肝硬化患者血清1,25（OH）2D3对骨代谢的影响

分别采用竞争性放射受体法及入免法测定３２例肝硬化患者血清１，２５（ＯＨ）２Ｄ３、ＰＴＨ水平，并与３２例慢性乙型活动性肝炎、３１例健康者对照。发现：肝硬化组血清１，２５（ＯＨ）２Ｄ３较肝炎组和对照组明显下降（Ｐ〈０．０１，Ｐ〈０．００１），并与血钙、尺桡骨密度呈下相关（Ｐ〈０．０１，Ｐ〈０．０５）；肝硬化组血清ＰＴＨ较肝炎组和组明显升高（Ｐ〈０．０５，Ｐ〈０．０５），但与血钙、尺桡骨密度无相关性。提     

1,25(OH)2D3治疗血透患者继发性甲状旁腺功能亢进症的临床研究

继发性甲状旁腺功能亢进症（secondaryhyper－parathyoidism，SHPT）是长期透析患者的常见并发症之一。目前对其发病机制还不是很清楚犤１犦。由于低血钙、高血磷及甲状旁腺激素不易被清除所致，此病代谢紊乱易引起的骨结构、骨转化异常导致骨纤维化、骨囊肿、甚至骨折，严重影响患者的生活质量及生存率。如何控制SHPT是临床探索的一个焦点，我们观察口服大剂量１，２５（OH）２D３冲击治疗长期血透病人的SH－PT，现报告如下。１对象与方法１．１对象长期血透病人３１例，男１８例，女１３例，年龄２９～５６岁，平均４３．１±１６．…     

1,25(OH)_2D_3对去卵巢大鼠骨组织成骨细胞、骨细胞凋亡的影响

目的观察1,25(OH)_2D_3对去卵巢大鼠骨组织中成骨细胞、骨细胞凋亡的影响。方法 36只雌性SD大鼠随机分成四组,对尼尔雌醇组和1,25(OH)_2D_3组分别给予尼尔雌醇(0.1mg/kg)和1,25(OH)_2D_3(0.05μg/kg)治疗12周。12周后,以DXA法测定大鼠全身的骨密度;放射免疫法测定各组大鼠血清中骨钙素及雌二醇的水平;处死各组大鼠,采用3′-OH末端DNA原位标记技术和透射电镜检测骨细胞、成骨细胞凋亡。结果 12周后,去卵巢组大鼠的骨密度和血清雌二醇水平明显降低,骨钙素含量升高,与假手术组相比,差异有显著性(P0.05)。1,25(OH)_2D_3可以增加去卵巢大鼠的全身骨密度和血清骨钙素含量(P0.05),但是不增加血清雌二醇的水平(P0.05)。1,25(OH)_2D_3可以抑制骨细胞、成骨细胞凋亡,与去卵巢组相比差异有显著性(P0.05)。结论 1,25(OH)_2D_3对去卵巢大鼠骨质疏松症具有防治作用,其部分机制可能为1,25(0H)_2D_3抑制了骨细胞、成骨细胞凋亡,从而调节骨重建。     

1,25-(OH)2维生素D3对NOD小鼠的免疫干预作用

目的　探讨 1,2 5 (OH) 2 维生素D3 〔1,2 5 (OH2 )D3 〕对环磷酰胺促发的NOD小鼠 1型糖尿病的预防作用。方法　取体重相近的 4周龄NOD雌性小鼠 2 0只在实验开始前均一次性腹腔注射环磷酰胺 2 80mg/kg以加速胰岛炎。分为两组 ,每组 10只 ,干预组隔日腹腔注射 1,2 5 (OH2 )D3 5 μg/kg ,对照组注射等量的花生油。 3 0天实验结束时 ,观察糖尿病发生率 ,行HE染色观察胰岛炎程度 ,免疫组化观察bcl 2 ,bax在胰岛的表达 ,流式细胞仪定量测定脾脏T淋巴细胞的凋亡率。结果　 1,2 5 (OH) 2 D3 干预组糖尿病发病率较花生油对照组发病率低 ;1,2 5 (OH) 2 D3 干预后血糖值较干预前显著下降 (P <0 .0 1) ;干预组胰岛炎严重程度较花生油对照组明显减轻 ;胰岛细胞抑制凋亡的bcl 2基因的表达在 1,2 5 (OH ) 2 D3 处理组高于花生油对照组 ,而促进凋亡的bax基因的表达在 1,2 5 (OH ) 2 D3 组低于花生油对照组 (均P <0 .0 5 ) ;1,2 5 (OH ) 2 D3 组脾淋巴细胞凋亡率为 (3 2 .3 1± 7.0 1) % ,而花生油对照组凋亡率为 (2 4.19± 7.70 ) % (P <0 .0 5 )。结论　 1,2 5 (OH) 2 D3 对环磷酰胺加速的NOD小鼠胰岛具有保护作用。     

1,25(OH)2D3对应用糖皮质激素治疗的肾病患者骨代谢的影响

目的观察1,25(OH)2D3对应用糖皮质激素治疗的原发性肾脏病患者骨代谢的影响。方法将16例原发性肾脏病患者随机分为治疗组和对照组。治疗组在应用糖皮质激素治疗的同时给予0.25μg的1,25(OH)2D3,每日1次口服,碳酸钙0.75,每日3次口服。对照组单纯给予碳酸钙0.75,每日3次口服。所有患者在治疗前及治疗12周时应用双能X线吸收法骨密度仪测定腰椎和股骨颈的骨密度,同时测定有关骨代谢指标,包括血全段甲状旁腺素,骨钙素,尿脱氧吡啶啉,血钙、磷以及血清白蛋白,24小时尿蛋白定量、尿钙和尿磷。结果治疗12周时两组患者的腰椎和股骨颈骨密度均下降,两组间比较无显著性差异(P>0.05);治疗12周时对照组患者的骨钙素较治疗前明显下降(P<0.05),而治疗组无明显差异;尿脱氧吡啶啉在两组中均下降,但治疗组下降明显(P<0.05);两组患者血全段甲状旁腺素、24小时尿钙和尿磷治疗前后及组间比较均无显著性差异(P>0.05);应用1,25(OH)2D3治疗者无1例出现高钙血症。结论应用糖皮质激素治疗12周的原发性肾脏病患者其腰椎及股骨颈骨密度下降明显。1,25(OH)2D3可促进骨形成,抑制骨的吸收。     

大剂量1,25(OH)_2D_3口服冲击治疗血透患者甲状旁腺素和血小板胞内游离钙异常

目的：了解大剂量１，２５（ＯＨ）２Ｄ３口服冲击对血透患者血清甲状旁腺素［ＰＴＨ（１～８４）］和血小板胞内游离钙浓度（Ｐｔ［Ｃａ２＋］ｉ）的影响和相互关系。方法：用Ｆｕｒａ２荧光测定法和免疫放射法对１２例血透患者测定Ｐｔ［Ｃａ２＋］ｉ和ＰＴＨ（１～８４）。结果：静息Ｐｔ［Ｃａ２＋］ｉ和ＰＴＨ（１～８４），治疗前是升高的，治疗后则降低；且两者密切相关，其Ｐ值治疗前＜０００１，治疗后＜００２５。多因素逐步回归显示：ＰＴＨ（１～８４）在Ｐｔ［Ｃａ２＋］ｉ的影响中起显著作用。结论：大剂量１，２５（ＯＨ）２Ｄ３冲击治疗能降低Ｐｔ［Ｃａ２＋］ｉ和ＰＴＨ（１～８４），其降低Ｐｔ［Ｃａ２＋］ｉ的作用可能是通过抑制ＰＴＨ合成与分泌     

腹膜透析患者1,25二羟基D3冲击治疗的疗效观察

为了探讨口服１，２５（ＯＨ）２Ｄ３冲击治疗对腹膜透析患者钙磷代谢及甲状旁腺功能的影响，我们给予３２例ＣＡＰＤ患者口服１．２５（ＯＨ）２Ｄ３大剂量冲击治疗（２－４μｇ／次，每周２次）．另２９例为常规治疗组（０．２５－０．５ｕｇ／ｄ）作为对照组。结果显示，两组患者血钙均明显升主，血磷及血ＡＫＰ均明显降低；ＰＴＨ和ＣＴ在常规治疗组有轻度降低，但无统计学差异；而口服冲击治疗组，ＰＴＨ和ＣＴ则明显降低，且临床症状明显改善，用药过程中未发现明显副作用。上述结果表明，１，２５（ＯＨ）２Ｄ３口服冲击治疗是纠正钙磷代谢紊乱和甲状旁腺功能亢进的较佳疗法，值得推荐。     

1,25(OH)2D3阻抑UUO大鼠肾间质纤维化的实验研究

肾间质纤维化几乎是所有慢性肾脏疾病进行性发展的共同通路,是导致慢性肾功能衰竭(CRF)的病理学基础,寻求其早期可逆因子或防治措施对肾脏疾病转归有重要意义.     

乙肝后肝硬化患者血清1,25(OH)2D3检测及其临床意义

采用竞争性放射受体法测定３２例乙肝后肝硬化患者血清１Ｍ２５（ＯＨ）２Ｄ３水平,并与３２例性乙型肝炎、３１例健康者对照。发现：肝硬化组血清１,２５（ＯＨ）２Ｄ３水平较肝炎组和对照组明显下降（Ｐ〈０．０１,Ｐ〈０．００１）,且与血清骨钙素、尺桡密度呈正相关（Ｐ〈０．０１,Ｐ〈０．０５）。提示：测定乙肝后肝硬化患者血清１,２５（ＯＨ）２Ｄ３水平有利于肝性骨病的早期发现。     

肝硬化患者血清1,25(OH)_2D_3变化对骨代谢的影响

分别采用竞争性放射受体法及放免法测定32例肝硬化患者血清1,25(OH)2D3、PTH水平,并与32例慢性乙型活动性肝炎、31例健康者对照。发现:肝硬化组血清1 ,25(OH)2D3较肝炎组和对照组明显下降(P<0.01,P<0.001),并与血钙、尺桡骨密度呈正相关(P<0.01,P<0.05);肝硬化组血清 PTH较肝炎组和对照组明显升高(P<0.05,P<0.05),但与血钙、尺桡骨密度无相关性。提示:肝硬化患者血清 1,25(OH)2D3降低与肝性骨病的发生关系密切,检测其水平,有利于该病的早期发现。     

1,25（OH）2D3通过调节miR-146a水平抑制大鼠肝纤维化的体内和体外观察

目的 体内体外观察1,25（OH）₂D₃通过调节miR-146a水平抑制大鼠肝纤维化的作用机制。方法 建立CCl₄诱导的大鼠肝纤维化模型,体外转染肝星状细胞（HSCs）miR-146a 模拟剂/抑制剂,观察1,25（OH）₂D₃处理对动物肝组织变化和HSC增殖和凋亡的影响。采用qPCR法检测肝组织miR-146a水平,采用CCK8法检测细胞增殖,使用流式细胞术检测HSC凋亡。结果 在干预8 w末,1,25（OH）₂D₃干预组大鼠肝纤维化程度明显减轻; 1,25（OH）₂D₃干预组大鼠肝组织miR-146a水平为（0.70± 0.03）,显著高于橄榄油组【（0.33±0.17,P<0.05）】; 1,25（OH）₂D₃组细胞增殖率为58.8%,较DMSO组下降了15.9%,转染miR-146a 模拟剂组大鼠HSC增殖率为46.5%,较对照组下降了53.3%,转染miR-146a 抑制剂组HSC增殖率为132.8%,较对照物组升高了32.8%（P<0.05）,1,25（OH）₂D₃干预组细胞凋亡率为12.6%,较DMSO组增加了5.2%,转染miR-146a 模拟剂组细胞凋亡率为16.8%,较对照组细胞凋亡率增加了8.2%,转染miR-146a 抑制剂组细胞凋亡率为6.3%,较对照组细胞凋亡率减少了2.2%（P<0.05）,提示1,25（OH）₂D₃具有抑制HSC增殖、促进凋亡作用。结论 1,25（OH）₂D₃可能通过调节miR-146a水平抑制HSC活化和抑制大鼠肝纤维化。     

肝硬化患者血清25—（OH）D3与肌代谢的变化

肝脏是机体主要的物质代谢器官 ,肝脏疾病特别是肝硬化必将影响物质代谢。本文主要针对肝硬化维生素Ｄ代谢与骨代谢变化的关系作一探讨。一、材料与方法1.对象 :1998～ 2 0 0 0年因肝硬化住院 ,资料较完整的 2 6例患者 ,其中男 16例 ,女 10例 ,年龄为 35～ 78岁 ,平均年龄(5 5 .4 8± 12 .5 0 )岁 ,肝炎后肝硬化 2 3例 ,酒精性肝硬化 1例 ,混合性肝硬化 2例。病程 2个月～ 2 0年 ,1年以下 8例 ,1～ 5年 10例 ,6～ 10年 4例 ,10年以上 4例。按Ｃｈｉｌｄ Ｐｕｇｈ分级 ,Ａ级 2例 ,Ｂ级 12例 ,Ｃ级 12例。2 .方法 :①肝功能及其他指标 :每例肝…     

口服小剂量1,25(OH)2D3治疗早期血透患者继发性

继发性甲状旁腺功能亢进(secondary hyperparathyroidism,SHPT)是尿毒症患者的常见并发症之一.由于低血钙、高血磷及甲状旁腺激素(PTH)不易被清除等原因,多数尿毒症患者都伴有SHPT,其代谢紊乱引起的骨结构、骨转化异常影响患者的生活质量.如何控制SHPT是临床探索的一个焦点,多年来国内外报道了使用大剂量1,25(OH)2D3(钙三醇)静脉或口服冲击治疗SHPT抑制其功能[1],但价格昂贵、并发症发生率高,且不适用于每一个患者.因此我们设计应用小剂量1,25(OH)2D3在慢性肾功能衰竭(CRF)合并SHPT的早期进行干预,旨在阻碍甲状旁腺功能亢进的进一步发展,现将结果报告如下.     

重组人结缔组织生长因子对人成骨细胞骨保护素/RANKL表达的影响

目的 研究重组人结缔组织生长因子(CTGF)对体外培养的人成骨细胞骨保护素/RANKL(receptor activator of NF-κB ligand)表达的影响,并探讨重组人CTGF调节骨保护素/RANKL表达的信号转导机制.方法 用重组人CTGF干预体外培养的人成骨细胞,采用Western印迹法检测骨保护素/RANKL蛋白表达水平的变化,同时观察重组人CTGF对人成骨细胞FAK、MAPK磷酸化的影响.结果 重组人CTGF可呈时间-剂量依赖性抑制人成骨细胞RANKL的表达,200 ng/ml重组人CTGF作用24～48 h达最大抑制效果,而对人成骨细胞骨保护素的表达无明显影响.重组人CTGF可明显增强p38MAPK磷酸化,并减少FAK磷酸化,重组人CTGF干预对ERK、JNK磷酸化无明显影响;p38MAPK阻断剂SB23058可阻断重组人CTGF对RANKL表达的抑制效应.结论 重组人CTGF通过增强p38MAPK磷酸化,减少FAK磷酸化下调人成骨细胞RANKL的表达.     

1,25-(OH)2D3对UUO模型大鼠ILK及TGF-β1表达的影响

目的 探讨1,25-(OH)2D3减轻单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾间质纤维化的作用及其机制.方法 将96只雄性SD大鼠随机分为对照组、UUO组、假手术组、干预组各24只,其中UUO组和干预组均于左肾下极处游离并结扎左输尿管建立UUO模型,假手术组开腹后仅游离左输尿管,对照组不行特殊处理.其后干预组予1,25-(OH)2D3 0.5 μg(溶于1 mL花生油中)灌胃、余三组均予1 mL花生油灌胃;各组分别于术后第1、3、7、14天每天各处死6只大鼠,留取左侧肾脏标本,光镜观察肾脏组织形态学改变及肾脏病理损害,免疫组化法观察整合来连接激酶( ILK)、转化生长因子(TGF) -β1蛋白表达,RT-PCR法检测ILK mRNA表达.结果 ①与对照组相比,UUO组肾皮质变薄、肾间质炎细胞浸润明显增多、纤维化随时间延长而加重(P＜0.05);与UUO组相比,干预组肾组织炎细胞浸润减少、纤维化程度减轻、病变积分明显降低(P＜0.05).②与对照组相比,UUO组ILK蛋白阳性表达随时间延长显著增加(P＜0.01);与UUO组比较,干预组ILK蛋白表达减少(P＜0.01);与对照组相比,UUO组TGF-β1蛋白随时间延长阳性表达显著增加(P＜0.01);与UUO组比较,干预组TGF-β1蛋白表达减少;ILK蛋白表达与TGF-β1蛋白表达呈显著正相关(r =0.872,P＜0.05).③与对照组比较,UUO组和干预组ILK mRNA表达均随时间延长明显增强(P＜0.01),其中干预组表达在7、14 d无显著差异;干预组各期均显著低于UUO组(P＜0.01).结论 1,25-(OH) 2D3可减轻UUO大鼠肾间质纤维化、保护肾脏功能,可能机制为间接或直接抑制肾间质ILK、TGF-β1表达;此为防治肾间质纤维化提出了新的方向.     

前列腺素E2对人成骨样细胞白介素-6,骨保护素配体/骨保护素mRNA表达的影响

目的研究前列腺素E2（PGE2）对人成骨瘤细胞MG-63分泌的细胞因子白介素-6（IL-6）、骨保护素（Osteoprotegerin，OPG）、骨保护索配体（Ligand of receptor activator of NF-κB，RANKL）表达的调节，探讨PGE引发骨吸收的机制。方法体外培养成骨瘤细胞株（MG-63），分别给予不同剂量的PGE2进行干预试验，用钙估法显示成骨细胞碱性磷酸酶的表达；用MTT法测定PGE2对MG-63细胞刺激增殖作用；提取总RNA进行半定量逆转录PCR分析，检测IL-6，OPG，RANKL基因表达水平的改变。结果PGE2减少碱性磷酸酶的表达，抑制MG-63细胞的增殖，并呈剂量依赖性的上调IL-6mRNA，RANKL／OPGmRNA水平。结论PGE2可以通过IL-6，RANKL／OPGmRNA基因水平的上调，促进骨吸收，此可能为PGE2导致溶骨性病变的重要发病机制。     

小剂量1，25（OH）_2D_3口服冲击治疗尿毒症患者继发性甲状旁腺功能亢进

目的：对２０例尿毒症继发性甲状旁腺功能亢进患者使用小剂量１，２５（ＯＨ）２Ｄ３口服冲击治疗，以比较其与常规治疗的疗效。方法：４０例尿毒症透析患者，随机分为常规治疗组（ｎ＝２０），口服罗钙全０．２５μｇ／ｄ；冲击治疗组（ｎ＝２０），口服罗钙全２μｇ／次，每周２次，８周后改为０．２５μｇ／ｄ维持１个月。结果：冲击治疗组血ＰＴＨ、ＡＫＰ、Ｐ３＋较常规治疗组下降明显，血钙上升，症状改善，无高血钙发生。结论：应用小剂量１，２５（ＯＨ）２Ｄ３，无发生高血钙的危险，是一种经济合理安全有效的治疗方法     

不同浓度1,25-(OH)_2维生素D_3对体外培养恒河猴骨髓基质干细胞的影响

目的 观察1,25-(OH)_2维生素D_3[1,25-(OH)_2D_3]对体外培养的恒河猴骨髓基质干细胞(bone marrow stromal stem cells,BMSC)分泌骨保护素和NF-κB受体活化因子配体(RANKL)的影响.方法 设置了10~(-12)、10~(-10)、10~(-8)moL/L 3种浓度的1,25-(OH)_2D_3试验组和一个空白对照组.在体外用含这3种浓度1,25-(OH)_2D_3的培养基和空白培养基连续培养恒河猴BMSC.通过四唑盐(MTT)比色法观察细胞增殖.通过酶联免疫吸附测试法(ELISA)检测碱性磷酸酶、骨钙素、骨保护素、RANKL的含量.通过茜红素染色检测矿化结节.结果 不同浓度的1,25-(OH)_2D_3对恒河猴BMSC增殖的影响均表现为少于7 d促进增殖,超过7 d抑制增殖,但没有明显的剂量依赖性(均P<0.05).1,25-(OH)_2D_3促进恒河猴BMSC向成骨细胞方向分化,各浓度组成骨分化指标碱性磷酸酶(ng/ml,7 d:31.40±1.25,26.50±0.50,28.47±0.25对13.48±0.26;10 d:33.37±0.68,35.30±1.57,33.27±0.67对17.14±0.55;13 d:35.37±0.12,30.47±0.25,30.27±1.25对16.55±1.13;均P<0.05)和骨钙素(ng/ml,7 d:4.47±0.29,4.00±0.60,3.73±0.78对1.63±0.55;10 d:5.63±0.57,5.17±0.15,4.30±0.10对2.17±0.15;13 d:7.03±0.15,5.53±0.25,5.27±0.31对2.23±0.55;均P<0.05)均较对照组明显升高,但各浓度组均未见典型矿化结节的形成.1,25-(OH)_2D_3促进恒河猴BMSC分化出的成骨细胞分泌骨保护素(pg/ml,7 d:72.57±0.67,68.00±1.75,64.23±0.87对30.13±1.72;10 d:62.03±1.62,51.80±1.30,28.93±0.95对18.13±1.40;13 d:65.13±0.71,62.43±2.11,44.93±1.63对36.70±0.95;均P<0.05)和RANKL(pg/ml,7 d:74.33±0.61,82.37±2.15,85.23±0.45对70.83±1.71;10 d:83.30±0.46,86.70±0.56,88.23±0.91对74.20±1.83;13 d:81.70±1.81,81.07±0.95,84.70±1.41对72.73±0.97;均P<0.05),RANKL的分泌量呈现先升高后下降的趋势,而骨保护素的分泌量则呈现出相反的变化,两者均表现出剂量依赖性.结论 1,25-(OH)_2D_3促进恒河猴BMSC向成骨细胞方向分化,并促进其分泌骨保护素和RANKL.