恒定磁场对大鼠脑缺血再灌注损伤保护作用的研究

目的：研究恒定磁场对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用。方法：40只动物被随机分成3组，假手术组、模型组及磁疗组，其中后2组参考Longa法制成大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型，磁疗组在脑缺血模型完成后立即将其头颈部置于40mT的恒磁场中，持续30min，每天1次，7d后眼球取血、断头取脑，测量血液流变学、红细胞膜流动性、抗氧化酶活性以及NO、NOS等各项指标的变化，假手术组及模型组均未给予相应治疗措施，并与磁疗组对照。结果：模型组大鼠血液流变学、红细胞膜流动性等各项指标以及一氧化氮、一氧化氮合成酶含量均显著高于假手术组，抗氧化酶活性显著低于假手术组；经过磁场治疗后，大鼠血液流变学、红细胞膜流动性、一氧化氮及一氧化氮合成酶等含量均有所下降，抗氧化酶活性有所升高，差异均有显著性。结论：恒定磁场能显著改善大鼠的血液流变学特性，提高红细胞膜流动性及机体的抗氧化酶活性、降低MDA、NO及NOS含量，提高机体的抗氧化能力，从而有效阻止自由基、一氧化氮等对神经组织的损伤，从而阻断了脑缺血的病理生理过程，对脑缺血再灌注损伤起到一定的保护作用。     

恒定磁场对缺血再灌注脑组织的保护作用

背景:磁疗历史悠久,可用于治疗多种疾病,研究恒磁场对缺血性脑血管病的保护作用能为非药物、无创伤治疗提供新的临床治疗依据,开辟物理因子治疗新途径。目的:观察恒磁场治疗对缺血再灌注损伤大鼠宏观水平的血液流变学、亚细胞水平的红细胞膜流动性、分子水平的抗氧化酶活性以及一氧化氮和一氧化氮合成酶活性的影响。设计:完全随机设计。单位:哈尔滨医科大学生物物理教研室。材料:实验于2002-05/11在哈尔滨医科大学生物物理实验室进行,取40只健康Wistar大鼠适应性喂养1周后随机分成3组,假手术组(n=10)、模型组(n=15只)、磁疗组(n=15只)。方法:①模型组、磁疗组线栓法制作大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型,假手术组线栓不阻塞动脉血流。②磁疗组脑缺血后立即将其头颈部置于40mT的恒磁场中30min,1次/d,假手术组和模型组不作暴磁处理。3组大鼠手术7d后麻醉状态下眼球取血、断头取脑。主要观察指标:①观察三组大鼠血液流变学变化。②各组大鼠红细胞膜流动性指标变化。③各组大鼠血清谷胱甘肽过氧化物酶及铜蓝蛋白含量变化。④各组大鼠脑组织丙二醛、一氧化氮、一氧化氮合成酶活性等指标的变化。结果:30只大鼠进入结果分析。①血液流变学指标:模型组全血高切、低切黏度、纤维蛋白原和红细胞压积显著高于假手术组(P<0.01),磁疗组上述指标显著低于模型组(P<0.01)。②红细胞膜流动性指标:模型组荧光偏振度、平均微黏度、各向异性显著高于假手术组(P<0.01),磁疗组上述指标低于模型组(P<0.05)。③模型组大鼠血清谷胱甘肽过氧化物酶及铜蓝蛋白含量显著低于假手术组(P<0.05),磁疗组高于模型组(P<0.01),并略高于假手术组。④模型组大鼠脑组织铜锌超氧化物歧化酶、丙二醛、一氧化氮、一氧化氮合成酶活性均显著高于假手术组(P<0.05或0.01),抗氧化酶活性显著低于假手术组(P<0.01);经过磁场治疗后,磁疗组大鼠各指标均较模型组好转(P<0.05,0.01)。结论:恒定磁场能显著改善大鼠的血液流变学特性,提高红细胞膜流动性及机体的抗氧化酶活力,降低丙二醛、一氧化氮、一氧化氮合成酶含量,提高了机体的抗氧化能力,从而有效地阻止了自由基、一氧化氮对神经组织的损伤,阻断了脑缺血的病理生理过程,对脑缺血再灌注损伤起到一定的保护作用。     

中频电对大鼠脑缺血再灌注损伤保护作用的研究

目的研究中频电对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用。方法50只动物被随机分成3组,假手术组、模型组及中频疗组,其中后2组参考Longa法制成大鼠脑缺血再灌注模型,中频疗组在缺血再灌注后立即将电极安置于耳后两侧乳突处,每次通电30min,每天1次,7d后眼球取血、断头取脑,测量血液流变学、红细胞膜流动性、抗氧化酶活性以及一氧化氮(NO)、一氧化氮合成酶(NOS)等各项指标的变化。结果模型组大鼠血液流变学、红细胞膜流动性、NO、NOS等含量显著高于假手术组,抗氧化酶活性显著低于假手术组;经过中频电治疗后,大鼠血液流变学、红细胞膜流动性、NO、NOS等含量有所下降,抗氧化酶活性有所升高,差异均有显著性。结论中频电能显著改善大鼠的脑部微循环,提高机体的抗氧化防御能力,有效地抑制了自由基、一氧化氮等对神经组织的损伤,通过作用于脑缺血病理生理过程中的多个靶点,发挥其对脑缺血再灌注损伤的保护作用。     

低频脉冲电磁场对去卵巢大鼠一氧化氮含量及骨重建的影响

目的：建立雌性大鼠去卵巢骨质疏松模型，模拟妇女绝经后骨质疏松，探讨低频脉冲电磁场对一氧化氮含量、一氧化氮合酶活性变化的影响，及其与骨重建的关系。 方法：实验于2003—08／11在上海体育学院解剖教研室完成。选取3月龄健康纯种雌性SD大鼠24只，随机分为假手术对照组、去势对照组、低频脉冲电磁场组，8只／组。①去势对照组、低频脉冲电磁场组大鼠完整摘除两侧卵巢，假手术对照组找到卵巢后割取与卵巢等量脂肪。②低频脉冲电磁场组大鼠给予低频脉冲电磁场干预，电磁场频率为50Hz。将两只大鼠尾部相对置于螺线管中部，头部面向管的两端，治疗1h／d，5d／周，共12周。③各组大鼠处死前不同时间点进行2次荧光标记，以动态观察两次注射期间骨形成的情况。④第12周末治疗结束后取材，测定各组血清与骨匀浆中一氧化氮含量及一氧化氮合酶活性的变化，对腰椎骨进行骨形态计量学指标测定。 结果：实验选取SD大鼠24只，全部进入结果分析。①磁场干预结束后各组大鼠体质量、子宫重量和血清雌激素含量测定结果：与假手术对照组比较，去势对照组、低频脉冲电磁场组大鼠体质量均明显升高（P〈0．05），子宫质量，血清中雌激素含量均明显降低（P〈0．05），而此两组之间差异均无显著性意义（P〉0．05）。②磁场干预结束后各组骨形态计量学指标的测定结果：与假手术对照组比较，去势对照组、低频脉冲电磁场组骨小梁相对体积比、骨小梁平均骨壁厚度、皮质骨壁平均厚度均明显降低（P〈0．05）；骨小梁形成表面，骨小梁吸收表面、骨矿化沉积率、四环素标记荧光周长百分率、破骨细胞数量均明显升高（P〈0．05）。③磁场干预结束后各组血清和骨匀浆上清液中一氧化氮含量及一氧化氮合酶活性的测定结果：低频脉冲电磁场组一氧化氮含量及一氧化氮合酶活性均较去势对照组显著升高（P〈0．05）。 结论：低频脉冲电磁场治疗可使去卵巢大鼠一氧化氮含量及一氧化氮合酶活性增高，从而抑制破骨细胞的骨吸收，降低骨重建的高转换率。     

恒定磁场对脑缺血再灌注大鼠血液流变学指标及红细胞膜流动性影响的研究

目的：对脑缺血再灌注大鼠应用恒定磁场后，研究血液流变学指标、红细胞膜流动性等各项指标的变化。方法：实验动物分三组，每组十只，对照组做假手术，再灌组、恒磁组参考Longa法制备局灶性脑血再灌注模型（恒磁组大鼠于脑缺血2小时再灌注后立即置于40mT的恒磁场中照射30min，每天一次）。7天后眶静脉取知进行观察。结果：再灌注ηH（全血高切粘度）、ηL（全血低切粘度）、Fg(纤维蛋白原含量）、η（平均微粘度）显著高于对照组（P＜0．01），恒磁组与再灌组比较ηH（全血高切粘度）、ηL（全血低切粘度）、Fg（纤维蛋白原含量）、η（平均微粘度）；HC（细胞压积）显著下降（P＜0．01；P＜0．05）。结论：恒磁场可降低血液粘度，提高红细胞膜流动性，改善血液流变学特性，增加脑血流量，对脑缺血再灌注损伤起到一定的保护作用。     

川芎嗪对大鼠缺血再灌注心肌预适应性保护与一氧化氮的关系

目的：观察川芎嗪对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用及其与一氧化氮的关系。 方法：实验于2004-06／2005-01在南阳医学高等专科学校药理学实验室完成。选择Wistar大鼠60只，随机分为4组，即空白对照组、模型对照组、川芎嗪组及特异性一氧化氮合成抑制剂亚甲蓝＋川芎嗪组，各组均15只。川芎嗪组给予川芎嗪注射液25mg／kg；亚甲蓝＋川芎嗪组在川芎唪组基础上给予亚甲蓝2mg。对各组大鼠进行麻醉后，除正常对照组冠脉左室支下穿线不结扎外，其余各组均结扎大鼠冠脉左室支。结扎30min后，再灌60min诱发心律失常。测定大鼠心电功能及一氧化氮合酶、和一氧化氮含量。亚甲蓝于结扎冠脉左室支前20min输入，川芎嗪则10min后输入。结果：纳入60只大鼠。全部进入结果分析，无脱失。各组大鼠心肌一氧化氮含量及一氧化氮合酶活性比较：模型对照组大鼠再灌注时心肌原生型一氧化氮合酶及总一氧化氮合酶活性显著低于空白对照组（P〈0．01），一氧化氮产生减少（P〈0．05-0．01）。川芎嗪组缺血期间一氧化氯水平显著高于模型对照组和亚甲蓝＋川芎嗪组（P〈0．01），心肌原生型一氧化氮合酶及总一氧化氮合酶活性显著高于模型对照组和亚甲蓝＋川芎嗪组（P〈0．05-0．01）。 结论：川芎嗪可以提高缺血再灌注大鼠心肌一氧化氮合酶活性和一氧化氮水平，应用特异性一氧化氰合成抑制剂亚甲蓝可降低大鼠心肌一氧化氮合酶活性和一氧化氮水平。川芎嗪可能通过调节一氧化氮合酶活性，维持正常一氧化氨水平对缺血再灌注心肌损伤大鼠起药理预适应保护作用。     

铅中毒大鼠抗氧化酶活性的改变及核酸的干预效应

目的：观察染铅大鼠抗氧化系统的改变及核酸对其的影响。 方法：实验于2003-03／05在哈尔滨医科大学公共卫生学院完成。选择Wistar大鼠32只，随机分为4组，即空白组、模型组、200mg／kg和700mg／kg核酸组，每组8只。空白组大鼠正常饮水，其余3组饮（8g／L）醋酸铅水溶液。另外空白组、模型组大鼠灌蒸馏水，200mg／kg和700mg／kg核酸组大鼠分别灌胃核酸200，700mg／kg，5周后麻醉处死动物，测定大鼠血清中超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶、过氧化氢酶活性、丙二醛、谷胱甘肽含量及总抗氧化能力水平。 结果：纳入32只大鼠全部进入结果分析，无脱失。①各组大鼠血清超氧化物歧化酶、谷胱苷肽过氧化物酶活性及丙二醛含量比较：模型组血清超氧化物歧化酶、谷胱苷肽过氧化物酶活性显著低于空白组[（5374．57&;#177;819．00，3516．37&;#177;597．62；7088．75&;#177;668．63，4677．10&;#177;856．84）μkag/L（q=4．02，6．03，P〈0．05-0．01）]，而丙二醛含量则显著高于空白组[（8．63&;#177;1.47，6．64&;#177;1．06）μmol／L（q=4．52，P〈0．05）]。200，700mg／kg核酸组血清超氧化物歧化酶、谷胱苷肽过氧化物酶活性显著高于模型组，而丙二醛含量显著低于模型组（q=4．01～4．91，P〈0．01）。②各组大鼠血清中谷胱甘肽含量、过氧化氢酶活性、总抗氧化能力水平比较：模型组血清谷胱甘肽含量、总抗氧化能力、过氧化氢酶活性均显著低于空白组（q=3．64～7．53，P〈0．05-0．01）。200，700mg／kg核酸组血清总抗氧化能力、过氧化氢酶活性显著高于模型组（q=3．49-5．74，P〈0．05～0．01）。 结论：铅染毒能够造成实验大鼠机体氧化损伤，核酸能够提高机体抗氧化酶的活性，减轻铅中毒引起的过氧化损伤。     

活血化瘀药对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用：时效量效关系对照验证

背景：脑缺血后再灌注性血脑屏障损伤是脑缺血和再灌注损伤的重要病理生理基础。目的：观察以活血化瘀的4个最基本中药（红花、桃仁、川芎、赤芍）作为施加因素对脑缺血再灌注大鼠血清和脑组织匀浆中的一氧化氮、免疫球蛋白、C反应蛋白、补体等免疫指标及脑组织细胞形态和超微结构产生的变化，并验证其时效和量效关系。设计：随机对照实验，单盲法评估。材料：实验于2001-01／2002-12在广州市红十字会医院创伤研究所实验室完成。红花、川芎、桃仁、赤芍为单味中药饮片浓缩颗粒，按1：1：1：2比例制成含2．5g／mL生药汤剂（活血化瘀药）。实验动物选择成年雌性SD大鼠138只，体质量280-300g，由广州中医药大学实验动物中心提供。干预：采用线栓法制备大鼠大脑中动脉阻塞模型（经2h大脑中动脉阻断后再灌注24h）。138只大鼠随机分为6组，每组23只。假手术组：结扎各血管，不阻塞大脑中动脉。灌药1组：术前30min灌胃给予2g／kg活血化瘀药。灌药2组：术前30min灌胃给予2．5g／kg活血化瘀药。灌药3组：术前连续7d灌胃给予2g/kg活血化瘀药。灌药4组：术前连续7d灌胃给予2．5g／kg活血化瘀药。对照组给予等容积生理盐水。①全部大鼠清醒后于缺血2h再灌注24h进行神经功能缺损评分（5分制，0～1分为神经功能轻度缺损，2-4分为神经功能重度缺损）。②再灌注24h后从各组大鼠中随机选取10只，检测脑匀浆、血清C反应蛋白及补体C3和C4水平采用速率散射比浊法，检测脑匀浆和血清中一氧化氮浓度采用硝酸还原酶法。③再灌注24h后从各组大鼠中随机选取10只，麻醉后迅速断头取脑，然后在110℃烘箱中烘干至恒重，计算脑组织含水量。④光学显微镜下观察各组大鼠脑组织细胞形态。⑤再灌注24h后从各组中随机选取3只大鼠，制备脑组织冠状切片，采用透射电镜观察各组大鼠脑组织超微结构。主要观察指标：①各组大鼠神经功能缺损评分结果。②各组大鼠脑匀浆及血清中C反应蛋白及补体C3和C4水平，一氧化氮浓度。③各组大鼠脑组织含水量。④各组大鼠脑组织细胞形态和脑组织超微结构。结果：138只大鼠全部进入结果分析。①各组大鼠神经功能缺损程度比较：灌药各组大鼠缺血再灌注24h后重度缺损所占比例明显低于对照组（P〈0．01），灌药4组低于灌药2组（P〈0．05）。②各组大鼠脑组织含水量比较：假手术组和灌药各组大鼠脑组织含水量低于对照组（P〈0．05）。③各组大鼠脑匀浆一氧化氮浓度比较：假手术组和灌药各组大鼠低于对照组（P〈0．01）。灌药3组低于灌药1组（P〈0．05）。灌药4组低于灌药2，3组（P〈0．01）。④各组大鼠血清一氧化氮浓度比较：假手术组和灌药各组血清一氧化氮浓度均高于对照组（P〈0．01）。灌药3组高于灌药1组（P〈0．05）。灌药4组高于灌药2，3组（P〈0．05）。⑤各组大鼠脑匀浆和血清C反应蛋白水平比较：假手术组和灌药各组低于对照组（P〈0．05-0．01），灌药3组低于灌药1组（P〈0．01），灌药4组低于灌药2，3组（P〈0．05-0．01）。⑥各组大鼠脑匀浆和血清补体C3水平比较：假手术组和灌药各组低于对照组（P〈0．05-0．01）。灌药3组低于灌药1组（P〈0．05）。灌药4组低于灌药2，3组（P〈0．01）。⑦各组大鼠脑匀浆和血清血清补体C4水平比较：假手术组和灌药各组低于对照组（P〈0．05-0．01）。灌药3组低于灌药1组（P〈0．05）。灌药4组低于灌药2，3组（P〈0．01）。⑧各组大鼠脑水肿情况比较：对照组脑组织明显充血水肿，表明炎症反应明显。灌药组脑水肿、病理损害较对照组轻。⑨各组大鼠脑组织超微结构的改变：假手术组超微结构正常，对照组皮质坏死边缘区的细胞、毛细血管、髓鞘水肿明显，神经元细胞器减少，灌药3，4组细胞膜界限清楚，结构完整，线粒体丰富，大小均匀，有髓纤维形态正常，灌药1，2组介于两者之间。结论：①给予活血化瘀药大鼠神经功能缺损评分降低，用药时间长的大鼠神经功能缺损评分低，提示大鼠神经功能缺损程度改善与用药时间延长有关。②给予活血化瘀中药大鼠脑组织一氧化氮浓度降低，血清中一氧化氮浓度增高，说明活血化瘀中药可以逆转缺血再灌注后一氧化氮浓度在不同组织中的异常改变来减轻脑损伤。③给予活血化瘀中药大鼠脑组织和血清中补体C3和C4水平明显降低，说明该药可通过启动补体系统而减轻对脑组织的损伤，C反应蛋白也明显降低，更进一步提示该药可抑制炎症反应。④用药时间越长脑损伤越轻，且用药剂量以2．5g／L效果较好。     

氧自由基在一氧化氮缺乏所致高血压及心血管重构中的作用

背景：以往研究表明．心肌及血管局部组织中的肾素-血管紧张素系统激活参与了高血压及心血管重构的形成过程，但其是否通过氧自由基发生作用尚不明确。 目的：观察抗氧化剂依布硒啉对长期给予一氧化氮合酶抑制剂硝基精氨酸甲酯大鼠的干预效果，分析氧自由基在一氧化氮缺乏所致高血压、心血管系统重构中的作用。 设计：随机分组，对照动物实验。 单位：南昌大学第二附属医院心血管内科，南昌大学心血管疾病研究所。 材料：实验于2002—01／2003—03在南昌大学心血管病研究所动物实验室及医学分子中心实验室完成。选择雄性Wistar大鼠24只，按随机数字表法分为3组，每组各8只，即正常对照组、一氧化氮合酶抑制剂组和一氧化氮合酶抑制剂＋依布硒啉组。 方法：（1）正常对照组：常规饮食饮水，给予4g脱脂奶球。（2）一氧化氮合酶抑制剂组：将硝基精氨酸甲酯50mg／（kg&;#183;d）添加于4g脱脂奶球中喂食。（3）一氧化氮合酶抑制剂＋依布硒啉组：将硝基精氨酸甲酯50mg／（kg&;#183;d）及依布硒啉30mg／（kg&;#183;d）分别添加于2g脱脂奶球中喂食：在大鼠给予硝基精氨酸甲酯前和喂药后1，2，4，6，8周末测收缩压。8周末麻醉后处死大鼠，取血浆及心尖部心肌匀浆测生化指标，其余心脏组织行病理学检测。 主要观察指标：①各组大鼠血压动态变化情况。②各组大鼠血浆、心肌组织一氧化氮水平、超氧化物歧化酶及血管紧张素转换酶活性、心肌超氧阴离子生成率及心肌血管紧张素Ⅱ1型受体蛋白表达水平。③各组大鼠病理形态学检测指标。 结果：24只大鼠全部进入结果分析，无脱失。①各组大鼠收缩压：给药后第1，2，4，6、8周末一氧化氮合酶抑制剂组大鼠收缩压逐渐升高，显著高于正常对照组同期收缩压（P〈0．05-0．01）；在给药后第8周末，一氧化氮合酶抑制剂＋依布硒啉组收缩压显著低于一氧化氮合酶抑制剂组（P〈0．05）。②各组大鼠血浆及心尖部心肌匀浆测生化指标：一氧化氮合酶抑制剂组心肌组织一氧化氮水平、超氧化物歧化酶活性均显著低于正常对照组（P〈0．05-0．01），一氧化氮合酶抑制剂＋依布硒啉组则显著高于一氧化氮合酶抑制剂组（P〈0．05-0．01）。一氧化氮合酶抑制剂组心肌超氧阴离子生成率、血管紧张素转换酶活性、血管紧张素Ⅱl型受体表达水平均显著高于正常对照组（P〈0．05），一氧化氮合酶抑制剂＋依布硒啉组则显著低于一氧化氮合酶抑制剂组（P〈0．05）。③各组大鼠病理形态学检测指标：一氧化氮合酶抑制剂组及一氧化氮合酶抑制剂＋依布硒啉组大鼠心脏质量／体质量比值、左心室厚度及小动脉腔径／壁厚比值均显著高于正常对照组（P〈0．05-0．01），其中一氧化氮合酶抑制剂＋依布硒啉组大鼠左心室厚度及小动脉腔径／壁厚比值均显著低于一氧化氮合酶抑制组（P〈0．05）。 结论：抗氧化剂依布硒啉能缓解一氧化氮缺乏所致的高血压及心血管重构。氧自由基可能通过促进血压升高及局部肾素一血管紧张素一醛固酮系统的激活，参与心血管重构效应，提示氧自由基在一氧化氮缺乏所致的高血压及心血管重构中可能发挥重要作用。     

大鼠心肌缺血再灌注损伤与红花黄素的保护作用

目的：观察大鼠心肌缺血再灌注损伤模型心肌组织中超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶、诱导型一氧化氮合酶、总一氧化氮合酶活性及一氧化氮，丙二醛含量的变化，探讨红花黄素对离体大鼠缺血再灌注心肌的保护作用。 方法：①实验于2004—06／2005—02在南阳医学高等专科学校药理学教研室完成。选用健康Wistar大鼠32只，随机分为4组，每组8只：正常对照组、模型组、红花黄素组、地奥心血康组。②采用Langendofff创建的离体心脏灌流法建立离体大鼠心肌缺血缺氧再灌注损伤模型。以持续平衡的充有体积分数0．95O2＋0．05CO2混合气体的KH液进行非循环逆行灌流。灌注数秒后心脏恢复跳动。稳定15min后停灌30min，再灌40min，给药组在停灌前10min以红花黄素（0．33g生药／mL）或地奥心血康灌注，直至再灌后40min。正常对照组离体心脏持续灌注K—H液90min。模型组离体心脏灌注．K—H液35min，全心缺血25min，再灌注30min。③心肌中超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶、一氧化氮合酶活性变化、一氧化氮、丙二醛含量测定按南京建成生物工程研究所提供的相应试剂盒说明完成。④分别进行成组t检验和配对t检验。 结果：进入结果分析大鼠32只。①超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶活力：模型组明显低于其他3组（P〈0．05～0.01）；丙二醛含量：模型组明显高于其他3组（P〈0．05～0．01）。②一氧化氮含量：模型组明显低于其他3组（P〈0．05～0．01）。③诱导型一氧化氮合酶活力：地奥心血康组明显高于模型组（P〈0．01）；总一氧化氮合酶活力：模型组明显高于对照组和红花黄素组（P〈0．01），明显低于地奥心血康组（P〈0．05）。 结论：红花黄素对离体大鼠缺血再灌损伤的心肌具有保护作用，此作用可能与抑制心肌脂质过氧化、增强抗氧化能力有关。