应用激光共聚焦显微镜研究光敏剂CDHS801亚细胞定位

目的研究新型光敏剂CDHS801在膀胱癌T24细胞内的亚细胞定位。方法将传代培养的膀胱癌T24细胞与CDHS801共同孵育，采用激光共聚焦显微镜为成像工具，应用线粒体荧光探针MitoTracker RED CMXRose和MitoTracker Green FM来进行CDHS801的亚细胞定位分析。结果激光共聚焦显微镜下CDHS801、MitoTracker RED CMXRose和MitoTracker Green FM发出的荧光都位于细胞浆内，在细胞核周围呈点状散在分布。结论CDHS801经膀胱癌T24细胞摄取后，定位于细胞浆内，主要分布线粒体内。     

大鼠膀胱癌模型的光动力学治疗

目的　验证采用新型光敏剂的光动力学治疗方法对于SD大鼠膀胱癌动物模型的有效性。方法　使用 0 .0 5 %N 丁基 N(4 羟丁基 )亚硝胺 (BBN)诱导成功的SD大鼠随机分为试验组2 0只和对照组 7只。实验组大鼠用剂量为 50mg/kg体重光敏剂溶液灌胃 ,2 4h后打开膀胱进行激光照射 ,能量为 50J/cm2 ,72h后取肿瘤标本送病理分析和DNA含量测定 ,对照组术前不灌药物。结果　光动力学治疗法 (PDT)治疗后试验组的肿瘤坏死发生率和面积均高于对照组 ,差异有显著性 (P <0 .0 5)。样本的平均DNA质量均数 :实验组 9.50 5pg,对照组 1 4 .2 69pg,差异有显著性 (P<0 .0 5)。结论　以CDHS80 1作为光敏剂的光动力学治疗对于SD大鼠膀胱癌模型是有效的     

光动力疗法治疗乳腺癌术后胸壁复发12例

光动力疗法(photodynamic therapy,PDT)是采用波长为630 nm的激光照射静脉输入光敏剂患者的肿瘤复发病灶.其原理是借助光敏剂进入体内后具有动态聚集于肿瘤组织的特点,再行激光照射治疗,此方法是治疗肿瘤复发病灶的一种较新的方法.     

经尿道2 μm激光膀胱肿瘤部分切除术后膀胱内灌洗液的细胞学分析

目的 总结经尿道2 μm激光膀胱肿瘤部分切除术后,膀胱灌洗液中肿瘤细胞的变化特点.方法 选取2008年5月至12月收治的30例膀胱肿瘤患者的临床资料,膀胱镜检肿瘤直径0.5～3.0 cm.以直径为标准,将患者分为A组(直径<2.0 cm)10例,B组(直径≥2.0 cm)20例.所有患者术前病理组织学诊断均为膀胱尿路上皮癌.手术采用经尿道2 μm激光膀胱部分切除术.A组瘤体直接经由切割镜鞘冲出;B组瘤体在膀胱内用激光将其分割后冲出.清除肿瘤瘤体及碎屑后,经切割镜鞘给予膀胱灌洗,连续留取5次灌洗液,分别进行病理细胞学染色观察.结果 A组10例患者中,8例术后所有灌洗液中未见肿瘤细胞;2例术后第1、2次灌洗液中有少量完整形态和破碎的肿瘤细胞.B组20例患者中14例术后第1、2、3次灌洗液片中可见肿瘤细胞,细胞密度逐渐递减,第4、5次灌洗液片则未见肿瘤细胞;6例术后第1～4次灌洗液片中可见肿瘤细胞,细胞密度逐渐递减,第5次灌洗液片则未见肿瘤细胞.结论 经尿道2 μm激光膀胱肿瘤部分切除术治疗后,通过连续5次经切割镜鞘膀胱灌洗,可有效地清除膀胱内残存的肿瘤细胞,降低肿瘤细胞播散种植的风险.     

钬激光照射诱导膀胱肿瘤细胞株T-24凋亡的实验研究

目的:观察钬激光照射人膀胱癌细胞株T24后诱导肿瘤细胞凋亡的影响。方法:取对数生长期人膀胱癌细胞株T-24细胞,分为对照组与激光组。激光组以800mJ钬激光直接照射10s,对照组以钬激光光纤直接照射,未激发能量。于照射48h后,分别选用光镜下直接观察细胞形态学的改变,流式细胞仪检测及免疫细胞化学检测等方法,观察细胞凋亡情况。结果:激光组细胞形态呈现出凋亡改变;流式细胞学及Caspase-3蛋白表达的检测,均证实细胞凋亡的存在。结论:体外细胞试验表明,采用钬激光照射人膀胱癌细胞株T-24,能够诱发肿瘤细胞凋亡,Caspase-3蛋白在诱导T-24细胞凋亡中可能发挥了重要的作用。     

基因-病毒治疗系统CNHK200-hA的构建及体外初步研究

目的　构建一种结合抗肿瘤新生血管生成的基因治疗与病毒治疗优势的新型肿瘤基因 病毒治疗系统CNHK2 0 0 hA。方法　克隆人抗血管生成基因Angiostatin(k1 5 ) ,命名为hA。利用病毒重组技术将hA插入肿瘤特异性增殖病毒的病毒基因组中 ,通过病毒增殖试验、电镜技术、Westernblot分析、鸡胚尿囊膜试验 (CAM ) ,观察CNHK2 0 0 hA的复制情况、hA基因的表达及其对新生血管生成的抑制作用。结果　构建了一种新型的基因 病毒治疗系统CNHK2 0 0 hA。该治疗系统为E1b 5 5× 10 3 蛋白缺失而保留了腺病毒E1a蛋白的 5型腺病毒 ,能在肿瘤细胞内大量增殖及复制 ,而在正常细胞内增殖能力较弱 ,从而特异性杀灭肿瘤细胞。同时CNHK 2 0 0 hA携带人抗肿瘤新生血管生成基因hA ,能在肿瘤细胞内高效表达hA蛋白 ,其表达量高于传统基因治疗的腺病毒载体系统。电镜证实该治疗系统可在肺癌A5 49细胞株中复制及增殖。CAM试验证实该治疗系统感染肺癌细胞后的培养液上清具有抗新生血管生成的生物活性。结论　基因 病毒治疗系统CNHK2 0 0 hA能在肿瘤细胞中增殖复制 ,并明显提高hA基因的表达量 ,表达产物具有抑制新生血管形成的作用。     

膀胱癌肿瘤血管生成的研究进展

膀胱癌的生物学行为突出表现为易复发、多发、浸润和转移。而肿瘤血管生成几贯穿膀胱癌整个发生发展过程。目前,肿瘤血管密度已被用作判断膀胱癌预后的独立指标,高肿瘤血管密度是肿瘤复发的危险因素。膀胱癌浸润生长依赖血管新生,肿瘤血管生成淑及内皮细胞、肿瘤浸润巴细胞及血管外基质之间的相互作用,大致可分为以下几点：（１）肿瘤细胞释放多种血管生成因子;（２）血管内皮细胞因血管生成因子的作用而激活,血管扩张,通透性增高;（３）血管内皮细胞和肿瘤细胞释放蛋白深解酶,降解细胞基底膜和细胞外基质;（４）血管内皮细胞增生;（５）血管内皮细胞从毛细血管后微静脉迁徙出来形成血管新芽;（６）肿瘤微血管分化塑型,形成新生血管网络系统。肿瘤血管形成决定于血管形成调节因子活性,而血管形成促进因子与抑制因子之间的平衡是关键环节。当肿瘤细胞或瘤内白细胞     

新城疫病毒对人肺腺癌A549细胞系的作用

目的 观察新城疫病毒对人肺腺癌A549细胞的作用.方法 应用新城疫病毒(NDV)强毒株D90对体内、体外培养人肺腺癌A549细胞进行抗癌实验,通过体外培养A549细胞观察D90对肿瘤细胞的杀伤作用,进而建立14例A549肿瘤细胞裸鼠模型,对实验后裸鼠肿瘤组织进行病理学检查,通过光镜、电镜等方法观察肿瘤细胞形态学改变从而探讨新城疫病毒D90对人肺腺癌A549细胞的杀伤作用,为临床应用奠定基础.结果 NDV强毒株D90可在体外培养条件下溶解、杀伤A549细胞.实验组与对照组比较肿瘤组织体积明显缩小(t'=4.753,P<0.01),光镜和电镜下可见肿瘤组织内血管分布减少,肿瘤细胞坏死与凋亡.结论 新城疫病毒强毒株D90能够抑制体外培养的人肺腺癌A549细胞的增殖并溶解、杀伤肿瘤细胞,能够抑制裸鼠体内肿瘤组织的生长和转移,对正常组织无影响.     

腹膜内弥漫性恶性肿瘤的光动力治疗技术

光动力治疗是利用肿瘤细胞对光敏物质的特殊亲和作用而与之相互结合,再用特定强度和波长的光对其照射,光敏物质被照射激活后与细胞内氧分子相互作用成单线氧(Single oxygen),从而造成细胞破坏,杀死肿瘤细胞。临床采用血卟啉衍生物作为光敏物质对食管、支气管、膀胱及皮肤肿瘤进行光疗,取得了缓解症状的效果。Tochnar等人利用血卟啉衍生物及激光成功治愈了腹膜内腹水瘤的小鼠,于是人们推测光疗对某些腹膜癌病患者有治疗作用。外科切除巨大肿瘤是腹腔内光疗的一个组成部分,这样可以缩小肿瘤体积,以便光线穿透肿瘤组织激活其深部的光敏物质,达到完全消灭肿瘤的目的。     

光动力治疗裸鼠胰腺癌及其机理的实验研究

目的 探讨在裸鼠胰腺癌瘤内注射光敏剂血卟啉衍生物（HpD）、竹红菌甲素（HA）及2－丁胺－2－去甲氧基竹红菌甲素（2－BA－2－DMHA）后，光动力治疗（PDT）的效果及其作用机理。方法 将人胰腺癌细胞株SW1990接种到裸鼠皮下，建立胰腺癌动物模型，而后将光敏剂HpD、HA及2－BA－2－DMHA注射入肿瘤，再用激光照射肿瘤局部，观察PDT治疗胰腺癌的效果。另以第Ⅷ因子为标记，采用免疫组化LSAB法研究肿瘤血管损伤的情况。结果 PDT对胰腺肿瘤有明显杀伤作用，能使胰腺肿瘤生长速度明显减慢。免疫组化染色明显，PDT可引起血管内皮细胞损伤和血管结构破坏。结论 PDT对胰腺癌有治疗作用，血管损伤是其杀伤肿瘤的重要途径。