炙甘草汤通过调控自噬-凋亡平衡改善糖尿病性心肌病(DCM)大鼠心功能

目的：研究炙甘草汤对糖尿病性心肌病(diabetic cardiomyopathy, DCM)大鼠心功能的改善作用及相关机制。方法：将40只雄性SD大鼠随机分为4组：对照组,模型组、炙甘草汤低剂量组,炙甘草汤高剂量组。通过链脲佐菌素( streptozotocin,STZ)注射制作DCM模型,用不同剂量炙甘草汤治疗,通过检测血清脑钠肽(brain natriuretic peptide,BNP)及超声心动图评估心功能,Western blotting检测凋亡相关蛋白Bcl-2及Bax评估心肌凋亡水平,自噬相关蛋白LC3-I/II,P62,Beclin-1评估心肌自噬水平。结果：与模型组相比,炙甘草汤低剂量组和高剂量组均显著降低心力衰竭大鼠BNP及左心室收缩末期内径(left ventricular end-systolic dimension,LVESD),左心室舒张末期内径(left ventricular end-diastolic dimension,LVEDD)(P<0.05),升高左室射血分数(left ventricular ejection fraction,EF),左室短轴缩短率(left ventricular fractional shortening,FS)水平,说明炙甘草汤改善DCM模型组大鼠心功能,高剂量组尤其明显。DCM模型组抗凋亡蛋白Bcl-2表达下降,促凋亡蛋白Bax表达升高,炙甘草汤组抗凋亡蛋白Bcl-2表达回升,促凋亡蛋白Bax表达下降,说明DC模型组大鼠心肌细胞凋亡率增加,炙甘草汤抑制心肌细胞凋亡。DC模型组自噬相关蛋白LC3-II,Beclin-1表达下降,P62表达升高,炙甘草汤组LC3-II,Beclin-1表达回升,P62表达下降,说明DCM模型组大鼠心肌细胞自噬水平下降,炙甘草汤增强心肌细胞自噬水平。结论：炙甘草汤能改善糖尿病性心肌病(DCM)大鼠心功能,这可能与其抑制心肌细胞凋亡,增强心肌细胞自噬相关。     

炙甘草汤对糖尿病性心肌病模型大鼠心功能的影响

目的研究炙甘草汤对糖尿病性心肌病(DCM)模型大鼠心功能的改善作用及相关机制。方法将40只雄性SD大鼠按随机数字表法分为正常对照组、DCM模型组、炙甘草汤低、高剂量组,每组10只。通过高脂饮料饮食+链尿佐霉素(STZ)注射制备DCM模型,炙甘草汤低、高剂量组分别给予1mL/100g、2mL/100g炙甘草汤灌胃,正常对照组及DCM模型组给予等量双蒸水灌胃,至STZ注射后12周,检测血清BNP及超声心动图评估心功能,Western blot检测凋亡相关蛋白Bcl-2及Bax评估心肌凋亡水平,自噬相关蛋白LC3-Ⅰ/Ⅱ,P62,Beclin-1评估心肌自噬水平。结果与DCM模型组比较,炙甘草汤低、高剂量组均显著降低大鼠血清BNP水平[(358.39±60.86)pg/mL、(313.92±61.71)pg/mL比(443.11±51.88)pg/mL,P0.05]、左心室收缩末期内径(LVESD)[(4.86±0.61)mm、(4.28±0.39)mm比(6.04±0.51)mm,P0.05)]及左心室舒张末期内径(LVEDD)[(7.52±0.56)mm、(6.87±0.63)mm比(8.04±0.57)mm,P 0.05)],升高左室射血分数(EF)[(52.30±5.66)%、(61.14±5.28)%比(46.48±3.81)%,P0.05)]及左室短轴缩短率(FS)[(29.42±4.78)%、(35.33±4.01)%比(24.62±3.88)%,P0.05)]。Western blot检测结果显示,炙甘草汤低、高剂量组大鼠心肌组织较DCM模型组抗凋亡蛋白Bcl-2表达上调[(0.49±0.02)、(1.03±0.05)比(0.48±0.29),P0.05],促凋亡蛋白Bax表达下调[(0.67±0.04)、(0.52±0.03)比(0.93±0.02),P0.05],自噬相关蛋白LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ表达上调[(0.58±0.06)、(0.61±0.05)比(0.29±0.02),P0.05],P62表达下调[(0.76±0.06)、(0.40±0.02)比(1.23±0.08),P0.05],Beclin-1表达上调[(0.83±0.03)、(0.88±0.03)比(0.80±0.03),P0.05]。与炙甘草汤低剂量组比较,高剂量组上述指标改善更明显(P0.05)。结论炙甘草汤能改善DCM模型大鼠心功能,可能与其抑制心肌细胞凋亡,增强心肌细胞自噬相关。     

罗汉果皂苷对阿霉素心肌损伤大鼠氧化应激和凋亡调节作用研究

目的 :从氧化应激和凋亡途径研究罗汉果皂苷对阿霉素心肌损伤大鼠的治疗作用,以为罗汉果皂苷治疗阿霉素心肌损伤提供基础实验理论。方法 :60只清洁级雄性SD大鼠采用一次性尾静脉注射阿霉素18 mg/kg构建阿霉素心肌损伤模型,模型构建成功后按照随机数字法将其分为正常组,模型组以及罗汉果皂苷低、中和高剂量治疗组,每组12只,罗汉果皂苷治疗4周后,收集血清和心脏,检测心肌病理学、心功能、血清SOD和MDA,同时采用Western Blotting和实时荧光定量检测心肌组织中Bax、Bcl-2蛋白和mRNA的表达特点。结果 :HE染色可见正常组心肌纤维排列整齐,模型组则有明显的心肌排列紊乱,与模型组相比,罗汉果皂苷低、中和高剂量有不同程度的减轻;与正常组相比,模型组AST、LDH、CK-MB和MDA明显升高(P0.05),罗汉果皂苷3个剂量组均可以明显降低上述几个指标(P0.05);与正常组相比,模型组SOD明显降低(P0.05),罗汉果皂苷3个剂量组相较于模型组则明显升高(P0.05);与正常组相比,模型组Bax蛋白和mRNA明显升高(P0.05),Bcl-2蛋白和mRNA明显降低(P0.05),与模型组相比,罗汉果皂苷3个剂量组均可以降低Bax(P0.05),同时升高Bcl-2表达(P0.05)。结论 :罗汉果皂苷可增强阿霉素心肌损伤大鼠抗氧化能力,抑制心肌细胞凋亡,进而改善心功能。     

法舒地尔对急性氧乐果中毒大鼠心肌损害的保护作用及机制研究

目的 探讨法舒地尔(Rho激酶抑制剂)对急性氧乐果中毒大鼠心肌损害的保护作用及机制.方法 将40只雄性SD大鼠随机分为正常对照组(NC组)、中毒组(OM组)、阿托品治疗组(AT组)和阿托品+法舒地尔联合治疗组(UN组),每组10只大鼠.采用腹腔注射氧乐果制备急性有机磷农药中毒模型,染毒后给予阿托品或阿托品+法舒地尔的不同治疗,观察48 h各组大鼠存活状况、中毒症状消失时间、心肌病理变化,检测心肌细胞凋亡和心肌组织Bcl-2相关X蛋白(Bax)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)蛋白表达情况.结果 OM组大鼠短时间[(29.0±6.3)min]全部死亡;AT组有3只大鼠死亡,平均死亡时间(23.3±2.1)h;UN组有1只大鼠于28 h时死亡;NC组大鼠无死亡.4组大鼠死亡率比较,差异有统计学意义(P＜0.01).AT组与UN组大鼠呼吸困难消失时间比较,差异无统计学意义(P＞0.05);两组大鼠肌力0分与肌颤消失时间比较,差异均有统计学意义(P＜0.01).与NC组比较,AT组、UN组心肌病理损害明显,心肌细胞凋亡显著增加,心肌组织Bax蛋白表达增加,Bcl-2蛋白表达减少,Bax/Bcl-2比值升高,心肌细胞凋亡率(AI)升高,差异均有统计学意义(P＜0.01).与NC组比较,OM组心肌病理损害不明显,心肌组织Bcl-2蛋白表达减少(P＜0.05);而Bax蛋白表达、Bax/Bcl-2比值及心肌细胞AI间差异均无统计学意义(P＞0.05).与AT组比较,UN组心肌病理损害减轻,心肌细胞凋亡减少,Bax蛋白表达减少,Bcl-2蛋白表达增加,Bax/Bcl-2比值下降,心肌细胞AI降低,差异均有统计学意义(P＜0.01).结论 法舒地尔能明显减轻急性氧乐果中毒大鼠的中毒症状,明显减轻心肌损害,降低中毒大鼠的死亡率;能显著抑制氧乐果诱导心肌组织Bax/Bcl-2蛋白比值的升高,进而抑制心肌细胞凋亡.法舒地尔对急性氧乐果中毒大鼠的心肌损害具有明显的保护作用.     

Effect of Depression on Cardiac Myocyte Apoptosis and the Expression of Bcl-2, Bax and Caspase-3 in Rats with Myocardial Infarction

目的:探讨抑郁对心肌梗死大鼠缺血心肌细胞凋亡及Bcl-2、Bax和Caspase-3的影响.方法:大鼠随机分为四组,各组8只,A组为假手术组,B组为抑郁大鼠假手术组,C组为心肌梗死组,D组为抑郁大鼠心肌梗死组.用TUNEL法检测心肌细胞凋亡,用免疫组织化学法和逆转录-聚合酶链反应方法检测Bcl-2、Bax和Caspase-3的基因表达.结果:各组大鼠心肌细胞凋亡指数以及心肌细胞Bcl-2、Bax、Caspase-3蛋白表达和心肌细胞Bcl-2、Bax、Caspase-3mRNA表达的差异有统计学意义(P＜0.01),C、D组大鼠心肌细胞凋亡指数以及心肌细胞Bcl-2、Bax、Caspase-3蛋白表达和心肌细胞Bcl-2、Bax、Caspase-3mRNA表达均高于A组和B组,差异有统计学意义(P＜0.01),D组大鼠心肌细胞凋亡指数以及心肌细胞Bax、Caspase-3蛋白表达和心肌细胞Bax、Caspase-3mRNA表达高于C组,而心肌细胞Bcl-2蛋白及mRNA表达低于C组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论:抑郁可以加重心肌梗死大鼠缺血心肌细胞凋亡,其机制可能与上调促凋亡基因Bax及Caspase3表达、下调抗凋亡基因Bcl-2的表达有关.     

补阳还五汤超微饮片对局灶性脑缺血大鼠神经干细胞移植后Bcl-2、Bax表达的影响

目的探讨补阳还五汤超微饮片对局灶性脑缺血大鼠神经干细胞移植后凋亡相关基因Bcl-2、Bax的影响。方法将SD大鼠80只,雌雄各半,复制局灶性脑缺血大鼠模型,造模后按神经功能缺损评分进行分层,随机分为5组,每组15只,分别于移植后7 d、14 d、28 d进行神经功能评分,采用补阳还五汤超微饮片与传统饮片予以干预,于相应时间点处死大鼠后采用免疫组化法检测凋亡基因Bcl-2、Bax。结果补阳还五汤能显著减轻神经功能缺损,Bcl-2、Bax在各时间点(7 d、14 d、28 d)表达与模型组比较差异有统计学意义(P0.05),模型加移植加补阳还五汤超微饮片组上调Bcl-2、拮抗Bax表达的作用优于模型加移植加补阳还五汤传统饮片组,差异有统计学意义(P0.05)。结论补阳还五汤可调节脑缺血后Bcl-2、Bax的表达,是其促进神经功能恢复的可能机制之一,且超微饮片组的作用较传统饮片组更加显著。     

叶酸对阿霉素所致心肌损伤的保护作用研究

目的探讨叶酸对阿霉素所致心肌损伤的保护作用。方法将24只小鼠随机分成4组：对照组，叶酸组，阿霉素组，阿霉素+叶酸组，每组6只。阿霉素组：采用腹腔内注射阿霉素（每次2.5mg/kg，每周3次，共6次，总量15mg/kg），建立小鼠阿霉素心脏毒性模型，常规喂养4周；叶酸组：以等量0.9%氯化钠溶液代替阿霉素作腹腔内注射，并给予叶酸灌胃[10mg/（kg·d），共4周]；阿霉素+叶酸组：按上两组方法和剂量给予阿霉素和叶酸。对照组：以等量0.9%氯化钠溶液代替阿霉素做腹腔内注射，常规喂养4周。4周后B超测定小鼠心脏功能，TUNEL法测定小鼠心肌细胞凋亡率，并利用Westernblot法分析凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2的表达。结果阿霉素组各项心功能指标、心肌细胞凋亡率、Bax/Bcl-2比值与对照组比较均有统计学差异（均P＜0.05）；而阿霉素+叶酸组各项心功能指标、心肌细胞凋亡率、Bax/Bcl-2比值与阿霉素组比较均有明显改善（均P＜0.05）。结论叶酸对小鼠阿霉素心肌损伤有明显的保护作用。     

培哚普利联合厄贝沙坦治疗大鼠扩张型心肌病近期和远期疗效

目的:探讨培哚普利联合厄贝沙坦治疗扩张型心肌病(DCM)大鼠的近、远期疗效.方法:腹腔注射阿霉素建立大鼠DCM模型.实验大鼠分4组:A组(n=14)为正常大鼠,B组(n=26)为DCM大鼠,均无药物干预; C(n=24),D(n=24)组均为DCM大鼠,其中C组予以培哚普利2mg/(kg·d)灌胃,D组予以培哚普利1mg/(kg·d) 联合厄贝沙坦25mg/(kg·d)灌胃.酶联免疫吸附法检测血浆脑利钠肽(BNP)水平;检测血钾、血肌酐水平;心肌HE染色后进行病理评分;记录干预过程各只大鼠存活期.结果:药物干预3周后,D组BNP水平低于C组(P＜0.05);各组干预前后血钾、血肌酐水平差异无统计学意义(P＞0.05);与B组比较,C和D组心肌病理损害均减轻(P＜0.01),而C与D组间心肌病理损害的差异无统计学意义(P＞0.05).对数秩检验显示:C组存活期短于D组(P＜0.05);Cox回归分析显示:联合用药或单用培哚普利为延长生存期因素,联合用药作用更明显.结论:培哚普利联合厄贝沙坦治疗DCM大鼠,在改善心功能及远期预后方面优于单用培哚普利,2种方案均能减轻心肌病理损害且未见血钾、血肌酐升高不良反应.     

阿霉素致扩张型心肌病心肌损伤中各项相关指标变化

目的:探讨阿霉素致扩张型心肌病中心肌损伤中相关指标的变化。方法:通过腹腔注射阿霉素诱导SD大鼠扩张型心肌病模型;通过ELISA方法检测血浆脑利钠肽(BNP)水平,超声心动图测定左室射血分数(LVEF)及观察心脏大体形态以及光学显微镜下病理形态来评估是否造模成功;通过Western blot技术检测造模前后SD大鼠心肌组织凋亡指标P53蛋白表达量。结果:扩张型心肌病造模后SD大鼠较造模前BNP明显升高,LVEF明显下降,P53蛋白表达增多。结论:阿霉素致扩张型心肌病过程中,大鼠心功能明显下降,p53表达增多对阿霉素致心肌损伤有重要作用。     

银杏叶提取物对1型糖尿病心肌病大鼠心肌Bcl-2、Bax和caspase-3表达的影响

目的 探讨银杏叶提取物（extract of Ginkgo biloba,EGB）对1型糖尿病心肌病大鼠心肌Bcl-2、Bax和caspase-3表达的影响.方法 将30只SD雄性大鼠随机分成3组：正常对照组（Con组,n=10）、糖尿病模型组（DM组,n=10）和银杏叶提取物治疗组（EGB组,n=10）.用链脲佐菌素（strepozotocin,STZ）进行腹腔注射,建立1型糖尿病动物模型后用银杏叶提取物注射液腹腔注射建立EGB组,其余两组给予相同体积的生理盐水.于12周末用超声心动图仪测定左心室舒张末期容积（LVIDV）、左心室收缩末期容积（LVISV）、左心室射血分数（LVEF）和每搏射血量（SV）;测定左心室重量指数、血糖和血胰岛素水平;用TUNEL法测定心肌细胞的凋亡指数（AI）;用RT-PCR和Western blot法分别检测其Bcl-2、Bax和caspase-3的表达.结果 与Con组相比,DM组大鼠LVIDV（P ＜0.01）、SV（P ＜0.01）、胰岛素含量（P＜0.01）和心肌组织Bcl-2（P ＜0.05）的表达都显著降低;而左心室重量指数和血糖浓度（P＜0.01）、心肌组织中Bax （P ＜0.05）、caspase-3（P＜0.05）的表达以及Bax/Bcl-2比例均明显升高.当EGB干预治疗后,与DM组相比,大鼠LVIDV（P＜0.05）、SV（P ＜0.05）、胰岛素含量（P＜0.05）和心肌组织Bcl-2（P ＜0.05）的表达均显著升高;而左心室重量指数（P＜0.05）、血糖浓度（P＜0.01）、心肌组织中Bax （P ＜0.05）、caspase-3（P＜0.05）的表达以及Bax/Bcl-2比例（P＜0.05）均明显降低.但是TUNEL染色显示各组大鼠的心肌细胞凋亡率（cardiomyocyte apoptosis index,CAI）没有明显的差异（P＞0.05）.结论 银杏叶提取物可以通过增加Bcl-2的表达,降低Bax、caspase-3表达及Bax/Bcl-2比例,减少心肌细胞的凋亡,从而提高了糖尿病心肌病的心肌功能.这也提示EGB通过调节心肌凋亡相关基因的表达,减少细胞的凋亡是其治疗糖尿病心肌病的重要机制之一.