Th1/Th2极化:转录因子的作用

本文介绍了Th1细胞相关的转录因子ERM、T bet、IRF 1和Th2细胞相关的转录因子c maf、GATA 3等的作用特点 ,在此基础上 ,对各种转录因子的内在联系和相互调节作用做一简要综述。     

溃疡性结肠炎相关性结直肠癌大鼠Th1/Th2漂移与微血管密度的关系

为探讨溃疡性结肠炎相关性结直肠癌(ulcerative colitis-associated colorectal cancer,UC-CRC)大鼠Th1/Th2漂移与微血管密度(microvessel density,MVD)的关系,建立UC-CRC大鼠模型,于第14、16、18周分批处死,观察各组结肠组织病理学变化情况,并比较血清、结肠组织中Th2细胞因子IL-4、Th1细胞因子IFN-γ水平及结肠组织中CD4~+IL-4~+占比、CD4~+IFN-γ~+占比、CD4~+IFN-γ~+/CD4~+IL-4~+、MVD,分析MVD与IFN-γ、IL-4、IFN-γ/IL-4的相关性。结果显示,模型组大鼠建模后状态逐渐变差,持续2周后好转;模型组结肠细胞有明显的病理学变化;与对照组比较,模型组各时刻血清和组织中IL-4水平、CD4~+IL-4~+占比、MVD较高,IFN-γ水平、CD4~+IFN-γ~+占比、IFN-γ/IL-4、CD4~+IFN-γ~+/CD4~+IL-4~+较低(P0.05);模型组血清和组织中IL-4水平、CD4~+IL-4~+占比、MVD均随时间的延长呈升高趋势(P0.05),IFN-γ水平、CD4~+IFN-γ~+占比、IFN-γ/IL-4、CD4~+IFN-γ~+/CD4~+IL-4~+均随时间的延长呈下降趋势(P0.05),而对照组上述指标变化均不显著(P 0.05);不同时刻MVD与血清及组织中IL-4水平呈正相关(P0.05),与IFN-γ水平、IFN-γ/IL-4均呈负相关(P0.05)。提示UC-CRC大鼠Th1/Th2平衡向Th2漂移,MVD与Th2细胞因子呈正相关,与Th1细胞因子呈负相关,MVD与Th1/Th2漂移关系密切。     

初发SLE病人Th1/Th2及调控因子IL-18基因研究

目的：探讨未经药物治疗初发狼疮病人Th1/Th2细胞亚群分布及其调控细胞因子、细胞因子受体基因表达的差异，试图揭示系统性红斑狼疮发病的免疫紊乱机理。方法：运用三色荧光标记法流式细胞术检测42例未经药物治疗初发狼疮病人细胞亚群分布，并以10例正常人作对照；ABI7700 real-time PCR法同时检测 38例未经药物治疗初发狼疮病人和 28例正常人IL-18及其受体mRNA表达水平的差异。结果：①初发狼疮病人Th1较正常人明显减低（P<0．05），但Th1/Th2无显著性改变。②与正常组相比，SLE组病人IL-18 mRNA及其受体表达较正常人明显降低（P<0．05）；③面部红斑组病人Th1/Th2较正常人明显降低（P<0．05）；④关节炎组SLE病人较无关节炎病人IL-18表达降低。结论SLE是一种以Th1细胞下降，Th2细胞相对占优势的免疫介导的自身免疫性疾病，源于诱导向Th1细胞分化的IL-18及其受体减少和细胞因子间失衡所致。     

转录因子T-bet在Th1/Th2分化中的作用及意义

T-bet是属于T-box家族的新型转录因子,选择性地表达于Th1细胞,作为Th1特异的转录因子能诱导IFN-γ的产生,在Th1细胞的分化中起着决定性的作用。T-bet是IFN-γ基因强有力的转录激活剂,又能诱导并保持IL-12Rβ2的表达,且能将分化中的效应性Th2和已完全分化的Th2逆转为Th1,伴随产生大量的IFN-γ,并抑制IL-4、IL-5、IL-13等Th2型细胞因子的产生。T-bet在T细胞活化过程中能被IFN-γ诱导而上调;通过STAT1依赖的途径,TGF-β能通过抑制T-bet而抑制Th1分化。T-bet与Th1/Th2相关疾病的联系正日益受到关注。     

BALB/c小鼠感染弓形虫后Th1/Th2免疫漂移的实验研究

目的：动态分析BALB/c小鼠感染弓形虫后Th1/Th2免疫失衡及免疫漂移特点,并探讨转录因子T-bet和GA-TA-3在此过程中的改变及其意义。方法：90只BALB/c小鼠随机分为正常对照组30只,弓形虫感染组60只。于感染后奇数天每天处死感染组小鼠2只,对照组小鼠1只,采用ELISA法动态检测各组小鼠血清中IFN-γ和IL-4的水平,同时应用荧光定量PCR方法检测小鼠脾细胞中T-bet和GATA-3 mRNA的表达情况。结果：感染组小鼠中,血清IFN-γ于感染后第4天开始显著升高,第5~7天维持在高峰值,从第8天开始下降,第9天降至正常水平;IL-4于感染后第8天开始显著升高,第9天升至峰值,从第14天开始下降,第15天降至正常水平;脾细胞T-bet mRNA的表达在感染后第3天升高,第5天达高峰后于第9天降至正常水平;脾细胞GATA-3 mRNA的表达在感染后第7天升高,第11天达高峰,于第13天降至正常水平。正常对照组小鼠在实验期内IFN-γI、L-4水平没有明显变化,维持在正常的较低水平。结论：BALB/c小鼠感染弓形虫后诱导的免疫应答在感染急性期（第1~8天）以Th1应答为主,第9至13天,宿主免疫应答以Th2细胞应答为主,之后Th1/Th2应答基本恢复平衡。Th1应答向Th2应答的漂移与T-bet和GATA-3 mRNA的表达相关并受其调控,Th1/Th2型免疫应答的发生时相和效应强度可能影响弓形虫感染的最终结局。     

转录因子Bach1对人微血管内皮细胞的作用研究

 目的:研究转录因子Bach1对人微血管内皮细胞功能的影响。方法: 利用小干扰RNA（small interfering RNA,siRNA）细胞转染技术下调内皮细胞Bach1表达;用Matrigel管腔形成实验检测内皮细胞体外血管新生的能力;用Transwell小室法检测细胞迁移;用CCK-8法测定细胞增殖;用实时荧光定量PCR、Western blotting和ELISA法检测细胞中血红素氧合酶1（heme oxygenase 1,HO-1）和血管内皮细胞生长因子（vascular endothelial growth factor, VEGF）mRNA 和蛋白的表达情况;用转染报告基因的方法检测VEGF基因的转录活性。结果: 下调内皮细胞Bach1表达明显促进人微血管内皮细胞迁移和管腔形成能力,对内皮细胞增殖能力无明显影响;抑制Bach1表达促进内皮细胞HO-1 mRNA 和蛋白的表达,增加VEGF 转录活性及mRNA和蛋白的表达。结论: 抑制转录因子Bach1表达可增加内皮细胞HO-1和VEGF的表达,促进人微血管内皮细胞迁移和管腔形成,提示Bach1是负性调控血管新生的因子。     

β-catenin基因沉默对肝癌干细胞干性转录因子的影响

背景：肝癌干细胞是导致癌细胞形成、更新和增殖的原因,寻找针对肝癌干细胞治疗的关键靶点,并进一步拓展肝癌综合治疗手段是重要研究课题。目的：观察β-catenin基因沉默后CD133⁺Hep G2细胞干性转录因子变化,探讨β-catenin调控肝癌干细胞干性的作用机制。方法：采用免疫磁珠筛选CD133⁺Hep G2细胞,然后经干细胞培养基诱导、扩增方案获得CD133⁺Hep G2肝癌干细胞,流式细胞术鉴定CD133⁺Hep G2细胞阳性率,RNA干扰技术构建沉默β-catenin基因表达的β-catenin-sh RNA慢病毒质粒,转染CD133⁺Hep G2肝癌干细胞72 h,荧光标记并评估转染效率。确认β-catenin沉默后,平板克隆形成实验观察CD133⁺Hep G2肝癌干细胞增殖情况,流式细胞术检测CD133⁺Hep G2肝癌干细胞的细胞周期,q RT-PCR和Western blot检测干性转录因子SOX2,NANOG,OCT...     

Th1/Th2漂移与HCV感染慢性化

Thl和Th2细胞分别介导机体的细胞免疫和体液免疫,它们来自一个共同的前体细胞Th0,在不同的细胞因子、抗原等因素的影响下,可发生Thl与Th2的转换。HCV感染时,Th1应答与丙型肝炎的好转有关,Th2应答与丙型肝炎慢性化有关。因此,Thl与Th2之间的漂移对HCV感染的转归有重要影响,是HCV感染慢性化的重要机制。     

Th1/Th2分化的转录调节

Th1/Th2平衡在机体免疫反应调节中具有关键性作用。许多普遍性转录因子和细胞特异性转录因子参与了对Th1/Th2分化的转录调节 ,对这些转录因子在Th1/Th2分化中作用的研究 ,将有助了解免疫性疾病的发病机理和探索新的治疗方法。     

Graves'病患者Th1/Th2免疫应答及性激素对Th1/Th2的影响

Graves'病(GD)是最常见的自身免疫性甲状腺疾病(AI-TD),其发病机理以体液免疫异常为大家所熟知,但细胞因子在GD中的发病作用越来越受到国内外学者的重视,研究的焦点主要侧重于Th1/Tb2细胞平衡紊乱.GD及其他自身免疫性疾病女性显著高发,提示性激素是影响机体免疫功能的重要因素.本文就近年来国内外对GD患者Th1/Th2免疫应答的研究及性激素对Th1/Th2平衡的影响作一综述.     

神经生长因子对哮喘大鼠Th1/Th2类细胞因子分泌的调控作用

目的探讨支气管哮喘时神经生长因子(NGF)对Th1/Th2类细胞因子分泌的调控作用。方法随机将SD大鼠分为4组:正常对照组、哮喘组(建立哮喘模型)、外源性NGF干预组(NGF组)、抗NGF抗体干预组(抗NGF抗体组),每组8只。14d后取肺组织进行HE染色,观察病理改变;免疫组化和酶联免疫吸附试验(ELISA)检测肺组织的NGF蛋白,Th1类细胞因子γ-干扰素(IFN-γ)、Th2类细胞因子白细胞介素4(IL-4)蛋白水平。结果哮喘组支气管、肺组织炎症明显;肺组织NGF蛋白的分泌水平和免疫阳性信号也显著增高(P<0·001);IL-4蛋白水平明显增强(P<0·05),而IFN-γ蛋白水平明显减低(P<0·001);肺组织中的NGF蛋白与IFN-γ/IL-4蛋白比值呈显著负相关(P<0·01)。NGF组更进一步增强上述变化(P<0·05),而抗NGF抗体干预组显著缓解上述变化(P<0·05)。结论NGF可诱导哮喘大鼠神经源性炎症,并分别通过增强Th2类细胞因子分泌,减弱Th1细胞因子分泌,诱导哮喘Th1/Th2免疫失衡效应。     

雷酚内酯对IgA 肾病大鼠肾间质纤维化和Th1 / Th2 漂移的调控

目的:探讨雷酚内酯对IgA肾病大鼠肾间质纤维化和Th1/Th2免疫失衡的调控。方法:采用牛血清白蛋白+脂多糖+四氯化碳联合建立IgA肾病模型。考马斯亮蓝法检测尿蛋白。肌氨酸氧化酶法检测血清肌酐。二乙酰肟比色法检测血清尿素氮。ELISA法检测血清中IFN-γ、IL-2、IL-4和IL-10的水平。免疫荧光法观察肾小球IgA的沉积。HE染色法观察肾组织病理。Masson法观察肾间质纤维化。蛋白印迹法分析TGF-β1和MCP-1的表达。结果:与正常对照组相比,模型组尿蛋白、血清肌酐和尿素氮水平明显升高(P0.05)。与模型组相比,雷酚内酯组尿蛋白、肌酐和尿素氮水平明显降低(P0.05)。与正常对照组相比,模型组IL-2和IFN-γ水平明显下降,IL-4和IL-10水平明显升高(P0.05)。与模型组比较,雷酚内酯组IL-2和IFN-γ水平明显升高,IL-4、IL-10水平及IL-4/IFN-γ比值明显降低(P0.05)。与正常对照组相比,模型组肾组织IgA沉积增加,胶原纤维增多,TGF-β1和MCP-1表达明显升高(P0.05)。雷酚内酯可减少IgA的沉积和胶原纤维,抑制TGF-β1和MCP-1的表达(P0.05)。结论:雷酚内酯可保护IgA肾病大鼠的肾功能,减轻肾间质纤维化,改善Th1/Th2漂移。     

转录因子MAZ对c1orf109基因转录表达调控的体外研究

目的:本文旨在研究转录因子Myc相关锌指蛋白(MAZ)在体外对人类1号染色体开放阅读框109(c1orf109)基因的转录表达调控。方法:体外条件下,采用凝胶电泳迁移实验筛选c1orf109基因启动子区MAZ的结合位点,并利用本室构建的由c1orf109启动子驱动的增强型绿色荧光蛋白报告载体与MAZ和转录因子特化蛋白1(Sp1)的表达质粒共转染He La细胞,24 h后,用激光共聚焦显微镜和流式细胞术检测c1orf109基因的转录表达情况。结果:c1orf109启动子区可与MAZ结合,且有与Sp1共享的结合位点;MAZ与Sp1皆可抑制c1orf109的转录表达,且Sp1的抑制作用大于MAZ(P0.05)。结论:MAZ与Sp1两个转录因子共同调控c1orf109基因在生理及病理条件的表达,且调控方向一致。这种冗余机制调控方式的存在提示该基因的精确表达调控对于细胞行使其生物学功能可能具有重要意义     

巨细胞病毒感染婴儿Th1/Th2细胞分化及转录因子T-bet/GATA-3的表达

人巨细胞病毒(human cytomegalovius,HCMV)感染在我国相当普遍.T-bet和GATA-3是分别特异性地表达于 Thl和 Th2细胞并诱导其定向分化的两种特异性转录因子~([1]).     

酶免疫和基因转录调控缺陷的原发性免疫缺陷病基因研究进展

本文从酶免疫缺陷，基因转录调控缺陷的角度综述了原发性免疫缺陷病的基因研究进展，充分展示了分子生物学在原发性免疫缺陷病发病机制，诊断和今后基因治疗应用的广阔前景。     

酶免疫和基因转录调控缺陷的原发性免疫缺陷病基因研究进展

本文从酶免疫缺陷，基因转录调控缺陷的角度综述了原发性免疫缺陷病的基因研究进展，充分展示了分子生物学在原发性免疫缺陷病发病机制，诊断和今后基因治疗应用的广阔前景。     

HMGB1对淋巴细胞增殖、凋亡及Th1/Th2、Tc1/Tc2漂移的影响

目的:探索HMGB1是否参与淋巴细胞免疫功能的调节.方法:系列浓度HMGB1单独或与ConA联合刺激培养小鼠脾淋巴细胞.MTT法检测细胞增殖,流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡、细胞表面CD3、CD8及细胞内IL-4、IFN-γ表达.结果:(1)HMGB1时间-剂量依赖性调节淋巴细胞增殖,而不影响其凋亡.(2)不同HMGB1浓度和刺激时间不影响淋巴细胞Th1、Th2及Th1/Th2变化,但10 μg/L和100 μg/L HMGB1刺激12～24 h,Th1亚群占优势;培养12～24 h,淋巴细胞Tc1亚群明显减少,Tc2无变化.Tc1/Tc2变化显示,1 μg/L和10 μg/L HMGB1刺激,Tc1亚群占优势.(3)培养12～24 h,上清中IL-2增加,sIL-2R减少,IL-2/sIL-2R比例升高20～50倍,尤以10 μg/L HMGB1刺激明显.结论:低剂量HMGB1可增强淋巴细胞免疫功能.     

Graves’病患者Th1/Th2免疫应答及性激素对Th1/Th2的影响（文献综述）

Graves’病（GD）是最常见的自身免疫性甲状腺疾病（AITD），其发病机理以体液免疫异常为大家所熟知，但细胞因子在GD中的发病作用越来越受到国内外学者的重视，研究的焦点主要侧重于Th1／Th2细胞平衡紊乱。GD及其他自身免疫性疾病女性显著高发，提示性激素是影响机体免疫功能的重要因素。本文就近年来国内外对GD患者Th1／Th2免疫应答的研究及性激素对Thl／Th2平衡的影响作一综述。     

CpG ODN对rHBsAg免疫小鼠Th1/Th2型免疫应答的影响

目的：初步探讨CpC寡脱氧核苷酸(CpG ODN)与重组乙型肝炎表面抗原(rHBsAg)联合免疫小鼠的Th1／Th2型免疫应答效应。方法：BALB／c小鼠经后腿胫骨前肌免疫2次，ELISA法检测血清乙型肝炎表面抗体(抗-HBs)IgG亚类IgG2a/IgG1的比值；生物活性法检测脾细胞诱生上清中的IFN-γ和IL-2含量；ABC-ELISA法检测小鼠血清中IL-4、IL-10及IL-12含量。结果：加CpG ODN组与单独注射rHBsAg组相比：抗-HBs IgG亚类IgG2a／IgG1比值明显高；Th1型细胞因子IFN-γ和IL-2的表达增强，抑制Th2型细胞因子IL-4和IL-10的产生。结论：CpCODN能够明显增强rHBsAg免疫小鼠Th1型抗体亚类IgG2a的产生，并且诱导Th1型细胞因子的表达，抑制Th2型细胞因子的表达。