α干扰素治疗小鼠日本血吸虫病肝纤维化实验研究

目的观察IFN-α是否具有抗日本血吸虫病肝纤维化的作用及疗效.方法以日本血吸虫尾蚴感染IcR小鼠造成肝纤维化模型.10周后顿服吡喹酮杀虫治疗,继以IFN-α皮下注射治疗,并与模型对照组和0.9%氯化钠注射液治疗组比较.肝脏组织切片作苏木素-伊红、苦味酸-酸性品红染色,观察肝脏虫卵肉芽肿平均大小、胶原面积百分比及肝纤维化程度（SSS评分）.结果IFN-α治疗组肝脏虫卵肉芽肿平均大小缩小（P〈0.05）、胶原面积百分比降低（P〈0.05）、SSS评分较模型对照组下降〉2分（P〈0.05）.结论IFN-α治疗小鼠日本血吸虫病肝纤维化有效.     

HMGB1在日本血吸虫病小鼠肝脏虫卵肉芽肿组织中的表达

目的：：确定日本血吸虫病小鼠肝脏虫卵肉芽肿形成过程中 HMGB1的表达。方法：建立日本血吸虫病小鼠模型,免疫组织化学方法检测肝脏虫卵肉芽肿形成过程中 HMGB1的表达,半定量方法测定 HMGB1表达的累积光密度值(IOD),ANOVA 统计分析各组之间差异。结果：未感染日本血吸虫尾蚴的对照组小鼠肝脏与感染尾蚴后2、4、6周模型组小鼠肝脏虫卵肉芽肿组织中 HMGB1表达差异有显著性(F =526.30,P <0.05),除感染尾蚴后4、6周的模型组差异不具有显著性(t =1.574,P =0.1162)外,其余各组差异均具有显著性(P <0.05)。结论：HMGB1可能参与日本血吸虫病小鼠肝脏虫卵肉芽肿的形成过程。     

血吸虫病虫卵肉芽肿与肝纤维化的动态观察

目的:从形态学和血清学角度探讨血吸虫病虫卵肉芽肿与肝纤维化之间的关系.方法:用血吸虫尾蚴感染新西兰家兔,建立血吸虫病动物模型.采用石蜡切片、HE染色动态观察日本血吸虫病急性期、慢性期、晚期肝脏虫卵肉芽肿大小,放射免疫检测仪测定不同时期的血清中透明质酸(hyaluronic acid,HA)含量的变化.结果:感染第6周家兔肝脏出现虫卵肉芽肿,第12周肉芽肿缩小,周围发现成纤维细胞,至第21周时虫卵肉芽肿明显缩小,肝脏纤维化程度增高,并有纤维组织增生.同时,血清HA含量检测显示随感染时间延长,体内HA水平逐渐升高.结论:血吸虫病是一个持续进展的过程,包含虫卵肉芽肿与肝脏纤维化两大病理变化,两者间发病机制不同,肝纤维化是虫卵肉芽肿的间接延伸.     

干扰素对日本血吸虫虫卵肉芽肿小鼠肺模型的免疫调节作用

研究目的探讨干扰素在虫卵肉芽肿病理过程中的作用及血吸虫病的发病机制。方法用纯系NH小鼠感染日本血吸虫虫卵建立小鼠肺部虫卵肉芽肿模型。观察干扰素α对肉芽肿及小鼠免疫反应的影响感染小鼠后分别于第4、8、16、24、32天解剖动物，检测其血清抗体滴度、胸腺T细胞百分比和肉芽肿最大横切面面积。结果干扰素组小鼠抗体滴度、胸腺T细胞百分比在不同时程呈动态变化趋势，其肉芽肿面积在第8天明显增大，以后逐渐缩小。结论干扰素对血吸虫虫卵肉芽肿病变过程具有免疫调节作用。     

Th17细胞因子及炎症趋化因子在日本血吸虫感染小鼠肝脏中的表达

目的 观察日本血吸虫感染C57BL/6小鼠肝脏Th17细胞因子及其相关炎症趋化因子动态变化和肝脏虫卵肉芽肿病变,探讨其在日本血吸虫虫卵肉芽肿病变形成中的作用.方法 建立日本血吸虫感染C57BL/6小鼠模型,感染后2、4、6、8、10和12周剖杀小鼠,用实时荧光定量PCR法检测小鼠肝脏白介素17(IL-17)、IL-6、...     

C_（57）BL／6鼠日本血吸虫病肝虫卵肉芽肿模型特性初步研究

本实验对所建虫卵可溶性抗原（ＳＥＡ）致敏和未致敏Ｃ５７ＢＬ／６鼠日本血吸虫病肝虫卵肉芽肿模型特性进行初步探讨，并与Ｃ５７ＢＬ／６鼠自然感染模型进行比较。结果显示：１．经脾注射活卵诱发小鼠肝虫卵肉芽肿方法可行，２．ＳＥＡ致敏组肝虫卵肉芽肿形成过程及细胞组成基本与自然感染组相似，但发展速度较快；３．ＳＥＡ致敏组和自然感染组各期虫卵肉芽肿内ＩｇＧ抗体均呈阳性。从而证明，所建ＳＥＡ致敏Ｃ５７ＢＬ／６鼠日本血吸虫病肝虫卵肉芽肿模型对于肝虫卵肉芽肿防治研究确有价值。     

干预协同刺激分子CD86对生殖道沙眼衣原体感染小鼠妊娠结局的影响

目的 了解小鼠感染沙眼衣原体后的妊娠结局,以及CD86mAb干预治疗后对妊娠结局的影响及与体内Th1型、Th2型细胞因子水平的关系.方法建立小鼠沙眼衣原体生殖道感染模型,合笼受孕后为模型组,受孕后孕4d腹腔注射CD86 mAb100μg作为治疗组,将未受衣原体感染孕鼠作为对照组.孕12d用酶联免疫法检测各组小鼠血清中Th1型(IFN-γ)和Th2型(IL-4)细胞因子的表达水平.结果(①模型组Th1型细胞因子(IFN-γ)上升,较对照组和治疗组差异有统计学意义(P＜0.05),②模型组胚胎吸收率升高,较对照组和治疗组差异有统计学意义(P＜0.05).③3组的受孕情况、胚重、孕期体质量增加量差异无统计学意义.结论 小鼠感染沙眼衣原体后体内Th1细胞因子IFN-γ增加,形成Th1型偏倚,增加了胚胎吸收率;CD86mAb干预可降低Th1型偏倚程度,降低小鼠胚胎吸收率.     

IL-12对日本血吸虫重组SjGST-Sj32免疫小鼠攻击感染后虫卵肉芽肿形成的调节

目的观察白细胞介素-12(IL-12)对重组日本血吸虫谷胱苷肽-S-转移酶-32kD融合蛋白(rSiGST-Si32)蛋白免疫小鼠肝脏虫卵肉芽肿大小的影响。方法BALB/c小鼠36只随机分成IL-12加rSjGST-Sj32组、rSiGST-Si32组和磷酸盐缓冲液(PBS)组，第3次免疫后4周，经腹部贴片感染10条尾蚴，45天后杀鼠取肝组织，常规染色，光镜下进行组织学观察及单个虫卵肉芽肿大小的测量。结果与PBS组和rSjGST-Sj32组相比，IL-12加rSiGST-Sj32组虫卵肉芽肿体积明显减少(P＜0.01)。在形态学上，PBS组和rSjGST-Sj32组肝脏虫卵肉芽肿周围有大量嗜酸性粒细胞为主的炎性细胞浸润，还有少量的纤维母细胞、类上皮细胞等，有的肉芽肿已有纤维形成。IL-12加rSjGST-Sj32组的肝脏虫卵周围仅有少量的嗜酸性粒细胞聚集，很少见到胶原纤维。结论IL-12能下调rSjGST-Sj32蛋白免疫小鼠肝脏虫卵肉芽肿的应答。     

两种大鼠受孕方法及两种判断受孕方法比较

目的:探讨提高实验大鼠受孕率的方法及准确判断大鼠受孕的检测方法.方法:24只SD雌鼠随机分为性周期筛选合笼组(筛选组)和延长时间合笼组(延长时间组),筛选组雌鼠根据阴道涂片于发情前期与雄鼠合笼2d,延长时间组雌鼠直接与雄鼠合笼10 d,采用阴道精子检查法和阴道精子合并角化上皮检查法判断合笼后雌鼠是否受孕,以分娩作为受孕成功的标准,观察两组受孕率,并比较两种判断受孕的方法.结果:筛选组受孕率(91.67％)高于延长时间合笼组(50.00％),差异具有统计学意义(P＜0.05);延长时间组第1～5天受孕率(41.67％)高于第6 ～ 10天(14.28％),差异不具有统计学意义(P＞0.05);阴道精子检查法和阴道精子合并角化上皮检查法的假阴性率分别为0和11.76％,假阳性率分别为14.29％和0.结论:性周期筛选合笼法对雌鼠受孕率高于延长时间合笼法,阴道涂片法判断雌鼠受孕需结合雌鼠性周期推算.     

免疫调节剂SCA诱导的抗血吸虫性肝病变及其机制的研究

目的探讨感染日本血吸虫的BALB/c小鼠诱导的抗肝内血吸虫卵肉芽肿病变效应及其分子机制.方法取鼠肝连续切片,HE染色,光镜下测量肉芽肿大小(平均面积和体积);用流式细胞仪测定鼠脾T淋巴细胞亚群CD4+和CD8+百分数及二者的比值;用ELISA检测小鼠血清特异性抗体IgG及其亚类IgG1和IgG3水平.结果服用SCA(SCA-1,SCA-2)实验小鼠肝内肉芽肿病变均非常显著地小于感染对照组(均P＜0.01);实验鼠肝内虫卵肉芽肿的平均面积和体积,与对照组比较,减小率达40.71%～53.08%;实验组CD4+/CD8+值(2.72～3.67),显著地高于对照组(1.89)(均P＜0.05);用药组的特异性抗体IgG及其亚类IgG1和IgG3水平,均显者地高于对照组(均P＜0.01或0.05).结论中药合剂SCA是一种新型、高效无毒的免疫调节剂,其抗病免疫的分子机制与细胞免疫和体液免疫应答的增强密切相关.     

Congenital infection of rabbits with Schistosoma japonicum and protective immunity of offspring

Background Recently congenital infection with Schistosoma japonicum (S. japonicum) has been domonstrated in pigs, rabbits, mice and dogs. We explored the rabbit as an animal model for the congenital infection of schistosomiasis japonica and assessed the effect of a congenital S. japonicum infection on the resistance of rabbit kittens to a postnatal challenge infection.Methods Sixteen pregnant New Zealand white rabbits were infected with a single dose of S. japonicum cercariae. The exposed animals were divided into three groups according to the gestation age at the time of infection. Diagnosis of prenatally acquired S. japonicum infection in the rabbit kittens was primarily based on serological tests in combination with parasitological and histopathological findings. Congenitally infected kittens were challenged percutaneously with 100 S. japonicum cercariae to assess the effect of a congenital S. japonicum infection on kitten resistance to a postnatal challenge infection.Results The overall prevalence of congenital infection in offspring of infected mothers was 20% (12/60). The congenital infection rate in group L (late gestation) was much higher than in group E (early gestation) and group M (mid-gestation) (P&lt;0.05). After a postnatal challenge infection, prenatally infected kittens had a 54.66% worm reduction rate, 41.45% egg reduction rate, and 51.76% granuloma size reduction rate compared to nave kittens.Conclusions This study demonstrates the possibility of congenital infection of S. japonicum in rabbits and the resistance of congenitally infected kittens to a postnatal challenge infection. These results have important implications not only for epidemiological investigations, but also in designing government control programs for schistosomiasis.     

日本血吸虫感染可诱导共刺激分子配体基因敲除小鼠CD154和CD40动态变化及对Th1/Th2偏移的影响

目的:探讨可诱导共刺激分子( inducible costimulator,ICOS)-ICOS配体( ICOS ligand,ICOSL)信号通路对感染日本血吸虫小鼠的CD154、CD40表达及Th1/Th2偏移的影响. 方法:建立ICOSL基因敲除( ICOSL knockout, ICOSL-KO)小鼠及野生型C57BL/6J小鼠感染日本血吸虫疾病模型,于感染前和感染后4、7、12、16、20周,应用流式细胞术、免疫组织化学法分别检测小鼠脾细胞与肝虫卵肉芽肿周围炎性浸润细胞CD154、CD40的水平;应用酶联免疫吸附测定法( enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测小鼠脾细胞经可溶性虫卵抗原( soluble egg anti-gen,SEA)诱导72 h后培养的上清液中γ-干扰素(interferon gamma,IFN-γ)、白细胞介素-4(interleukin-4,IL-4)水平及小鼠血清中SEA特异性抗体IgG、IgG1、IgG2a的水平;应用HE染色观察小鼠肝虫卵肉芽肿病变动态变化. 结果:感染后4、7、12、16、20周,ICOSL-KO小鼠脾细胞CD154、CD40 水平与野生型小鼠相比,显著降低 [ CD154 为(18. 62 ± 4. 76)% vs. (27. 91 ± 3. 94)%、(22. 44 ± 4. 67)% vs. (40. 86 ± 5. 21)%、(25. 50 ± 6. 81)% vs. (43. 81 ± 8. 41)%、(20. 22 ± 5. 28)% vs. (40. 95 ± 7. 34)%、(17. 87 ± 4. 59)% vs. (33. 16 ± 6. 31)%,皆P<0. 01;CD40为(19. 43 ± 3. 26)% vs. (24. 37 ± 3. 59)%、(23. 00 ± 4. 47)% vs. (31. 80 ± 5. 86)%、(24. 46 ± 5. 01)% vs. (35. 85 ± 5. 32)%、(23. 42 ± 4. 69)% vs. (33. 30 ± 6. 14)%、(22. 85 ± 3. 78)% vs. (30. 88 ± 5. 94)%,皆P<0. 05 ]. 感染后7、12、16、20周,ICOSL-KO小鼠肝虫卵肉芽肿炎性浸润细胞 CD154、CD40 水平与野生型小鼠相比,亦显著降低[CD154为(0. 319 ± 0. 066) vs. (0. 488 ± 0. 086)、(0. 389 ± 0. 067) vs. (0. 596 ± 0. 082)、(0. 378 ± 0. 064) vs. (0.543 ±0.072)、(0.348 ± 0. 069) vs. (0. 523 ± 0. 076),皆 P <0. 01;CD40 为(0. 398 ± 0. 066) vs. (0. 546 ± 0. 079)、(0. 461 ± 0. 085) vs. (0. 618 ± 0. 076)、(0. 453 ± 0. 087) vs. (0. 587 ± 0. 074)、(0. 449 ± 0. 065) vs. (0. 565 ± 0.082),皆P<0.05 ]. 感染后,ICOSL-KO小鼠IFN-γ表达显著高于野生型小鼠(P<0.05),而IL-4表达水平则显著低于野生型小鼠(P<0. 05),其Th2分化指数亦显著低于野生型小鼠(P<0. 01). ICOSL-KO小鼠血清SEA特异性抗体IgG、IgG1、IgG2a的水平与IgG1/IgG2a的比值亦显著低于野生型小鼠(P<0. 01),且ICOSL-KO小鼠的肝虫卵肉芽肿体积显著小于野生型小鼠(P<0. 01). 结论:ICOS-ICOSL信号通路在血吸虫病免疫病理中起重要调控作用,其对Th1/Th2偏移的影响可能是通过调控CD154-CD40信号通路来实现的.     

小鼠日本血吸虫模型肝组织坏死形态学观察

建立小鼠日本血吸虫肝虫卵肉芽肿模型和自然感染模型，发现早期肝脏出现，片状或灶性凝固性坏死，后期发生纤维组织增生。提示肝组织凝固性坏死诱发肝纤维化，与虫卵肉芽肿引起的纤维化协同作用可能是血吸虫性肝硬化的又一发生机理。     

Congenital Transmission of Schistosoma japonicumin the Rabbit

Fourteen pregnant rabbits were each infected with 300 cercariae of Schistosoma japonicum and divided into two groups.Group M (n =8)was infected during mid-gestation (the organogenetic stage)and group L (n=6)was infected during late-gestation (the post-organogenetic stage).Mother rabbits and rabbit kittens were killed 45-60 days after infection and perfused in order to obtain worm counts.Furthermore,faecal egg counts and tissue egg counts from livers were obtained from the mother rabbits as well as the rabbit kittens.All mother rabbits became infected harbouring 207.6 20.2 and 220.0 27.5 adult worms in group M and L,respectively.In groups M and L, 13.5%and 46.7% of the kittens were infected,respectively,In 12 of 14 litters at least one kitten was infected.Tne infected kittens harboured between one and three adult S.japonicum.The livers of the kittens infected with a worm pair displaced lesions,as a result of egg deposition.The results, therefore,show that congenital transmission of S.japonicum can occur in rabbits.The close anatomical resemblance between the rabbit and human placenta may be indicative of the presence of congenital transmssion of S.japomcum infection in humans.     

妊娠期糖尿病高危因素与产后早发糖代谢异常的关系

【目的】探讨妊娠期糖尿病(GDM)传统高危因素与妊娠结局及产后早发糖代谢异常的关系&#65377;【方法】 3 017名孕妇以高危因素或50 g葡萄糖筛查试验进行GDM筛查,阳性者行75 g 口服葡萄糖耐量试验(OGTT)确诊GDM,GDM孕妇分为高危因素组(G1组, n = 143)与非高危因素组(G2组,n = 175),并于产后6 ~ 8周及产后6 ~ 12月复查OGTT&#65377; 【结果】 3 017名孕妇中318例确诊GDM,存在高因危素的孕妇GDM患病率明显高于无高危因素的孕妇(41.81% VS 6.54%, P < 0.01),且分娩期并发症发生率&#65380;早产率以及胎儿体质量更高,产后6 ~ 12个月持续糖代谢异常率亦明显升高&#65377;Logistic回归分析显示糖尿病家族史&#65380;尿糖阳性与产后糖代谢异常相关&#65377; 【结论】 存在GDM高危因素的孕妇GDM患病率明显升高,产后持续糖代谢异常的概率亦显著升高,其中尿糖阳性与糖尿病家族史有较高的相关性&#65377;     

西咪替丁对青蒿琥酯抗日本血吸虫活性的影响

目的观察西咪替丁对青蒿琥酯抗日本血吸虫活性的影响.方法40只ICR小鼠随机分为A、B、C、D 4组,每组10只.D组为不用药对照组,A、B、C 3组于攻击感染后第7天开始肌注给药:A组单用青蒿琥酯,B组西咪替丁和青蒿琥酯联合用药,C组单用西咪替丁.于感染后46 d剖杀小鼠,并分别比较A组和B组、C组和D组的减虫率、减雌率、肝组织减卵率、雌虫子宫内减卵率.结果单用青蒿琥酯组和联合用药组的减虫率分别为82.33%、95.91%(P<0.05),减雌率分别为83.64%、97.44%(P<0.05),肝组织减卵率分别为99.87%、99.97%(P<0.05),雌虫子宫内减卵率分别为91.17%、98.89%(P<0.05).与对照组相比较,单用西咪替丁组的减虫率、减雌率、肝组织减卵率、雌虫子宫内减卵率分别为12.63%、14.11%、7.35%、7.22%(P>0.05).结论西咪替丁具有增强青蒿琥酯抗日本血吸虫活性的作用.     

经脾脏注射血吸虫虫卵实验方法的探讨

报告应用经脾脏注射虫卵法建立Ｃ５７ＢＬ／６小鼠日本血吸虫肝虫卵肉芽肿模型，并与自然感染模型作比较。结果表明，脾脏注射组小鼠肝虫卵肉芽肿发生率为１００％，其肉芽肿的形态、细胞组成、转化发展过程均与自然感区染模型相似。本实验提示经脾脏注射虫卵是一种较好的、建立小鼠日本血吸虫肝虫卵肉芽肿模型的方法。     

过量氟对雌性小鼠生殖及其子鼠发育毒性的影响

目的 探讨微量元素氟在妊娠前后对母子两代产生的综合影响。方法 成年雌性小鼠分别在孕期及孕前期始自由饮用200mg/L含氟水，观察其交配率、受孕率、胎（仔）鼠体重变化，母子两代甲状腺形态与功能的变化。结果 各组小鼠的交配率及受孕率差异无显著性（P＞0．05）；实验组各期胎仔鼠的体重大于对照组，以出生后7d差别最明显（P＜0．001）；孕期摄氟组母子两代的血T4水平均高于对照线（P＜0．01或0．001）；实验组甲状腺形态与功能的变化相一致。结论 高氟对雌性小鼠的生殖和胎仔鼠的发育存在一定的毒性影响，对母子两代甲状腺形态与功能的影响与子代的发育有关。     

早孕小鼠血小板减少机制的组织学研究

应用昆明小鼠对其妊娠早期、假孕、脾摘除妊娠早期外周血血小板计数的变化进行观察。结果表明，正常小鼠和脾摘除小鼠妊娠早期外周血中血小板计数明显减少，约１周后恢复正常。假孕小鼠无此反应。血小板计数减少与生殖管道内的胚卵数呈负相关。脾的组织学观察表明，妊娠第４天小鼠脾红髓内巨核细胞数较假孕第４天明显减少。提示早孕小鼠血小板计数减少可能与生殖道内的胚卵数、血小板激活因子及脾内巨核细胞数有关。