NMDA受体对烫伤应激大鼠海马糖皮质激素受体基因表达的影响

目的：观察烫伤应激后海马糖皮质激素受体（GR）基因表达的变化，探讨N－甲基－D－天冬氨酸（N－methyl-D-aspartate,NMDA）受体在这种变化中的作用。方法：利用RT－PCR技术，检测烫伤前腹腔注射NMDA受体拮抗剂MK－801及激动剂NMDA对烫伤应激后2h GR mRNA水平的影响。结果：烫伤应激后2h海马GR mRNA水平明显降低（P＜0．01）；应激前腹腔注射MK－801使烫伤后降低的GR mRNA水平明显恢复（P＜0．01），注射NMDA使其进一步降低（P＜0．05），注射生理盐水无明显变化。结论：NMDA受体介导了烫伤应激导致的海马GR转录水平基因表达的下降。     

烫伤大鼠糖皮质激素受体减少与全身炎症反应综合征的关系

阐明实验大鼠烫作后糖皮质激素受体减少与烫伤后全身炎症反应综合征的关系。方法以ＳＤ大鼠制成烫伤模型，肌注ＧＲ的竞争性拮抗剂ＲＵ３８４８６阻断烫伤大鼠体内的ＧＲ，观察ＧＲ阻断对严重烫伤大鼠血浆磷脂酶Ａ２（ＰＬＡ２）活性，肿瘤坏死因子含量、脂质过氧化代谢产物－丙二醛（ＭＤＡ）含量以脏脏器组织匀浆中ＴＮＦα、ＭＤＡ含量变化的影响。结果烫伤８ｈ，大鼠血浆ＰＬＡ２活性，ＴＮＦα和ＭＤＡ的含是以及肺、肝、肾组织     

光亲和标记测定烫伤大鼠肝胞液糖皮质激素受体分子量

本实验室以往的工作证明,大鼠烫伤后,不但有肝胞液糖皮质激素受体结合容量的改变,而且有表观解离常数的增大和糖皮质激素受体沉降系数的改变。本文采用[~3H]去炎松缩酮光亲和标记法测定了烫伤大鼠肝胞液糖皮质激素受体的分子量,和正常大鼠无显著差异,因而说明,受体沉降系数的改变不是由于受体结合亚单位分子量的改变所致。     

阻断糖皮质激素受体对大鼠烫伤后急性呼吸窘迫综合…

以ＲＵ３８４８６阻断严重烫伤大鼠体内的糖皮质激素受体，观察ＧＲ阻断对其肺血管壁通透性，含水量以及血液和肺组织匀浆中丙二醛的含量的影响。结果：ＧＲ阻断明显加重严重烫伤大鼠肺血管壁通透性、肺含水量以及血液和肺组织匀浆中ＭＤＡ含量的升高；     

烫伤大鼠肝组织糖皮质激素受体的变化及α-MSH、合成肽KPV的调节作用

目的　探讨烫伤所致的病理性应激时大鼠肝胞液糖皮质激素受体的变化及可能的调节机制。方法　以 [3H]地塞米松为配体 ,用放射性配基 受体结合分析法测定了正常对照组、轻度烫伤组和重度烫伤组大鼠肝胞液糖皮质激素受体的结合容量(Receptorcapacity ,R0 )和表观解离常数 (Kd)。采用体内注射TNFα、IL 1 β中和抗体和α 促黑色素细胞刺激激素 (α melanocyte stimulatinghormone ,α MSH)和合成肽KPV(Ac D Lys L Pro D Val)等措施调节其改变。结果　与正常组的R0 [Massactionrobust:(30 7.86± 2 4.2 2 )fmol/mg ;Scatchard :(30 6 .71± 2 7.96 )fmol/mg]相比 ,烫伤后 1 2h ,轻烫组的R0 [MassActionRobust:(2 85 .1 9± 1 6 .6 2 )fmol/mg ;Scatchard :(2 96 .6 4± 1 6 .0 6 )fmol/mg]差异不显著 ;重烫组的R0 [Massactionrobust:(2 0 5 .5 2± 30 .41 )fmol/mg ;Scatchard :(2 0 8.45± 30 .78)fmol/mg]则显著下降 (P <0 .0 5 )。用体内注射TNFα、IL 1 β中和抗体和α MSH和KPV均能明显改善重烫组R0 的降低。结论　TNFα、IL 1 β中和抗体、α MSH及KPV均可在一定程度上防止重度烫伤所致的病理性应激时糖皮质激素受体的减少     

肾上腺切除后大鼠下丘脑室旁核MR、GR表达变化的研究

目的:实施大鼠双侧肾上腺切除术,研究下丘脑室旁核盐皮质激素受体(MR)、糖皮质激素受体(GR)表达的变化。方法:建立大鼠双侧肾上腺切除模型,于肾上腺切除后0,4,7 d取材;同时取材假手术组(未切除肾上腺)作为对照,应用免疫组织化学方法检测各组下丘脑室旁核神经元MR、GR的表达变化。结果:肾上腺切除后,免疫组化结果显示,下丘脑室旁核的MR表达没有显著性变化,GR表达上调。结论:肾上腺切除后,下丘脑室旁核MR表达不变,GR表达上调。提示下丘脑室旁核的MR可能不直接参与HPA轴的调节,GR参与HPA轴的调节。     

大鼠严重烫伤早期应激反应中肝脏糖皮质激素受体变化的实验研究

目的 研究大鼠在严重烫伤早期应激反应中肝脏糖皮质激素受体（GR）的表达变化及意义，探讨影响GR改变的分子机制。方法 通过免疫印迹分析GR在严重烫伤后早期不同时相点肝脏中的表达变化及烫伤血清、细胞因子以及高浓度地塞米松对体外培养肝细胞GR表达的影响；应用放免和ELISA方法测定烫伤大鼠血清皮质酮和细胞因子TNF－α、IL-β的浓度变化。结果 大鼠肝脏GR的表达在严重烫伤后早期显著下调，而血清皮质酮和血清炎性细胞因子在烫伤早期均显著升高，体外实验则证实烫伤血清和TNF－α、IL－1对培养肝细胞的GR的表达有明显抑制作用，高浓度地塞米松作用则不明显。结论 严重烫伤会引起大鼠肝脏GR表达显著下调，烫伤早期分泌增多的炎性细胞因子可能是引起GR下调的主要原因之一，而烫伤早期机体内部大量生成的糖皮质激素对GR的表达并无显著影响。     

大鼠外周血白细胞糖皮质激素受体的测定

为了测定糖皮质激素受体的结合参数，以利于今后进步探讨ＧＲ改变在某些疾病发生中的作用及对治疗的指导意义。材料和方法以「＾３Ｈ」地塞公为配基，建立了大鼠外周血ＧＲ的放射配体结合测定方法。结果Ｓｃａｔｃｈａｒｄ作图分析「＾３Ｈ」Ｄｅｘ特异结合呈一直线，表观结合容量和平衡解离常数分别为（３３８７±３２８）位点细胞和（２。３５±１．１３）ｎｍｏｌ／Ｌ（ｘ±ｓ，ｎ＝５），「＾３Ｈ」Ｄｅｘ特异结合有明显的甾体特     

Determination of the Molecular Weight of Photoaffinity Labeled Glucocorticoid Receptor in Scalded Rat Liver Cytosol

Previous work in our laboratory showed that,after scalding,there wasnot only a decrease of rat liver cytosol [~3H]-Dexamethasone specific binding sitesbut also an increase of apparent dissociation constant of [~3H]-Dex and change ofsedimentation coefficient of glucocorticoid receptor.The present study was carriedout using photoaffinity labeling of glucocorticoid receptor in rat liver cytosol.Itwas found that there was no significant difference between molecular weights ofglucocorticoid receptor of normal and scalded rats determined by SDS-polyacrylamide gel electrophoresis.Our result suggests that chnage ofsedimentation coefficient is not due to alteration of molecular weight ofglucocorticoid receptor binding subunit.     

左归丸对老龄大鼠海马糖皮质激素受体位点及其基因表达的影响

目的　观察左归丸 (ZGW)对老龄大鼠海马糖皮质激素受体 (GR)位点及其基因表达的影响。方法　以2 4月龄大鼠为自然老化模型 ,随机分为老龄组、左归丸组 ,并以 3月龄大鼠为青龄组 ,各组处理 3个月。采用放射配基饱和分析技术及RT PCR方法检测大鼠海马GR位点及GRmRNA表达。结果　老龄组、青龄组及左归丸组海马GR位点分别为 (439.6 4± 4 8.0 9)、(85 0 .32± 34.96 )和 (1171.5 7± 5 4 .85 )fmol/mg蛋白 ,老龄组明显低于青龄组 (P <0 .0 5 ) ,左归丸组较老龄组明显上调 (P <0 .0 1) ;3组GRmRNA表达量分别为 0 .2 74 9± 0 .0 6 5 9、0 .6 4 0 7± 0 .4 4 18、0 .96 0 3± 0 .32 4 9,表明老龄组GRmRNA表达量低于青龄组 (P <0 .0 5 ) ,左归丸组海马GRmRNA表达量明显高于老龄组 (P <0 .0 0 1)。结论　左归丸延缓衰老作用可能与上调海马GR位点及其基因表达有关     

糖皮质激素对淋巴细胞受体表达的影响

目的观察糖皮质激素(GH)对淋巴细胞受体(GR)及亚型表达的影响。方法将10-5mol/L地塞米松(Dx)在淋巴细胞株Raji和Jurkat上作用3d,采用Westernblot方法检测GR在蛋白质水平上的变化,采用Realtime方法检测GR及其亚型在mRNA水平上的变化。结果应用Dx24h,总蛋白中GR表达明显减少,但在核蛋白中GR表达明显增多;在mRNA水平上hGRα亚型在用药前后无显著变化(P>0.05),hGRβ亚型量极微,几乎不能检测。结论GH影响GR的表达,GR活化后由细胞浆转入细胞核;hGRβ亚型的作用有待进一步研究。     

米非司酮和利洛司酮对大白鼠肝胞浆糖皮质激素受体亲和力的影响

本文以放射配体结合实验测定了国产米非司酮、进口米非司酮和利洛司酮在大白鼠肝胞浆糖皮质激素受体水平的竞争抑制特性。[~3H]地塞米松与其受体结合之kd为0.57±0.06nmol/L,3种化合物Ki分别为0.55 0.09nmol/L、0.55±0.14nmol/L和1.02±0.07nmol/L,地塞米松、米非司酮和利洛司酮的相对结合亲和力LRBA)比值约为1:4:2。国产米非司酮和进口米非司酮的各项受体药理特性指标差异无显著性意义。     

布地奈德对哮喘模型大鼠肺组织Toll样受体4和5表达的影响

目的观察布地奈德对哮喘模型大鼠肺组织Toll样受体4（TLR4）和TLR5表达的影响,探讨TLR在哮喘炎症机制中的作用。方法 27只SD大鼠随机分成哮喘组、对照组、布地奈德组,每组9只。制备哮喘大鼠模型,免疫组织化学法检测各组大鼠肺组织TLR4和TLR5表达。结果哮喘组大鼠肺组织TLR4光密度值与对照组比较,差异无统计学意义（P〈;0.05）;布地奈德组大鼠肺组织TLR4光密度值显著低于对照组和哮喘组（P〈0.05）。哮喘组大鼠肺组织TLR5光密度值显著高于对照组（P〈0.05）;布地奈德组TLR5与对照组及哮喘组比较,差异均无统计学意义（P〈0.05）。肺组织TLR4和TLR5蛋白表达水平无相关性（r=0.246,P＆gt;0.05）。结论 OVA致敏的哮喘模型大鼠肺组织TLR5表达升高,TLR4无变化,TLR5在哮喘中可能起到促炎作用。布地奈德能下调哮喘模型大鼠肺组织TLR4和TLR5表达。