黄芪、丹参对肥大心肌细胞SERCA2a、PLB mRNA表达的影响

目的:研究黄芪注射液、丹参注射液对肥大心肌细胞SERCA2a、PLB mRNA的影响。方法:采用AngⅡ致乳鼠心肌细胞肥大模型,分为对照组、模型组、黄芪组、丹参组、联合组,采用RT-PCR法观察给药后24、48、72h心肌细胞PLB和SERCA2a mRNA水平。结果:AngⅡ可使PLB和SERCA2a mRNA水平降低,各时点SERCA2a下降均具有显著差异(P<0.05),48、72h PLB下降具有统计学意义(P<0.01),各用药组不同时点、不同程度改善PLB、SERCA2a mRNA水平与SERCA2a/PLB。结论:黄芪注射液、丹参注射液及其联合应用可以在不同时间改善SERCA2a、PLB mRNA水平和SERCA2a/PLB。     

益气活血方对慢性心力衰竭大鼠心肌NCX与SERCA2a mRNA及蛋白表达水平的影响

目的观察益气活血方(由丹参、黄芪、香加皮等组成)对慢性心力衰竭(CHF)大鼠心肌钠钙交换蛋白(Sodium-calcium exchanger,NCX)与肌浆网钙泵-2a(SR calcium ATPase-2a,SERCA2a)mRNA及蛋白表达水平的影响,初步探讨益气活血方改善慢性心衰大鼠心功能的作用机制。方法采用结扎大鼠冠状动脉左前降支的方法制备急性心肌梗死后慢性心力衰竭模型。实验分6组:假手术组,模型组,卡托普利组,益气活血方高、中、低3个剂量组,连续ig给药4周后取材,检测心肌组织NCX与SERCA2a mRNA及蛋白表达。结果各给药组均可不同程度的下调NCX mRNA的表达,上调SERCA2a mRNA的表达,其中益气活血方高、低剂量组以及卡托普利组与模型组比较有显著性差异(P<0.05);各给药组均能降低NCX/SERCA2a mRNA的比值,与模型组比较差异显著(P<0.05)。各给药组均有下调NCX蛋白、上调SERCA蛋白表达的趋势,但与模型组相比无显著差异(P>0.05)。结论益气活血方能够降低CHF大鼠NCX mRNA的表达,升高SERCA mRNA的表达,降低NCX/SERCA mRNA的比值,调节心肌细胞内钙循环,从而改善心肌的舒缩功能,其可能为益气活血方改善心脏功能、抗心力衰竭的机制之一。     

3′-大豆苷元磺酸钠对慢性心力衰竭大鼠心肌PLB和SERCA mRNA表达的影响

目的:观察3'-大豆苷元磺酸钠对慢性心力衰竭大鼠心肌受磷蛋白(phospholamban,PLB)和Ca2+-ATP酶(Ca2+-ATPase,SERCA)mRNA表达的影响,探讨3'-大豆苷元磺酸钠抗心力衰竭的机制。方法:结扎大鼠冠状动脉前降支造成心肌梗死后慢性充血性心力衰竭(CHF)模型,采用实时荧光定量PCR技术观察。心肌PLB和SERCA mRNA表达以及3'-大豆苷元磺酸钠对其影响。结果:各给药组均可不同程度的下调PLB mRNA表达,上调降低SERCA mRNA表达,其中3'-大豆苷元磺酸钠0.4mg.kg-1剂量组、地高辛组与模型组比较有显著性差异(P<0.05);各给药组均能降低PLB/SERCA比值,地高辛组和3'-大豆苷元磺酸钠0.4mg.kg-1、0.2mg.kg-1剂量组与模型组比较差异具有显著性(P<0.05,P<0.01)。结论:3'-大豆苷元磺酸钠治疗能提高SERCA mRNA表达,降低PLBmRNA表达,改善PLB/SER-CA比值,这可能是3'-大豆苷元磺酸钠抗心力衰竭的机制之一。     

黄芪甲苷对糖尿病心肌病大鼠SERCA2a及ICa-L的影响

目的 观察黄芪甲苷改善高脂高糖饲料联合链脲佐菌素（STZ）诱导糖尿病心肌病大鼠SERCA2a及L-钙电流的机制研究。方法 成年Wistar大鼠高脂高糖饮食及STZ诱导糖尿病心肌病模型,随机分为3组,模型组（n=5）、黄芪甲苷组（10mg/kg,n=5）、贝那普利组[100mg/（kg·d）,n=5],另设正常组（n=5）,4周治疗后观察大鼠心肌组织细胞凋亡、心肌纤维化、SERCA2a蛋白水平、基因表达及I_Ca-L电流的变化。结果 高脂高糖饲料联合STZ-诱导糖尿病心肌病大鼠心脏功能下降、SERCA2a、I_Ca-L电流表达降低,黄芪甲苷组较模型组可显著改善细胞凋亡和心肌纤维化,同时提高SERCA2a蛋白和mRNA表达,改善I_Ca-L电流的作用,与盐酸贝那普利组比较差异有统计学意义（P<0.05）。结论 黄芪甲苷可通过提高SERCA2a mRNA和蛋白的表达,增加I_Ca-L电流,改善心肌的收缩舒张功能。     

黄芪对慢性心衰大鼠心功能及心肌肌浆网钙泵基因表达的影响

目的:探讨黄芪对慢性心衰大鼠心功能及心肌肌浆网钙泵基因(SERCA2a)表达的影响.方法:60只大鼠随机分为假手术组、模型组、黄芪组(20 g/kg)和卡托普利组(0.05 g/kg).采用缩窄腹主动脉法制备慢性心衰模型,造模后第13周开始灌胃给药,连续给药12周后测定大鼠在体血流动力学指标,并采用RT-PCR、Western blot方法检测左室组织SERCA2a基因的表达.结果:模型大鼠左室收缩压(LVSP)、左室舒张末压(LVEDP)均较假手术组显著升高(P＜0.01或P＜0.001),卡托普利和黄芪均能降低模型大鼠LVSP(P＜0.05或P＜0.01)、LVEDP(P＜0.05或P＜0.01);模型组大鼠左心室SERCA2a基因表达较假手术组下调(P＜0.05),黄芪能上调模型大鼠SERCA2a基因表达(P＜0.05),而卡托普利对其表达无明显影响.结论:黄芪能改善慢性心衰大鼠心功能障碍,并以改善舒张功能为主,其机制可能与上调心肌SERCA2a基因表达有关.     

杠柳毒苷对慢性心力衰竭大鼠心肌PLB和SERCA mRNA表达的影响

目的:观察杠柳毒苷对慢性心力衰竭大鼠心肌受磷蛋白(phospholamban,PLB)和Ca2+-ATP酶(Ca2+-ATPase,SERCA)mRNA表达的影响,探讨杠柳毒苷抗心力衰竭的机制.方法:结扎大鼠冠状动脉前降支造成心肌梗死后慢性充血性心力衰竭(CHF)模型,采用实时荧光定量PCR技术观察心肌PLB和SERCA mRNA表达以及杠柳毒苷对其的影响.结果:杠柳毒苷8mg/kg剂量、地高辛可下调PLB mRNA表达,上调降低的SERCA mRNA表达与,模型组比较有显著性差异:地高辛和杠柳毒苷8mg/kg、4mg/kg剂量能降低PLB/SERCA比值,与模型组比较差异具有显著性.结论:杠柳毒苷治疗能提高CHF模型大鼠SERCA mRNA表达,降低PLB mRNA表达,改善PLB/SERCA比值,这可能是枉柳毒苷抗心力衰竭的机制之一.     

柴胡三参胶囊对心肌缺血心律失常模型大鼠心肌细胞Ca~(2+)及SERCA2a mRNA表达的影响

目的:研究柴胡三参胶囊对心肌缺血心律失常模型大鼠的防治作用,通过检查指标探讨其可能的作用机制。方法:以结扎大鼠冠状动脉前降支为模型,将60只大鼠分为模型组、假手术组、柴胡三参胶囊小、中、大剂量组和普罗帕酮组,观察大鼠结扎后心电图、心肌细胞Ca2+浓度及SERCA2amRNA表达。结果:柴胡三参胶囊可减少大鼠心肌缺血心律失常的发生,减少心肌细胞内Ca2+超载,增强SERCA2amRNA的表达。结论:柴胡三参胶囊对大鼠心肌缺血心律失常具有明显的保护作用,可能是通过增加SERCA2amRNA活性,从而减少心肌细胞内Ca2+超载。     

附子-黄芪-葶苈子角药对心力衰竭模型大鼠心肌细胞线粒体膜电位及钙调节蛋白NCX1、SERCA2的影响

目的 探讨附子-黄芪-葶苈子角药治疗心力衰竭的可能作用机制.方法 将75只SD大鼠随机分为空白组、模型组、角药组、黄芪甲苷组与曲美他嗪组,每组15只.除空白组外,其余各组大鼠以腹腔注射盐酸阿霉素6周的方式建立心力衰竭大鼠模型,实验第2周起角药组给予附子、黄芪、葶苈子免煎颗粒15g/(kg·d)灌胃,曲美他嗪组给予盐酸曲...     

益母草水苏碱对大鼠心肌细胞肥大的肌浆网钙摄取及SERCA活性的影响

目的:探讨益母草水苏碱(stachydrine,Sta)对去甲肾上腺素(norepinephrine,NE)诱导的新生大鼠心肌细胞肥大肌浆网钙摄取及SERCA活性的影响。方法:采用不同浓度的益母草水苏碱(10-4,10-5,10-6mol·L-1)对NE诱导的心肌肥大模型组进行干预,通过大鼠心肌肌浆网的蛋白水平和钙摄取能力来反映益母草水苏碱对NE诱导的新生大鼠心肌细胞肥大的影响。结果:益母草水苏碱能够明显减少心肌细胞蛋白含量,降低Protein/DNA比值;益母草水苏碱可剂量依赖地提高NE诱导的心肌肥大细胞的肌浆网钙摄取和SERCA活性。结论:益母草水苏碱对NE诱导的心肌肥大细胞的肌浆网钙摄取功能有一定的程度的提高,与剂量有一定的依赖关系,随着益母草水苏碱的浓度的提高,肌浆网的钙摄取速率和SERCA活性也明显提高。     

丹参总酚酸对慢性心衰大鼠肌浆网Ca~(2+)-ATP酶、受磷蛋白表达的影响

目的:观察丹参总酚酸对慢性心力衰竭大鼠心肌肌浆网Ca2+-ATP酶(Ca2+-ATPase,SERCA)、受磷蛋白(Phospholamban,PLB)的蛋白表达的影响,探讨丹参总酚酸抗心力衰竭的作用机制。方法:结扎大鼠冠状动脉左前降支造成心肌梗死后慢性心力衰竭模型,连续给予丹参总酚酸4周后,采用蛋白印迹(Western Blot)技术检测心肌组织的SERCA和PLB蛋白表达水平及PLB的磷酸化水平。结果:与心力衰竭模型组相比,丹参总酚酸能明显升高SERCA及磷酸化受磷蛋白(phosphorylated Phospholamban,P-PLB)的蛋白表达及PLB的磷酸化水平。丹参总酚酸能明显降低PLB/SERCA比值。结论:丹参总酚酸能升高SERCA的蛋白表达,升高P-PLB的蛋白表达及PLB的磷酸化水平,降低PLB/SERCA比值,减轻PLB对SERCA功能的抑制,这可能是丹参总酚酸抗心力衰竭的机制之一。     

黄芪和丹参提取物配伍对大鼠心肌梗死后心肌组织病理变化的影响

目的:探讨黄芪和丹参提取物配伍对心肌梗死大鼠心肌组织病理变化的影响.方法:成功构建大鼠心梗模型后,随机分为模型组、黄芪组、丹参组、黄芪-丹参配伍组,每组8只大鼠,另设假手术组8只.术后48 h,黄芪、丹参及黄芪-丹参配伍组大鼠,均按20 mg· kg-1灌胃,其中黄芪-丹参配伍组,黄芪、丹参提取物按照1∶1配伍;对照组和假手术组给予生理盐水20 mL·kg-1灌胃.8周后测定大鼠的血流动力学变化;应用HE染色分析左心室心肌细胞组织形态学变化;采用Masson染色法检测左心室心肌胶原纤维;应用免疫组化法检测左心室心肌组织蛋白激酶D1(PKD1)的表达情况.结果:血流动力学检测结果表明,与模型组相比,假手术组、黄芪组-丹参组及黄芪丹参配伍组心脏左室收缩压(LVSP)、左室内压曲线最大上升和下降速率(±dp/dt)均显著升高(P＜0.01),左室舒张末压(LVEDP)均显著降低(P＜0.01),与丹参组相比,黄芪丹参配伍组LVSP,±dp/dt均明显升高(P＜0.05).HE染色分析,模型大鼠心肌细胞坏死严重,成纤维细胞增多,伴有炎症细胞浸润;黄芪、丹参单体组,细胞形态略显模糊,核肥大,成纤维细胞轻度增生,炎症细胞减少;黄芪-丹参配伍组细胞形态较清晰,成纤维细胞和炎症细胞少见.Masson染色结果表明,模型组大鼠心肌以胶原组织为主,各治疗组大鼠以红色心肌组织为主,间杂以胶原组织.免疫组化分析表明,模型组心肌组织胞浆中PKD1蛋白的表达极其明显(P＜0.01);和模型组相比,黄芪-丹参组心肌组织胞浆中PKD1蛋白的表达明显下调(P＜0.01),但仍清晰可见;和黄芪、丹参单体组相比,黄芪-丹参配伍组心肌组织胞浆中PKD1蛋白的表达进一步下调(P＜0.05).结论:黄芪-丹参配伍可明显改善心肌梗死后异常的血液流变学指标及组织的病理学病变,其作用机制可能与调控心肌组织PKD1蛋白的表达相关.     

黄芪注射液对左室肥厚大鼠心肌钙超载及肌浆网钙泵表达的影响

目的：探讨黄芪对压力过载致左室肥厚大鼠心肌钙含量及肌浆网钙泵(SERCA2a)表达的影响。方法：采用缩窄腹主动脉法制备压力过载性心肌肥厚模型。大鼠随机分为假手术组，模型组，低、中、高剂量黄芪组(5，10，20 g·kg^-1·d^-1)和卡托普利组(0.05 g·kg^-1·d^-1)。造模后第13周开始灌胃给药，连续12周。测定大鼠左室质量指数(left ventricular mass index, LVMI)和心肌钙含量的变化(原子吸收光谱法)，并检测(RT-PCR，Western blot)大鼠左室组织肌浆网钙泵的表达。结果：黄芪呈剂量依赖性抑制模型大鼠左室质量指数的增加(P<0.01，P<0.001)，其中高剂量黄芪作用与卡托普利相似；黄芪能抑制肥厚心肌组织钙超载(P<0.01)；与假手术组相比，心肌肥厚大鼠左心室SERCA2a 基因表达下调(P<0.05)，高剂量黄芪使之表达上调(P<0.05)，而卡托普利对其表达无明显影响。结论：黄芪对大鼠压力过载性心肌肥厚的抑制作用可能与其减轻心肌钙超载及上调心肌SERCA2a基因表达有关。     

Cardioprotective effect of salvianolic acid B on large myocardial infarction mediated by reversing upregulation of leptin, endothelin pathways, and abnormal expression of SERCA2a, phospholamban in rats

AIM: To study the cardioprotective effect of salvianolic acid B (Sal B) on cardiac dysfunction. We hypothesized that hyperleptinemia may correlate with abnormal expression of sarco/endoplasmic reticulum ATPase 2a (SERCA2a), phospholamban (PLB) and endothelin-reactive oxygen species (ET-ROS) pathways in rats with large myocardial infarction (MI). METHODS: Large MI was produced by coronary artery ligation for 4 weeks in rats. The rats were divided into four groups: sham, MI, MI+l-Sal B (50 mg/(kg d)), p.o. for 4 weeks), and MI+h-Sal B (100 mg/(kg d)), p.o. for 4 weeks). RESULTS: In MI rats, hemodynamic and echocardiographic abnormalities, cardiac remodeling, and histological changes with features of cardiac failure were associated with hyperleptinemia accompanied by oxidative stress and upregulated OB-Rb, ET pathway mRNA expression and downregulated SERCA2a and PLB mRNA and protein expressions in the myocardium. CONCLUSIONS: The studies demonstrated that an activated leptin pathway correlated with abnormal expression of SERCA2a, PLB and an activated ET-ROS system in the affected myocardium. Sal B exerts beneficial actions on cardiac function in rats with large MI, mainly suppressing upregulation of leptin and ET pathways and oxidative stress, and recovering the normal expressions of SERCA2a and PLB in myocardium.     

赤芍药提取物对兔颈动脉介入术后增殖内膜相关基因表达的影响

目的:探讨赤芍药提取物对高脂喂养兔颈动脉球囊损伤后血管内膜增殖与还原型炯酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)氧化酶亚单位p22phox及单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)的影响.方法:采用Clowes方法建立兔颈总动脉球囊损伤模型,并给予赤芍药提取物.免疫组化染色测定兔颈动脉新生内膜成分、增殖细胞核抗原(proliferat ingcellnuclearantigen,PCNA)及巨噬细胞表达,血管特殊染色观察1型胶原增生,图像分析系统测定新生内膜面积;原位杂交染色及逆转录聚合酶链反应检测增殖血管内膜的NADPH Oxidase p22phox及MCP-1 mRNA水平.结果:赤芍药提取物可减少PCNA阳性细胞数,抑制型胶原增生,减轻新生内膜形成;显著降低NADPH Oxidase p22phox及MCP-1mRNA表达.结论:赤芍药抑制血管内膜增殖程度,其机制可能与抗氧化应激及抗血管内皮炎症反应有关.     

复方苦参注射液对泪腺腺样囊性癌ACC-2细胞增殖、凋亡及Caspase-3蛋白表达的影响

目的探讨复方苦参注射液对泪腺腺样囊性癌ACC-2细胞增殖、凋亡及Caspases-3蛋白表达的影响。方法体外培养人泪腺腺样囊性癌ACC-2细胞,应用MTT法检测细胞增殖;AnnexinV/PI双染色流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期;ELISA法检测Caspases-3蛋白表达。结果复方苦参注射液对ACC-2细胞的体外增殖具有抑制作用,量效关系显著,与对照组比较有统计学差异(P<0.01),半数抑制浓度(IC50)为0.84g/ml。经流式细胞仪检测表明,复方苦参注射液能使ACC-2细胞G0-G1期逐渐增加,G2-M期和S期逐渐减少,并且随着剂量的增加,ACC-2细胞凋亡率明显增加(P<0.05或P<0.01)。复方苦参注射液能增强ACC-2细胞Caspases-3蛋白的表达(P<0.05或P<0.01),并呈剂量依赖性。结论复方苦参注射液能有效抑制人泪腺腺样囊性癌ACC-2细胞Caspases-3蛋白表达,诱导ACC-2细胞凋亡,抑制肿瘤细胞增殖。     

温补肾阳方对心肌梗死后心力衰竭大鼠血流 动力学及血清肌钙蛋白I和脑钠肽含量的影响

[目的]研究温补肾阳方对心肌梗死后心力衰竭大鼠心脏血流动力学及血清心肌肌钙蛋白(ITNI)和脑钠肽(BNP)含量的影响。[方法]采用结扎冠状动脉前降支术制备心肌梗死后心力衰竭大鼠模型,造模成功后,将大鼠随机分为模型组,曲美他嗪为对照组,假手术组为空白对照组,温补肾阳方高、中、低剂量组。给药8周后测血流动力学指标,如左室收缩压(LVSP)、左室舒张压(LVEDP)、左室内压上升下降最大速率(±LVdp/dtma)x;应用双抗体夹心法测定心肌梗死后心力衰竭大鼠药物干预前后TNI水平;采用酶联免疫吸附法检测治疗前后大鼠BNP水平。[结果]治疗后测血流动力学,与模型组相比,温补肾阳方中、高剂量组与曲美他嗪组均可显著升高心力衰竭大鼠LVSP和+LVdp/dtmax(P<0.01),降低其LVEDP、-LVdp/dtma(xP<0.01),且高剂量组要优于中剂量。与模型组相比,补肾阳方高、中、低剂量组及曲美他嗪组均可显著降低心力衰竭大鼠TNI及BNP水平(P<0.01)。[结论]温补肾阳方能提高心力衰竭大鼠的心脏收缩、舒张功能,减轻心肌受损,改善心功能。