血管内皮生长因子浓度对乳腺癌微转移的影响

目的:研究腋淋巴结阴性乳腺癌(ALNNBC)血管内皮生长因子(VEGF)血清浓度与乳腺癌微转移关系。方法:采用巢式RT-PCR方法,检测62例ALNNBC外周血人类乳腺珠蛋白(hMAM)mRNA的表达,阳性表达者判定为乳腺癌微转移;ELISA方法检测患者VEGF血清浓度。分析hMAM mRNA表达及VEGF血清浓度与相关临床病理因素间的关系,VEGF血清浓度与微转移及复发转移的关系。结果:ALNNBC中c-erbB2阳性表达者hMAM mRNA阳性表达率高(P<0.05);hMAM mRNA阳性表达提示乳腺癌存在微转移;ER阴性、P53阳性、c-erbB2阳性、hMAM mRNA阳性表达组VEGF血清浓度高(P<0.05或者P<0.01);高VEGF浓度组无复发生存率较低(P<0.05)。结论:ALNNBC外周血血清VEGF高浓度与微转移及临床复发和转移密切相关,血清VEGF浓度可能是ALNNBC预后预测因子。     

FOXP3~+Treg细胞对浸润性乳腺癌患者新辅助化疗疗效的预测价值分析

目的观察新辅助化疗对浸润性乳腺癌患者外周血及组织中CD4+CD25+FOXP3+Treg细胞的影响,探讨FOXP3+Tregs对乳腺癌新辅助化疗疗效的预测价值。方法回顾性分析郑州大学第一附属医院2013年1月至2014年12月期间收治的73例治疗前均经病理活检证实的女性浸润性乳腺癌患者,采用TAC方案(多西他赛+阿霉素+环磷酰胺)新辅助化疗2个周期。采集新辅助化疗前1 d和化疗后第10天的外周静脉血,应用流式细胞仪检测外周血中CD4+、Treg细胞的变化;采用免疫组化法检测乳腺癌组织中FOXP3的表达,评估患者新辅助化疗后的疗效,并分析FOXP3+Tregs的高低与病理完全缓解率(p CR)之间的关系。结果乳腺癌患者新辅助化疗后外周血中Treg细胞明显下降,CD4+细胞及CD4+细胞/Treg细胞显著升高,差异具有统计学意义(P<0.05)。化疗后57例有效组患者Treg细胞较16例无效组患者明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。p CR为17.8%,而FOXP3+Tregs高表达患者较低表达患者病理完全缓解率低(P=0.016)。结论新辅助化疗可降低乳腺癌患者外周血Treg细胞的比例;乳腺癌组织中Treg细胞FOXP3表达水平可预测乳腺癌新辅助化疗的疗效,将作为指导乳腺癌治疗的一个潜在指标。     

非小细胞肺癌患者术后化疗过程中外周血CK19 mRNA表达水平的变化及其临床意义

目的 探讨定量检测外周血CK19 mRNA表达水平在判定术后辅助治疗疗效及早期预测肿瘤复发中的价值.方法 接受以根治为目的的手术治疗的非小细胞肺癌(NSCLC)患者共26例,分别于术后化疗开始前、第1、2、3周期化疗结束后第3周各采集外周血标本.对照组为健康体检者(n=20).运用实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应法(fqRT-PCR)检测各时点外周血中CK19 mRNA水平.结果 化疗前患者外周血CK19 mRNA表达水平显著高于第1、2、3周期化疗后.阳性率从化疗前的84.6%分别下降至46.2%、38.5%及46.2% (P=0.004 6).术后有临床转移/复发患者外周血CK19 mRNA表达水平显著高于无临床转移/复发者(P=0.019).结论 术后定期监测外周血CK19 mRNA表达水平可作为判定术后辅助治疗疗效的重要标准.术后动态监测有助于预测NSCLC复发或转移.化疗难以完全消灭外周循环癌细胞,需寻找新的治疗方法或靶点.     

新辅助化疗对骨肉瘤患者外周血淋巴细胞HSP72表达的影响及意义

目的观察新辅助化疗对骨肉瘤患者外周血淋巴细胞热休克蛋白72(HSP72)表达的变化及临床意义。方法收集9例骨肉瘤患者化疗前后外周血为实验组,同时以11例健康献血者为对照组。应用RT-PCR和Western blot技术检测骨肉瘤患者化疗前后外周血淋巴细胞HSP72 mRNA和蛋白的表达,并同时检测对照组外周血淋巴细胞HSP72 mRNA和蛋白的表达。结果实验组外周血淋巴细胞HSP72 mRNA和蛋白的表达明显高于对照组(P<0.01)。实验组化疗前HSP72 mRNA和蛋白的表达显著高于化疗后(P<0.05)。结论 HSP72在骨肉瘤患者化疗中的变化可作为评价骨肉瘤对化疗药物敏感性的一个指标。     

乳癌新辅助化疗后MCM5、Ki-67和C—erbB-2表达变化及意义

目的 观察人乳癌新辅助化疗前后MCM5、Ki-67 和C-erbB-2蛋白的表达情况,探讨其与化疗效果的关系.方法 采用免疫组化法检测新辅助化疗前后40例乳癌标本中MCM5、Ki-67和C-erbB-2的表达.结果 新辅助化疗有效率为77.5%.化疗前MCM5和Ki-67蛋白阳性表达显著高于化疗后(Z=-3.94、-3.04,P＜0.01),而化疗前后C-erbB-2蛋白阳性表达差异无显著性(Z=-1.60,P＞0.05);化疗前MCM5蛋白阳性表达显著高于Ki-67(Z=-4.02,P＜0.01).化疗有效组(31例)MCM5蛋白阳性表达显著高于化疗无效组(9例)(Z=-3.57,P＜0.01),而C-erbB-2蛋白阳性表达显著低于化疗无效组(Z=-3.92,P＜0.01).结论 ET方案新辅助化疗有较好的疗效,可能通过抑制MCM5、Ki-67蛋白的表达来阻止乳癌细胞的增殖.MCM5高表达、C-erbB-2阴性者化疗更为敏感,二者可作为临床指导乳癌化疗的分子生物学指标.     

RRM1在NSCLC患者外周血和组织中的表达及其与吉西他滨疗效相关分析

目的 探讨Ⅱ,Ⅲ和Ⅳ期非小细胞肺癌(NSCLC)患者外周血和肿瘤组织中RRM1(核糖核苷酸还原酶M1)mRNA表达水平的一致性及其与吉西他滨化疗疗效之间的关系.方法 收集49例接受吉西他滨化疗患者化疗前、化疗第1个疗程后、病情恶化或停止治疗前外周血及化疗前病理组织蜡块,应用荧光定量PCR法检测肿瘤组织及外周血中RRM1 mRNA表达水平,并分析其表达量水平和相关变化与吉西他滨化疗疗效之间关系.结果 RRM1 mRNA在病理组织和外周血中的表达水平无统计学差异(P=0.336),RRM1 mRNA在化疗前、化疗第1个疗程后、病情恶化或停止治疗前表达水平的差异无统计学意义(P=0.939;P=0.878).RRM1 mRNA低表达30例(61.2%),高表达19例(38.8%);RRM1 mRNA低表达组有效(CR+PR)为23例(76.7%);RRM1 高表达组有效(CR+PR)4例(21.1%),即RRM1 mRNA低表达组对吉西他滨化疗疗效高于高表达组(P<0.05).结论 RRM1 mRNA表达水平可用于以吉西他滨为化疗基础的NSCLC患者的疗效预测指标.     

乳腺癌患者外周血中hMAM、SBEM和CEACAM19 mRNA联合检测及其临床意义

目的:探讨外周血中人乳腺珠蛋白(hMAM)、乳腺小黏蛋白(SBEM)和癌胚抗原相关黏附因子19(CEACAM19)mRNA联合检测在乳腺癌诊断中的作用,阐明其临床意义.方法:收集104例乳腺癌患者(乳腺癌组)、52例乳腺良性病变患者(良性乳腺病组)和50名健康人(健康对照组)的外周血,采用实时荧光定量PCR(RT-qP...     

CK-19对乳腺癌新辅助化疗疗效的评估价值

目的探讨细胞角蛋白19（cytokeratin19,CK-19）检测对乳腺癌患者新辅助化疗疗效评估的价值。方法采用实时定量逆转录聚合酶链反应（qRT—PCR）技术检测114例乳腺癌患者新辅助化疗前后外周血CK-19mRNA表达水平的变化。结果化疗前乳腺癌患者的CK-19mRNA阳性率为36．8％（42／114）,与患者的年龄、肿瘤大小,TNM分期、绝经状态、雌激素受体（ER）及孕激素受体（PR）的表达无关（P〉0．05）,而与腋窝淋巴结转移及临床分期有关（P〈0．01）。化疗后CK-19mRNA表达水平较化疗前明显降低（P〈0．01）。结论CK-19可以作为乳腺癌患者新辅助化疗疗效的评价指标之一。     

不同方案新辅助化疗对乳腺癌激素受体表达的影响

目的 探讨不同方案新辅助化疗对乳腺癌激素受体表达的影响.方法 免疫组化检测不同方案新辅助化疗组的乳腺癌患者化疗前后肿瘤组织雌激素受体(estrogen receptor,ER)和孕激素受体(progesterone receptor, PR)的表达情况,并比较两组化疗前后ER和PR表达水平的差异.结果 TE方案新辅助化疗组60例,ER表达水平增强15例(25.0%),减弱8例(13.3%),PR表达水平增强12例(20.0%),减弱6例(10.0%);CEF方案新辅助化疗组57例,ER表达水平增强8例(14.0%),减弱4例(7.0%),PR表达水平增强6例(10.5%),减弱3例(5.3%).TE方案新辅助化疗前后ER、PR表达水平改变显著(P＜0.05),而CEF方案新辅助化疗前后改变不显著(P＞0.05),不同疗效病例组之间ER、PR的表达水平改变差异显著(P＜0.05).结论 TE方案新辅助化疗对乳腺癌患者的ER、PR表达水平的改变影响显著,而CEF方案新辅助化疗对乳腺癌患者ER、PR表达水平的改变无明显影响,化疗后ER、PR表达水平的改变与疗效有关.     

新辅助化疗对乳腺癌雌激素受体和P53基因及人表皮生长因子受体-2的影响及意义

目的 探讨雌激素受体(ER)和P53基因、人表皮生长因子受体-2(HER-2)在新辅助化疗乳腺癌组织的表达及临床意义.方法 采用免疫组织化学方法检测100例乳腺癌患者新辅助化疗前后肿瘤组织中ER、P53基因及HER-2的表达,分析其与疗效的关系.结果 新辅助化疗总有效率为79%,新辅助化疗前ER、P53基因阳性表达和阴性表达患者化疗后有效率比较,差异均有统计学意义(P＜0.05).而新辅助化疗前HER-2阳性表达和阴性表达患者化疗后有效率比较,差异无统计学意义(P＞0.05).新辅助化疗前后ER、P53基因和HER-2表达率比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 新辅助化疗对ER、P53 基因及HER-2表达状态无显著影响;ER和P53 基因对乳腺癌新辅助化疗疗效有一定预测价值.     

SBEM、hMAM及CK19预测乳腺癌外周血微转移的临床价值

目的：探讨生物学标志物乳腺上皮小黏蛋白（ SBEM ）、乳腺珠蛋白（ hMAM ）和细胞角蛋白19（ CK19）在乳腺癌患者外周血循环中的表达及其作为乳腺癌外周血微转移预测指标的价值。方法采用巢式PCR技术,检测47例乳腺癌患者和45例乳腺良性瘤患者外周血有核细胞中SBEM、hMAM和CK19的表达;采用半定量PCR技术10例乳腺癌及对应的癌旁组织以及10例乳腺良性肿瘤组织中SBEM、hMAM和CK19的表达。结果 SBEM和hMAM在乳腺癌组患者外周血中表达率高于乳腺良性肿瘤组患者（ P＜0．05）,而两组外周血CK19表达率差异无统计学意义（P＞0．05）。 SBEM、hMAM和CK19在乳腺癌组织、癌旁组织及乳腺良性肿瘤组组织中均呈高表达,3组患者hMAM和CK19表达量没有差异（ P＞0．05）, SBEM在癌组组织中表达量低于癌旁组织及乳腺良性肿瘤组织组（ P＜0．05）。结论 SBEM、hMAM、CK19在乳腺组织中呈稳定高表达,作为乳腺癌外周血微转移生物学标志物灵敏性高,但缺乏特异性,联合检测可提高特异性。     

实时荧光定量RT—PCR检测乳腺癌患者外周血CK19及hMAMmRNA表达的临床意义

目的动态监测乳腺癌患者外周血液中CK19及hMAMmRNA的表达,探讨其临床意义。方法应用实时荧光定量PCR技术,动态检测40例经病理证实的乳腺癌及10例健康对照组外周血液中CK19及hMAM的表达。结果40例乳腺癌循环血液中CK19及hMAM的表达显著高于正常人群。在治疗过程中,乳腺癌患者循环血液中上述指标表达的阳性率呈下降趋势。不同分期乳腺癌在治疗前、中期的表达无显著性差异,但在治疗后期不同分期乳腺癌表达的阳性率差异有统计学意义（CK19：P=0．044;hMAM：P=0．005）,对持续阳性的乳腺癌患者,其复发转移率较高,差异有显著性统计学意义（P〈0．001）。结论实时荧光定量PCR技术可检测出各期乳腺癌患者外周血中CK19及hMAM的表达,有较高的敏感性和特异性,在判断乳腺癌预后、监控复发中的应用具有一定的可行性。     

hMAM联合MMP-9和C-erbB2mRNA表达检测在乳腺癌外周血微转移诊断中的应用

目的：探讨生物标记物人乳腺珠蛋白（hMAM）联合基质金属蛋白酶9（MMP-9）和人表皮生长因子受体2（C-erbB2） mRNA在乳腺癌外周血微转移患者中阳性表达情况,阐明其用于诊断乳腺癌外周血微转移的临床应用价值。方法：选择74例乳腺癌患者、21例乳腺纤维腺瘤患者和10名健康人作为研究对象,所有患者均行手术治疗,采集外周血,运用实时荧光定量PCR检测外周血hMAM、MMP-9和C-erbB2 mRAN表达水平,比较hMAM、MMP-9和C-erbB2联合检测阳性表达率,并分析不同临床病理特征患者之间hMAM、MMP-9和C-erbB2联合检测的差异。结果：MMP-9、C-erbB2 mRNA阳性表达率在有无淋巴结转移患者间比较差异有统计学意义（χ²=6.450,P < 0.05;χ²=5.636,P < 0.05）,hMAM mRNA阳性表达率在HER-2阳性与阴性患者间比较差异有统计学意义（χ²=5.804,P < 0.05）。乳腺癌患者hMAM及联合MMP-9和C-erbB2 mRNA阳性表达率分别为37.84%（28/74）、59.46%（44/74）和48.65%（36/74）,三者联合阳性表达率为64.86%（48/74）,均高于健康对照组（χ²=5.676,P < 0.05;χ²=3.102,P > 0.05;χ²=5.339,P < 0.05;χ²=2.310,P > 0.05）、乳腺纤维腺瘤组（χ²=8.438,P < 0.01;χ²=4.491,P < 0.05;χ²=7.982,P < 0.01;χ²=4.844,P < 0.05）和非乳腺癌组（对照组+乳腺纤维腺瘤组）（χ²=13.093,P < 0.01;χ²=6.471,P < 0.05;χ²=11.837,P < 0.01;χ²=6.103,P < 0.05）。与Ⅰ+Ⅱ期比较,Ⅲ+Ⅳ期乳腺患者hMAM mRNA单独及联合阳性表达率均增加,其中hMAM mRNA单独及联合C-erbB2 mRNA阳性表达率比较差异有统计学意义（χ²=5.157,P < 0.05;χ²=4.912,P < 0.05）。结论：hMAM诊断乳腺癌微转移的阳性率较低,联合MMP-9和C-erbB2 mRNA检测可以提高诊断阳性率,对于早期乳腺癌微转移诊断具有一定临床应用价值。     

实时荧光定量PCR法检测乳腺癌外周血循环肿瘤细胞的临床价值

目的:比较运用实时荧光定量PCR法联合不同生物标志物细胞角蛋白19(cytokeratin 19,CK19)?乳珠蛋白(human mammaglobin,hMAM)?小黏蛋白(small breast epithelial mucin,SBEM)检测乳腺癌外周血循环肿瘤细胞(circulating tumor cells,CTCs)的临床价值?方法:运用实时荧光定量PCR法检测人乳腺癌细胞株MCF-7中的生物标志物CK19?hMAM?SBEM的表达情况,对20例健康志愿者和20例乳腺良性疾病患者(对照组人群)进行检测以确定CK19?hMAM?SBEM在外周血中的基础表达水平,检测94例可手术乳腺癌患者外周血中CK19?hMAM?SBEM表达情况?结果:人乳腺癌细胞株MCF-7中CK19?hMAM?SBEM均有表达,Ct值分别为13.87?34.47?20.14;40例对照组人群中有1例表达CK19,另有1例表达hMAM,未检测到SBEM表达;94例可手术乳腺癌患者中CK19表达率49%?hMAM表达率34%?SBEM表达率13%,联合CK19?hMAM?SBEM阳性率为56%?结论:运用多标志物(CK19?hMAM?SBEM)联合的实时荧光定量PCR法检测乳腺癌外周血CTCs具有较高的敏感性,同时特异性并不降低?     

乳腺癌患者外周血hMAM、CK19、CEA、SBEM mRNA表达与淋巴结微转移的关系

目的探讨腋淋巴结阴性（ANN）乳腺癌患者外周血hMAM、CK19、CEA和SBEM mRNA的表达及与淋巴结微转移的关系。方法研究对象为62例ANN乳腺癌患者,免疫组化S-P法检测CK（AE1/AE3）在其淋巴结中的表达,以判定微转移;用荧光定量PCR技术检测外周血hMAM、CK19、CEA、SBEM mRNA的表达。结果 ANN组腋窝淋巴结微转移率为27.42%,有微转移的患者外周血hMAM、CK19、CEA和SBEM mRNA的阳性表达率分别为41.18%、29.41%、23.52%和35.29%,与对照组相比有显著差异。4种标记物联合检测比单项检测有更高的敏感度和准确性。结论外周血中的hMAM、CK19、CEA和SBEM mRNA联合检测可能为预测ANN乳腺癌患者淋巴道转移和微转移提供有用的观测指标。     

悬浮阵列技术检测循环肿瘤细胞基因预测乳腺癌术后复发

目的建立可以同时检测乳腺癌患者外周血中循环肿瘤细胞多个基因表达水平的悬浮阵列方法,探讨多基因联合检测在乳腺癌术后复发早期预测中的应用价值。方法以悬浮阵列技术检测73例乳腺癌患者外周血循环肿瘤细胞癌基因,并用COX比例风险模型寻找影响乳腺癌复发转移的独立预后因素。结果成功建立了可以同时检测乳腺癌患者外周血中8种循环肿瘤细胞基因表达水平的悬浮阵列方法,基因阳性率从大到小排列的结果为乳腺珠蛋白（hMAM）、人类表皮生长因子受体2（HER2）、细胞角蛋白19（CK19）、乳腺小黏蛋白（SBEM）、肿瘤相关钙信号转导蛋白1（EPG2）、端粒酶逆转录酶（hTERT）、人绒毛膜促性腺激素β亚基（β-HCG）和B305D基因,分别为57．5％、57．5％、53．4％、52．1％、31．5％、26．1％、21．9％和15．1％。1个及1个以上基因表达的阳性率为79％,高于血清CA15—3检测（44％,P〈0．05）。SBEM的表达与临床分期有关（P〈0．05）;hMAM、SBEM、HER2、雌激素受体（ER）为乳腺癌复发转移的独立预后因素（均P〈0．05）。结论建立的悬浮阵列方法在乳腺癌的预后判断方面具有实用价值。外周血循环肿瘤细胞hMAM、SBEM和HER2的表达可以作为分子标记物预测乳腺癌的复发转移。     

新辅助化疗对乳腺癌外周血微转移因子的影响

目的：观察新辅助化疗对乳腺癌外周血微转移因子的影响。方法：以48例具备新辅助化疗条件的乳腺癌患者为研究对象,采用RT—PCR技术,联合检测外周血中CK-19mRNA、VEGFmRNA和hMAMmRNA的表达,观察新辅助化疗前后血微转移因子变化。结果：本组乳腺癌微转移因子阳性率在病理分级中差异无显著性意义（P〉0．05）;在分期中,分期越高阳性率越高（P〈0．05）;化疗方案可影响微转移因子阳性率的变化（P〈0．01）。结论：通过检测乳腺癌患者外周血中微转移因子．有可能成为判断乳腺癌预后和指导治疗的指标。     

乳腺癌患者中乳腺球蛋白的表达及其临床意义

目的 探讨hMAM mRNA在乳腺癌患者皮肤组织及乳头乳晕复合体的表达及其临床意义.方法 对30例乳腺癌患者,术后皮肤在距肿瘤最近点取材,乳头乳晕复合体经正中切面取材,同时取乳腺癌组织26例,正常皮肤组织10例,采用RT-PCR技术检测hMAM mRNA.结果 乳腺癌组织均阳性,正常皮肤组织均阴性.乳腺癌患者皮肤组织hMAM mRNA阳性率为10.0%(3/30),乳头乳晕复合体hMAM mRNA阳性率为16.7%(5/30).皮肤组织hMAM mRNA阳性率与皮肤外观是否有改变有关(P=0.0035).乳头乳晕复合体hMAM mRNA阳性率与肿瘤是否位于中心区有关(P=0.0192).结论 乳腺癌患者hMAM mRNA阳性预示着微转移.皮肤局部外观的改变,及肿块的相对位置能够大致预测皮肤或乳头是否受累;而且,由于皮肤及乳头的受累率较低,保留皮肤的乳腺癌根治术,或腔镜乳腺癌根治术具有可行性.     

人乳腺珠蛋白信使RNA聚合酶联反应检测乳腺癌前哨淋巴结微转移

目的应用RT-PCR法检测乳腺癌前哨淋巴结(sentinel lymph node,SLN)中乳腺珠蛋白基因(human mammaglobin,hMAM)mRNA的表达情况。探讨乳腺癌SLN定位及其微转移检测的临床意义。方法对51例乳腺癌患者采用术中肿瘤周围和乳晕下注射专利蓝的方法定位SLN,检测SLN中hMAM mR-NA的表达情况。结果SLN定位成功率为76.47%(39/51);RT-PCR检测hMAM mRNA与常规病理检查方法相比,检测SLN转移的阳性率提高了20.51%,二者差异具有显著性(P<0.05)。结论hMAM mR-NA可作为标志物来检测乳腺癌SLN中的微转移情况,通过SLN定位和RT-PCR的联合应用,可明显提高乳腺癌SLN微转移的检出率,对预测腋窝淋巴结(axillary lymph node,ALN)的状态有着重要的临床价值。     

TCH方案在Her-2阳性乳腺癌新辅助治疗的临床疗效观察

目的探讨TCH(多西他赛+卡铂+曲妥珠单抗)方案在Her-2阳性乳腺癌新辅助治疗中的临床疗效。方法对21例Her-2阳性乳腺癌(ⅡB期～ⅢC期)术前行TCH方案的新辅助治疗4～6个周期,评价临床疗效,并中位随访2年观察无病生存率及总生存率。结果 21例患者中CR 16例(76.19%),其中达到PCR 13例(61.90%),PR 3例(14.29%),SD 2例(9.52%)。总有效率(CR+PR)达:90.48%,2年的无病生存率为95.23%,总生存率为100%。结论应用TCH方案行新辅助治疗可有效提高Her-2阳性乳腺癌患者的临床缓解率,使一部分患者获得保乳手术的机会,提高手术成功率,并改善患者的生存率。