NF-κB在TNF-α诱导的Hela细胞凋亡中的作用

目的：探讨核因子-κB(nuclear factorkappa B，NF-κB)对肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α，TNF-α)诱导的宫颈癌Hela细胞凋亡的影响。方法：培养宫颈癌Hela细胞。不同处理因素按指定时间作用后，RT一PCR检测NF-κB p65 mRNA的表达。免疫印迹和免疫组化检测NF-κB p65活性的变化，TUNEL法检测细胞凋亡。结果：静息状态下。在Hela细胞中NF-κB p65具有微弱活性水平。TNF-α诱导Hela细胞NF—κB活化与其诱导细胞凋亡明显相关，NF-κB p65单抗能显著抑制TNF-α(10ng／mL)诱导的Hela细胞NF-κB活化，抑制率为49．69％，并增强其诱导Hela细胞凋亡的作用，凋亡增加率为57．52％。结论：TNF-α在诱导宫颈癌Hela细胞凋亡的同时活化NF-κB。NF-κB p65单抗可通过抑制NF-κB活化以增强TNF-α诱导Hela细胞凋亡的作用。     

AdIκBα转染通过诱导凋亡逆转人非小细胞肺癌对泰素的耐药性

目的研究携带抑制性核因子κBα(IκBα)的腺病毒(AdIκBα)联合化疗对人非小细胞肺癌细胞株H460及H460荷瘤小鼠的作用。方法(1)检测50%抑制浓度(IC50)以确定化疗单用或联合AdIκBα对H460细胞增殖的影响,同时采用Annexin-V/PI染色法和caspase3活性测定来检测治疗引起的细胞凋亡情况;(2)观察泰素单用及联合不同浓度AdIκBα转染对H460荷瘤小鼠的作用,同时通过免疫组化染色观察核因子κB(NFκB)与p53及NFκB与血管内皮生长因子(VEGF)之间的关系。结果(1)联合AdIκBα3moi转染明显降低了泰素对H460的IC50,与激活caspase3途径而诱导了更多的细胞凋亡有关;在低剂量化疗组,联合治疗的疗效更加明显。(2)体内联合治疗明显抑制了H460荷瘤小鼠的肿瘤生长;免疫组化染色证实泰素治疗诱导了H460移植瘤细胞的NFκB表达增加,AdIκBα转染则消除了其表达,同时伴有轻度增加的VEGF表达,而p53表达不受影响。结论IκBα可通过阻滞NFκB表达和诱导凋亡而增加化疗疗效,同时减弱了VEGF表达,但与p53状态无关。推测联合治疗可减少化疗药的剂量,从而增加临床应用的耐受性。     

NF-κB在TNF-α诱导的Hela细胞凋亡中的作用

目的探讨核因子-κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)对肿瘤坏死因子-α(tumor necrosisfactor-α,TNF-α)诱导的宫颈癌Hela细胞凋亡的影响。方法培养宫颈癌Hela细胞,不同处理因素按指定时间作用后,RT-PCR检测NF-κBp65mRNA的表达,免疫印迹和免疫组化检测NF-κB p65活性的变化,TUNEL法检测细胞凋亡。结果静息状态下,在Hela细胞中NF-κB p65具有微弱活性水平,TNF-α诱导Hela细胞NF-κB活化与其诱导细胞凋亡明显相关,NF-κB p65单抗能显著抑制TNF-α(10ng/mL)诱导的Hela细胞NF-κB活化,抑制率为49.69%,并增强其诱导Hela细胞凋亡的作用,凋亡增加率为57.52%。结论TNF-α在诱导宫颈癌Hela细胞凋亡的同时活化NF-κB。NF-κB p65单抗可通过抑制NF-κB活化以增强TNF-α诱导Hela细胞凋亡的作用。     

CPNE5的A结构域对肿瘤坏死因子α诱导核因子κB活化的影响

[目的]研究CPNE5的A结构域(AD)对肿瘤坏死因子α(TNF-α)激活核因子κB(NF-κB)转录活性的调控作用。[方法]用PCR法扩增AD序列,将其构建EGFP-N1载体上,在真核细胞中表达融合蛋白AD-GFP。以连有κB序列和表达水平受κB序列调控的荧光素酶基因的质粒为报告基因载体,将EGFP-N1、AD-GFP质粒分别与报告基因共转染到HEK293细胞中,经TNF-α处理后,用双荧光素酶报告基因系统测定荧光素酶的活性,检测它们对NF-κB转录活性的影响。[结果]构建了AD-GFP质粒;A结构域能够显著抑制NF-κB转录活性(P<0.05);AD对NF-κB转录活性的抑制具有剂量依赖性。[结论]CPNE5的A结构域能够剂量依赖性抑制NF-κB的转录激活活性。     

rhTNFα对鼻咽癌 CNE3细胞p53及p21WAF1/CIP1蛋白表达的影响

瘤坏死因子α(tumor necrosis factor alpha, TNF-α)为活化的巨噬细胞分泌的一种蛋白质，具有多种生物活性，其细胞抑制效应（ cytostatic effect）可能由于上调 WAF1表达水平所致 [1， 2]。 p21WAF1/CIP1（简称为 WAF1）与细胞周期抑制蛋白 CIP1完全相同 [3]，能将 DNA失常的细胞阻滞于 G1期进行修复或使之凋亡，其 DNA的启动子区含有一个 p53结合点，受野生型 p53基因（wtp53）调控。我们曾将 wtp53基因导入鼻咽癌细胞株 CNE3[4]并进行裸鼠致瘤抑制实验 [5]，结果表明导入 wtp53基因有明显抑制移植瘤生长作用。现在此基础上进一步研究 CNE3裸鼠移植瘤经注射 TNF-α处理后抑瘤基因 p53及 WAF1表达的变化，为阐明这 3种抑瘤物质的相互作用机理提供实验依据。     

两型TNF-α对HL-60细胞毒效应及其机制研究

目的前期研究表明，膜型TNF-α较分泌型TNF-α具有更强和更广的细胞毒作用，本研究拟进一步研究两型TNF-α介导胞毒效应的差异。方法采用对两型TNF-α反应性不同的HL-60为靶细胞；MTT法检测两型TNF-α对HL-60的胞毒活性；RT-SSCP法检测p53基因；通过检测荧光素酶报告基因表达水平，反映NF-kB活性的变化。结果TM-TNF可以有效杀伤HL-60，S-TNF则不能。S-TNF诱导HL-60的NF-kB活性升高，TM-TNF则不能诱导HL-60的NF-kB活性升高。同时我们发现HL-60细胞的p53基因是突变的。结论HL-60细胞对S-TNF胞毒作用耐受，对TM-TNF敏感；此种差异可能在于TM—TNF能够有效抑制NF-kB的激活，进而下调突变p53基因，最终导致其抗凋亡效应减弱，杀伤效应增强，其具体机制有待深入研究。     

乙肝病毒x蛋白对肝癌细胞中PUMA表达的影响

目的:探讨乙肝病毒x蛋白（hepatitis B virus x protein,HBx）对肝癌细胞中PUMA表达的影响及其机制。方法:利用质粒转染技术对p53基因不同状态的肝癌细胞转染野生型HBx基因,用RT-PCR检测转染后肝癌细胞中HBx mRNA表达和荧光定量PCR检测NFκB mRNA表达,Western blot检测HBx、p53、NFκB、PUMA蛋白表达。结果:转染后随着HBx的表达,在p53野生型肝癌细胞BEL-7402和p53突变型肝癌细胞Huh-7中NFκB mRNA和蛋白上调而p53蛋白表达下降,BEL-7402细胞PUMA蛋白表达下降而Huh-7细胞中PUMA蛋白表达略有下降。加入NFκB抑制剂PDTC后并随着PDTC浓度逐渐增加,BEL-7402细胞NFκB蛋白表达逐渐下降而p53蛋白和PUMA蛋白表达逐渐上升;但在Huh-7细胞中随着NFκB蛋白表达的抑制,p53蛋白逐渐上升而PUMA蛋白上升不明显。结论:结果提示转染HBx基因可以抑制肝癌细胞中PUMA蛋白表达,在p53野生型肝癌细胞这种抑制可能与HBx通过NFκB 的激活有关。     

IκBα基因转染抑制人肺癌细胞株H460成瘤性的实验研究

背景与目的核因子κB(NFκB)参与多种肿瘤的发生发展,抑制其活性可能抑制肿瘤细胞生长。本研究旨在观察抑制NFκB对人肺癌细胞株H460生长的影响,探讨其抑制或杀伤肿瘤的分子机制。方法体外实验:用表达抑制性κB(IκBα)或LacZ的腺病毒(AdIκBα或AdLacZ)转染H460细胞,测定其生长和凋亡情况,并检测细胞培养上清液中caspase3和TNFα表达。体内实验:用预先转染AdIκBα/AdLacZ的H460细胞建立肿瘤模型,以观察基因转染对成瘤性的影响;对未转染的H460肿瘤小鼠,于瘤内注射AdIκBα/AdLacZ/PBS,观察小鼠肿瘤的生长。留取小鼠肿瘤标本进行免疫组化染色,检测p65、p53和VEGF表达。结果①转染AdIκBα可抑制肿瘤细胞生长,促进凋亡发生;②成瘤性抑制实验显示接种30MOIAdIκBα转染的H460细胞的小鼠中77.8%在6周内无肿瘤形成,而30MOIAdLacZ转染组仅12.5%(P=0.012);③对已建立的H460肿瘤,瘤内注射30MOIAdIκBα可明显延缓肿瘤生长(P<0.05);④免疫组化染色提示各实验组的p53表达无显著性差异,而VEGF表达在30MOIAdIκBα转染组明显减少,转染AdIκBα抑制了H460细胞的p65活性。结论AdIκBα转染阻滞人肺癌细胞H460的NFκB活性,抑制肿瘤细胞的成瘤性,并延缓肿瘤生长。体内外实验显示AdIκBα转染不仅通过诱导凋亡而控制细胞     

K562及其耐药细胞株K562／A02对rmhTRAIL的敏感性及NF-κB表达

[目的]探讨K562及其耐药细胞株K562／A02对rmhTRAIL敏感性及NF-κB（RelA／p65）的表达。[方法]观察rmhTRAIL作用后K562、K562／A02细胞形态变化，采用碘化丙啶染色法流式细胞术定量检测细胞凋亡比例，MTT法测定rmhTRAIL抑制细胞增殖率，半定量逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）方法检测K562、K562／A02细胞的NF-κB（RelA/p65）mRNA表达水平。[结果]rmhTRAIL可诱导K562、K562／A02细胞凋亡，有典型的细胞形态改变；流式细胞术检测显示K562／A02的sub—G1百分比大于K562（P〈0．05）；rmhTRAIL对K562／A02的增殖抑制作用优于K562（P〈0．05）；K562和K562／A02均高表达NF-κB（RelA/p65）mRNA，两者无统计学意义（p〉0．05）。[结论]rmhTRAIL可以诱导K562、K562／A02细胞凋亡；rmhTRAIL对K562／A02促凋亡和抑制增殖作用优于K562；NF-κB（RelA／p65）未显示出其在K562及其耐药细胞株K562／A02对rmhTRAIL敏感性差异中的作用。     

rmhTNF α协同顺铂对小鼠Lewis肺癌移植瘤的抑制

目的:观察重组改构人肿瘤坏死因子(rmhTNF-α)协同顺铂(cisplatin ,DDP)对小鼠Lewis肺癌移植瘤的抑制作用,并探讨其可能的作用机制.方法:将Lewis肺癌细胞接种于C57BL/6小鼠右腋皮下,随机分为4组:生理盐水组(对照组)、DDP组(3 mg/kg)、rmhTNF-α组(150×104 U/kg)、rmhTNF-α(150×104 U/kg) DDP(3 mg/kg)组.于细胞接种的第7天,肿瘤直径约0.6 cm时,瘤内注射给药,连续3 d,停药1 d后处死小鼠,剥离并称取瘤重,计算抑瘤率.流式细胞术测定移植瘤细胞凋亡率及细胞周期, RT-PCR检测移植瘤组织Survivin的表达.结果:(1)rmhTNF-α DDP组治疗的抑瘤率(36.61%)明显高于DDP组(17.12%)或rmhTNF-α组(15.83%)单药治疗(P<0.05).两药联合使用的q=1.2,具有良好的协同作用.(2)联合用药治疗后移植瘤细胞的凋亡率[(28.2±1.8)%]显著高于DDP[(21.6±1.0)%]和rmhTNF-α[(19.3±2.0)%]单药治疗(P<0.05);前者的细胞周期明显阻滞于G2期.(3)3个治疗组移植瘤细胞Survivin 基因的表达受到明显抑制(P<0.01),联合用药组的抑制程度较单药组更明显(P<0.05).结论:rmhTNF-α与DDP联合应用具有协同抗Lewis肺癌移植瘤的作用,其机制可能与抑制Survivin基因表达、诱导肿瘤细胞凋亡有关.     

槐耳清膏对人肺腺癌细胞H1299化疗敏感性的影响

[目的]探讨槐耳清膏对p53基因表达缺失的人肺癌细胞系H1299（p53-null）体外生长化疗敏感性的影响。[方法]应用MTT法、流式细胞仪及克隆形成试验，检测槐耳清膏对H1299生长的影响及对化疗药物（DDP和ADM）敏感性的变化。[结果]槐耳清膏能使H1299细胞体外生长速度明显减慢．其抑制生长的作用具有剂量依赖性。MTT实验提示槐耳清膏使顺铂和阿霉素的IC50值分别减少了4倍和45倍，槐耳清膏（1．0g/L）联合原本没有明显抑制和杀伤作用的化疗药物（1．25μmol／L的顺铂或0．25μmol／L的阿霉素）使H1299细胞生长明显受到抑制。流式细胞术显示槐耳清膏使顺铂诱导的细胞凋亡率从12．8％升高到33．5％（P〈0．01），阿霉素诱导的细胞凋亡率从22．7％升高到51．0％（P〈0．01）。克隆形成实验显示槐耳清膏能明显降低化疗后细胞的克隆形成数（P〈0．01），对顺铂和阿霉素的化疔增效倍数分别为1．9和1．6倍。[结论]槐耳清膏可以抑制人肺腺癌细胞H1299体外生长并提高其对阿霉素、顺铂等化疗药的敏感性．且这种作用不依赖于p53基因。     

转染NF—kB抑制物基因对食管癌细胞系生物活性的影响

目的：将NF—kB抑制物基因pcDNA3／mI kBα S32A／S36A转染食管癌细胞株EC1，观察对NF—kB因子活性及对细胞生长的影响。方法：采用脂质体转染法将pcDNA3／mI kBα S32A／S36A质粒转染入EC1细胞进行瞬时表达．检测其对EC1细胞的影响，用Western blot和RT—PER方法检测转染前后NF—kB p65、NF—kB p50蛋白和mRNA表达水平的变化。结果：与转染pcDNA3．0质粒和未转染质粒组比较，转染pcDNA3．0／mI kBα S32A／S36A质粒EC1细胞的生长速度受到明显抑制，P〈0．05。转染pcDNA3／mI kBα S32A／S36A质粒的EC1细胞，在0、24、48、96小时未见NF—kB p65、NF—kB p50蛋白和mRNA表达，而转染pcDNA3．0质粒EC1细胞可见核内NF—kB p65和NF—kB p50蛋白表达。结论：转染NF—kB抑制物基因IkBα后可抑制EC1细胞的生长，并抑制细胞NF—kB p65、NF-kB p50基因的表达．该结果提示调节NF—kB的表达可能是食管癌基因治疗的靶点。     

p73基因对人肺腺癌细胞H1299化疗敏感性的影响

背景与目的:实验证明野生型p53基因能增强大多数非小细胞肺癌的化疗敏感性。p53基因的同源体p73与其在结构和功能上都具有高度的相似性。本研究拟探讨p73基因对人肺腺癌细胞株H1299化疗敏感性的影响。方法:通过脂质体介导将p73α基因导入人肺腺癌细胞株H1299,G418筛选获得稳定表达P73α的阳性细胞克隆。Westernblot检测转染细胞中P73α蛋白的表达;MTT法检测细胞存活率,观察转染细胞对阿霉素、顺铂的敏感性变化;采用流式细胞仪和TUNEL法检测.p73646化疗药诱导前后转染细胞凋亡的变化;克隆形成实验观察细胞生物学性状的变化。结果:转染p73α基因的H1299细胞可以稳定高表达P73α蛋白。MTT实验提示顺铂和阿霉素的IC50值分别减少了86.2%和99.2%,转染细胞在原本没有明显抑制和杀伤作用的药物浓度(1.25μmol/L的顺铂或0.05μmol/L的阿霉素)作用下生长明显受到抑制。流式细胞术显示p73α基因转染后顺铂诱导的细胞凋亡率从10.1%升高到38.4%(P<0.01),阿霉素诱导的细胞凋亡率从12.1%升高到49.3%(P<0.01)。克隆形成实验显示p73α基因转染能明显降低化疗后H1299细胞的克隆形成数(P<0.01),对顺铂和阿霉素的化疗增效倍数分别为1.8和2.6倍。结论:转染p73基因可以提高H1299细胞对阿霉素、顺铂等化疗药的敏感性。该作用可     

食管鳞癌细胞中NF-κB与IκBα的mRNA、蛋白表达

目的：核转录因子NF—kappaB（NF—κB）是一种重要的转录因子，参与调控多种与炎症、抗凋亡、肿瘤形成和转化有关的基因表达。本研究通过检测食管鳞癌细胞中NF—κB与IκBαmRNA、蛋白的表达及NF—κB的DNA结合活性．分析NF—κB在食管鳞癌细胞中的激活状态及其在食管鳞癌细胞的生存及转化中的作用。方法：采用Western blotting法检测两株食管鳞癌细胞胞质中NF—κB亚单位p50和p65、阻遏物IKBα及其磷酸化IKBα的蛋白表达．检测细胞核中p50和p65的蛋白表达并采用EMSA法检测其与DNA的结合活性。使用RT-PCR法检测p50、p65、IκBαmRNA的表达：结果：NF—κB的亚单位p50、p65、IκBα及磷酸化IκBα在食管鳞癌细胞质中均表达．p50、p65蛋白在细胞核中也表达并具有较高的DNA结合活性.RT-PCR结果表明．p50、p65、IκBα的mRNA在细胞中也存在过表达。结论：本研究发现NF—κ在两株食管鳞癌细胞系中被激活，基因的过表达及IκBα的磷酸化在维持NF—κB的活化中起着重要的作用．     

多烯紫杉醇联合TNF—α对人前列腺癌裸鼠皮下移植瘤的抑制作用

目的：探讨多烯紫杉醇联合TNF-α抑制前列腺癌的作用，并进一步了解其作用机理。方法：建立人前列腺癌细胞的裸鼠皮下移植瘤模型，在多烯紫杉醇和TNF—α的联合作用下观察其对皮下移植瘤生长的抑制作用，并通过RT—PCR、免疫组化方法检测Bax、Bcl-2基因mRNA表达及p53蛋白表达。结果：与多烯紫杉醇组、TNF—α组及对照组相比，多烯紫杉醇和TNF—α联合治疗组可抑制前列腺癌皮下移植瘤生长速度，且肿瘤体积明显减少（P〈0．01）。BaxmRNA表达上调，而Bcl-2mRNA表达水平下降，免疫组化结果表明p53蛋白的表达水平下降。结论：多烯紫杉醇联合TNF—α对前列腺癌有一定的抑制作用，作用机理可能是通过引起促凋亡基因Bax表达增高，从而导致肿瘤细胞加速凋亡而实现的。     

多烯紫杉醇联合TNF-α对人前列腺癌裸鼠皮下移植瘤的抑制作用

目的：探讨多烯紫杉醇联合TNF-α抑制前列腺癌的作用，并进一步了解其作用机理。方法：建立人前列腺癌细胞的裸鼠皮下移植瘤模型，在多烯紫杉醇和TNF—α的联合作用下观察其对皮下移植瘤生长的抑制作用，并通过RT—PCR、免疫组化方法检测Bax、Bcl-2基因mRNA表达及p53蛋白表达。结果：与多烯紫杉醇组、TNF—α组及对照组相比，多烯紫杉醇和TNF—α联合治疗组可抑制前列腺癌皮下移植瘤生长速度，且肿瘤体积明显减少（P〈0．01）。BaxmRNA表达上调，而Bcl-2mRNA表达水平下降，免疫组化结果表明p53蛋白的表达水平下降。结论：多烯紫杉醇联合TNF—α对前列腺癌有一定的抑制作用，作用机理可能是通过引起促凋亡基因Bax表达增高，从而导致肿瘤细胞加速凋亡而实现的。     

EGCG影响TNF-α诱导的NF—KB／p65入核及促凋亡效应

背景与目的：研究表明，表没食子儿茶素没食子酸酯（epigallocatechin-3-gallate，EGCG）抗肿瘤作用机制尚不十分清楚，本研究旨在观察EGCG调节TNF—α诱导的胃癌SGC-7901细胞核转录因子KB／p65（NF—KB／p65）的入核并发挥诱导凋亡的作用。方法：Hoechst染色法检测EGCG处理SGC-7901细胞前后凋亡的形态学改变；Westemblot方法观察EGCG作用前后NF—KB／p65蛋白在胞质内及核内的变化；流式细胞术检测EGCG调节NF—KB／p65入核前后细胞凋亡的变化；DNA ladder方法观察EGCG诱导细胞DNA断裂情况。结果：Hoechst染色法显示EGCG处理后细胞形态改变：核致密浓染或呈碎块状、苍白色。Western blot方法检测发现，10ng／ml的TNF—d作为NF—KB／p65入核的诱导剂分别作用细胞30、60、90和120min后，核内NF—KB／p65明显增多并在60min达高峰；60斗g／ml的EGCG预处理细胞不同时间（0、12、24、36和48h）后，再以TNF—d处理60min，检测发现核内NF—KB／p65明显下降并在24h达低谷；不同浓度EGCG（40、60、80和100μg／m1）预处理细胞24h后，再加TNF—d处理60min，核内NF—KB／p65呈时间依赖性下降。流式细胞术显示，10ng／ml的TNF—α处理细胞60min后，细胞凋亡率为3．7％，60μg／mlEGCG处理细胞24h后再以TNF—α处理细胞，凋亡率为16．6％；NF—KB通路阻断剂吡咯啉烷二甲基硫脲（PDTC）100μmoL／L预处理30min后再以TNF—α处理细胞60min，细胞凋亡率为21．4％。EGCG60μg／ml处理细胞24h、PDTC处理细胞30min后再以TNF—α处理细胞60min，DNA凝胶电泳出现明显梯形条带。结论：EGCG能够抑制TNF—α诱导的NF—KB／p65入核，并可能通过此机制发挥诱导细胞凋亡的作用。     

肿瘤坏死因子-α对乳腺癌细胞CD44表达调控及其影响细胞迁徙机制的探讨

目的:检测肿瘤坏死因子(TNF-α)对乳腺癌细胞株MDA-MB-231中CD44s、CD44V3和CD44V6表达的调控及其对细胞迁徒力的影响,并探讨TNF-α调节CD44可能存在的信号途径.方法:用RT-PCR和蛋白质印迹法检测TNF-α(0、2、20和200 ng/mL)作用乳腺癌细胞后其CD44 mRNA和蛋白的表达情况,Transwell方法检测TNF-α作用后细胞迁徒能力的改变;以浓度为20 ng/mL的TNF-α处理MCF-7和MDA-MB-231后,用蛋白质印迹法检测MAPK(JNK、p38和ERK)信号通路中蛋白磷酸化水平变化,对磷酸化水平增加的蛋白用特异性抑制剂预处理后检测CD44的表达及细胞迁徙能力的改变.结果:TNF-α作用后MDA-MB-231细胞CD44s、CD44V3、CD44V6mRNA和蛋白表达水平均上调;迁徙力增加了22%～90%;TNF-α作用MDA-MB-231细胞后p38磷酸化水平升高;用p38的特异性抑制剂预处理后可以逆转CD44表达和细胞迁徒力的改变.结论:TNF-α通过p38途径对MDA-MB-231细胞CD44表达进行调控,CD44的表达可以增强肿瘤细胞的迁徙力.     

纳米材料介导TNF基因转染CIK细胞对鼻咽癌细胞生长抑制研究

目的：探讨纳米材料PAMAM介导TNFα基因转染CIK细胞的可能性以及对人鼻咽癌细胞株CNE-2生长的抑制作用。方法：纳米材料PAMAM介导pEGFP-N1-TNFα转染CIK细胞,检测其转染效率,ELISA法检测转染后CIK细胞培养上清液TNF—α浓度,流式细胞术分析CIK细胞表型,MTT法检测转染后CIK细胞对鼻咽癌细胞株CNE-2的生长抑制。结果：转染后CIK细胞生长曲线与来转染CIK细胞生长曲线一致;PAMAM介导pEGFP—N1-TNF。转染CIK细胞阳性率为（71．5±2．13）％,脂质体转染效率为（78．9±1．55）％,两组比较差异无统计学意义,P〉0．05;转染PAMAM／pEGFP—N1-TNFα后CIK细胞第1、3、5和7天培养上清液中TNF-α逐步升高,转染第1天TNF—α表达量为（8．24±0．65）0g／mL,明显高于未转染PAMAM／DNA组的（6．53±0．52）ρg／mL及单纯转染PAMAM组的（6．24±0．57）9g／mL;转染第3天TNF—α表达量为（23．41±2．82）pg／mL,明显高于未转染PAMAM／DNA组的（6．89±0．61）9g／mL）gc单纯转染PAMAM组的（7．05±0．58）ρg／mL;转染第5天TNF—α表达量为（61．59±3．47）og／mL,明显高于未转染PAMAM／DNA组的（7．29±0．75）ρg／mL及单纯转染PAMAM组的（7．15±1．21）ρg／mL;转染第7天TNF-α表达量为（89．21±4．24）ρg／mL,明显高于未转染PAMAM／DNA组的（8．13±1.04）ρg／mL及单纯转染PAMAM组的（8．78±1．25）pg／mL;经组间效应检验方差分析,不同时间不同组间TNF-α表达量差异有统计学意义,P〈0．05。转染pEGFP—N1-TNFα后CIK细胞可明显抑制CNE-2细胞生长,P〈0．05。结论：纳米材料PAMAM介导pEGFP—N1-TNFα转染CIK细胞未改变CIK细胞生长特性及表型特征,转染后CIK细胞可分泌较多TNF-α,可更加有效的抑制鼻咽癌细胞生长。