左金丸干预大鼠胃热证的~1H-NMR代谢组学研究

目的运用核磁共振氢谱(1H-NMR)代谢组学方法探讨左金丸干预大鼠胃热证的作用机制。方法采用辣椒煎液和无水乙醇灌胃建立大鼠胃热证模型。利用1H-NMR技术建立大鼠胃组织的代谢物谱图,分析左金丸(3.5 g·kg^-1)干预胃热证模型大鼠后,相关潜在生物标志物的变化。结果左金丸能对胃热证大鼠代谢紊乱产生有效的干预,并对8个与胃热证相关潜在生物标志物产生显著回调。结论左金丸干预胃热证的机制可能与调节能量代谢、氧化应激和炎症反应有关。     

基于UPLC-QTOF-MS 技术的藿香正气口服液治疗大鼠湿困脾胃证的血清代谢组学研究

目的基于超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱联用（UPLC-QTOF-MS）技术的血清代谢组学方法寻找与湿困脾胃证相关的潜在生物标志物,探讨藿香正气口服液对湿困脾胃证的干预机制。方法采用综合物理造模方法建立湿困脾胃证大鼠模型。观测大鼠体质量、体长、尾长、腹围指数与自主活动次数;利用UPLCQTOF-MS 方法对大鼠血清进行代谢组分析,结合正交偏最小二乘法-判别分析（OPLS-DA）,寻找藿香正气口服液治疗湿困脾胃证大鼠后相关潜在生物标志物的变化及其相关代谢通路。结果与正常组比较,模型组大鼠的体质量、体长、自主活动次数明显减少（P＜0.001）,腹围指数明显升高（P＜0.001）;正离子和负离子模式下分别鉴定了与湿困脾胃证相关的15、10 个血清潜在生物标志物,涉及磷脂代谢、氨基酸代谢、能量代谢等9 条代谢通路。藿香正气口服液对湿困脾胃证模型大鼠的血清代谢表型能产生有效的干预,并使14 个潜在生物标志物产生显著回调（P＜0.05）。结论藿香正气口服液对大鼠湿困脾胃证的干预作用可能与调节磷脂代谢、氨基酸代谢、能量代谢等通路有关。     

清伙灵对大鼠积滞化热证干预作用的代谢组学研究

目的：运用代谢组学方法研究积滞化热模型大鼠机体代谢表型的变化及清伙灵发挥干预作用的相关代谢途径。方法：实验分正常组、模型组和清伙灵组。模型组和清伙灵组给予特制饲料并ip阿托品（0.25 mg·kg^-1）,每日2次,连续造模7 d,从造模第4天开始,ig清伙灵（2.64 g·kg^-1）,每日1次。大鼠血清和尿液的代谢指纹利用核磁共振氢谱（¹H-NMR）进行表征。综合使用主成分分析、正交偏最小二乘判别分析和单变量统计分析方法探讨积滞化热证引起的机体代谢表型的变化,鉴定及比较相关的代谢标志物。结果：与正常组比较,模型组的肛温、饮水量、饮食量等有明显改变（P<0.05）。在血清和尿液中分别筛选得到6种和7种与积滞化热证相关的代谢标志物。模型组大鼠机体代谢表型发生了明显的改变,脂质代谢、糖吸收和代谢、肠道菌群都受到不同程度的影响。清伙灵组与模型组比较差异有统计学意义（P<0.05）。结论：清伙灵能有效改善积滞化热证候大鼠的脂质和糖代谢失衡,并可调节肠道菌群。     

干姜热性作用的大鼠血清代谢组学研究

目的基于气相质谱联用代谢组学平台研究干姜水提液对大鼠血清的影响,探索干姜热性作用机制。方法雄性大鼠连续5 d给予干姜水提液,分析大鼠血清中小分子代谢物的变化。运用主成分分析等多元线性统计技术分析差异代谢产物,解析内源性代谢产物变化及相关通路。结果正常大鼠在给药后,α-酮戊二酸、苹果酸及柠檬酸等三羧酸循环中间产物下降,天冬氨酸、谷氨酸及胱氨酸等生糖氨基酸中间产物也下降,推测大鼠在给予干姜提取物后体内三羧酸循环代谢通路及生糖氨基酸通路激活用于产生热量,与干姜热性功效相吻合。结论正常大鼠中干姜提取液可能通过增强三羧酸循环及生糖氨基酸代谢通路发挥了热性的功效。     

维胃方治疗大鼠实验性胃溃疡的尿液代谢组学研究

目的 探讨维胃方治疗大鼠实验性胃溃疡的尿液代谢表型的变化及相关机制.方法 采用乙酸灼烧法制备大鼠胃溃疡模型;运用气相色谱-质谱(GC-MS)获得正常对照组、模型组、自愈组与维胃方高、中、低剂量组的大鼠尿液代谢物谱.运用偏最小二乘法判别分析(PLS-DA),寻找表征正常对照组与模型组差异的生物标记物;使用主成分分析(PCA)考察维胃方不同剂量组对胃溃疡的治疗效果,并根据标记物水平的变化解释相关机制.结果 模型组与正常对照组的尿液代谢物谱具有显著差异;获得的生物标记物包括有机酸、氨基酸等,两组标记物水平有显著性差异(P<0.01或P<0.05).维胃方不同剂量组的物质水平出现不同程度回调,以中剂量组幅度最大.结论 胃溃疡大鼠出现代谢异常,维胃方通过调节机体的代谢机能有效治疗胃溃疡,且以中剂量为佳;运用代谢组学技术可从整体上揭示中药对疾病的治疗作用与机制.     

基于UPLC/Q-TOF-MS技术的大黄牡丹汤治疗IBD大鼠的血清代谢组学研究

目的从代谢组学角度探讨大黄牡丹汤治疗炎症性肠病(IBD)的作用机制。方法采用灌肠给予2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)-乙醇(90 mg·kg~(-1))诱导IBD模型;SD大鼠随机分正常组、模型组、美沙拉嗪组(430mg·kg~(-1))和大黄牡丹汤组(7.5 g·kg~(-1)),每组8只,连续灌胃给药7 d,每天1次。观察大鼠一般情况,测定体质量及疾病活动指数(DAI);全自动血液分析仪检测大鼠红细胞、白细胞、粒细胞和淋巴细胞数量;采用ELISA法检测血清中IL-6、TNF-α的含量;HE染色观察结肠组织病理变化。采用超高效液相色谱-串联四极杆飞行时间质谱(UPLC/Q-TOF-MS)技术建立大鼠血清代谢轮廓图,分析各组大鼠血清内源性代谢物的变化,鉴定潜在的生物标志物并进行生物学意义分析。结果与正常组比较,模型组大鼠的DAI评分明显升高(P 0.001),体质量明显降低(P 0.001),白细胞、红细胞、淋巴细胞及粒细胞数目均显著上升(P 0.05,P 0.01),血清中IL-6、TNF-α含量显著升高(P 0.01,P 0.001),结肠组织出现不同程度的水肿、糜烂,腺体破坏严重且紊乱,有隐窝炎及脓肿形成。与模型组比较,给药组大鼠的DAI评分明显降低(P 0.05,P 0.01,P 0.001),体质量明显升高(P 0.05,P 0.01),白细胞、红细胞、淋巴细胞和粒细胞数目均显著下降(P 0.05,P 0.01),血清中IL-6、TNF-α的含量显著降低(P 0.01),结肠黏膜上皮逐渐恢复,肠绒毛形态结构趋于完整,肠腺结构明显。结果鉴定出IBD大鼠血清中的8个生物标志物,大黄牡丹汤可以上调苯乙酰甘氨酸、鞘氨醇、植物鞘氨醇、黄嘌呤、色氨酸、吲哚的含量(P 0.05,P 0.01),下调甘氨酸、苯丙氨酸的含量(P 0.05,P 0.01)。结论大黄牡丹汤对TNBS-乙醇诱导的IBD大鼠具明显的治疗作用,可能与其改善血清中内源性代谢物水平,恢复体内正常代谢活动有关。     

基于血清代谢组学研究苍术苷A治疗湿阻中焦大鼠作用机制

目的:研究苍术麸炒后增量成分苍术苷A对湿阻中焦大鼠血清内源性代谢物的影响,分析苍术苷A治疗湿阻中焦证的可能机制。方法:雄性SD大鼠24只,分为正常对照组、模型对照组、苍术苷A 5 mg/kg组、香砂养胃丸0.93 g/kg组各6只。正常对照组正常饲养,其余组构建湿阻中焦大鼠模型。造模成功后,各组灌胃生理盐水或相应药物。给药1 w后,检测小肠推进率并进行HE染色;检测血清中胃动素、胃泌素含量;血清衍生化处理;采用气相色谱-质谱联用(GC-MS)技术检测血清样本。结果:与正常对照组相比,模型对照组大鼠小肠推进能力显著受损,胃动素、胃泌素含量显著降低,炎性浸润明显(P<0.01);而苍术苷A 5 mg/kg能明显增强大鼠的小肠推进能力(P<0.05),升高胃动素、胃泌素含量,减少炎性细胞浸润(P<0.01)。模型对照组大鼠血清中13种代谢产物含量显著降低,6种代谢产物含量显著升高(P<0.05);与模型对照组相比,给予苍术苷A 5 mg/kg能明显回调9种代谢产物变化(P<0.05)。结论:苍术苷A能够显著回调湿阻中焦大鼠代谢异常,其机制可能是调节甘油酯代谢,甘氨酸、丝氨酸和苏氨酸代谢等途径。该结果为进一步阐释麸炒苍术增效机制提供依据。     

何首乌致肝损伤大鼠的动态血清代谢组学研究

该文采用液相色谱-质谱方法测定服用何首乌大鼠的血清代谢指纹谱,同时利用多元统计分析方法比较代谢谱差异并筛查显著相关的生物标志物,考察其动态变化趋势。探讨何首乌致大鼠肝脏损伤的代谢组学动态变化,寻找其显著相关的生物标志物,并考察标志物的动态变化趋势,以期为何首乌致肝损伤的内在机制与临床早期诊断提供依据。结果显示给药后不同时间点大鼠的血清代谢轮廓存在一定的差异,经比较分析,共筛选得到6个潜在生物标志物:oleamide,lyso PC(16∶0),leukotriene A4,trans-tetra-dec-2-enoic acid,dihydrocortisol和7a-hydroxydehydroepiandrosterone,这些标志物在何首乌致肝损伤动态过程中呈现一定的变化趋势。所筛选到的生物标志物在给药1周后含量即出现明显变化,相比于ALT,AST来说更加敏感。一定程度上可揭示出何首乌造成肝损伤的动态机制以及肝脏自我修复表现,对于监测服用何首乌患者肝功能、早期发现何首乌肝损伤具有潜在的应用价值和意义。     

脾气虚证代谢综合征大鼠血清脂质代谢生物标志物代谢组学研究

目的:通过脾气虚证代谢综合征大鼠血清样本脂质代谢物进行非靶标脂质组学分析,寻找脾气虚证代谢综合征早期诊断相关的特征性脂质生物标志物,探索其微观物质基础。方法:将30只大鼠随机分为正常组、模型组,每组15只。模型组通过劳倦加饮食不节法造模。运用超高效液相色谱与串联四级杆飞行时间质谱仪联用技术(UPLC/Q-TOF-MS)检测模型组和正常组生物样本血清的代谢轨迹,采用主成分分析(PCA)和偏最小二乘方判别分析(PLS-DA)寻找各组代谢物差异,筛选潜在内源性标志物。结果:潜在生物标志物主要有溶血磷脂酰胆碱、2-羟基丁酸、棕榈酸、油酸、硬脂酸、亚油酸、花生四烯酸等。结论:脾气虚证代谢综合征大鼠模型存在明显脂质代谢紊乱,游离脂肪酸是脂质代谢中最活跃的成分。     

香砂六君丸对糖尿病胃轻瘫大鼠的血清代谢组学研究

目的:研究香砂六君丸对糖尿病胃轻瘫大鼠血清代谢产物的影响。方法:SD大鼠随机分为正常组,糖尿病胃轻瘫模型组,香砂六君丸组。应用气相色谱和质谱联用仪的代谢组学方法检测经香砂六君丸治疗2型糖尿病大鼠血清中代谢物的变化。分别通过偏最小二乘-判别分析方法(PLS-DA)及正交偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA),比较糖尿病胃轻瘫模型组及香砂六君丸组大鼠的血清小分子代谢物的区别。结果:正常组,糖尿病胃轻瘫模型组,香砂六君丸组大鼠的血清代谢物有显著差异,比较并鉴定出D-阿糖醇、草氨酸等氨基酸含量组间有显著差异。结论:香砂六君丸改变糖尿病胃轻瘫大鼠血清的代谢产物,其作用机制可能体现为对氨基酸代谢的调节作用。     

基于异常黑胆质证载体大鼠模型血清代谢组学研究

目的:探讨异常黑胆质型体液在异常黑胆质证发生、发展过程中对大鼠血清代谢组分的影响。方法:在建立异常黑胆质证大鼠模型的基础上,运用代谢组学研究技术,对异常黑胆质证及正常大鼠血清进行代谢组学研究,分析两组大鼠血清差异代谢组分。结果:异常黑胆质证组与正常对照组大鼠血清间存在差异代谢组分,与正常对照组相比,异常黑胆质证组大鼠血清中VLDL、LDL、不饱和脂肪酸、乙酰乙酸、丙酮等代谢组分的含量升高,苯丙氨酸、肌酸、肌醇等代谢组分的含量下降(P<0.05)。结论:异常黑胆质证组与正常对照组大鼠血清代谢物谱存在差异,异常黑胆质证大鼠存在糖、脂肪、蛋白质及磷酸肌酸代谢紊乱。     

田黄方治疗高脂血症大鼠粪便代谢组学研究

目的:从粪便代谢组学角度探讨田黄方对高脂血症大鼠模型的作用及机制。方法:SD大鼠随机分为3组,对照组、模型组、田黄组,每组6只。应用高脂乳剂灌胃法复制高脂血症模型,并给予相应药物治疗,采集给药4周后的粪便,采用超高效液相色谱--四级杆飞行时间质谱联用(UPLC/Q-TOF MS)技术分析大鼠粪便代谢物指纹谱。应用主成分分析(PCA)和偏最小二乘判别(PLS-DA)分析各组之间的代谢物谱差异,并通过变量重要性投影(VIP)选取生物标志物,比较并找出差异代谢产物。结果:与对照组比较,高脂血症模型组中发现12个潜在生物标志物,其中十二碳四烯酸、己烯雌酚、十二碳五烯醛、十六碳三烯酸、脱氧胆酸、花生四烯酸、前列腺素、氧代胆烷酸、石胆酸等含量显著降低,11-酮基睾酮、羟雌甾二醇、羟雄甾二烯酮含量显著升高;与模型组比较,田黄方给药组能改善上述异常上调和下调的生物标志物。结论:田黄方能改善由高脂引起的脂肪酸、胆固醇、激素和炎症相关的代谢紊乱。     

金芪降糖片治疗2型糖尿病大鼠的血清代谢组学研究

目的：本研究采用超高效液相色谱-串联四极杆飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF-MS/MS)技术,探讨了金芪降糖片(JQJT)治疗2型糖尿病(T2DM)的作用机制。方法：采用高糖高脂饮食联合链脲佐菌素(STZ)诱导T2DM模型,检测大鼠体质量、血糖等指标。利用UPLC-Q-TOF-MS/MS分析对照组、模型组、阳性药组、正常给中药组、模型给中药组大鼠的血清样品代谢谱。采用主成分分析(PCA)和正交偏最小二乘法判别分析(OPLS-DA)对差异代谢物进行筛选和鉴别。结果：从血清中筛选出15个潜在的生物标志物,并利用Met PA构建了1条相关的代谢通路,即甘油磷脂代谢通路。在2型糖尿病(T2DM)大鼠血清中,溶血磷脂酰胆碱(LysoPC)(18∶0)和LysoPC(16∶1)等9种代谢物下调,LysoPC(18∶1)和LysoPC(20∶0)等6种代谢物上调。结论：金芪降糖片给药组能使这15种潜在的生物标志物有良好的回调趋势,推测金芪降糖片可能通过调节脂代谢紊乱而缓解T2DM的进程。     

玉屏风颗粒治疗大鼠变应性鼻炎的血清氨基酸代谢组学研究

目的：研究玉屏风颗粒对变应性鼻炎(allergic rhinitis, AR)大鼠血清氨基酸含量的影响,探讨玉屏风颗粒治疗AR的疗效和作用机制。方法：将40只雄性大鼠随机分为正常对照组、模型组、玉屏风颗粒组、枸地氯雷他定组四组。采用卵清蛋白造模法建立AR大鼠模型,玉屏风颗粒组、枸地氯雷他定组以相应药物干预,应用气相色谱-质谱联用技术检测氨基酸含量,分析药物干预后AR大鼠血清样本代谢谱的变化,找出有统计学意义的差异代谢物,并进一步分析相关代谢通路。结果：造模后AR血清代谢谱发生了显著变化,玉屏风颗粒干预后逆转了精氨酸、丙氨酸、天冬氨酸、谷氨酸、谷氨酰胺及谷氨酸等的变化(P<0.05),使AR大鼠血清氨基酸含量较枸地氯雷他定组更趋于正常对照组。结论：玉屏风颗粒干预后,AR大鼠血清氨基酸含量有所逆转,证实了玉屏风颗粒治疗AR的一定疗效,通过血清氨基酸代谢物回归趋势可从侧面证实其在治疗AR中发挥着一定的抗炎、调节免疫作用。     

雷公藤致大鼠肾毒性血清代谢组学分析

目的:联合超高效液相色谱与复合型三重四级杆/线性离子阱串联质谱联用技术(UFLC-MS/MS)及统计学分析方法研究雷公藤对大鼠血清中内源性小分子化合物的影响和肾毒性作用机制,寻找与肾毒性相关的生物标记物和代谢通路。方法:利用试剂盒法测定给药14 d后大鼠血清生化指标,观察肾组织切片。血清样本采用乙腈沉淀蛋白法,UFLC-MS/MS分析测定,正离子一级全扫描模式,经主成分分析法和主成分判别分析法处理数据。结果:与空白组大鼠相比,雷公藤乙醇提取物组大鼠血清生化指标(血清肌酐、尿素氮)显著升高;组织病理学切片明显病变,表明造模成功。血清中二甲基甘氨酸、赖氨酸、苯丙氨酸、溶血卵磷脂、磷脂酰胆碱、磷脂酰丝氨酸和甘油二酯等9种代谢物有显著性差异,鉴定为雷公藤致肾毒性的生物标记物。结论:雷公藤对肾脏的毒性作用机制可能与氨基酸代谢、磷脂代谢等有关,为雷公藤类药物临床毒性的早期预防提供参考。     

大鼠肾阳虚证的代谢组学研究

目的 利用代谢组学技术观察糖皮质激素所造的肾阳虚证大鼠模型的内源性代谢物特征.方法 将24只SD雄性大鼠随机分为正常组、模型组和模型给药组各8只;肌注氢化可的松琥珀酸钠造模;造模成功后,给予模型给药组大鼠白附片溶液灌胃,连续14 d;末次给药24 h后取血制备血浆;采用高效液相色谱-质谱联用的代谢组学技术检测内源性代谢物.结果 正常组与模型组相比,溶血磷脂酰乙醇胺(LPE)、溶血磷脂酰胆碱(LPC)和468.4m/z的未知化合物的谱峰峰形改变较为明显.发生改变的代谢物可作为肾阳虚证的生物标志物做进一步研究.结论 从代谢组学分析中找出特异的标志性代谢产物,以利于深入研究中医证候的生物学本质.     

基于药物研究的代谢组学技术新进展

近年来代谢组学成为药物研究领域中一个重要且有价值的工具,完善代谢组学技术和方法已成为目前研究的热点,文章针对近年来其技术和方法上的整合创新及其在药物研究中的应用作出评述,提出其今后发展方向。     

二陈汤对代谢综合征痰证大鼠血清代谢组学的影响

目的：利用UHPLC-QE-MS代谢组学技术筛选代谢综合征（MS）痰证可能的特征标志物,从代谢角度初步探讨二陈汤改善MS痰证的机制,为寻找化痰的靶点提供参考依据。方法：50只SPF级雄性Wistar大鼠随机分成空白组12只,造模组38只,以高糖高盐高脂饮食喂养12周复制MS痰证大鼠模型。检测大鼠的一般状况、生长、血压、糖脂代谢情况,根据模型评价标准筛选成模大鼠,将24只成模大鼠随机分为模型组和二陈汤组各12只,二陈汤组予二陈汤5.3 g/kg灌胃,模型组及空白组予0.9%氯化钠溶液10.5 mL/kg灌胃,每日1次,连续4周。收集第16周末空白组（9只）、模型组（8只）和二陈汤组（9只）大鼠血清。利用LC-MS技术进行检测,对数据进行分析以筛选差异代谢产物,并登入京都基因与基因组百科全书数据库整理出差异代谢产物映射的所有通路,通过对差异代谢物所在通路的富集和拓扑分析,寻找差异代谢通路。结果：以VIP>1且P<0.05为卡值,空白组和模型组最终鉴定出357种差异代谢产物;模型组和二陈汤组最终鉴定出109种差异代谢产物。空白组-模型组与模型组-二陈汤组,P<0.05或影响...     

基于血清代谢组学的栀子肝肾毒性机制研究

目的:通过代谢组学技术考察栀子对大鼠内源性代谢物的影响,探讨其毒性代谢途径和可能机制。方法:以栀子为示例药物,以大鼠为研究对象,分为正常组和栀子组(给药组,灌胃栀子溶液),连续给予21 d。采集大鼠血清样本进行UPLC-MS检测,用主成分分析(PCA)结合正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)进行代谢差异表征,寻找差异代谢物及可能的代谢通路。结果:代谢组学分析显示,组间代谢差异明显,与正常组比较,栀子组血清样本中分别鉴定出11个差异代谢物,这些代谢物水平存在明显的变化。结论:栀子对肝、肾脏具有一定的毒性;栀子产生肝肾毒性的机制可能与葡萄糖、尿苷、肌苷、溶血磷脂酰胆碱(LPC16:0、LPC18:2)下降有关。栀子组sn-甘油基-3-胆碱磷酸明显上升,D-谷氨酰胺、葡萄糖、尿苷、肌苷、十八碳烯酸、紫胶桐酸、十二碳六烯酸、LPC 16:0、LPC 18:2、l-α-磷脂酰乙醇胺(大豆)明显下降。