龙胆药材中龙胆苦苷的含量测定

目的:规范龙胆药材质量标准研究,建立较为准确的龙胆苦苷HPLC含量测定方法。方法:采用ProsphereC-18300A5μ(250×4.6mm)分析柱,以甲醇-0.4%磷酸(10∶90→60∶40,0→30min)为流动相,检测波长选择270nm。结果:采用本方法龙胆苦苷在0.4024~20.0800g范围内呈良好的线性关系,平均回收率达99.37%,RSD为2.20%,测定结果表明10批样品中龙胆苦苷含量在1.75%~5.66%。提示本方法重现性好、分离度高,准确、易行。     

云南不同产地滇龙胆中龙胆苦苷的含量测定

目的 建立HPLC法测定云南不同产地滇龙胆中龙胆苦苷的方法.方法 色谱柱为Waters Sunfire RP18(250 mm×4.6 mm,5 μm)柱,流动相为甲醇-水溶液(20∶80),柱温35℃,体积流量1.0 ml/min,检测波长270 nm.结果 龙胆苦苷在0.077 4 ～ 1.160 4 mg(r = 0.999 8)线性关系良好,平均回收率为98.8%(RSD = 1.86%,n = 9),检测10批样品其龙胆苦苷的含量在2.75% ～4.87%之间.结论 该方法简便快速、准确,可为评价滇龙胆药材质量提供依据.     

HPLC法测定不同产地龙胆中龙胆苦苷的含量

目的:建立龙胆苦苷含量测定的方法,测定不同产地龙胆中龙胆苦苷的含量,为控制药材质量提供参考。方法:采用Hypersil ODS2 C18色谱柱;以甲醇-水(25∶75)为流动相;流速为1 m L·min-1;检测波长为270 nm,柱温:30℃,测定不同产地龙胆中龙胆苦苷的含量。结果:龙胆苦苷在0.002 15~0.107 5 g·L~(-1)的浓度范围内呈现良好的线性关系;平均回收率为100.07%,RSD为2.32%。结论:该方法快捷、简便、重复性好,通过测定不同产地龙胆药材中龙胆苦苷的含量,为不同产地龙胆质量的控制提供参考。     

龙胆药材中龙胆苦苷含量测定样品制备方法比较

目的　龙胆药材中龙胆苦苷的含量测定时样品的最佳制备方法。方法　采用高效液相色谱法 ,比较甲醇超声提取 (本法 )、甲醇冷浸提取 (2 0 0 0版药典龙胆项下方法 )、甲醇回流提取 (2 0 0 0版药典秦艽项下方法 )及甲醇索氏提取 4种样品制备方法对龙胆苦苷含量测定结果的影响。结果　甲醇超声提取法优于其它三种方法。结论　本方法操作简便易行 ,重现性好 ,准确度高 ,可作为龙胆药材含量测定的供试品溶液制备方法     

HPLC法测定复方龙胆片中龙胆苦苷的含量

目的:建立复方龙胆片中龙胆苦苷含量的测定方法.方法:采用高效液相色谱法,色谱柱:Waters Symmetry C18柱(250 mm×Φ4.6 mm,5 μm);流动相:甲醇-水(23:77);柱温:40 ℃;检测波长:270 nm;流速:0.8 mL/min.结果:龙胆苦苷在0.010 76～0.107 6 μg/μL之间,质量浓度与峰面积值呈良好的线性关系,r＝0.999 8,平均回收率为100.6%,RSD值为1.54%(n=6).结论:此方法操作简单、快捷、稳定性及重现性好,可用于复方龙胆片中龙胆苦苷的含量测定.     

高效液相色谱法测定金胆片中龙胆苦苷的含量

目的:建立用高效液相色谱法(HPLC)测定金胆片中龙胆苦苷的含量测定方法。方法:采用YMC ODS(4.6mm×150mm,5μm)色谱柱,流动相为乙腈-水(11∶89),流速为1.0mL.min-1;检测波长为274nm。结果:龙胆苦苷在0.106~1.277μg范围内呈良好的线性关系,r=0.999 9,平均回收率为98.73%,RSD为2.7%。结论:本方法简便可行,重复性好,能有效地控制金胆片成品的质量。     

甘肃产秦艽不同部位中龙胆苦苷的含量测定

目的:测定甘肃产秦艽不同部位中活性成分龙胆苦苷的含量。方法:采用高效液相色谱法。色谱柱:WatersC₁₈色谱柱;流动相:甲醇-水(3∶7);流速:1.0mL·min^-1;检测波长:254nm。结果:龙胆苦苷在(1.7352 ～17.3520)μg范围内具有良好线性关系,平均回收率为96.20%(RSD=1.5%)。结论:甘肃产秦艽不同部位中龙胆苦苷含量高于或接近《中国药典》标准,有一定的开发利用价值。     

高效液相色谱法测定清肝胶囊中龙胆苦苷的含量

目的:建立高效液相色谱法测定清肝胶囊中龙胆苦苷的方法。方法:以C18反相柱为色谱柱,甲醇-水(3∶7)为流动相。检测波长270 nm,用乙酸乙酯和甲醇混合液作提取剂。结果:平均回收率为98.38%,r=0.9995,线性关系良好。结论:此方法灵敏、准确,适用于龙胆苦苷的测定。     

龙胆泻肝片中龙胆苦苷的含量测定

龙胆泻肝片由龙胆、柴胡、黄芩、栀子 (炒 )、泽泻、关木通、车前子 (盐炒 )、当归 (酒炒 )、地黄、甘草(蜜 )十味药组成 ,具清肝热、利湿热之功。用于肝胆湿热 ,头晕目赤 ,耳鸣耳聋 ,耳肿疼痛 ,胁痛 ,口苦 ,尿赤涩痛 ,湿热带下 ;临床疗效较好。为了更好地控制龙胆泻肝片的质量 ,本文对龙胆泻肝片中龙胆苦苷的含量测定方法进行了研究。1　仪器与试药HP110 0高效液相色谱仪 ,龙胆泻肝片 (广东环球制药有限公司研究发展部 ) ;阴性样品 (广东环球制药有限公司研究发展部 ) ;龙胆苦苷 (中国药品生物制品检定所 ) ;甲醇为色谱纯 ;其余试剂均为分…     

养阴生肌散中龙胆苦苷的HPLC测定

目的：建立养阴生肌散中龙胆苦苷的含量测定方法。方法：采用色谱柱为WatersSymmetryShield—C18柱（4．6mm×250mm,5μm）,流动相为乙腈-0．2％磷酸溶液（25：75）;流速为1．0mL／min,柱温为室温,检测波长为265nm。结果：龙胆苦苷在0．52～2．60μg范围内呈良好的线性关系,相关系数r=0．9994,平均回收率为99．06％,RSD为1．85％（n=6）。结论：该测定方法简便快速、准确可靠,可用于该制剂的质量控制。     

粗茎秦艽种子萌发过程中马钱苷酸和龙胆苦苷的含量测定

目的:探究粗茎秦艽种子萌发过程中马钱苷酸和龙胆苦苷的含量变化。方法:建立粗茎秦艽种子中马钱苷酸和龙胆苦苷高效液相色谱(HPLC)含量测定方法:Cat C18色谱柱(4.6 mm×150 mm,3.5μm),流动相为乙腈(A)-0.04%乙酸水(B),梯度洗脱,流速0.8 m L·min~(-1),检测波长为254 nm,柱温为30℃,进样量为5μL。测定种子不同萌发时期马钱苷酸和龙胆苦苷的含量。结果:马钱苷酸和龙胆苦苷的线性范围分别为35.5~761.5 mg·L~(-1)(r_1=1.000 0),4.8~103.1 mg·L~(-1)(r_2=0.999 9),线性关系良好,平均加样回收率分别为98.30%(RSD 1.9%),99.85%(RSD 2.6%);粗茎秦艽种子在萌发过程中,马钱苷酸的含量呈不断降低的趋势,龙胆苦苷的含量呈不断上升的趋势。结论:粗茎秦艽种子萌发过程中,龙胆苦苷和马钱苷酸的含量动态变化呈负相关性趋势,且相关性程度与种子的发芽率有关。     

全萼秦艽的生药学研究

目的:对全萼秦艽和秦艽进行生药学的比较研究,为全萼秦艽的进一步开发和利用提供参考。方法:利用生药学鉴定方法,从微形态、形态及理化等方面对全萼秦艽和秦艽进行系统分析和评价。采用HPLC测定獐牙菜苦苷和龙胆苦苷含量,流动相甲醇-水梯度洗脱,检测波长254 nm。结果:全萼秦艽的内、外周皮的木栓细胞只有1层。全萼秦艽及秦艽中龙胆苦苷质量分数分别为6.24%和8.51%,獐牙菜苦苷依次为0.26%和0.36%。结论:全萼秦艽在生药学特征方面与秦艽存在部分差异,为全萼秦艽资源的开发利用提供了实验依据。     

秦艽总苷中龙胆苦苷在大鼠体内的药动学

目的:建立HPLC快速测定大鼠血浆中龙胆苦苷浓度的方法,研究秦艽总苷(total iridoid glucosides,TIG)中龙胆苦苷的药动学特点,评价秦艽总苷中其他组分对龙胆苦苷药动学的影响。方法:大鼠灌胃给予秦艽总苷,眼眶采血于肝素化试管,离心,取血浆适量用5倍量乙腈沉淀蛋白,取上清液过滤,用HPLC测定龙胆苦苷血药浓度,以C18为固定相,流动相为甲醇-0.1%磷酸溶液(20∶80),于272 nm处检测,Kinetica程序软件处理数据。结果:龙胆苦苷血浆质量浓度在33.5～4 020.0μg·L-1线性良好,最低检出质量浓度为6.7μg·L-1,高、中、低浓度样品的提取回收率分别为80.82%,97.38%,89.10%。给大鼠灌胃TIG后药-时曲线符合非房室模型,主要药动学参数t1/2,Tmax,Cmax,MRT,HVD,AUC(0～∞)和CL相对稳定。结论:方法快速简便,准确灵敏,能较好地满足龙胆苦苷在大鼠体内的药动学研究。     

秦艽喷膜剂的制备工艺研究及其质量标准建立

目的 制备秦艽Gentiana macrophylla喷膜剂,并建立其质量标准。方法 结合层次分析法（analytic hierarchy process,AHP）,以成膜时间、挥发量、含量均匀度、膜的显微性状、黏性为指标对成膜辅料的种类及用量进行筛选;以保湿性为指标,对甘油的比例进行考察;以有效成分龙胆苦苷的累积释放量为指标,筛选出合适的促渗剂及其用量;采用HPLC对秦艽喷膜剂中有效成分龙胆苦苷进行含量测定,并建立包括保湿性等多个检查项在内的秦艽喷膜剂质量标准。结果 确定成膜处方为6%聚乙烯吡咯烷酮K30（polyvinyl pyrrolidone K30,PVP）和0.2%甲基纤维素MC-400（methyl cellulose-400,MC）,促渗剂处方为2.5%丙二醇和2.5%氮酮;建立秦艽喷膜剂质量标准为秦艽喷膜剂含龙胆苦苷不得少于0.76 mg/mL;保湿性不得低于30.25%;成膜时间不得高于240 s;挥发量不得低于62.70%;成膜后433 nm处吸光度（A）值不得大于0.142,成膜中A值不得小于0.259;运动黏度不得低于6.91 mm²/s;样品pH值为3.67～5.50。结论 筛选所得秦艽喷膜剂的制备工艺稳定,建立的质量标准为秦艽喷膜剂质量评价提供依据。     

不同产地麻花秦艽中5种环烯醚萜苷成分的含量比较

目的: 建立HPLC同时测定麻花秦艽中马钱苷酸、龙胆苦苷、獐牙菜苦苷、獐牙菜苷、山栀苷甲酯含量的方法。方法: 采用Diamonsil C₁₈色谱柱(4.6 mm× 250 mm,5 μm),流动相乙腈-0.05%磷酸水梯度洗脱,流速1.0 mL·min^-1,柱温30 ℃, 检测波长240 nm。结果: 以上5种环烯醚萜类成分的线性范围分别为0.042 1~8.420 0(r=0.999 7),0.094 2~18.830 0(r=1.000 0),0.012 4~2.471 2(r=0.999 9),0.009 9~1.971 2(r=1.000 0),0.011 3~2.260 0 μg (r=0.999 0),平均回收率均在95.39%~103.75%,RSD≤2.6%。结论: 该法简便、快速、准确,可以用来同时测定麻花秦艽中5种环烯醚萜苷成分的含量。     

基于UPLC-ESI-HRMS~n评价不同干燥方式对粗茎秦艽中环烯醚萜类及黄酮类成分的影响

目的通过化学成分测定,评价远红外干燥、真空干燥、冷冻干燥、阴干、烘干、"发汗"干燥对粗茎秦艽品质的影响。方法采用UPLC-ESI-HRMS~n测定秦艽中4个环烯醚萜类成分(獐牙菜苦苷、龙胆苦苷、马钱苷酸、獐牙菜苷)和4个黄酮类成分(木犀草素、异牡荆素、芹菜素、山柰酚)质量分数。并结合单因素方差分析、聚类分析、逼近理想值排序法(TOPSIS)分析综合评价不同干燥方式所得样品的品质,确定最佳干燥方式。结果不同干燥方法样品的獐牙菜苦苷差异不显著,龙胆苦苷、马钱苷酸、獐牙菜苷、木犀草素、异牡荆素、芹菜素和山柰酚差异明显。其中,4个环烯醚萜类成分在冷冻干燥中保留最佳;4个黄酮类成分在"发汗"干燥中保留最佳。各成分在阴干样品中质量分数最低。聚类分析及TOPSIS分析表明"发汗"干燥具有与冷冻干燥相似的品质,且品质最好,其次是烘干干燥和远红外干燥,阴干干燥的样品品质最差。结论不同干燥方式对秦艽药材品质的影响值得关注。研究表明《中国药典》2015年版收载秦艽"发汗"的干燥方法具有科学性。但传统"发汗"过程时间较长,为了提高干燥效率,进一步研究方向应关注"发汗"干燥结合现代干燥技术如热风干燥、冷冻干燥、真空干燥以保证秦艽药材稳定品质的基础上缩短干燥时间。     

外源NO对龙胆次生代谢调控及质量形成机制研究

目的 探讨外源一氧化氮（nitric oxide,NO）对龙胆Gentiana scabra次生代谢产物环烯醚萜苷积累及其质量形成机制的影响。方法 分别用水及0.02、0.10、0.50、2.00 mmol/L硝普纳（sodium nitroprusside,SNP）溶液处理龙胆鲜根,研究活性氧、抗氧化酶活性、次生代谢产物相关酶活性及次生代谢产物积累之间的关系。结果 0.50、2.00 mmol/L SNP处理组龙胆超氧阴离子、过氧化氢（H₂O₂）、NO含量在0～2 d显著增加,第2天之后逐渐降低。丙二醛（malondialdehyde,MDA）含量呈现先升高后降低的趋势,表明SNP可模拟再现生态胁迫的生理状态。SNP处理组超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）活性在0～6 d均显著升高,0.50 mmol/L SNP处理组过氧化氢酶（catalase,CAT）和过氧化物酶（peroxidases,POD）活性分别在0～2 d和2～4 d显著升高。1,3-二磷酸甘油酸（1,3-disphosphoglycerate,1,3-DPG）含量及磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶（phosphoenolpyruvate carboxylase,PEPC）活性在0～4 d显著增加,其中0.50、2.00 mmol/L SNP处理组效果显著（P＜0.01）。0.50 mmol/L SNP处理组羟甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶（hydroxymethylglutaryl-CoA reductase,HMGR）和1-脱氧-D-木酮糖醇-5-磷酸还原异构酶（1-deoxy-D-xylulose 5-phosphate reductoisomerase,DXR）活性在0～6 d显著升高,第6天0.50 mmol/L SNP处理组龙胆中龙胆苦苷、獐芽菜苦苷、獐芽菜苷和马钱苷酸含量比第0天分别增加了34.5%、35.3%、1.8%和53.7%。结论 SNP能够再现龙胆逆境条件下的生理状态,促进龙胆中环烯醚萜类化合物的生物合成,提高龙胆药材质量。     

小秦艽和秦艽核型的比较研究

 目的首次对小秦艽和秦艽的核型进行比较研究,为其遗传和进化提供了进一步的细胞学证据。方法根尖用0.002mol·L^-1的8-羟基喹啉溶液预处理5.7h,用2.5%混合酶液,于25℃下酶解1.6h,低渗处理3h(置于冰箱内),然后用空气干燥法制片。结果小秦艽的核型公式是K(2n)=26=2M+24m,属于"1A"型,染色体相对长度组成为2n=26=2L+10M₂+12M₁+2S;秦艽的核型公式是K(2n)=26=2M+20m+4sm,属于"2B"型,染色体相对长度组成为2n=26=6L+6M₂+8M₁+6S。结论小秦艽的核型与秦艽相比较,秦艽较为进化。     

宁夏栽培秦艽与野生秦艽有效成分的比较

目的:通过对宁夏栽培秦艽不同品种与野生秦艽有效成分的比较,评价宁夏栽培秦艽的质量.方法:采用《中国药典》2010年版一部方法测量龙胆苦苷和马钱苷酸的含量;采用全自动氨基酸分析仪测定其氨基酸的含量;采用蒽酮-硫酸法测定其多糖的含量.结果:宁夏栽培的3种秦艽龙胆苦苷、马钱甘酸的含量都高于《中国药典》规定的限度;与野生秦艽相比,所含氨基酸的含量有显著性差异;多糖的含量无显著性差异.结论:宁夏栽培的3种秦艽品质良好,对于秦艽氨基酸和多糖的药用价值,可以进一步的研究开发和利用.     

陕西产秦艽的化学成分研究

目的:对陕西产秦艽Gentiana macrophylla根的化学成分进行系统研究。方法:利用多种色谱手段对秦艽的脂溶及水溶部分进行分离;用UV,IR,MS,¹H-,¹³C-NMR等技术及对照品对照进行鉴定。结果:鉴定了8个化合物,其中脂溶部位4个,分别是:5-羧基-3,4-二氢-1H-2-苯并吡喃-1-酮(5-carboxyl-3,4-dihydrogen-1H-2-benzopyran-1-one1),红白金花内酯(erythrocentaurin 2),栎瘿酸(roburic acid 3),齐墩果酸(oleanolic acid 4)。水溶部位4个:龙胆苦苷(gentiopicroside 5),獐牙菜苦苷(swertiamarine 6),獐牙菜苷(sweroside 7),6′-O-β-D-葡萄糖基龙胆苦苷(6′-O-β-D-gluco-sylgentiopicroside 8)。结论:1为新化合物,命名为红白金花酸,2为首次从本属植物中分得,8为首次从秦艽中分得。