS刺激后,能显著刺激巨噬细胞分泌TNF-α和IL-1β,并产生大量的NO。小鼠巨噬细胞对乳胶颗粒的吞噬功能也明显的增强,且荷瘤小鼠的巨噬细胞对GLIS的敏感度要优于正常小鼠,GLIS中的糖部分对它的活性作用起主要作用。该研究表明,灵芝活性多糖GLIS对正常和荷瘤小鼠巨噬细胞均具有明显的激活作用。     

谷胱甘肽对酵母多糖诱导的小鼠肝TNF-α基因表达的影响

在分子水平上研究谷胱甘肽对酵母多糖诱导的小鼠肝组织肿瘤坏死因子－α基因表达的影响。腹腔注射（ip)谷胱甘肽（20mg/kg)，然后ip酵母多糖（0.5g/kg)。RT－PCR检测肝组织TNF－αmRNA水平，放射免疫地检测TNF－α蛋白水平及DTNB显色法检测谷胱甘肽过氧化物酶（GSH－Px)活性。发现损伤组肝组织TNF－αmRNA，蛋白水平高于对照组（P＜0．05），谷胱甘肽组肝组织TNF－αmRNA，蛋白水平都低于损伤组。谷胱甘肽组肝组织谷胱甘须过氧化物酶活性高于其他各组（P＜0．05）。谷胱甘肽抑制了由酵母多糖诱导的小鼠肝组织TNF－αmRNA蛋白的表达。     

IL-12对小鼠哮喘模型气道炎症及TNF-α和IL-10水平的影响

支气管哮喘(简称哮喘)是由多种细胞和细胞组分参与的气道慢性炎症性疾病[1],被世界卫生组织列为疾病中四大难症之一[2],在世界范围内广泛流行。已成为美国18岁以下人群住院的第3位原因,     

黄芪多糖对红斑狼疮小鼠6种抗磷脂抗体的影响

目的 :观察黄芪多糖 (PG2 )对红斑狼疮小鼠抗心磷脂 (anticardiolipin ,aCL)、抗磷脂酰胆碱 (antiphosphatidylcho line ,aPC)、抗磷脂酰丝氨酸 (antiphosphatidylserine,aPS)、抗磷脂酰肌醇 (antiphosphatidylinositol,aPI)、抗磷脂酸 (antiphosphatidicacid ,aPA)和抗磷脂酰乙醇胺 (antiphosphatidylethanolamine ,aPE) 6种自身抗体的影响。方法 :19只雌性NZB×NZWF1小鼠随机分为黄芪I组 (2 5mg kg) 7只 ,黄芪II组 (5 0mg kg) 6只及生理盐水组 (0 2ml d) 6只 ,日一次腹腔注射 ;雌性BXSB及C5 7BL 6小鼠作对照 ,用酶联免疫吸附 (ELISA)法测定各组小鼠的 6种抗磷脂抗体A值进行比较。结果 :NZB×NZWF1小鼠黄芪II组各种抗磷脂抗体A均值比生理盐水组明显降低 (P <0 0 5或P <0 0 1) ,与BXSB ,C5 7BL 6小鼠比无统计学差异 ;黄芪I组与生理盐水组比有所升高 ;黄芪I组及生理盐水组与BXSB、C5 7BL 6比明显升高 (P <0 0 5或P <0 0 1)。结论 :黄芪多糖低剂量有使抗磷脂抗体升高的趋势 ,高剂量可明显抑制抗磷脂抗体的产生     

实验性病毒性心肌炎小鼠血清ICAM-1、TNF-α和IL-2水平及意义

病毒性心肌炎 (ＶＭＣ )主要是由柯萨奇Ｂ组病毒侵犯心脏所致 ,并以心肌炎性坏死和间质单个核细胞浸润为主要病理变化。病毒感染引起的细胞免疫功能紊乱而致的心肌损害 ,是ＶＭＣ发病的重要机制之一[1] 。而多种细胞因子则是ＶＭＣ发病过程中的重要介质 ,我们建立了ＶＭＣ小鼠模型 ,并观察其血清中ＩＣＡＭ 1、ＴＮＦ α及ＩＬ 2的水平 ,现报告如下。1　材料和方法1 1　动物　选取 4～ 6周龄雄性ＢＡＬＢ/ｃ小鼠 ,体重 14±2ｇ,由中科院上海实验动物中心提供。1 2　病毒　柯萨奇Ｂ3 病毒 (ＣＶＢ3 )、Ｎａｎｃｙ株 ,由上海医科大学卫生部病…     

马齿苋多糖对荷宫颈癌小鼠免疫刺激活性的研究

目的：研究马齿苋（Portulaca oleracea L.）多糖（POL-P3b）对宫颈癌小鼠免疫刺激作用的影响。方法：采用移植性U14宫颈癌小鼠模型,随机分为荷瘤对照组、环磷酰胺组（CTX）和POL-P3b低剂量[POL-P3b（L）]、高剂量[POL-P3b （H）]组。连续给药13 d后,测定其胸腺指数和脾脏指数,ConA诱导小鼠脾淋巴细胞转化试验检测POL-P3b对小鼠机体的细胞免疫功能;ELISA法检测脾细胞分泌细胞因子IL-2、IFN-γ、IL-10和IL-4的含量;免疫组化和Western blot法检测肿瘤组织吲哚胺2,3-二氧化酶（ IDO）的表达。结果：POL-P3b可提高荷瘤小鼠免疫器官重量及增强荷瘤小鼠细胞免疫功能。 POL-P3b能降低荷瘤小鼠脾细胞分泌的IL-4和IL-10水平,并能促进IL-2和IFN-γ的分泌;POL-P3b能抑制肿瘤组织中IDO的表达,且高剂量组效果更明显。结论：POL-P3 b抗肿瘤作用的机制可能与提高机体免疫功能、降低免疫逃逸有关。     

从IL—2水平探讨黄芪及黄芪多糖的免疫调节作用

本文报道了黄芪及其多糖对正常小鼠和大黄脾虚模型小鼠体内、体外白细胞介素2(IL—2)产生的影响。大黄脾虚模型小鼠IL—2活性比正常小鼠明显降低;25～200%黄芪水煎剂以及50～200mg/ml黄芪多糖均能使大黄脾虚模型小鼠低下的IL—2活性提高;但对正常小鼠则无影响。提示IL—2产生增加可能是黄芪“扶正”的重要机制之一,也是其调节免疫功能的分子免疫学基础之一;IL—2活性有可能是“脾气”的内涵之一。     

黄芪多糖对小鼠骨髓及外周血造血干细胞的增殖及动员作用

探讨APS-P对正常或化疗后小鼠的骨髓、脾及外周血造血干细胞的促增殖及外周动员作用。给正常或经环磷酰胺化疗后的C57BL／6小鼠注射APS-P，然后取骨髓细胞、外周血细胞及脾细胞，并用荧光抗体PerCP-Sca-1，APE-c-kit及PE-Lineage(CD3，CD4，CD8，Trll9，B220 CDllb，Gr-1)进行染色标记，用流式细胞仪检测小鼠造血干细胞(Lin c-kit^ Sca-1^ )数量变化。注射APS-P能使正常及化疗小鼠骨髓、脾及外周血中的造血干细胞有不同程度的增加。这一作用可能是由于APS-P促进骨髓造血干细胞的增殖，而在外周血及脾中的增加则可能是由于APS-P对骨髓造血干细胞的外周动员作用。     

黄芪及黄芪多糖对隐孢子虫感染小鼠的免疫调节作用

目的探讨黄芪及黄芪多糖对隐孢子虫感染的免疫抑制小鼠的免疫调节作用。结论 20日龄Balb/c小鼠连续8d灌服醋酸地赛米松后,于第9天经口接种1×106个隐孢子虫卵囊1次,建立隐孢子虫感染模型,再经黄芪水煎剂及黄芪多糖灌胃治疗10d,并设正常对照、模型对照和西药对照组。每日计数粪便隐孢子虫卵囊数量,组织切片HE染色后光学显微镜观察肠组织病理学改变,ELISA法检测血清IL-2、IL-4、IFN-γ水平,流式细胞仪检测T细胞亚群。结果与模型组比较,黄芪水煎剂组、黄芪多糖组和西药组小鼠卵囊排出数量减少,肠组织病理学改变较轻,免疫学检测发现CD4、CD4/CD8及IL-2、IL-4和IFN-γ水平明显升高（P〈0.05）。结论黄芪水煎剂及黄芪多糖通过增强免疫功能促进隐孢子虫感染小鼠恢复。     

黄芪多糖对高糖所致血管平滑肌细胞增殖变化的影响

目的: 旨在观察体外高糖环境对大鼠主动脉血管平滑肌细胞(VSMCs)所致的增殖变化以及黄芪对其的影响。方法: 原代培养VSMC,分为正常对照组、25 mmol/L高糖剌激组、高糖剌激加低、中、高浓度黄芪多糖组(终浓度分别为100、200 和400 mg/L)。MTT方法分析细胞增殖率,RT-PCR检测分析MKP-1 mRNA转录及用ELISA法检测炎症因子MCP-1水平。结果: 与对照组相比高糖可以诱导VSMCs增殖(P<0.05),而中、高浓度黄芪多糖可以显著抑制该作用(P<0.05);高糖环境明显下调MKP-1 mRNA表达(P<0.05),但低浓度黄芪多糖可使MKP-1 mRNA上调,恢复到正常水平,在中、高浓度黄芪多糖时可使MKP-1 mRNA上调,显著高于对照组;高糖刺激组可促使VSMCs MCP-1分泌明显升高,低浓度黄芪即可降低高糖诱导MCP-1的水平(P<0.05),在高浓度组最明显。结论: 黄芪多糖防治糖尿病心血管并发症的作用可能与上调MKP-1 mRNA表达、抑制VSMCs增殖和MCP-1分泌相关。     

红光、红外线照射对荷瘤小鼠免疫功能的影响

目的:研究红外线、红光单独照射及联合照射对荷瘤小鼠免疫功能及肿瘤生长的影响。材料与方法:红外线:波长2.5～5.0mm、强度0.06W/cm2;红光:波长628mm、强度500LX/cm2;分别采用红外线、红光及二者联用照射H22肿瘤小鼠,观察外周血T淋巴细胞转化率、RBC-CR1花环率、RBC-IC花环率及抑瘤率。结果:单纯红光照射不能提高荷瘤鼠的免疫功能;红外线照射可提高荷瘤鼠T淋巴细胞转化率、RBC-CR1花环率,与肿瘤对照组比较P<0.05;二者联用可提高淋转率、RBC-CR1花环率,与红外线组比较P<0.05,瘤重低于对照组。结论:红外线照射可提高荷瘤鼠的免疫功能;红光红外线联用可提高荷瘤鼠的免疫功能,优于单纯红外线照射,并抑制肿瘤生长。     

肿瘤热休克蛋白70联合IL-2对荷瘤小鼠的治疗作用

目的:研究肿瘤热休克蛋白70(HSP70)与IL-2联合应用对荷瘤小鼠的治疗作用。方法:用液相色谱法纯化小鼠肿瘤细胞 株中的HSP70。对纯化产物用SDS-PAGE及Western blot进行定性分析,再用毛细管电泳鉴定其纯度。通过动物实验,观察HSP70与IL-2单独应用及联合应用的抗肿瘤作用。结果:HSP70与IL-2联合应用较单独应用的治疗效果更明显,但治疗作用仍以HSP70为主。单独应用IL-2只能延长小鼠的生存期限[平均为(36.6±13.0)d],而HSP70 10μg组可使40％荷瘤小鼠的肿瘤最终全部消退,生存期最长者>90[平均生存期(>59.2±29.6)d],与对照组相比较差异显著(P<0.01)。HSP70与IL-2联合应用组可使60％荷瘤小鼠的肿瘤完全消退,平均生存期(>70.8±26.5)d,与对照组相比差异十分显著(P<0.01)。结论:合适剂量的HSP70与IL-2联合应用,对荷瘤小鼠有明显的治疗作用,可明显抑制肿瘤进展,提高生存率。以上结果对研究人类恶性肿瘤的免疫治疗具有较大的参考价值。