泌尿系感染产超广谱β内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌的耐药表型和基因分型

目的:了解本地区泌尿系感染产超广谱β内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌耐药表型及其基因型分布.方法:收集2003-03/2004-06间临床分离的尿培养阳性大肠埃希菌共258株,ESBLs的检测采用NCCLs规定的ESBLs型筛选和确定实验,用K-B琼脂扩散法进行药物敏感性检测,并应用聚合酶链反应(PCR)方法对所分离的产ESBLs菌株进行SHV,CTX-M基因型检测.结果:产ESBLs大肠埃希菌检出率为24.0%(62株),67.7%(42株)携带CTX-M基因,14.5%(9株)的菌株携带SHV型基因,并有1.6%(1株)同时携带CTX-M基因和SHV型基因.结论:本地区泌尿系感染产ESBLs大肠埃希菌以耐头孢曲松和头孢噻肟为主;CTX-M型的ESBLs最为常见.     

尿路致病性大肠杆菌临床株I型菌毛FimH基因检测及分析

目的检测尿路致病性大肠杆菌 (uropathogenicEscherichiacoli,UPEC)临床株I型菌毛的携带频率 ,并对其粘附素基因FimH作序列分析。方法用血凝方法检测尿路致病性大肠杆菌的I型菌毛 ;根据GENEBANK的大肠杆菌I型菌毛粘附素FimH基因序列设计引物 ,用聚合酶链反应 (polymerasechainreaction ,PCR)检测临床分离的 15 5株UPEC的目的基因 ,选取典型阳性株的扩增产物测序。结果 15 5株尿路致病性大肠杆菌 ,用血凝方法仅检测到 5 5株携有I型菌毛 ,阳性率 3 5 .5 % ;而用基因扩增方法检测 14 0株 (90 .5 % )含有FimH基因。扩增产物序列与尿路致病性大肠杆菌标准株J96的序列基本一致。结论FimH基因存在于大多数尿路致病性大肠杆菌临床株中 ,是其重要毒力因子 ,具有重要的临床意义。     

大肠埃希菌临床株Dr粘附素的检测及其序列分析

目的：研究Dr粘附素在大肠埃希菌临床株中的携带情况及其在Afa／Dr家族粘附素中所占的比例,并分析draE基因的突变情况。方法：采用PCR检测600株大肠埃希菌中Afa／Dr家族粘附素的共有序列afa／draC及Dr粘附素的特异序列draE,并对draE基因进行序列分析。结果：600株大肠埃希菌中,402株（67％）携带Afa／Dr家族粘附素,其中Afa／Dr家族粘附素阳性菌株中3株（0．75％）为Dr粘附素阳性菌株。draE序列分析显示,该基因片段与genebank中的相应序列对比有1-3个点突变。结论：国内大肠埃希菌临床株中存在Dr粘附素,其draE基因片段与genebank中标准draE基因序列AF329316具有高度同源性。     

尿路致病性大肠埃希菌1型菌毛黏附特性与分子流行病学分析

目的 了解尿路致病性大肠埃希菌(UPEC)1型菌毛黏附特性、耐药表型及分子流行病学特征,为临床诊疗提供理论基础。方法 收集2020年1-11月广东省中医院大学城医院临床分离的80株UPEC,利用VitekⅡ细菌鉴定药敏分析仪鉴定细菌并进行药敏实验。利用PCR方法检测UPEC的1型菌毛fimH基因的携带情况,酵母细胞黏附实验检测UPEC的黏附特性,比较黏附阳性UPEC和黏附阴性UPEC菌株间的抗生素耐药差异。通过随机扩增多态性DNA(RAPD)法分析黏附阳性UPEC间的亲缘关系。结果 80株UPEC中1型菌毛fimH基因阳性菌株为74株,占94.5%,其中黏附阳性菌株为37株,占50.0%。黏附阳性UPEC头孢呋辛耐药率(45.9%)和产超广谱β内酰胺酶(ESBL)阳性率(45.9%)均高于黏附阴性UPEC(21.6%、21.6%),差异均有统计学意义(P均<0.05)。37株黏附阳性UPEC可基因聚类,分为18个基因型,其中以R010基因型为主,包含11株UPEC,占29.7%;另外R006基因型包含4株UPEC,占10.8%;其余基因型均包含1～2株菌。结论 临床分离的UPEC...     

尿路致病性大肠杆菌Ⅰ型菌毛fim H基因真核表达载体的构建及鉴定

目的 构建以尿路致病性大肠杆菌临床分离株Ⅰ型菌毛编码基因fimH 为目的基因的真核表达载体pcDNA3.0-fimH.方法 提取尿路致病性大肠杆菌临床株基因组DNA,PCR扩增fimH基因片段,然后克隆至TA载体,通过PCR 、酶切及测序鉴定后,将fimH基因片段用限制性内切酶切下克隆至真核表达载体pcDNA3.0,构建pcDNA3.0-fimH重组质粒.通过PCR 、酶切对重组质粒pcDNA3.0-fimH进行鉴定.结果 PCR 法克隆出全长为903 bp 的fimH基因并构建了pcDNA3.0-fimH重组质粒.结论 本研究成功构建尿路致病性大肠杆菌Ⅰ型菌毛fimH基因真核表达质粒pcDNA3.0-fimH,为尿路致病性大肠杆菌基因疫苗的研制奠定了基础.     

大肠埃希菌和克雷伯菌的qnr基因流行情况调查

目的了解上海部分医院大肠埃希菌和克雷伯菌qnr基因流行情况。方法采用聚合酶链反应(PCR)对267株大肠埃希菌和59株克雷伯菌(其中产酸克雷伯菌4株)的qnr基因进行筛选,全自动细菌鉴定仪VITEK系统进行鉴定和最低抑菌浓度测定,并采用PCR检测qnr基因阳性菌株Ⅰ型和Ⅱ型整合酶基因。结果在267株大肠埃希菌和59株克雷伯菌中检出3株细菌携带qnr基因,其中1株为大肠埃希菌,2株为肺炎克雷伯菌。3株qnr基因阳性菌株均产超广谱内酰胺酶(ESBLs),呈多重耐药性,且Ⅰ型整合酶均阳性、Ⅱ型整合酶均阴性。结论在所收集的大肠埃希菌和克雷伯菌中检出3株细菌携带qnr基因,其阳性率并不高。3株qnr基因阳性菌株均产ESBLs,且呈多重耐药性,qnr基因存在于Ⅰ类整合子上。     

大肠埃希菌和克雷伯菌的qnr基因流行情况调查

目的 了解上海部分医院大肠埃希菌和克雷伯菌qnr基因流行情况.方法 采用聚合酶链反应(PCR)对267株大肠埃希菌和59株克雷伯菌(其中产酸克雷伯菌4株)的qnr基因进行筛选,全自动细菌鉴定仪VITEK系统进行鉴定和最低抑菌浓度测定,并采用PCR检测qnr基因阳性菌株Ⅰ型和Ⅱ型整合酶基因.结果 在267株大肠埃希菌和59株克雷伯菌中检出3株细菌携带qnr基因,其中1株为大肠埃希菌,2株为肺炎克雷伯菌.3株qnr基因阳性菌株均产超广谱内酰胺酶(ESBLs),呈多重耐药性,且Ⅰ型整合酶均阳性、Ⅱ型整合酶均阴性.结论 在所收集的大肠埃希菌和克雷伯菌中检出3株细菌携带qnr基因,其阳性率并不高.3株qnr基因阳性菌株均产ESBLs,且呈多重耐药性,qnr基因存在于Ⅰ类整合子上.     

产CTX-M型超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌基因型分析

目的 了解我院临床分离大肠埃希茼产CTX-M型超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的发生率和基因型分布情况.方法 确证试验鉴别临床分离大肠埃希菌中产ESBLs株,PCR扩增CTX-M耐药基因,PCR.RFLP和DNA测序确定CTX-M基因型.结果 确证实验证明,88株大肠埃希菌中有57株ESBLs阳性,其中54株CTX-M基因扩增阳性.PCR-RFLP分析发现,10株携带CTX-M-1组基因,39株携带CTX-M-9组基因,另外5株同时携带CTX-M-1和CTX-M-9组基因.测序证实7株CTX-M-9组扩增产物均为CTX-M-14型,3株CTX-M-1组扩增产物均为CTX-M-3型.结论 大肠埃希菌中产CTX-M型ESBLs的检出率较高,其基因型以CTX-M-14和CTX-M-3型为主.     

血流感染大肠埃希菌对多黏菌素耐药机制研究

目的探讨血流感染大肠埃希菌对多黏菌素的耐药机制及流行特点,为其治疗提供依据。方法收集2018年1月至2019年12月浙江省人民医院和杭州市余杭区第二人民医院门诊及住院患者中分离的血流感染大肠埃希菌241株,通过VITEK-2Compact系统检测大肠埃希菌药物敏感性;应用WHONET5.6软件统计药敏结果;通过PCR法检测多黏菌素耐药相关基因;应用多克隆序列位点（MLST）测定菌株克隆型别;应用接合试验验证多黏菌素耐药基因转移。结果241株血流感染大肠埃希菌中,分离出6株多黏菌素耐药大肠埃希菌,分离率为2.5%。PCR检测显示6株多黏菌素耐药大肠埃希菌均携带mcr-1耐药基因,MLST分析结果显示这些菌株属于不同克隆型别。此外,6株多黏菌素耐药大肠埃希菌mcr-1耐药基因均可以成功传递至受体菌大肠埃希菌J53菌株中。结论血流感染大肠埃希菌对多黏菌素的耐药机制主要是携带mcr-1基因,该基因定位于质粒进行水平播散,需密切监测携带mcr-1基因的菌株,防止其进一步传播。     

大肠埃希菌质粒型AmpC酶基因的检测分析

目的 调查大肠埃希菌质粒型Ampc酶基因的存在状况。方法 采用MH药敏平板对40株临床分离的大肠埃希菌进行抗菌药物敏感试验和ESBLs纸片法确诊，PcR方法检测DHA和ACT-1型Ampc酶基因。结果 40株大肠埃希菌呈多重耐药，20株ESBLs阳性菌AmpCM基因阳性率90％，20株ESBLs性菌Ampc酶基因阳性率45％，40株大肠埃希菌ACT-1和DHA基因阳性率分别为57．5％，40．0％，有12株大肠埃希菌同时携带ACT-1和DHA基因。结论 临床分离的大肠埃希菌多重耐药严重，质粒型AmpC酶基因携带率高。     

尿路感染大肠埃希菌耐药分析

目的:探讨尿路感染大肠埃希菌的耐药性变迁,为临床合理用药提供试验依据.方法:对2008～2010年度尿标本检出的234株大肠埃希菌进行超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)检测和药敏试验,并对药敏结果进行分析.结果:大肠埃希菌的产酶率呈增高趋势;药敏结果显示大肠埃希菌除对亚胺培南耐药率为0外,对其他常用抗菌药物均出现了不同程...     

353例泌尿外科住院患者尿培养分离病原菌分布及耐药性监测

目的：监测并分析我院泌尿外科尿路感染病原菌的菌种分布及耐药性,为临床治疗尿路感染、合理选用抗菌药物提供流行病学依据。方法：回顾性分析泸州医学院附属医院泌尿外科2012年6月至2013年9月间尿培养标本中分离菌的菌种分布和药敏率。细菌鉴定及药敏试验采用MicroScan WalkAway系统并辅以手工方法。结果：共分离出353株病原菌。其中,革兰阴性菌245株,占69.4%;革兰阳性菌96株占27.2％;真菌12株,占3.4%。前5位病原菌依次为大肠埃希氏菌163株,占46.2%;粪肠球菌39株,占11.0%;肺炎克雷伯氏菌20株,占5.7%;产酸克雷伯氏菌15株,占4.2%;屎肠球菌14株,占4.0%。大肠埃希菌产超广谱β－内酰胺酶（ESBLs）检出97例,检出率为59.5％,肺炎克雷伯氏菌产超广谱β－内酰胺酶（ESBLs）检出7例,检出率为35.0％;未发现万古霉素和利奈唑胺的耐药株。结论：泌尿道感染病原菌仍以大肠埃希菌为主,酶抑制剂复合制剂可作为大肠埃希菌感染的经验用药。细菌耐药率较高,临床医师应根据药敏结果合理选用敏感抗菌药物,减少耐药菌株的产生。     

致尿路感染大肠埃希菌的耐药监测及分析

目的：了解尿路感染患者尿液标本中大肠埃希菌的检出情况和耐药情况,指导临床合理用药。方法：采用回顾性分析,对2013年1年来医院尿路感染患者进行调查研究。结果：尿液培养分离的814株病原菌中,大肠埃希菌260株,占总数的31.9%,其中,产ESBLs大肠埃希菌124株,占47.7%。药敏结果显示,产ESBLs大肠埃希菌耐药率明显高于非产ESBLs大肠埃希菌。结论：产ESBLs大肠埃希菌的增多,加重了细菌的耐药性,临床在治疗尿路感染时应综合考虑大肠埃希菌产ESBLs的危险因素及药敏结果合理使用抗生素。     

长期卧床引起尿路感染患者细菌分布和耐药性分析

目的调查因行动不便长期卧床患者引起尿路感染的原因。方法收集长期卧床的患者的中段尿做细菌培养及药敏试验,如果阳性,则收集患者的粪便,分离相应的细菌并做药敏试验。把同一患者尿液和粪便中分离到的两株相同细菌做脉冲电场凝胶电泳（PFGE）进行同源性分析。结果收集的123例患者中,大肠埃希菌为90对占73．2％,粪肠球菌为9对占7．3％,屎肠球菌为6对占4．9％,奇异变形杆菌6对占4．9％,肺炎克雷伯菌4对占3.3％。90对大肠埃希菌中有同源性的为63对占70％。结论院内长期卧床的患者尿路感染的发生率较高,且以自身清洁消毒不严、从肛门-尿道感染的可能性最大。建议加强自身的清洁和消毒隔离工作。     

尿路感染常见病原菌及耐药性分析

目的了解本院尿路感染病人病原菌分布情况,为临床合理治疗提供依据。方法2008年1月-2012年12月,我院确诊并有完整病原学资料的尿路感染病人共1205例,对其尿液的病原学、药敏学进行分析。结果在1205株病原菌中革兰阴性杆菌829株（68．80％）,其中最多的是大肠埃希菌602株（49．96％）,其次是肺炎克雷伯菌41株（3．40％）和铜绿假单胞菌40株（3．32％）。革兰阳性菌305株（25．31％）,其中最多的是粪肠球菌103株（8．55％）,其次是屎肠球菌68株（5．64％）和溶血葡萄球菌36株（2．99％）。另检出真菌71株（5．89％）,以酵母菌为主。革兰阴性菌敏感性较高的抗生素依次为碳青酶烯类、耐酶青霉素、丁胺卡那霉素、头孢西丁。革兰阳性菌敏感性较高的抗生素为利奈唑胺、万古霉素、氧哌嗪青霉素／Tazo。结论尿路感染病人细菌耐药率较高,需根据病原菌的药敏试验选择用药,经验用药也要考虑不同地区、不同医院耐药率的差异。     

尿路感染病原菌分布及耐药变化趋势分析

目的：分析2006—2011年尿路感染患者病原菌分布及耐药性变化趋势,为临床合理用药提供依据。方法：采用回顾性调查方法对2006～2011年尿培养分离出的668株病原菌分布进行分析,同时分析其中产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌（ESBLs大肠埃希菌）分布及耐药性变化。结果：2006—2011年尿培养标本2356份,分离出病原菌668株,分离率为28．4％。其中革兰阴性杆菌438株（65．6％）,革兰阳性球菌120株（18．0％）,假丝酵母菌110株（16．4％）。排名前3位的是：大肠埃希菌302株（45．2％）、白假丝酵母菌57株（8．5％）、肺炎克雷伯菌47株（7．0％）。产ESBLs大肠埃希菌分离率为54．3％（164／302）,各年份依次为50．0％（14／28）、51．9％（28／54）、45．6％（26／57）、45．8％（22／48）、53．1％（26／49）、72．7％（48／66）;尿路感染患者中女性多于男性（422：246）;以〉50岁为主（419／668）。结论：该地区尿路感染病原菌以大肠埃希菌为主,产ESBLs菌株分离率较高,且耐药情况严重;假丝酵母菌有较高的分离率。     

尿道致病性大肠杆菌毒力因子与其抗生素耐药性之间的关系

目的:探讨细胞毒性坏死因子1（CNF1）、溶血素A（HlyA）和菌毛蛋白FimH 3种毒力因子在尿道致病性大肠杆菌（UPEC）中的表达与其抗生素耐药性之间的关系。方法:选取天津市第一中心医院84例尿道感染（UTI）患者尿液样本中分离的UPEC,通过PCR实验检测其毒力因子基因的表达,并通过药物敏感性实验分析其耐药性,进一步探索UPEC毒力因子的表达与其抗生素耐药性之间的关系。结果:本研究通过PCR实验在71例（84.52%）UPEC分离株中检测到毒力基因的表达,其中cnf1+ UPEC菌株10例（11.90%）,hlyA+ UPEC菌株9例（10.71%）,fimH+ UPEC菌株69例（82.14%）。观察到45例（53.57%）UPEC为超广谱β-内酰胺酶（ESBL）阳性。cnf1+ UPEC菌株中ESBL阳性为6例（60.00%）,hlyA+ UPEC菌株中ESBL阳性为7例（77.78%）,fimH +UPEC菌株中ESBL阳性为38例（55.07%）,ESBL阳性率均高于其相应的阴性菌株。表达毒力因子CNF1、HlyA、FimH的UPEC分离株对多种抗生素的耐药率均高于其阴性分离株。结论:毒力因子的表达与UPEC对多种抗生素的高耐药性之间存在相关性。     

耐药大肠埃希菌氨基糖苷类修饰酶和16S rRNA甲基化酶基因的分析

目的：了解耐药大肠埃希菌（drug-resistant Escherichia coli,DR-ECO）氨基糖苷类修饰酶和16S rRNA甲基化酶基因的分布,探讨该菌对氨基糖苷类药物耐药的分子机制。方法：采用PCR法检测20株DR-ECO中15种氨基糖苷类修饰酶基因和7种16S rRNA甲基化酶基因,并用PCR直接全自动荧光法对阳性产物进行测序。结果：20株DR-ECO中,18株检出氨基糖苷类修饰酶基因;其中,aac（3）-Ⅱ、aac（6＇）-Ⅰb、ant（3″）-Ⅰ、aadA4/5和aph（3＇）-Ⅰ的阳性检出率分别为25%、25%、5%、65%和55%;只有1株检出rmtB型16S rRNA甲基化酶基因,阳性率为5%,其余基因型均未测出。结论：本组DR-ECO对氨基糖苷类药物的耐药主要与aadA4/5和aph（3＇）-Ⅰ等氨基糖苷类修饰酶基因相关,而与16S rRNA甲基化酶基因无明显关系。     

亚胺培南耐药型鲍曼不动杆菌的耐药机制与分子流行病学研究

目的：了解亚胺培南耐药型鲍曼不动杆菌分子流行病学特点,研究鲍曼不动杆菌的耐药机制。方法：收集我院亚胺培南耐药型鲍曼不动杆菌（imipenem resistant acinetobacter baumannii, IRAB）共17株,E-test进行药敏试验,PFGE技术分析耐药菌株同源性,改良Hodge试验筛选产碳青霉烯类耐药菌株,PCR扩增bla基因并进行基因序列的测序和分析。结果：17株亚胺培南耐药型鲍曼不动杆菌分别来自病人痰液、伤口、血液标本,药敏检测发现17株菌具有多重耐药性,PFGE分析表明17株菌可分为A、B、C、D4个克隆型,其中A型包括A1和A2两个亚型,改良Hodge试验和PCR基因扩增证实17株菌均含OXA-23型基因。结论：产OXA-23型碳青霉烯酶是本研究中鲍曼不动杆菌对亚胺培南等碳青霉烯类抗生素耐药的主要机制之一。     

喹诺酮耐药大肠埃希菌尿道感染现状及危险因素分析

目的 分析喹诺酮耐药大肠埃希菌尿道感染现状及危险因素,为临床合理选用抗生素提供依据.方法 回顾性分析348例大肠埃希菌尿道感染临床现状,以喹诺酮敏感大肠埃希菌为对照菌株,对喹诺酮耐药大肠埃希菌感染危险因素进行分析.结果 348株大肠埃希菌尿道感染中检出喹诺酮耐药菌203株,占58.3％.Logistic回归分析显示三代头孢菌素及喹诺酮类药物使用、尿路引流和细菌产超广谱β-内酰胺酶是喹诺酮耐药大肠埃希菌感染的独立危险因素.结论 尿道感染大肠埃希菌中喹诺酮耐药株的检出率高、耐药性强,其感染患者平均住院时间长、医疗费用高.喹诺酮耐药菌株感染具有多个危险因素,加强对这些危险因素的控制有助于预防耐药菌株感染的扩散.